背景:系统性红斑狼疮疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以育龄期女性发病为主的自身免疫性疾病,临床表现异质性大。CD4+T细胞活化和分化通过分泌细胞因子及辅助B细胞分泌抗体参与自身免疫反应,SLE的CD4+T细胞存在多个细胞亚群表型及功能的异常,包括Th1、Th2、Th17、Treg、Tfh等。多项研究表明SLECD4+T细胞还存在线粒体超级化及功能障碍。线粒体自噬为健康细胞清除受损线粒体的一种代谢方式,经典的线粒体自噬通路由PINK1-Parkin介导,其在SLE CD4+T细胞的研究尚属空白。目的:(1)探究SLE患者CD4+T细胞及其亚群中线粒体自噬的状态及其主要分子PINK1、Parkin的表达,线粒体自噬与疾疾病活动度SLEDAI评分的相关性;探究PINK1缺陷对T细胞功能影响的机制;(2)探究PINK1对小鼠CD4+T效应细胞亚型分化的影响;(3)探究线粒体自噬缺MRTX1133说明书陷对SLE模型小鼠疾病表型及免疫细胞的影响,及其与Ⅰ型干扰素的相关性。方法:(1)本研究首先通过透射电镜、实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)技术首先确定正常健康对照者(Healthy control,HC)和SLE患者CD4+T细胞线粒体自噬情况。进一步使用线粒体自噬特异性探针分析CD4+T细胞及其各亚群线粒体自噬及与SLEDAI的相关性,通过转染siPINK1后对CD4+T细胞表型及T细胞系Jurkat细胞状态的影响。(2)分选野生型和PINK1敲除鼠体内的na?ve CD4+T细胞进行T细胞亚群的体外诱导分化,同时过继转移至RAG2敲除鼠体内构建T细胞免疫工具模型即T细胞肠炎模型观察体内T细胞诱导分化差异。(3)对PINK1和Parkin全敲小鼠使用TLR7激动剂咪喹莫特(Imiquimod,IMQ)进行耳部涂抹构建狼疮小鼠模型观察临床表型差异,通过酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)、流式细胞术(Flowcytometry,FCM)检测血清学、组织病理学和免Groundwater remediation疫学的差异。结果:(1)与HC相比,SLE患者CD4+T细胞线粒体皱缩,线粒体DNA减少,PINK1和Parkin在RNA和蛋白水平均降低,进一步分析细胞亚群的线粒体自噬发现Treg细胞的线粒体自噬水平降低最为明显(HC vs SLE:45512.8000±3293.87231 vs 26576.8462±2864.59111,P<0.0001)。干扰PINK1 后体外诱导分化小鼠Treg细胞数量无明显影响,而人Treg细胞数量可降低(siNC vs siPINK1:11.68 ± 1.729 vs 9.160±1.293,P<0.05)。干扰 Jurkat 细胞 PINK1 后 Treg 细胞功能相关p-Akt通路受损,细胞早期凋亡增加,但可被糖酵解抑制剂拯救。(2)PINK1缺失的na?ve CD4细胞在体外诱导分化为Th1细胞的比例更高(WT vs KO:9.040±3.771 vs 33.90±7.063,P<0.05),且与T细胞肠炎的体内诱导结果一致(肠系膜淋巴结 WT vs KO:5.481±0.8418 vs 15.62±1.270,P<0.001),线粒体自噬激动剂尿Fer-1价格石素A体外处理狼疮小鼠MRL/lpr小鼠的CD4+T细胞观察到Th1细胞比例降低。(3)小鼠经8周IMQ诱导红斑狼疮模型,Parkin敲除(Knock out,KO)鼠以自身抗体增多(WT vs KO:14836.60±1761.31 vs 36629.2±7113.08,P<0.01)和肾脏损害为主,PINK1敲除鼠以皮肤损害为主,但都与组织中Ⅰ型IFN相关蛋白STING表达增加相关。Parkin KO鼠和PINK1 KO鼠在Ⅰ型IFN分泌细胞即浆样树突状细胞存在不一致的变化趋势(淋巴结WT vs Parkin KO:3.27± 0.5567 vs 5.0377± 0.3268,P<0.05;WT vs PINK1 KO:1.490± 0.2796 vs 1.250± 0.2774,P>0.05)。结论:(1)SLE患者CD4+T细胞存在PINK1依赖的线粒体自噬障碍,且Treg细胞表现最为显著;PINK1可影响人Treg的表型、p-Akt通路及早期凋亡。糖酵解抑制剂可能为有效的拮抗剂。(2)PINK1 KO的na?ve T细胞体内体外诱导分化结果提示促进了 Th1细胞的分化。(3)PINK1和Parkin敲除鼠经TLR7激动剂IMQ诱导狼疮样模型后临床表现不一致,提示线粒体自噬相关蛋白具有细胞及组织异质性,靶向线粒体自噬治疗SLE还需要更多的具体到组织和基因的研究数据。