研究目的:细胞囊泡作为一种新颖的药物递送材料,已经证实其具有良好的生物相容性和一定的生物靶向性。本研究旨在探讨TIGIT/CD40过表达并携带黑色素-奥沙利铂(OXA)的纳米囊泡在小鼠胰腺癌模型中,是否能够通过抑制TIGIT/CD155及CD40/CD40L免疫检查点,进而抑制肿瘤细胞的增长,并将其包载的药物靶向到肿瘤部位释放,达到杀伤肿瘤的作用。研究方法:1、用慢病毒包装的方法构建过表达TIGIT/CD40的稳定细胞系,经过先研磨再差速离心法制备获得生物细胞膜衍生的TI40MNs细胞囊泡,同时使用电转的方法使其包裹黑色素-OXA,获得MO@Ti40 NVs。2、通过Western Blot、透射电镜鉴定TIGIT/CD40细胞囊泡的表征和TIGIT/CD40蛋白的表达情况以及用动态散射光检测出的纳米囊泡及黑色素的粒径分布图。3、观察表达TIGIT/CD40的细胞囊泡和胰腺癌细胞的结合情况,并在体外实验中,验证MO@Ti40 NVs促进胰腺癌的凋亡和抑制肿瘤细胞增长的作用。4、构建C57BL/6J小鼠胰腺癌皮下模型验证MO@Ti40 NVs在体内的作用。通过观察肿瘤的体积,处死,称量肿瘤的重量,使用免疫组化和HE染色及细胞流Dolutegravir分子式式分析来观察MO@Ti40纳米颗粒在体内对T细胞免疫能力和炎症的影响。研究结果:1、从TIGIT/CD40稳定过表达HEK293T细胞系制备出Medical image高表达TIGIT/CD40的细胞囊泡,通过电转的方法包载黑色素-奥沙利铂,制备出MO@Ti40 NVs。2、TIGIT/CD40细胞囊泡能够和胰腺癌细胞表面的CD155/CD40L特异性结合。3、黑色素-奥沙利铂在体外能够抑制胰腺癌细胞的增长。4、MO@Ti40 NVs在GDC-0973溶解度体外促进胰腺癌细胞的凋亡和抑制胰腺癌细胞的增殖。5、在C57BL/6J小鼠胰腺癌模型,MO@Ti40 NVs能够显著抑制胰腺癌肿瘤的增长。研究结论:在本研究中,我们使用黑色素-奥沙利铂和TIGIT/CD40在纳米囊泡中抑制免疫逃逸,从而达到抑制肿瘤增长的作用。纳米囊泡作为非常好的的生物相容性载体,可以有效的包载细胞毒性药物,达到靶向治疗肿瘤的目的,为胰腺癌的临床治疗提供了一条可以继续探索和临床转化的治疗方案。