MAPK信号通路

目的 研究冠心康对脂多糖(LPS)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)干预的巨噬细胞铁死亡的影响及其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 采用ox-LDL联合LPS诱导RAW264.7巨噬细胞D-Lin-MC3-DMA体外铁multidrug-resistant infection死亡并给予冠心康和ERK5抑制剂XMD8-92进行干预,检测铁死亡相关指标脂质过氧化物(LPO)含量、胞内二价铁离子(Fe~(2+))含量、活性氧(ROS)及谷胱甘肽(GSH)水平,IL-6、TNF-α、MMP含量及ERK5/Nrf2信号通路mRNA及蛋白的表达。结果 LPS联合ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞LPO含量、胞内Fe~(2+)含量及ROS水平升高,GSH含量减少,IL-6、TNF-α、MMP-2、MMP-9含量显著升高,ERK5、Nrf2、HO-1、GPX-4的mRNA及P-ERK5、P-Nrf2、HO-1的蛋白表达水平降低(P<0.05)。冠心康组LPO、Fe~(2+)、ROS降低,GGSK1120212SH含量增加,IL-6、TNF-α、MMP-2、MMP-9水平下调,ERK5、Nrf2、HO-1、GPX-4的mRNA及P-ERK5、P-Nrf2、HO-1的蛋白表达水平升高,而XMD8-92可以抑制冠心康这一作用(P<0.05)。结论 冠心康可以抑制LPS联合ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞的铁死亡,减轻炎症反应,其机制与活化ERK5及下游Nrf2通路有关。

甾体类药物具有抗过敏、消炎以及调节内分泌等作用,是世界上仅次于抗生素的第二大类药物,在制药工业中占据重要地位。从头全生物合成为甾体类药物的工业生产提供了新的思路,然而由于参与各个步骤的酶活性较低、合成过程复杂等问题,阻碍了甾体类药物全生物合成的工业应用。在整个甾体生物合成途径中,细胞色素P450酶CYP11A1s扮演了至关重要的角色,其负责催化胆固醇转化成重要的甾体类药物前体孕烯醇酮。然而,CYP11A1s较低的催化活性大大限制了其在甾体类药物微生物生产中的应用。因此有必要挖掘新的CYP11A1同工酶或者Unlinked biotic predictors对CYP11A1进行酶工程改造来提高其催化活性,以促进甾体类药物或甾体类药物前体的绿色生物合成。在本研究中,为了挖掘具有胆固醇侧链切割活性的CYP11A1s,对数据库中CYP11A1s进行生物信息学分析和基因组挖掘,并在大肠杆菌中进行异源表达以及催化活性检测。之后,对其中表达水平较高的几个CYP11A1s进行了包括底物特异性以及氧化还原伴侣适配性在内的生化表征。此外,基于已知的晶体结构对人源和牛源CYP11A1s进行半理性酶工程改造,期望获得高催化活性的胆固醇侧链切割酶。主要的研究内容和结论如下:1.不同脊椎动物来源CYP11A1s的异源表达基因组数据库中存在大量的CYP11A1基因有待挖掘。以牛源CYP11A1作为模板,在蛋白数据库中进行序列比对,利用同源序列构建了 CYP11A1s的系统发育进化树。基于系统发育树,从中挑选了包括7种哺乳动物、2种鸟类以及1种鱼类在内的10个不同脊椎动物来源的CYP11A1s在大肠杆菌中进行异源表达。通过检测细胞裂解液对于胆固醇的催化活性,在mChCYP11A1(山羊,m:mature)、mBtCYP11A1(牛)、mHsCYP11A1(人)、mSsCYP11A1(野猪)、mMmCYP11A1(鼠)和mTgCYP11A1(珍珠鸟)的体外酶反应产物中检测到了催化产物孕烯醇酮,实现了 6种不同来源CYP11A1的体外催化活性重建。2.不同来源CYP11A1s的生化表征在第一部分中获得的6种具有胆固醇催化活性的CYP11A1s中,选择表达水平较高的mChCYP11A1、mBtCYP11A1、mHMLN4924说明书sCYP11A1 以及mSsCYP11A1 进行生化表征。首先,对具有膜结合性质的这4种CYP11A1s进行了蛋白纯化和体外活性检测,成功获得了具有体外催化活性的纯蛋白。之后,利用纯化的4种CYP11A1蛋白,检测了其对胆固醇、链甾醇、谷甾醇、菜油甾醇以及7-脱氢胆固醇的体外催化活性,其中野猪来源的mSsCYP11A1展现出了较好的催化活性,且4种CYP11A1s均对底物7-脱氢胆固醇具有最高的催化活性。通过分子对接对底物特异性的原因进行了解释。此外,适配的氧化还原伴侣对于P450的催化活性至关重要。在大肠杆菌中对mChCYP11A1、mBtCYP11A1、mHsCYP11A1 以及mSsCYP11A1 的本源皮质铁氧还蛋白(Adx)以及皮质铁氧还蛋白还原酶(AdR)进行了异源表达,利用纯化得到的蛋白进行了氧化还原伴侣的组合筛选,催化活性比较结果表明来源于野猪的mSsAdx与来源于人的mHsAdR为最佳组合。3.CYP11A1的酶工程改造为了提高CYP11A1的催化活性,对其进行了酶工程改造。首先,通过序列比对发现在底物结合口袋6 A范围内共有3个差异氨基酸,研究了这3个差异氨基酸对CYP11A1催化活性的影响。之后,基于人源和牛源CYP11A1s的晶体结构,选择位于CYP11A1的活性位点以及底物入口通道的氨基酸残基进行了丙氨酸扫描,通过对突变体进行活性筛选获得了一个催化活性提高46%的突变体mBtCYP11A1-Q377A。此外,通过测量高催化活性突变体的底物入口通道直径,发现mBtCYP11A1-Q377A的底物入口拓宽了 34%,一定程度上解释了突变体催化活性提高的原因。获得的突变体mBtCYP11A1-Q377A为CYP11A1的工程改造提供了新的候选亲本酶,也为其他真核生物P450的改造提供了参考。综上所述,本研究通过基因组挖掘来寻找具有胆固醇侧链切割活性的CYP11A1s,成功实现了 6种不同来源CYP11A1s的体外活性重建。以人源和牛源CYP11A1s作为参考,对表达水平较高的山羊来源和野猪来源的CYP11A1s进行了生化表征,山羊来源的CYP11A1对所测试的底物展现出较好的催化活性,且所有4种CYP11A1s均对7-脱氢胆固醇具有最高的催化活性,最佳的氧化还原伴侣组合为野猪来源的Adx与人源AdR。通过对CYP11A1进行酶工程改造得到了一个催化活性提高的胆固醇侧链切割酶,这对CYP11A1的工程化改造具有指导性MAPK抑制剂意义,同时也为甾体类药物的微生物生产奠定了研究基础。

由禾谷镰刀菌Fusarium graminearum引起的小麦赤霉病（Fusarium head blight,FHB）是小麦、大麦、燕麦、黑麦等禾谷类作物的毁灭性病害。目前，生产上防治小麦赤霉病主要依靠化学药剂防治，多菌灵等苯并咪唑类杀菌剂使用较为广泛，其作用靶标为β微管蛋白。禾谷镰刀菌有2个β微管蛋白，通过分子对接结果发现β2微管蛋白第138位氨基酸位点可能为多菌灵结合位点。本研究对β2第138位丝氨酸位点进行突变研究，以明晰其生物学功能。结果表明Fgβ2S138A突变后禾谷镰刀菌对多菌灵的敏感性显著增加，EC50值由0.617 mg/L降至0.290 mg/L，但不影响对噻菌灵的敏感性ICI 46474研究购买，EC50值为0.9BI 10773价格50 mg/L左右，并且该突变不影响禾谷镰刀菌菌丝营Urologic oncology养生长、无性繁殖、有性生殖和致病性。本研究结果可为多菌灵对小麦赤霉病的化学防治提供理论基础，在生产上具有一定指导意义。

基因治疗通过向靶细胞导入正常基因(外源)来治疗基因缺陷相关疾病。因此,基因治疗作为一种新的肿瘤治疗方式引起了研究者的关注。近年来,基于siRNA的RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术迅速发展,该技术可以特异性降低或关闭目的基因的表达,因此该技术在基因治疗领域已经被大量应用。但是裸露的siRNA稳定性差、对血清降解敏感且难以穿透细胞膜。为此,研究者开发了各种各样的递送系统用于实现siRNA的高效递送。而基于聚合物的递送载体具有安全性高、结构易于改造等优势,是研究最多的一类siRNA递送载体。聚乙烯亚胺(PEI)可高效络合siRNA,其“质子海绵效应”可有效逃逸内涵体,但PEI具有显著的细胞毒性严重限制了其生物医学应用。聚乙二醇(PEG)化是一种广泛使用的提高递送系统生物相容性并延长其循环时间的策略,但该过程会降低细胞内化,这一现象被称为“PEG窘境”。Fe_3O_4纳米颗粒具有易于制备、尺寸小、易于化学功能化、优异的生物相容性和稳定性及良好的磁响应性等优势,在生物医学领域展现了良好的应用前景。基于以上研究背景,本课题设计并构建了www.selleck.cn/products/LBH-589一种PEG可脱落型磁性si PKM2纳米递送系统,该系统在弱酸性条件下可显著增强si PKM2的稳定性及递送效率,并可通过下调PKM2的表达来发挥抗肿瘤效应。本课题主要包括以下三个方面的研究内容。(1)PEG-PEI/Fe_3O_4复合物的合成与表征。首先合成PEG-PEI共聚物,然后与带负电荷的Fe_3O_4纳米颗粒通过静电相互作用provider-to-provider telemedicine形成PEG-PEI/Fe_3O_4复合物,通过TEM、SQUID、DLS等技术对其进行表征,证明了PEG-PEI/Fe_3O_4复合物被成功合成。接着通过荧光定量PCR技术、Western Blot技术在m RNA和蛋白水平证实:与结肠上皮细胞FHC相比,PKM2在结肠癌细胞HCT116中显著上调表达。因此,后续采用PKM2高表达的HCT116细胞作为研究对象进行实验。通过MTT法来检测PEG-PEI/Fe_3O_4复合物的细胞毒性,表明PEG的引入明显降低了PEI的细胞毒性。(2)PEG-PEI/Fe_3O_4复合物对siRNA的络合能力及递送效率研究。采用凝胶阻滞法检测了PEG-PEI及Telaglenastat供应商PEG-PEI/Fe_3O_4复合物对siRNA的络合能力,当N/P比大于等于5:1时,PEG-PEI共聚物及PEG-PEI/Fe_3O_4复合物与siRNA完全络合。琼脂糖凝胶电泳证明PEG-PEI/Fe_3O_4@siRNA复合物具有良好的血清稳定性。通过激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪检测了HCT116细胞对PEG-PEI/Fe_3O_4@siPKM2纳米复合物的摄取,结果表明在磁场引导和弱酸性条件下纳米复合物的内化能力明显增强,显著提高了siRNA的递送效率。另外,荧光定量PCR和Western Blot技术证实,在磁场引导和弱酸性条件下,PEG-PEI/Fe_3O_4@si PKM2纳米复合物在m RNA和蛋白方面可有效抑制PKM2的表达。(3)PEG-PEI/Fe_3O_4@si PKM2纳米复合物的体外抗肿瘤活性评价。通过MTT检测、结晶紫染色法、Annexin V-FITC/PI双染细胞调亡试剂盒、葡萄糖和乳酸检测试剂盒、划痕法和Transwell实验等方法较为系统地研究了PEG-PEI/Fe_3O_4@si PKM2纳米复合物的体外抗肿瘤活性。在p H 6.5并有磁场存在的条件下,PEG-PEI/Fe_3O_4@si PKM2纳米复合物可有效抑制HCT116细胞的增殖并触发大量肿瘤细胞凋亡;再者,该纳米复合物可显著抑制HCT116细胞对葡萄糖的摄取并减少乳酸的产生,进而降低糖酵解水平;此外,PEG-PEI/Fe_3O_4@si PKM2纳米复合物可高效抑制HCT116细胞的迁移。综上所述,本课题成功合成了PEG-PEI/Fe_3O_4@si PKM2纳米复合物,该纳米复合物具有良好的血清稳定性;在肿瘤的弱酸性环境中,PEG会从纳米复合物上脱落下来,在磁场介导下有效进入肿瘤细胞,促进si PKM2高效递送,因此有望解决“PEG窘境”;PEG-PEI/Fe_3O_4@si PKM2纳米复合物通过下调PKM2的表达来发挥抗肿瘤活性。本研究可为p H和磁双响应型递送系统构建提供新策略,同时也可为代谢靶向型肿瘤治疗提供新思路。

蛋黄壳结构磁点击此处性纳米材料不仅具有独特的磁学性质,便于回收再利用,接枝其它高分子材料聚合物后,在刺激响应性可控释放方面拥有广阔的应用前景,因而吸引了越来越多的科研工作者的关注。基于此,本论文以蛋黄壳结构纳米粒子作为基体,结合席夫碱键的酸敏感性和PNVCL的温度响应性,构建了磁、p H和温度三重响应性结合的控制释放系统,主要研究内容如下:1、采用溶剂热法制备具有超顺磁性的Fe_3O_4纳米粒子,然后通过溶胶-凝胶法在其表面包覆一层介孔二氧化硅外壳,再利用盐酸-乙醇溶液对Fe_3O_4核进行部分刻蚀,得到Fe_3O_4@V-mSiO_2蛋黄壳结构纳米粒子,饱和磁化强度为37emu/g。通过对罗丹明B的吸附实验考察其负载能力和应用的经济性。结果表明:随着罗丹明B浓度的增加,Fe_3O_4@V-mSiO_2蛋黄壳结构纳米粒子对罗丹明B的吸附量也逐渐增加,当浓度达到100μg/m L时,达到吸附平衡,吸附量为85.64mg/g。用同一吸附剂对罗丹明B重复进行7次吸附试验后,平衡吸附量依然保持在74 mg/PF-02341066半抑制浓度g以上。2、在Fe_3O_4@V-mSiO_2纳米粒子表面依次进行氨基化改性和醛基化改性,然后与氨基化的温度响应性的聚合物N-乙烯基己内酰胺(PNVCL)进行席夫碱合成反应,得到Fe_3O_4@V-mSiO_2-PNVCL纳米粒子,再通过物理吸附过程将DOX负载到纳米载体内,得到DOX-Fe_3O_4@V-mSiO_2-PNVC纳米粒子。结果表明:Fe_3O_4@V-mSiO_2-PNVCL的饱和磁化强度为21.Hepatitis B01 emu/g,依然具有良好的磁响应性;对DOX的装载量比Fe_3O_4@mSiO_2纳米粒子提高了9.39%;在37℃时对DOX的包封效果优于25°C,在肿瘤酸性微环境(p H=5.0)下的药物释放率高于正常组织环境(p H=7.4)。此外,载药纳米粒子可以通过内吞作用进入细胞,释放药物作用于细胞核;MTT实验证明纳米粒子对正常细胞几乎没有毒性,在外加磁场作用下对肿瘤细胞有靶向和缓释治疗的效果。

以甲基磺酸乙酯（Ethyl methane sulfonate,EMS）为诱变剂，分别采用浸种法和滴苗法处理西瓜种质M08的种子和幼苗，对M_1和M_2代群体单株叶、花、茎、果实等主要农艺性状进行观察、拍照、记录。在浸种法获得的749株M_1代单株中共发现叶片黄化、叶片畸形、雄花簇生、瓜胎形状变异等15种突变类型，总突变率达到20.56%；通过滴苗法共成活689株M_1代单株，包含10种变异类型，总变异率为19.30%。M_2代种子库共收获443份材料，随机选取其中的132个家系进行表型观测，共得到叶片黄化、子叶连结、叶MK-1775抑制剂片畸形、叶缘内卷、茎并生、果皮条带变异、植株生长发育迟缓等13种变异类型，总突变率为5.21%。对叶色黄化转绿突变体M_1-5家系的M_2代群体单株进行表型观测及光合特性分析得出，在转绿前，光合色素含量较低，叶片呈黄色；在转绿后，光合色素含量大幅度提高，叶色由黄转绿，但仍低于正常M08叶片，随着光合色Hepatoma carcinoma cell素的累积，黄化转绿突变体的光合能力得以恢复，PF-6463922采购可正常生长。

目的 研究内皮型一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase 3,NOS3)单核苷酸多态性检测在妊娠高血压患者中的表达及临床指导价值。方法 选择2016年3月—2018年1月本院收治的妊娠高血压患者(妊娠高血压组，74例)和正常妊娠孕妇(正常妊娠组，80名)作为研究对象，采集孕妇外周血，提Talazoparib NMR取DNA,PCR-RFLP技术分析NOS3基因Glu2selleck Alpelisib98Asp位点的基因型。分析妊娠高血压患者NOS3基因Glu298Asp位点基因型、等位基因与妊娠高血压严重程度关系。分析妊娠高血压患者并发症、妊娠不良结局患者与基因型频率关系。结果 正常妊娠组和妊娠高血压组孕妇NOS3基因Glu298Asp位点TT、GT、GG基因型频率比较，差异存在统计学意义(P<0.05)。正常妊娠组和妊娠高血压组孕妇NOS3基因Glu298Asp位点等位基因G和T频率比较，差异存在统计学意义(P<0.05)。比较轻度、中度和重度妊娠高血压患者NOSstrip test immunoassay3基因Glu298Asp位点基因型频率，差异无统计学意义(P>0.05)。轻度、中度、重度妊娠高血压患者NOS3基因Glu298Asp位点等位基因T频率逐渐升高。基因型为GT的妊娠高血压患者并发胎盘早剥、左心力衰竭、HELLP综合征、DIC、急性肾功能衰竭总发生率明显高于基因型TT和基因型GG患者(P<0.05)。基因型为GT的妊娠高血压患者新生儿窒息、剖宫产、胎儿宫内窘迫、围生儿死亡妊娠不良结局总发生率明显高于基因型TT和基因型GG患者(P<0.05)。结论 NOS3基因Glu298Asp位点基因型、等位基因频率与妊娠高血压有关，等位基因T频率越高，妊娠高血压严重程度增加，基因型为GT的妊娠高血压患者并发症和妊娠不良结局的总发生率增加。

钙钛矿量子点因其优异的光电性质,广泛应用于光电领域,特别是在太阳能电池以及发光二极管领域。钙钛矿LBH589说明书量子点常用的长链配体阻碍了光电器件中的电子耦合和电荷输运,因此钙钛矿量子点表面配体调控对于提高器件性能至关重要。本文报道了一种简便可行的芳香族羧酸配体交换策略,potential bioaccessibility利用苯甲酸交换CsPbBr_3量子点表面过多的长链配体。与绝缘的油酸/油胺配体相比,苯甲酸的长度要短得多。此外,苯甲酸具有π共轭苯环。这两者都使得它有利于量子点之间的电荷转移。实验证明,苯甲酸PLX5622化学结构后处理可以有效地交换长链配体,改善CsPbBr_3量子点的光学性质,大大改善了量子点薄膜的电荷输运,有效抑制了缺陷导致的非辐射复合。得到了具有光电转换-电光转换双功能的光电器件,将CsPbBr_3量子点太阳能电池效率提高至5.46%;作为绿色发光二极管,其电致发光最大亮度为584 cd/m~2。研究结果为实现了基于钙钛矿量子点的高性能多功能光电器件提供了有效的途径。

目的既往研究认为C肽无生物学活性,然而近期研究显示C肽对糖尿病并发症及骨代谢有一定影响。因此本研究对2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者C肽水平与骨密度(Bone mineral density,BMD)、骨折风险之间的关系进行探究,进而揭示C肽对糖尿病性骨质疏松及骨折风险的临床预测价值。方法纳入兰州大学第一医院T2DM患者540例,按空腹C肽(Fasting C-peptide,FCP)水平三分位间距分为三组:FCP≤1.14ng/ml组,1.141.73ng/ml组。收集临床资料,包括:性别、年龄、T2DM病程、T2DM并发症、吸烟史、饮酒史、用药情况、父母髋部骨折史和既往病史、体重指数(Body mass index,BMI)。应用电化学发光免疫分析法测定甲状旁腺激素(Parathyroid hormone,PTH)、25羟维生素D[25 hydroxy vitamin D,25(OH)D]、Ⅰ型原胶原N-端前肽(Procollagen typeⅠN-propeptide,PⅠNP)和Ⅰ型胶原C-末端肽β特殊序列(βisomer of C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX),应用化学发光法测定空腹胰岛素(Fasting insulin,FIns)和FCP,应用高压液相色谱法测定糖化血红蛋白(Glycosylated hemoglobin,Hb A1c)。应用葡萄糖氧化酶法测定空腹血浆葡萄糖(Fasting plasma glucose,FPG),应用肌氨酸氧化酶法测定肌酐(Creatinine,Cr),应用CHOD-PAP法测定总胆固醇(Total cholesterol,TC),应用GPO-PAP法测定甘油三酯(Triglyceride,TG),应用直接法测定高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoproteselleck激酶抑制剂in cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C),应用偶氮砷Ⅲ法测定钙(Calcium,Ca),应用磷钼酸盐法测定磷(Phosphorus,P),应用NPP底物-AMP缓冲液法测定碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)。采用双能X线BMD仪测量BMD,使用改良的骨折风险评估工具(Fracture Risk Assessment Tool,FRAX)评估未来10年主要部位骨质疏松性骨折风险(Major osteoporotic fracture,MOF)及髋部骨折风险(Hip fracture,HF)。应用SPSS 26.0进行统计分析。结果1.基线资料显示,与1.141.73ng/ml两组T2DM患者相比,FCP≤1.14ng/ml组T2DM患者的病程更长,Hb A1c更高,FIns更低,BMI更小,降糖药物胰岛素及其类似物使用率更高,血Ca水平更低,糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy,DR)发病率更高,全身(Whole body,WB)BMD、腰椎(Lumbar spine,LS)BMD更低,HF以及既往脆性骨折发病率更高(P<0.05)。性别、年龄、吸烟史、饮酒史、FPG、Cr、TC、TG、HDL-C、LDL-C、糖尿病周围神经病变(Diabetic peripheral neuropathy,DPN)、糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)、糖尿病周围血管病(Diabetic peripheral angiopathy,DPA)、P、ALP、25(OH)D、PTH、β-CTX、PⅠNP、股骨颈(Femoral neck,FN)BMD、MOF、降糖药物使用率(胰岛素促泌剂、钠-葡萄糖协同转运蛋白2(Sodium-glucose co-transporter 2,SGLT2)抑制剂、双胍类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、二肽基肽酶4(Dipeptidyl peptidase 4,DPP-4)抑制剂、胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)受体激动剂)三组间比较差异无统计学selleck Bafilomycin A1意义(P>0.05)。2.Spearman相关分析显示,总人群中,FCP与脆性骨折发Applied computing in medical science病率呈负相关(P<0.05),与WB BMD、LS BMD、FN BMD、MOF及HF均无相关性(P>0.05)。但是FCP水平三分位分层研究发现,FCP≤1.14ng/ml组,FCP与WB BMD、LS BMD、FN BMD呈正相关,与骨折风险、脆性骨折发病率呈负相关(P<0.05);然而在1.141.73ng/ml组,FCP与BMD、骨折风险以及脆性骨折发病率均无相关性(P>0.05)。3.按FCP水平三分位分层回归分析显示,FCP≤1.14ng/ml的T2DM患者,随着FCP水平升高,WB BMD、LS BMD、FN BMD升高,骨折风险、既往脆性骨折发病率降低(P<0.05);1.141.73ng/ml的T2DM患者,FCP水平与WB BMD、LS BMD、FN BMD、骨折风险和脆性骨折发病率均无相关性(P>0.05)。进一步校正模型回归分析显示,FCP≤1.14ng/ml的T2DM患者,FCP水平与WB BMD、LS BMD、FN BMD呈正相关(P<0.05),与骨折风险、脆性骨折发病率呈负相关,FCP是BMD、骨折风险和脆性骨折的独立影响因素(P<0.05);1.141.73ng/ml两组T2DM患者,FCP水平与BMD、骨折风险和脆性骨折发病率均无相关性(P>0.05)。4.按病程分层模型回归分析显示,T2DM病程≥10年的患者,随着FCP水平升高,骨折风险、既往脆性骨折发病率降低,FCP水平与WB BMD呈正相关(P<0.05);T2DM病程<10年的患者,FCP水平与WB BMD、LS BMD、FN BMD、骨折风险和脆性骨折发病率均无相关性(P>0.05)。结论1.FCP水平三分位分组后临床基线资料显示,FCP水平不同的三组WB BMD、LS BMD、HF、脆性骨折发病率有显著差异。2.T2DM患者BMD与FCP水平无明显相关性,FCP水平分层后,FCP≤1.14ng/ml组T2DM患者,FCP水平与BMD呈正相关,而另外两组T2DM患者FCP水平与BMD无相关性。骨折风险预测与FCP的相关性与上述一致。3.T2DM患者FCP水平与脆性骨折发病率呈负相关,FCP水平分层后,FCP≤1.14 ng/ml组T2DM患者FCP水平与脆性骨折发病率仍呈负相关,但是另外两组T2DM患者FCP水平与脆性骨折发病率无相关性。4.按病程进行亚组分析,T2DM病程≥10年的患者,FCP与WB BMD呈正相关,与骨折风险、脆性骨折发病率呈负相关。病程<10年的T2DM患者中,FCP与BMD、骨折风险及脆性骨折发病率无明显相关性。5.回归分析显示FCP≤1.14 ng/ml组T2DM患者,FCP是BMD、骨折风险和脆性骨折的独立影响因素。结果提示FCP水平对部分T2DM患者骨质疏松的发生有一定的预测价值。

Objective: To elucidate if Emodin is participated in adipose tissue inflammation and its underlying mechanisms. Mmedia and violenceethods: 3T3-L1 adipocytes and RAW264.7 macrophages were co-cultured to mimic adipose tissue inflammation microenvironment in obesity in vitro. Real-time PCR and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) were applied to examine the levels of IL-1β, IL-6, TNFα and Adiponectin in co-cultured cells and supernatants. Real-time PCR and western blot were performed to detect the expression of M1/M2 marker genes in CD11b microbeads isolated macrophages. Western blot was applied to detect JAK1 and STAT购买Dibutyryl-cAMP6 expression. Transwell migration assay was applied to determine the capacity of macrophage migration. STAT6 specific inhibitor AS1517499 was applied to elucidate the molecular mechanisms by which Emodin affects adipose tissue inflammation. Results: Emodin remarkably inhibited IL-1β, IL-6 and TNFα levels, whereas enhanced Adiponectin level in co-cultured cells and supernatants. Emodin apparently suppressed the expression of M1 marker gene(iNOS), whereas elevated the expression of M2 marker genes(IL-10 and Arg1) in isolated macrophages. Emodin greatly enhanced phosphorylated JAK1 and STAT6 levels. AS1517499 significantly abrogated the inhibitory effect of Emodin on the expression of inflammatory factors. Emodin remarkably repressed macrophage migration induced by adipocyte-conditioned medium. Conclusion: Emodin may decrease adipose tissue inflammation through promoting M2 macrophage polarization via JAK1/STAT6 signaling pathwawww.selleck.cn/products/Nolvadexy.