研究背景:腹主动脉瘤(Abdominal aortic aneurysm,AAA)是指腹主动脉血管壁病变或损伤而形成的局部膨出,是一种血管壁的退行性病变。通常无明确的临床症状,但严重时动脉瘤可发生破裂,若无紧急手术干预,死亡率超过80%。AAA病理生理机制主要包括血管细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)降解和重塑、主动脉壁炎症和血管平滑肌细胞的丢失。AAA早期,大量免疫细胞通过外膜滋养管、外膜周围淋巴结和腔内血栓进入主动脉壁。这些细胞产生的细胞因子和氧自由基促进血管炎症反应,诱导血管中层平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)的凋亡和表型变化,继而基质修复能力部分丧失。浸润性炎症细胞和VSMC释放的蛋白酶降解弹性蛋白和胶原蛋白,包括基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)、去整合素金属蛋白酶、血小infections: pneumonia板结合蛋白基序解聚蛋白样金属蛋白酶、弹性蛋白酶和组织蛋白酶等,促进主动脉扩张和破裂。硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)是一种具有心血管保护效应的气体信号分子,心血管组织主要依赖胱硫醚γ裂解酶(Cystathionine-γ-lyase,CSE)代谢半胱氨酸、同型半胱氨酸及胱硫醚产生。内源性CSE/H2S可抑制促炎因子、趋化因子的产生,诱导中性粒细胞凋亡和巨噬细胞向抗炎表型转变,抑制白细胞粘附于血管内皮和白细胞向炎症部位的迁移,具有显著的拮抗慢性炎症的生物学效应。还可减少缺血再灌注肾脏中MMP-9表达;降低缺氧诱导的大鼠肺动脉中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达和MMPs水平,使MMPs与TIMP 比值正常,调节微血管重塑。CSE在主动脉血管组织中主要表达于血管平滑肌细胞,VSMC内源性CSE/H2S系统是否参与AAA的发病,其分子机制是什么尚不清楚。本文首先观察了 AAA病人及动物模型瘤体内源性CSE/H2S表达的改变,进而利用平滑肌细胞特异敲除CSE小鼠,探讨了 VSMC内源性CSE缺失对AAA发病的影响,并初步探讨了巨噬细胞浸润及瘤体内Regorafenib使用方法ECM降解相关酶的改变的病理生理机制。研究方法:免疫荧光检测AAA患者和AAA小鼠腹主动脉α-SMA阳性细胞CSE表达;构建平滑肌细胞CSE特异性敲除小鼠,使用PCSK9诱导的高脂血症小鼠并给予AngII诱导AAA,或给予BAPN饮水诱导AAA。RNA高通量测序探究CSE敲除后VSMC基因表达谱确认细节的改变。实时定量PCR用于检测基因表达的改变。免疫组织化学染色观察动脉壁蛋白原位表达改变。研究结果:收集6例AAA病人腹主动脉瘤组织切片以及6例非AAA病人的乳内动脉切片,进行免疫荧光染色,结果显示,AAA患者动脉瘤平滑肌细胞内CSE的表达显著下调。制备AngII+高脂血症或BAPN诱导的AAA模型,AAA小鼠瘤体内平滑肌细胞中CSE蛋白表达也显著下调。AngII+ox-LDL模拟AAA发病时平滑肌细胞受到的损伤,人VSMCs和鼠VSMC CSE的mRNA及蛋白的表达下调。构建平滑肌细胞CSE特异性敲除小鼠,AngII+高脂血症或BAPN诱导野生型和平滑肌细胞CSE特异性敲除小鼠AAA形成,结果显示,平滑肌细胞CSE特异性敲除促进了AAA的发生率及死亡率,也促进了主动脉壁弹力板断裂及降解,同时增加了瘤体内巨噬细胞的浸润。RNA高通量测序探究CSE敲除后VSMC基因表达谱的改变,GO富集分析显示两组VSMC内与ECM形成有关的酶大量差异表达。定量实时荧光PCR结果显示CSE敲除后VSMC内与ECM降解相关的酶表达增加,如MMP-9、ADAMTS-4、LOXL1和Cela2a等。免疫组化染色表明,AAA小鼠模型中平滑肌细胞CSE特异性敲除小鼠腹主动脉瘤部MMP9、Cela2a和ADAMTS4蛋白表达增高。结论:平滑肌细胞内源性CSE/H2S系统下调是AAA发病的重要因素,VSMC CSE的缺失,可诱导动脉壁局部炎症反应,促进MMP9、MMP10、ADAMTS4、LOXL1、和CELA2A等基蛋白酶表达调节细胞外基质降解,促进AAA的形成与发展。平滑肌细胞内源性的CSE/H2S可能作为AAA药物干预或基因治疗的新靶点。
糖尿病足伴细菌感染患者不同病情程度感染特征分析
目的 分析糖尿病足伴细菌感染患者FUT-175不同病情程度的细菌感染特征及临床特点。方法 将收治的120例糖尿病足伴细菌感染患者为研究对象。根据大西洋学会联盟(TASC)分级标准对患者病情严重程度进行分级，并据此将患者分为A组(轻度组)28例，B组(中度组)35例，C组(重度组)31例，D组(极重度组)26例。收集患者一般资料，包括年龄、性别、糖尿病病程、身体质量指数(BMI)、血压、糖化血红蛋白水平、下肢踝肱指数(ABI)、趾肱指数(TBI)。比较各组炎症因子及免疫指标[白介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)]。对4组患者进行细菌培养及鉴定，分析4组细菌感染特征。采用Pearson相关性分析糖尿病足伴细菌感染患者病情严重程度与炎症及免疫指标水平的相关性。结果 4组患者年龄、性别、糖化血红蛋白水平、BMI及血压水平比较，差异均无统计学意义(P>Emerging marine biotoxins0.05);糖尿病病程呈A组
Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶8在肺腺癌中的作用及机制研究
目的探究Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶8(ADAMTS8)基因在肺腺癌中的作用及机制。方法选取肺腺癌数据集GSE75037和GSE116959以及TCGA数据库中肺腺癌转录组数据和临床信息;使用R软件分析肺腺癌组织中差异基因, 并对差异基因进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析;分析ADAMTS8基因在selleckchem肺腺癌中的表达及与患者生存和预后的相关性;CCK-8实验检测ADAMTS8过表达或敲低对A549细胞增殖的影响;Western blot检测ADAMTS8过表达或敲低对Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果联合分析发现, 有395个基因在肺腺癌样本中发生上调, 716个基因发生下调;ADAMTS8在肺腺癌组织中低表达, 其表达水平与肿瘤分期有关;ADAMTS8低表达与患者生存时间短、预后差相关, Cox回归分析表明, ADAMTS8可作为肺腺癌患者独立的预后标志物;CCK-8结果表明, 过表达ADAMTS8能抑制A549细胞的增殖, 敲低ADAMTS8能促进A549细胞的增殖(P0.05);Western blot结果表明, 过表达ADAMTS8后, 细胞中β-catenin、cyclin D1和c点击此处-Myc的蛋白水平显著降低(P0.05), Reaction intermediates而敲低ADAMTS8可引起细胞中β-catenin、cyclin D1和c-Myc的蛋白水平显著升高(P0.05)。结论 ADAMTS8在肺腺癌中低表达, 可作为患者独立的预后标志物, 过表达ADAMTS8可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活性发挥对肺腺癌细胞增殖的抑制作用。
2018年甘肃省肿瘤登记地区甲状腺癌流行特征及2010—2018年变化趋势
[目的]分析2018年甘肃省肿瘤登记地区甲状腺癌发病和死亡情况及2010—2018年甲状腺癌变化趋势。[方法]按照国家癌症中心制定的数据质量审核评价标准，对甘肃省符合质量控制标准要求的15个肿瘤登记点上报的甲状腺癌发病、死亡和人口数据进行汇总分析。分性别和城乡计算发病（死亡）率、标化发病（死亡）率、0～74岁累积率等统计指标。中标率及世标率分别采用2000年全国普查标准人口年龄构成和Segi’s世界标准人口年Tofacitinib核磁龄构成计算。使用Joinpoint线性回归模型计算2010—2018年甲状腺癌发病率和死亡率的年度变化百分比（APC）。[结果] 2018年甘肃省肿瘤登记地区甲状腺癌新发病例数为213例，发病率为3.96/10万，中标率为3.20/10万，世标率为3.18/10万，累积率（0～74岁）为0.31%，占全部恶性肿瘤发病的1.57%，居发病顺位第16位。甲状腺癌死亡病例数为37例，死亡率为0.69/10万，中标率为0.50/10万，世标率为0.57/10万，累积率（0～74岁）为0.05%，占全部恶性肿瘤死亡的0.49%，居死亡顺位第19位。发病率和死亡率分别在20岁和45岁开始随年龄增长呈上升趋势，高峰分别在50～54和80～8Panobinostat小鼠4岁年龄组。2010—2018年甘肃省甲状腺癌中标发病率从2010年的2.63/10万上升至2018年的3.20/10万(APC=2.08%urine microbiome,95%CI:-6.71%～11.69%)，趋势变化差异无统计学意义（P>0.05）；中标死亡率呈下降趋势(APC=-10.05%,95%CI:-17.97%～-1.35%)，趋势变化差异有统计学意义（P<0.05）。在地区分布中景泰县甲状腺癌中标发病率最高，临潭县中标死亡率最高，高台县中标发病率与死亡率均为最低。[结论] 2018年甘肃省肿瘤登记地区甲状腺癌发病率虽处我国较低水平，但其中标发病率仍在上升，应加强开展健康宣传教育，控制危险因素，有针对开展综合防治工作。
微创下置管抽吸液化引流术与保守治疗高血压脑出血患者的效果对比
目的 探究微创下置管抽吸液化引流术与保守治疗高血压脑出血患者的临床效果。方法 选择2013年1月—2020年1月该院收治的100例高血压脑出血患者作为研究对象，随机分为常规组以及观察组，各50例。观察组采用微创下置管抽吸液化引流术进行治疗，常PLX5622体内实验剂量规组使用保守治疗，比较两组患者血清IL-6、NSE水平以及患者神经功能缺损评分、BI指数评分、并发症发生情况和治疗效果。结果 治疗前，两组患者NIHSS评分、BI指数评分、血清IL-6、NSE水平比较，差异无统计学意义（t=2.132、0.367、0.013、0.040,P>0.05）。治疗后，观察组患者神经功能缺损（10.41±2.73）分及BI指数评分（58.84±5.69）分显著优于常规组（16.64±3.21）分、（51.28±6.27）分，差异有统计学意义（t=10.454、6.313,P<0.05），并且观察组患者的血清ILhttps://www.selleck.cn/products/MK-1775.html-6(26.44±4.33)ng/L、NSE(71.55±7.11)ng/L水平较常规组IL-6(29.46±6.86)ng/L、NSE(81.11±7.87)ng/L明显降低，差异有统计学意义（t=2.632、6.373,P<0.05）。观察组并发症发生率比常规组明显降Antiretroviral medicines低，而治疗有效率比常规组明显升高，差异有统计学意义（χ~2=7.294、13.562,P<0.05）。结论 高血压脑出血患者采用微创引流术能够改善患者的神经功能缺损评分以及BI指数评分，改善患者血清水平，降低并发症发生率，值得临床推广。
脐带间充质干细胞对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响
目的探讨脐带间充质干细胞(UCMSCs)对RA滑膜成纤维细胞(FLSs)分泌MMPs的影响。方法 Wistar大鼠制作胶原诱导关节炎(CIA)模型,第17天尾静脉输注1×10~6 UCMSCs,第42天处死大鼠后收集滑膜组织提取RNA,实时荧光定量PCR检测genetic stability滑膜组织MMP-1、MMP-3、MMP-13的表达桐平。取行膝关节置换术的RA和OA患者滑膜组织,分离培养FLSs,比较RA与OA FLSs的MMP-1、MMP-3和MMP-13的表达水平。将RA FLSs与UCMSCs用Transwell小室共培养72 h,配对t检验比较共培养前后FLSs的MMPs表达水平Enasidenib变化及上清中MMPs含量,并检测UCMSCs在共培养过程中分泌的可溶性细胞因子水平。向培养体系中加入可溶性细胞因子的抑制剂后观察FLSs表Alisertib达MMPs水平变化。2组间比较采用t检验,而3组及以上之间比较采用单因素方差分析。结果 CIA大鼠滑膜组织较正常鼠高表达MMP-1(6.9±5.4,1.3±1.4,P<0.05)、MMP-3(6.0±6.5,1.4±1.0,P<0.05)和MMP-13(21.8±20.8,1.5±1.6,P<0.05),UCMSCs治疗后与未治疗组及成纤维细胞治疗组比较,滑膜组织MMP-1(1.3±1.4,6.9±5.4,8.7±6.8,P<0.05)、MMP-3(1.4±1.5,6.0±6.5,6.0±5.7,P<0.05)和MMP-13(3.0±3.2,22±21,22±26,P<0.05)均表达下调。RA患者FLSs MP-1(1.8±0.9,0.9±0.7,t=2.44,P<0.05)、MMP-3(2.6±1.7,1.1±1.0,t=2.25,P<0.05)和MMP-13(2.4±2.3,0.6±0.7,t=2.37,P<0.05)水平明显高于OA患者。经UCMSCs体外共培养后,MMP-13(1.3±1.2,0.9±1.2,t=3.63,P<0.05)水平下调,而MMP-1(1.5±1.4,6.6±6.0,t=3.90,P<0.05)、MMP-3(7±17,22±35,t=2.86,P<0.05)上调。共培养后UCMSCs表达IDO、肝细胞生长因子(HGF)和IL-10等可溶性细胞因子水平明显增多。加入IL-10抗体后UCMSCs抑制MMP-13的能力减弱。结论 UCMSCs通过分泌可溶性细胞因子IL-10抑制RA滑膜组织MMPs分泌,从而改善关节炎病情。
Balb/c裸鼠LNCaP细胞前列腺癌原位移植模型的建立及超声造影在肿瘤血管生成中的作用
目的 构建Balb/c裸鼠LNCa P细胞前列腺癌原位移植模型并应用超声造影(CEUS)评价肿瘤血管生成的效果。方法 将LNCa P细胞接种到Balb/c裸鼠前列腺背叶中,构建Balb/c裸鼠LNCa P细胞前列腺癌原位移植模型;通过超声成像监测肿瘤的产生及体积变化情况,应用CEUS检查肿瘤内血流灌注情况并勾画感兴趣区域(ROI)生成时间强度曲线(TIC),通过仪器自动生成并记录造影剂进入肿瘤的到达时间(Atm)、到达峰值时间(Tto Pk)、造影曲线下面积(Au C)等超声造影参数;通过病理学检查分析雄激素受体(AR)的表达,免疫组织化学染色检测肿瘤组织中血小板内皮细胞粘附分子(CD31)和血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达,利用Image J软件对免selleck化学疫组织化学结果进行分析并计算CD31与VEGF-A抗体染色的平均光密度值(AOD);最后应用Prism9.0统计软件对CEUS参数Atm、Tto Pk、Au C与AOD进行Pearson相关性分析。结果 肿瘤构建第50天,原位肿瘤成瘤率为71.43%(15/21),原位肿瘤平均体积为(288.81±76.49)mm3;通过超声造影曲线分析显示Atm为(1.59±0.65)s,Tto Pk为(11.59±3.68)s,Bioactivatable nanoparticleAu C为(1933.91±454.38)d B;解剖发现肿瘤呈椭圆形,肿瘤组织的免疫组织化学染色结果显示:肿瘤细胞中AR染色显示强阳性,AR定位于细胞核内;免疫组织化学染色发现CD31阳性、VEGF-A阳性,Image J软件分析显示CD31的AOD=0.39±0.06、VEGF-A的AOD=0.45±0.05,Prism统计分析显示VEGF-A与Atm、Ttopk、Au C之间相关性为r=-0.934(P<0.001)、r=-0.878(P<0.001)、r=0.868(P<0.001),CD31与Atm、Ttopk、Au C之间相关性为r=-0.678(P<0.001)、r=-0.3购买PLX403260(P=0.018)、r=0.310(P=0.031)。结论 本研究通过细胞悬液注射法成功建立了LNCa P细胞原位移植模型,CEUS可以有效地评价原位前列腺肿瘤中血管的生成情况。
基质金属蛋白酶在糖尿病肾病作用中的研究
目的探讨2型糖尿病及糖尿病肾病患者血清基质金属蛋白酶水平的变化及其相关影响因素。方法选取2型糖尿病患者94例,其中2型糖尿病无蛋白尿组患者37例;微量蛋Liproxstatin-1临床试验白尿组(尿白蛋白/肌酐为30～300 mg/g)27例;显著蛋白尿组患者(尿白蛋白/肌酐>300mg/g)30例。健康体检者32名作为对照组。所有检测对象于清晨空腹抽肘静脉血,应用酶联免疫吸附法测定血清基质金属蛋白酶2及血浆纤溶酶原激活物抑制物1。结果 (1)微量蛋白尿组患者血清基质金属蛋白酶2水平为(4.3±4.1)μg/L确认细节,显著蛋白尿组患者为(4.6±4.1)μg/L,与正常对照组[2.8±0.4)μg/L]比较差异有统计学意义(P<0.05);(2)微量蛋白尿组患者血浆纤溶酶原激活物抑制物1水平为(69±19)μg/L,显著蛋白尿组implantable medical devices患者为(69±18)μg/L,与正常对照组[(52±30)μg/L]比较差异有统计学意义(P<0.05);(3)相关分析结果表明,血清基质金属蛋白酶2与血浆纤溶酶原激活物抑制物1水平无相关(r=0.077,P=0.468);(4)在2型糖尿病患者中血清基质金属蛋白酶2水平与尿素氮、肌酐水平相关(r分别为0.370及0.468,P分别为0.00、0.000),血浆纤溶酶原激活物抑制物1水平与空腹血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白、尿酸呈正相关(r分别为0.196、0.342、-0.167、0.203,P分别为0.004、0.000、0.016、0.003)。结论 2型糖尿病合并蛋白尿患者血清基质金属蛋白酶2及血浆纤溶酶原激活物抑制物1水平升高,是2型糖尿病患者合并肾病的危险因素。
儿童先天性心脏病术后导管相关性血流感染TGF-β1/Smads信号通路表达
目的 探讨儿童先天性心脏病术后导管相关性血流感染(CRBSI)T辅助细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡及转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的表达及意义。方法 选取2019年1月-2021年5月河南省胸科医院收治的96例先天性心脏病手术且术后采取经颈内静脉穿刺中心静脉置管的患儿为研究对象。根据患儿是否发生CRBSI,分为CR BSI组20例和非CRBSI组76例。另选取同期门诊健康体检儿童48名为健康对照组。检测外周血Th17/Treg细胞,血清TGF-Heparin Biosynthesisβ1及Smad2、Smad3水平,单个核细胞TGF-β1及Smad2、Smad3蛋白表达量。检测TGF-β1+869 C/T位点的基因型频率。结果 CRBSI组外周血Th17/Treg细胞比值高于非CRBSI组和健康对照组(P<0.05)Puromycin。CRBSI组血清TGF-β1及Smad2、Smad3水平均高于非CRBSI组和健康对照组(P<0.05)。CRBSI组外周血单个核细胞TGF-β1蛋白、Smad2蛋白、Smad3蛋白表达量均高于非CRBSI组和健康对照组(P<0.05)。CRBSI组TGF-β1+869 C/T位点的CC基因型频率高于非CRBSI组,TT基因型频率低于非CRBSI组(P<0.05)。结论 先天性心脏病MK-4827术后发生CRBSI的分子病理学机制可能与激活TGF-β1/Smads信号通路有关,从而导致Th17/Treg细胞平衡失调。
CUL3对胃癌细胞增殖、侵袭及迁移的作用及其机制
目的 探讨泛素连接酶Cullin3(CUL3)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的作用及其作用机制。方法 基于TCGA数据库分析CUL3在胃癌及癌旁组织中的表达及其与临床预后的关系。采用CUL3 shRNA和空载慢病毒转染HGC-27和BGC-823细胞，构建CUL3敲低胃癌细胞系组(shCUL3组)与空载慢病毒转染组(Vector组)。采用CCK-8法、克隆形成实验、EdU染色、划痕实验和TrWnt-C59抑制剂answell实验检测两hypoxia-induced immune dysfunction组的增殖、迁移和侵袭能力变化；采用Western blotting检测两组中上皮-间质转化(EM更多T)相关蛋白和PI3K/Akt/GSK3β通路蛋白的表达情况；应用PI3K激动剂740 Y-P后检测shCUL3组细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 TCGA数据库中CUL3在胃癌中呈高表达，且与胃癌患者预后不良明显相关；CCK-8、克隆形成实验和EdU染色结果显示，与空载组比较，shCUL3组胃癌细胞增殖能力受到抑制(P<0.05)，且CUL3 shRNA可明显抑制细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05)；此外，shCUL3组E-cadherin蛋白表达升高，波形蛋白、β-catenin、p-PI3K、p-Akt及p-GSK-3β蛋白水平较空载组明显降低(P<0.05)；与shCUL3组比较，应用PI3K激动剂740 Y-P可部分逆转CUL3 shRNA对胃癌细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论 敲低CUL3可抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移过程，CUL3在胃癌中的作用机制可能与激活PI3K/Akt/GSK3β信号通路相关。