目的:课题组前期工作基础显示B族1类清道夫受体SR-B1(Scavenger receptor class B type 1,SR-B1)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,cc RCC)中过表达且与预后差正相关,体外实验显示过表达可显著促进肿瘤细胞增殖,表达谱与蛋白质谱芯片筛查结果显示抑制SR-B1可下调HIF通路,该过程可能通过ERK发挥作用。故本研究旨在前期工作基础上,探讨SR-B1是否可以通过ERK影响HIF信号通路关键分子HIF-2α促进肾透明细胞癌增殖。方法:(1)应用基因表达谱数据库预测SR-B1、ERK/MAPK通路关键分子ERK与HIF通路关键分子HIF-2α在肾透明细胞癌中是否具有相关性,应用细胞免疫荧光(IF)及免疫共沉淀(Co-IP)验证预测结果并观察三者是否相互结合;(2)应用生物信息学数据库预测肾透明细胞癌中HIF-2α的表达分布,随后应用免疫组织化学(IHC)及Western Blot实验对预测结果加以验证;(3)在SR-B1低表达的正常肾小管上皮细胞HK-2中过表达SR-B1,观察ERK、p-ERK及HIF-2α的蛋白表达;在SR-B1高表达的肾透明细胞癌786-0、Caki中沉默SR-B1,观察ERK、p-ERK及HIF-2α的蛋白表达;(4)在HK-2中过表达SR-B1,同时使用梯度浓度ERK特异性抑制剂(SCH772984)处理细胞,检测药物处理前后SR-B1、ERK、p-Cell IsolationERK、HIF-2α及下游通路分子VEGF的蛋白表达;在786-0、Caki中沉默SR-B1,同时使用梯度浓度ERK激动剂(EGF)处理细胞,检测药物处理前后SR-B1、ERK、p-ERK、HIF-2α及下游通路分子VEGF的蛋白表达;(5)在HK-2中过表达SR-B1,同时使用梯度浓度ERK特异性抑制剂(SCH772984)处理细胞,应用CCK-8及细胞克隆实验检测、比较药物处理前后细胞的增殖能力;在786-0、Caki中沉默SR-B1,同时使用梯度浓度ERK激动剂(EGF)处理细胞,应用CCK-8及细胞克隆实验检测、比较药物处理前后细胞的增殖能力。结果:(1)生物信息学分析显示肾透明细胞癌细胞中SR-B1、ERK及HIF-2α蛋白表达呈正相关,且三者可相互结合(P<0.001或P<0.01);(2)HIF-2α在肾透明细胞癌中高表达(P<0.05),其高表达的肾透明细胞癌患者生存预后较差(P<0.0001或P<0.05);(3)过表达SR-B1可上调ERK、p-ERK及HIF-2α蛋白表达(P<0.001),沉默SR-B1可下调ERK、p-ERK及HIF-2α蛋白表达(P<0.001);(4)过表达SR-B1可显著升高HK-2细胞中ERK、p-ERK、HIF-2α及VEGF蛋白表达(P<0.001),ERK特异性抑制剂(SCH772984)可逆转过表达SR-B1对ERK、p-ERK、HIF-2α与VEGF蛋白的上调效应(P<0.001);沉默SR-B1可显著降低786-0、Caki细胞ERK、p-ERK、HIF-2α及VEGF蛋白表达(P<0.001),ERK激动剂可逆转沉默SR-B1对ERK、p-ERK、HIF-2α与VEGF蛋白的下调效应(P<0.001);(5)过表达SR-B1可增加HK-2细胞的增殖能力(P<0.01或P<0.05),加入ERK抑制剂后细胞增殖能力被抑制(P<0.01或P<0.05);沉默SR-B1可减弱786-0细胞增殖能力(P<0.01或P<0.05Lapatinib溶解度),ERK激动剂可反向抑制GW4869小鼠沉默质粒减弱细胞增殖的能力(P<0.01或P<0.05)。结论:SR-B1可能通过ERK影响HIF信号通路关键分子HIF-2α促进肾透明细胞癌细胞的增殖。