MAPK信号通路

目LGX818体外的 探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响，初步探索其潜在的分子机制。方法 从公共在线数据库癌症基因组图谱(TCGA)中下载卵巢癌的转录组及临床数据，根据TMEM16A和AKT1基因表达的中位值将患者分为高表达组与低表达组，应用Kaplan-Meier法进行生存分析。Western blot方法检测过表达TMEM16A后卵巢癌SKOV3细胞中蛋白激酶AKT1及磷酸化AKT1水平。应用CCK-8细胞增殖实验检测SKOV3卵巢癌细胞转染过表达TMEM16A质粒及应用AKT1抑制剂后细胞的增殖能力。应用Transwell侵袭实验检测过表达TMEM16A及加入AKT1抑制剂后卵巢癌细胞的侵袭情况。结果 Kaplan-Meier生存分析显示，TMEM16A高表达的卵巢癌患者预后生存期显著缩短，TMEM16A与AKT1联合高表达组生存期显著短于联合低表达组。Western blot结果显示，过表达TMEM16A促进磷酸化AKT1蛋白表达。CCK-8结果显示，过表达TMEM16A后细胞增殖能力增强，加入AKT1抑制剂后可以阻断其增强的细胞增殖能力。Transwell结果表明，TMEM16A高此网站表达明显促进卵巢癌细胞侵袭，而AKT1抑制剂可影响其侵袭能力。结论 过表达TMEM16A可以激活卵巢癌SKOV3细胞中AKT1蛋白，TMEM1ImmunoCAP inhibition6A可能通过激活AKT1促进卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭。

目的 探讨应用氯吡格雷联合阿司匹林治疗老年冠心病心绞痛患者的临床疗效及对心功能、血清细胞因子的改善效果，以期为临床治疗老年冠心病心绞痛提供有利的参考依据。方法 将南京医科大学第四附属医院2020年1月至2021年12月收治的48例老年冠心病心绞痛患者依据随机数字表法分为两组。对照组（24例）患者在常规治疗（根据患者自身情况进行高血压、糖尿病等治疗）基础上加用阿司匹林，联合组（24例）患者在对照组的治疗基础上加用氯Imported infectious diseases吡格雷，两组患者均连续治疗1个月。比较两组患者治疗后的临床疗效，治疗前后的心功能、血清细胞因子水平、西雅图心绞痛量表（SAQ）各项评分，以及治疗过程中不良反应发生情况。结果 两组患者治疗后临床总有效率比较，联合组显著高于对照组；治疗后两组患者SAQ各项评分及心输出量（CO）、每搏输出量（SV）、左心室短轴selleck产品缩短率（LVFS）、左心室射血分数（LVEF）水平与治疗前比均显著升高，联合组较对照组显著升高；治疗后两组患者血清氨基末端脑钠肽前体（NT-p确认细节roBNP）、炎症因子水平与治疗前比均显著降低，联合组较对照组显著降低（均P<0.05）；两组患者头痛、胃部不适等不良反应总发生率经比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 氯吡格雷与阿司匹林联合应用于老年冠心病心绞痛的治疗，可使患者心功能得以有效改善，提高整体生活质量，减轻炎症损伤，临床疗效显著，且安全性良好，可为临床治疗老年冠心病心绞痛提供有利的参考依据。

目的:探讨柚皮素对脑缺血小鼠神经细胞的保护作用，并从线粒体自噬途径selleck探讨其保护作用的机制。方法:采用大脑中动脉栓塞造模(MCAO)的脑缺血再灌注损伤小鼠模型，原代皮NVP-TNKS656分子式层神经元的糖氧剥夺再灌注模型。动物实验分为空白组、假手术组、模型组、溶剂组、柚皮素组、抑制剂组、抑制剂+柚皮素组。细胞实验分为正常组、模型组、模型+柚皮素组、正常+柚皮素组、模型+抑制剂组、柚皮素+抑制剂组。检测神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞活力，观察小鼠脑组织神经细胞内粒体结构和线粒体自噬体分布情况，检测线粒体相关蛋白TOMM20、COX4I1、P62、LC3、Cyt C表达水平。结果:柚皮素可以降低MCAO小鼠的神经功能缺损评分，缩小脑梗死体积，增强神经细胞活力。电镜及Western blot结果发现柚皮素可以激活并促进MCAO小鼠神经细胞线粒体自噬。结论:柚皮素可以激活脑缺血后神经细胞线粒体自噬，减轻lung infection脑缺血后神经细胞损伤。

目的 探讨雷帕霉素对慢性脑血流低灌注小鼠自噬机制的影响。方法 30只SPF级C57BL/6J雄性小鼠随机分为假手术组、构建双侧颈总动脉确认细节狭窄(BCAS)模型(模型组)、模型+治疗组(均n=10)。模型+治疗组小鼠予以雷帕霉素灌胃治疗。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆情况；苏木精-伊红染色观察小鼠额叶皮质和海马组织的病理变化；TUNEL染色检测小鼠额叶皮质和海马组织神经元凋亡；Western blot检测额叶皮质和海马中凋亡蛋白Bcl-2、Bax和自噬相关蛋白LC3、P62、Aβ_(1-42)、APP、BACE1蛋白的表达。结果 与假手术组比较，模型组小鼠认知损害加重、额叶皮质和海马神经元损伤、氧化应激水平提高、神经元凋亡率升高，Bcl-2蛋白下降，Bax、LC3-Ⅱ、P62、Aβ_(1-42)、APP和BACE1蛋白升高(均P<0.05)；与模型组比较，模型+治疗组小鼠认知能力提高，额叶皮质和海马神经元损伤减轻，氧化应激水平下降，神经Decitabine化学结构元凋亡率降低，Bcl-2蛋白、LC3-Ⅱ蛋白水平升高，Bax蛋白，P62、Aβ_(1-42)、APP和BACE1蛋白水平降低(均P<0.bioprosthetic mitral valve thrombosis05)。结论 雷帕霉素通过激活自噬改善慢性脑血流低灌注小鼠认知损害。

目的 研究木犀草素对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡及自噬的影响。方法 使用不同浓度木犀草素分别干预A549细胞12、24、36 h, MTT法检测细胞活力以筛选合适的作用浓度和时间。12.5、25、50μmol/L木犀草素分别干预A549细胞24 h, Hoechst33258染色观察木犀草素对A549细胞凋亡的影响，Western blot检测caspase-9、caspase-3、Bax、Bcl-2、LC-3、PI3K、Akt和mTOR蛋白表达。A549细胞转染pEGFP-LC3质粒后，分别用12.5、25、50μmol/L木犀草素干预24 h,观察自噬斑点的形成。结果 木犀草素呈剂量和时间依赖性地降低A549neuromuscular medicine细胞活力，24、36 h的IC_(50)分别为29.88、22.41μmol/L。12.5、25、50μmol/L木犀草素剂量依赖性地促进A549细胞凋亡，促进cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3和Stem Cells & Wnt抑制剂Bax蛋白表达，抑制Bcl-2表达，促进自噬斑点的形成，同时可抑制PI3K、Akt和mTOR的磷Protein Tyrosine Kinase抑制剂酸化。结论 木犀草素可诱导A549细胞凋亡及自噬，其作用可能与抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关。

目的 探究仙鹤草（APL）对肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制。方法 裸鼠皮下注射肝癌Hep G2细胞，建立裸鼠移植瘤模型；将裸鼠随机分为5组：对照组（Control）、仙鹤草低剂量组（APL 6g/kg）、仙鹤草中剂量组（APL 12g/kg）、仙鹤草高剂量组（APL 24BioBreeding (BB) diabetes-prone ratg/kg）和5-氟尿嘧啶组（5-FUNavitoclax说明书 20mg/kg）。30d后检测肿瘤重量；检测30d期间肿瘤体积变化；TUNEL检测肿瘤组织凋亡；Western blot检测Caspase-3、Bax、Bcl-2、LC3-I、LC3-II、Beclin1、p62蛋白表达水平；免疫组化染色检测Ki67、VEGF阳性细胞数。结果 与Control组比较，APL各剂量组和5-FU 20mg/kg组裸鼠肿瘤重量、体积显著降低，裸鼠肿瘤组织细胞凋亡率显著升高，裸鼠肿瘤组织细胞凋亡率显著升高，Bcl-2蛋白水平显著降低，LC3-II/LC3-I比值和Beclin1蛋白水平显著升高，p62蛋白水平显著降低，Ki67、VPuromycin使用方法EGF阳性细胞数显著降低，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 仙鹤草抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长，可能参与机制为诱导肿瘤细胞凋亡和自噬，抑制肿瘤细胞增殖。

目的 确定HIV-1 gp41 CHR肽CP621-652前7个氨基酸的作用以及CP621-652与NHR肽T21复Label-free immunosensor合物的结构取向，为下一步HIV gp41靶点的新型融合抑制剂改造提供线索。方法 合成7个丙氨酸（Ala）逐一替换CP621-652前7个氨基酸序列QIWNNRepSox分子量MT的突变体，测定其对HIV-1病毒的抑制活性，应用圆二色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳及凝胶排阻测定CP621-652及突变体与gp41 NHR肽T21的相互作用，合成N端带有半胱氨酸的CP621-652、C端带有半胱氨酸的N3-Methyladenine核磁HR肽T21及相应的同源二聚体，应用二硫键氧化折叠及平衡策略，分析CP621-652与T21复合物的结合取向。结果 CP621-652前7个氨基酸的Q~1、W~3、M~6、T~7被Ala替换后活性降低，圆二色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳及凝胶排阻色谱显示，CP621-652及突变体与gp41 NHR肽T21存在相互作用，形成螺旋复合物。N端带有半胱氨酸的CP621-652、C端带有半胱氨酸的NHR肽T21折叠后主要形成异源二聚体。交换平衡实验显示，异源二聚体比同源二聚体稳定。结论 Q~1、W~3、M~6、T~7是CP621-652的功能氨基酸，CP621-652与T21形成反平行螺旋结构。

目的:探讨a7胆碱能受体(a7nAChR)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的作用及兴奋a7nAChR减轻LPS诱导小鼠急性肺损伤的相关机制。方法:将20～75岁的男性ARDS患者分为吸烟组与非吸烟组，入院后24 h内检测血浆中IL-17、IL-6、TNF-α浓度。24只小鼠随机分为对照组、LPS组、LPS+a7nAChR激动剂组、LPS+a7nAChR抑制剂组，每组各6只。造模前1 h, LPS+a7nAChR激动剂、LPS+a7nHepatitis DAChR抑制剂组小鼠分别予以腹腔注射choline (10 mg/kg)、α-bungarotoxin (1μg/kg)。然后对照组通过气管导管滴注PBS溶液，其余3组小鼠更多气管导管内滴注LPS溶液建立小鼠ARDS模型。检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-17、IL-6、TNF-α水平。取左下肺组织行HE染色、肺损伤评分，右肺测肺组织湿/干比重，左上肺测RORγt蛋白及mRNA水平。结果:男性ARDS患者中，吸烟者外周血IL-17、IL-6、TNF-α水平低于非吸烟者(P<0.05)。a7nAChR激动剂降低小鼠肺损伤评分及肺组织湿/干比重(P<0.05),而a7nAChR抑制剂使其进一步升高(P<0.05)。肺损伤小鼠BALF中IL-17、IL-6、TNF-α水平较对照组升高(P<0.05),a7nAChR兴奋剂可使其降低(P<0.05),而a7nAChR抑制剂可使其进一步升高(P<0.05)。肺损伤小鼠肺组织RORγt蛋白及mRNA水平较对照组升高(P<0.05),a7nAChR兴奋剂可下调其表selleck产品达(P<0.05),而a7nAChR抑制剂可使其表达进一步上调(P<0.05)。结论:抑制a7nAChR可能通过在转录及翻译水平抑制RORγt表达减轻Th17细胞反应性反应，从而抑制炎症反应，减轻肺损伤。

目的 分析复方多粘菌素B软膏在烧伤重症监护室患者的应用情况，为烧伤治疗方案的选择提供参考。方法 选取自2015年1月至2019年12月收住北京积水潭医院烧伤科烧伤重症监护室的243例烧伤患者为研究对象。比较不同烧伤面积患者具体使用复方多粘菌素B的情况，比较使用和未使用复方多粘菌素B患者的肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）]及肾功能指标（尿素、肌酐），比较不同烧伤面积此网站患者使用和未使用复方多粘菌素B软膏的总治疗费用。结果 对243例患者的创面渗出液中的菌群进行分析发现，有172例患者创面有细菌检出，以铜绿假单胞菌检出为最多（27.91%,48/172），其次为鲍曼Hydrophobic fumed silica不动杆菌（14.53%,25/172），排名第三、四的分别是肺炎克雷伯菌（9.88%,17/172）和金黄色葡萄球菌（9.30%,16/172）。复方多粘菌素B软膏对绝大部分检出菌群敏感。单个烧伤患者住院期Tofacitinib间使用复方多粘菌素B软膏的最大量为492支，单次使用最大量为13支。243例患者中，219例使用了复方多粘菌素B软膏，24例患者未使用。使用与未使用复方多粘菌素B软膏患者的ALT、AST、尿素及肌酐水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。烧伤面积≤10%的患者使用复方多粘菌素B软膏组比未使用组的总治疗费用更低，前者日均治疗费用为后者的4%。结论 复方多粘菌素B软膏在烧伤治疗中的安全性高，对烧伤创面感染菌群敏感，可有效控制感染、促进创面恢复，特别是在小面积烧伤患者治疗中的局部使用，可大大降低治疗费用。

高血压是一种常见的慢性疾病,血管紧张素转换酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)抑制剂可以起到一定预防和治疗高血压的作用。化学合成的ACE抑制剂容易对人体产生不良反应,而许多动植物蛋白来源多肽对ACE具有较好的抑制作用,且安全性高,现已成为研究热点。西藏林芝地区野生桃分布广泛,桃仁资源丰富。桃仁脱除油脂后所剩物质中含有50%以上的蛋白质。因此,研究桃仁多肽的ACE抑制活Emricasan性具有重要的现实意义。本课题以西藏野桃仁为原料,通过不同酶解工艺对桃仁中不同蛋白质组分进行酶解,比较所得酶解多肽的ACE抑制活性,并对具有较高ACE抑制活性的多肽进行分离纯化和结构鉴定,同时对其胃肠消化稳定性和产品应用进行研究。主要研究内容和结果如下:(1)脱脂桃仁提取分离获得清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,分别用风味蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶对其酶解,筛选ACE抑制活性最强多肽。结果表明,清蛋白用中性蛋白酶酶解4h时产物(AN4)、球蛋白用碱性蛋白酶酶解6h时产物(BA6)、谷蛋genetic transformation白用中性蛋白酶酶解6h时产物(CN6)的ACE抑制率最高,分别达到45%、58%和60%。AN4、BA6、CN6依次采用超滤和RP-HPLC分离纯化,发现BA6中的<1 kDa组分,且保留时间在14.2 min时组分(K2)对ACE的抑制能力最强,其IC50可达到0.78mg/ml。经过LC-MS鉴定发现,K2的主要成分是由Ala和His构成的二肽Alpelisib分子量(P1)。BIOPEP数据库检索发现P1为已知的ACE抑制肽。(2)AN4、BA6和CN6经过胃肠道消化后的ACE活性变化结果表明:与未消化相比,AN4、BA6和CN6经过模拟胃消化后的ACE抑制率均有显著增加(P<0.05),但经过模拟肠消化后的ACE抑制率却显著降低(P<0.05)。无论是在消化前,还是胃肠消化后,BA6和CN6的ACE抑制率均显著高于AN4(P<0.05),证明BA6和CN6具有更好的消化稳定性。AN4、BA6和CN6消化前后的结构表征表明,ACE抑制活性变化规律与其消化产物的荧光强弱、表面疏水性指数、二级结构含量、巯基和二硫键含量等的结构表征相符。(4)分别考察木糖醇、桃仁多肽、蜂蜜、柠檬酸和果胶等添加量对桃仁多肽口服液口感影响的基础上,采用Design Expert中的Box-Behnken对产品配方进行响应面优化。结果表明:口服液中添加4%的木糖醇,1.66%的桃仁多肽,3.07%的蜂蜜,0.16%的柠檬酸,0.61%的果胶,能获得酸甜适口,香味独特,颜色清亮的产品。同时,研究了不同巴氏杀菌条件对口服液ACE抑制活性的影响,实验证实:温度为85℃时杀菌25min,能保留较好的ACE抑制活性,同时又能杀灭其中的大肠菌群。