MAPK信号通路

目的研究低氧状态下乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)对胰腺癌高转移细胞株MIA PaCa-2细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的影响。方法以Hpa AS-ODN预先阻断MIA PaCa-2细胞Hpa表达并低氧培养,观察MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达的变化,明胶酶法检测MMP-2和MMP-9活性的变化,观察阻断Hpa对MMP-2和MMP-9表达及活性的影响。结果低氧培养条件下,MIA PaCa-2细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达略有上调,但是与常氧条件下培养对比,在6、12和24 h差异均无统计学意义(P值均>0.05)。以ASODN阻断Hpa后,MMP-2 mRNA及蛋白表达均无明显变化。低氧后6 h MMP-9 mRNA及蛋白表达开始升高,12 h(P<0.05)和24 h(P<0.01)更加明显。阻断Hpa表达后,MMP-9 mRNA及蛋白表达在各时间段均有下降,而在24 h下降明显,差异具有统计学意义(P<0.01)。低氧后12 h和24 h,活化型的MMP-2和MMP-9均显著增强,当Hpa表达被抑制后,于12h(P<0.01)和24 h(PMS-275<0.01)活化型的MMP-9活性受到明显抑制,而各时间内,活化型的MMP-2活性均不受Hpa AS-ODN的Tezacaftor采购影响(P>0.05)。结adolescent medication nonadherence论低氧可刺激MIA PaCa-2细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达,增强酶活性。预先阻断Hpa表达在12h和24h可抑制MMP-9 mRNA和蛋白的表达,降低MMP-9的活性,而对MMP-2则无明显影响。

研究黄芪甲苷对2型糖尿病大鼠胰高血糖素样肽-1(GLP-1)分泌的影响，探究可能的作用机制。注射链脲佐菌素构建2型糖尿病大鼠模hand disinfectant型，设置空白对照组、糖尿病模型组、黄芪甲苷高剂量组、黄芪甲苷低剂量组；以NCI-H716细胞为体外细胞模型，设置空白对照组、黄芪甲苷组和相关信号通路抑制剂组；采用ELISA方法分别测定大鼠血液、肠组织和细胞中的GLP-1水平，以常规细胞免疫荧光染色技术测定大鼠肠组织中L细胞数，采用qT-PCR和Western Blot分别测定大鼠肠组织中胰高血糖素原和前激素转化酶1/3的mRN获悉更多A表达和蛋白表达水平。结果显示，黄芪甲苷能够显著提高大鼠血液、肠组织和细胞中GLP-1的含量(P<0.01),提高大鼠肠组织中L细胞数(P<0.05),提升大鼠肠组织中胰高血糖素原和前激素转化酶1/3的mRNA表达和蛋白表达水平(P<0.01),显著改善M受体阻RP56976化学结构断剂对细胞分泌GLP-1的抑制作用(P<0.05),相关信号通路抑制剂均显著抑制了黄芪甲苷促进细胞分泌GLP-1的作用(P<0.05或P<0.01)。结果提示，黄芪甲苷能够与肠道相互作用引起GLP-1水平的改变；多种信号通路参与了黄芪甲苷对肠道GLP-1分泌的调控作用。

相较于花生的传统加工技术——热榨，水媒法加工技术由于在脂质和蛋白质综合利用方面的优势，越来越受到重视。我国花生产量大，品种众多，它们是不是都适合于水媒法加工（提取率高、离心分离效果好）还不甚清楚。因此，本研究收集了五种花生品种，首先比较了它们的脂质和蛋白质含量、脂质和蛋白质的提取率，接着比较了离心分离对于花生浆中脂质和蛋白质Supplies & Consumables的分离效果，最后比较Ipatasertib配制了不同花生品种的内源性蛋白酶（内肽酶和外肽酶）活性（可用于花生蛋白的酶法改性）。结果显示，脂质（46.95%～51.35%）和蛋白质（24.66%～29.68%）含量在品种间存在差异。品种对于蛋白质提取率（91.86%～97.77%；罗汉果最高，花selleck Belumosudil育最低）的影响明显，而对于脂质提取率（98%左右）的影响不大；品种对于花生浆中蛋白质和脂质的离心分离效果也不同，蛋白质在蛋白液中的分布百分比为85.32%～97.34%，脂质在乳状液中的分布百分比为68.75%～81.24%，综合来说，白沙308的分离效果最好。内源性蛋白酶活性（pH 3～5）在品种间也存在差异，但是各品种的内肽酶都在pH 3时表现出最强活性，可有效降低花生致敏蛋白Ara h 1；各品种的外肽酶活性都随pH的增加而增加，在pH 5时，四粒红最高，花育最低；对于内肽酶和外肽酶的协同活性，花育在pH 3时最强，而其它四个品种在pH 5时最强。

目的:探究扩散张量成像(DTI)及弥散张量纤维束成像(DTT)技术在Microsphere‐based immunoassay高血压脑出血(HICH)术后神经运动功能损害评估中的应用。方法:选取98例需手术治疗的HICH患者，于入院24 h内及治疗2周后均进行DTI、DTT检查，检测患者脑部组织健侧和患侧大脑脚、内囊部分各向异性分数(FA)均值及皮质脊髓束(CST)损伤情况，依据CST损伤分级将患者分为甲组(CSTⅠ～Ⅱ级)、乙组(CST Ⅲ级)，借助美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估患者治疗前后四肢运动能力情况，NIHSS中四肢得分总和为瘫痪分级(PG)。结果:98例HMCC950说明书ICH术后患者CST损伤分级，1～2级有58例，3级有40例。入院时，甲组FA值明显高于乙组，且NIHSS、PG评分显著低于乙组(P <0.05);治疗2周后，两组FA值均有所升高，NIHSS、PG评分均明显下降(P <0.05)，且甲组优于乙组(P <0.05)。Pearson相关性分析显示，HICH患者入院时、治疗2周后CST损伤分级均与NIHSS、PG评分呈正相关，与FA值呈负相关(P <0.05)。结论:DTI、DTT技术应用于HICHselleckchem AY-22989术后患者，可有效评估术后神经运动功能损害情况，CST损伤级别与神经运动功能损害程度及预后密切相关。

目的:探究扩散张量成像(DTI)及弥散张量纤维束成像(DTT)技术在Microsphere‐based immunoassay高血压脑出血(HICH)术后神经运动功能损害评估中的应用。方法:选取98例需手术治疗的HICH患者，于入院24 h内及治疗2周后均进行DTI、DTT检查，检测患者脑部组织健侧和患侧大脑脚、内囊部分各向异性分数(FA)均值及皮质脊髓束(CST)损伤情况，依据CST损伤分级将患者分为甲组(CSTⅠ～Ⅱ级)、乙组(CST Ⅲ级)，借助美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估患者治疗前后四肢运动能力情况，NIHSS中四肢得分总和为瘫痪分级(PG)。结果:98例HMCC950说明书ICH术后患者CST损伤分级，1～2级有58例，3级有40例。入院时，甲组FA值明显高于乙组，且NIHSS、PG评分显著低于乙组(P <0.05);治疗2周后，两组FA值均有所升高，NIHSS、PG评分均明显下降(P <0.05)，且甲组优于乙组(P <0.05)。Pearson相关性分析显示，HICH患者入院时、治疗2周后CST损伤分级均与NIHSS、PG评分呈正相关，与FA值呈负相关(P <0.05)。结论:DTI、DTT技术应用于HICHselleckchem AY-22989术后患者，可有效评估术后神经运动功能损害情况，CST损伤级别与神经运动功能损害程度及预后密切相关。

恶性肿瘤的粗发病率和死亡率逐年增加，成为威胁人类健康的主要疾病之一。肿瘤的常规治疗药物具有严重的不良反应，给患者造成沉重负担。中药活性成分可有效抑制肿瘤生长、改善患者生存质量且毒副作用小。中药生物碱是一类天然有机化合物，其广泛存在于多种中草药中，近年来因其展现出抗肿瘤作用越来越受到关注。中药生物碱抗肿瘤机制主要包括pyrimidine biosynthesis诱导肿瘤细胞凋亡、抑制侵袭转移、抑制增殖、诱导肿瘤细胞BMN 673体外自噬、阻滞细胞周期、抑制血管生成、调控微小RNA和调节免疫功能等。此外，中药生物碱还可以逆转肿瘤耐药性，降低肿瘤干细胞干性。中药生物碱可通过调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3kinase/protein kinase B，PI3K/Akt）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogenactivated protein kinase，p38 MAPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammaliantarget of rapamycin，mTOR）、Notch、刺猬（Hedgehog）以及分泌型糖蛋白/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）等相关信号通路，多ABT-263供应商环节、多途径参与到肿瘤增殖、侵袭转移、自噬与凋亡过程中，影响肿瘤的发生发展。生物碱的衍生物、纳米制剂可改善生物碱溶解度、利用度和抗肿瘤活性，为生物碱的临床应用带来更广阔的前景。现将近年中药生物碱及其代表性衍生物和纳米制剂抗肿瘤相关研究进行归纳总结，以期为生物碱抗肿瘤作用深入研究提供参考。

目的 研究在不同给药方式下槐耳颗粒对三阴selleck产品性乳腺癌细胞的作用效果，及槐耳颗粒是否可以影响Bmi-1进而调节肿瘤细胞CD133表达以达到抑制肿瘤细胞转移的目的。方法选择40只3～4周龄雌性裸鼠随机分成四组，预防组、预防及治疗组、治疗组分别于建模前三周、建模前及建模后三周、建模后三周口服给予槐耳清膏溶液，对照组不给予药物治疗；建模方式采用左心室注射的方法建立三阴性乳腺癌全身转移模型，建模后六周观察期后统一处死裸鼠并取标本；通过Kaplan-Meier法分析裸鼠生存，免疫组化法检测裸鼠转移灶内CD133及Bmi-1的表达，组间比较采用方差分析。结果预防及治疗组裸鼠的生存时间最长（MST=42d），其次为治疗组（MST=39d），再次为预防组（MST=38d），对照组裸鼠的生存时间最短（MST=32d）；预防及治疗组的Bmi-1平均表达最低，对照组的Bmi-1平均表达最高，不同给药方式与Bmi-1的表达之间存在显著性差异（P＜0.05）；预防及治疗组的CD133平均表达最低，对照组的CD133平均表达最高，不同给药方式与CD133的表达之间存在显著性biolubrication system差异（P＜0.05）。结论槐耳颗粒对三阴性乳腺癌全身R428 molecular weight转移具有预防及治疗作用；槐耳颗粒可能通过激活Bmi-1凋亡基因从而减少了三阴性乳腺癌干细胞CD133的比例，进而达到了预防及治疗三阴性乳腺癌全身转移的作用。

MLN8237体内实验剂量目的：探讨毛蕊异黄酮对氧化损伤的星形胶质细胞(astrocyte，AS)的增殖、周期、凋亡的影响。方法：原代分DS-3201离大鼠脊髓星形胶质细胞，并利用免疫荧光检测GFAP进行鉴定。分别加入5μmol·L~(-1)、10μmol·L~(-1)、20μmol·L~(-1)毛蕊异黄酮预处理脊髓星形胶质细胞12h，然后加入H_(2)O_(2)处理24h，造成氧化损伤模型，CCK8检测各组细胞增殖情况，选择合适的毛蕊异黄酮处理浓度。实验分组包括空白对照组、模型组、模型+毛蕊异黄酮预处理组。CCK8检测各组细胞增殖情况，流式检测各组细胞凋亡和周期情况，免疫荧光检测各组细胞样本中Brdu水平，Western blot 检测各组细胞中p-JAK2、p-STAT3、GP130、IL-6 的蛋白表达水平。结果：H_(2)O_(2)处理能够抑制脊髓星形胶质细胞的增殖并诱导其凋亡（P<0.05），氧化损伤模型细胞组中p-JAK2、p-STAT3、GP130、IL-6的蛋白表达水平显著增加（P<0.05），而毛蕊异黄酮预处理后能够减轻H_(2)O_(2)造成的氧化损伤，促进增殖和抑制凋亡（P<0.05），并显著抑制了p-JAK2、p-STAT3、GP130、IL-6的potential bioaccessibility蛋白表达水平（P<0.05）。结论：毛蕊异黄酮能够促进氧化损伤的星形胶质细胞增殖并抑制其凋亡，可能通过抑制JAK2/STAT3通路磷酸化起作用。

目的 观察参乌益肾片治疗糖尿病肾病患者的临床效果及其对患者炎症反应和肾功能的影响。方法 选择60例Ⅳ期糖尿病肾病患者，随机分为对照组与中医组，各30例。在常规治疗基础上，对照组给予缬沙坦治疗，中医组给予参乌益肾片治疗。比较两组患者治疗前及治疗6个月后的中BIBW2992作用医证候积分、血糖变化情况[空腹血糖(FBG)Protein Analysis、餐后2 h血糖(2hPBG)、HbA1c]、肾功能指标[血清肌酐、血尿素氮、24 h尿蛋白、估算肾小球滤过率(eGFR)]、炎症细胞因子水平[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6],比较治疗6个月期间两组患者的肾功能减退情况。结果 治疗6个月后，两组患者的倦怠乏力、夜尿频多中医症候积分，血清肌酐水平、血尿素氮水平、24 h尿蛋白水平，以及血清TNF-α、ICAM-1、IL-1β、IL-6水平均低于治疗前，而eGFR均高于治疗前，且中医组上述指标均优于对照组(均P<0.05)。而两组患者治疗前后血糖水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗6个月期间，中医组肾功能减退的进展累积发生率低于对照组(P<0.05)。结论 相比于缬沙坦，采用参乌益肾片治疗能更好地改善糖尿病肾病患者的中医证www.selleck.cn/products/lgx818候及肾功能，抑制机体炎症反应，减缓肾功能减退的进展，且不影响血糖控制水平。

磺酰基乙烯类化合物是一种重要的功能组分,在有机合成及生物分子等领域都有着较为广泛的应用。在有机合成领域,磺酰基可以作为一种很好的离去基团,发生一系列取代反应;烯烃是一种不饱和烃,容易发生加成反应。磺酰基乙烯结合了磺酰基和烯烃的共同特性,可以发生加成反应、取代反应、重排反应等。在生物分子领域,磺酰基乙烯类化合物可以作为一种蛋白酶小分子亲电灭活剂,例如,半胱氨酸蛋白酶抑制剂、HIV-1抑制剂以及转肽酶抑制剂等;同时,不饱和的磺酰基乙烯化合物也是药物化学中重要的生物活性物质,可以用于治疗帕金森症的神经保护剂及抗锥虫药物试剂的合成。但是,对于1,2-双磺酰基乙烯化合物的反应,目前已有的方法大多存在反应过程较为复杂、反应效率较低等局限性;此外,磺酰基乙烯类化合物在蛋白质探针氧化修饰标记方面的研究依然是一个巨大的挑战。半胱氨酸亚磺酸是蛋白质的过氧化产物,也是蛋白质功能、催化和信号传递的关键调节器,蛋白质氧化修饰的研究大多是通过定性定量检测半胱氨酸的氧化产物来实现的。对于蛋白质氧化修饰及半胱氨酸亚磺酸的研究目前有间接法和直接法等途径,间接法是先用硫醇阻断剂、还原剂等对蛋白质氧化产物进行前处理,之后用特异性试剂进行检测。这种方法一是蛋白质前处理的过程时间较长,蛋白质内微环境容易发生变化,促使假阳性的出现,从而导致氧化Dorsomorphin使用方法应激现象;二是半胱氨酸亚磺酸的氧化态不够稳定,容易对检测造成假阳性结果。直接法是开发灵敏度高、毒性低的特异性小分子探针,但这种方法所报道的小分子探针反应类型少、效率低,也难以实现快速高效的检测。为了更好地解决以上问题,我们探究了1,2-双磺酰基乙烯的取代反应及生物应用,构建了无金属催化的新型磺酰基乙烯的取代反应,同时也实现Smart medication system了磺酰基乙烯类化合物在巯基蛋白亚磺化修饰上的标记应用。本文的具体工作如下:(1)1,2-双磺酰基乙烯的取代反应及巯基蛋白氧化修饰的标记应用我们开发了一种在室温条件下,1,2-双磺酰基乙烯与脂肪族亚磺酸钠的取代反应,实现了双磺酰基乙烯与脂肪族亚磺酸钠的快速高效制备不对称型磺酰基乙烯的反应。此类方法无需金属催化,在室温的条件下便能够实现瞬时反应,反应产率较VP-16试剂高,产物较稳定,底物耐受性好。同时,我们利用相同的条件和方法,实现了1,2-双磺酰基乙烯与半胱氨酸亚磺酸的反应,并且将1,2-双磺酰基乙烯作为探针成功实现了在巯基蛋白质亚磺化修饰上的标记。(2)1,2-双磺酰基乙烯的羟基化取代反应我们开发了一种在加热条件下,苯基亚磺酸钠促进的1,2-双磺酰基乙烯与溶剂中微量水的取代反应,实现了双磺酰基乙烯经由羟基化取代-烯醇互变过程合成多官能化脂肪醛的新型有机反应。该反应由苯基亚磺酸钠提供碱性环境,反应条件温和,溶剂绿色环保,无需金属催化及惰性气体保护;同时,经过一锅法还原得到了一种新型的磺酰基醇类化合物,其合成方法之前未有报道,这种化合物的羟基和磺酰基是药物合成的重要官能团,因而可能会对生物学领域、药学领域的研究具有潜在的价值。