目的：基于网络药理学结合实验验证，探讨补阳还五汤含药血清对高糖损伤血管内皮细胞的影响。方法：基于复方网络药理学从TCMSP数据库、化源网、Swisstarget prediction数据库获取补阳还五汤有效化学成分及靶点，通过GeneCards、OMIM、drugbank数据库收集糖尿病血管并发症相关靶点，运用String数据库构建关键靶点PPI网络图。基于Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析。使用Autodock和Pymol软件进行分子对接验证。建立高糖诱导的HUVECS细胞损伤模型，给予5%、10%补阳还五汤含药血清，采用CCK-8法检测HUVECs细胞增殖情况，TBA法测定MDA含量，黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性，Annexin V-FITC / PI 双标记法联合Hoechst 33258、JC-1检测细胞凋亡情况，ELISA法检测IL-6、TNF-ɑ炎性因子含量，Western Blot法检测VEGF、p-AKT和AKT蛋白的表达。结果： 补阳还五汤治疗糖尿病血管并发症有效成分69个，潜在靶点306个，涉及的主要有效成分槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇，关键靶点有血管内皮生长因子VEGFA，细胞炎性因子TNF，IL6等，生物学过程涉及对激素的反应、细胞对氮化合物的反应、对细胞因子的反应、等，细胞组成涉及膜筏、膜侧、受体复合物、等。分子功能涉及激酶活性与结合、脂质结合、转录因子结合、等过程，其发挥作用机制的通路可能与脂质和动脉粥样硬化，细胞凋亡与衰老，生长激素的合成分泌，胰岛素抵抗，糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路，PI3K-AKT信号通路，等相关。基于网络药理学结果佐以实验验证，结果表明Berzosertib与模型对照组比较，18.5 g/kg补阳还五汤含药血清10%组细胞存活率显著增加(P<0.01)，18.5 g/kg补阳还五汤含药血清Laboratory Services5%、10%组可降低受损内皮细胞MDA含量（P<0.05或P<0.01），提高SOD活性（P<0.01）；与模型对照组比较，18.5 g/kg补阳还五汤含药血清5%、10%组显著抑制细胞凋亡，降低受损内皮细胞IL-6、TNF-ɑ含量MK-2206（P<0.05或P<0.01），下调VEGF蛋白表达（P<0.01），下调p-AKT/AKT蛋白表达（P<0.01），改善高糖状态的血管内环境。结论：补阳还五汤能够改善高糖状态的血管内环境，治疗糖尿病血管并发症，其机制可能与其保护高糖损伤状态下内皮细胞，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡及炎症因子生成，以及下调VEGF和p-AKT/AKT蛋白，调节调控PI3k/AKT信号通路有关。