MAPK信号通路

目Starch biosynthesis的描述临床分离的热带假丝酵母菌培养不同时间的天冬氨酰蛋白酶活性(蛋白酶活性)、磷脂酶活性和溶血活性, 并分析不同感染部位分离菌的PUN30119采购蛋白酶活性和溶血活性差异。方法将分离自不同感染部位的热带假丝酵母菌鉴定后分别接种在牛血清蛋白培养基、卵黄琼脂培养基和羊血琼脂培养基上, 培养不同时间(24、48和72 h)后检测蛋白酶活性、磷脂酶活性和溶血活性。结果热带假丝酵母菌培养24、48和72 h时均具有蛋白酶活性和溶血活性, 但未表现出磷脂酶活性;热带假丝酵母菌在48和72 h时的蛋白酶selleck合成活性高于其在24 h时的活性, 在72 h范围内, 溶血活性随培养时间延长持续增长;分离自不同感染部位的热带假丝酵母菌的蛋白酶活性(P=0.368)和溶血活性(P=0.985)差异无统计学意义。结论我国热带假丝酵母菌临床分离株培养不同时间具有蛋白酶活性和溶血活性, 但无磷脂酶活性。

为了解浓香型白酒窖底泥和PF-07321332体外窖壁泥细菌群落与理化因子的差异，分析了窖泥的5项理化指标，采用高通量测序技术研究细菌群落结构，并进行相关性分析。结果表明：窖底泥的pH值、过氧化氢酶活性显著高于窖壁泥（P＜0.05），窖底泥的铵态氮含量显著低于窖壁泥（P＜0.05）。窖泥总体的优势菌门是Firmicutes、Bacteroidetes、Synergistetes，窖底泥的优势菌属为Hydrogenispora、LBH589Caproiciproduces、Aminobacterium、Proteiniphilum等，其中Hydrogenispora相对丰度显著高于窖壁泥（P＜0.05），窖壁泥的优势菌属为Caproiciproducens、Lactobacillus、Syntrophaceticus、Aminobacterium、Proteiniphilum、Syntrophaceticus、Petrimonas、Sedimentibacter等，其中Caproiciproducens、Lactobacillus、Syntrophaceticus相对丰度显著高于窖底泥（P＜0.05Human biomonitoring）。窖底泥和窖壁泥的理化指标和细菌群落存在差异，pH值是对窖底泥中细菌群落影响力度最大的理化指标，Hydrogenispora是窖底泥的标志性菌属，窖壁泥中参与酸代谢的酶相对丰度更高。说明窖底和窖壁细菌群落存在空间差异，对白酒发酵具有重要影响。

马里亚纳海沟是世界已知最深的海沟,其寡营养、高压、低温、低氧等极GW4869配制端的深海环境孕育出独特的细菌群落结构及多样性特征。选取寡营养培养基对马里亚纳海沟海水及表层沉积物分别进行液体共培养,并在不同培养阶段取样进行高通量测获悉更多序,分析细菌群落结构组成及其多样性的动态变化,探讨微生物之间可能的互作关系。研究结果表明:液体共培养样品中一共检测到19个门、34个纲、76个目、131个科、227个属的细菌,其中变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为优势菌群,其次为厚壁菌门(Firmicutes);与其他样品impedimetric immunosensor相比,1000米海水样品中细菌群落的多样性最高,并且蓝细菌门(Cyanobacteria)具有更高的相对丰度。共培养样品中细菌丰富度、多样性、群落结构均随培养时间而改变,其中共培养中期样品的细菌多样性较高;表层沉积物样本中,盐单胞菌属(Halomonas)可能由于较强的竞争能力在共培养后期占据优势地位。基因功能预测与代谢通路富集结果显示,随着共培养时间的增加,微生物生长相关的代谢通路丰度明显下降,而与互作相关的代谢通路丰度明显增加。共培养样品检测到的细菌多样性远高于单独分离培养的多样性,仅有少量菌属为单独分离培养与共培养样品均检测到的共有属。综上所述,马里亚纳海沟细菌群落中存在竞争、互利共生的相互作用,共培养法有利于揭示细菌间的互作关系。本研究为深渊及深海等极端环境下微生物生态系统组成及维持奠定了理论基础,也为进一步研究极端微生物的生存策略提供了科学指导。

【背景】栽培基质的利用是广叶绣球菌(Sparassis latifolia)栽培中重要的生理过程，但栽培过程中基质代谢物的变化尚不清楚。【目的】通过不同生长阶段栽培基质中差异代谢物分析挖掘关键代谢物，为广叶绣球菌基质利用机理研究提供理论参考。【方法】利用UHPLC-MS/MS技术分析广叶绣球菌菌丝(Myc)、原基(Pri)和子实体(FB)生长阶段栽培基质中代谢产物的变化，通过不同数据库进行代谢物注释并进行KEGG通路富集分析。利用LC-MS/https://www.selleck.cn/products/jq1.htmlMS技术检测不同发育阶段绣球菌中植物类激素含量。【Potentailly inappropriate medications结果】3个不同栽培阶段基质中共鉴定出代谢产物1 360个。不同比较组(Pri vs Myc，FB vs Myc和FB vs Pri)间共有的差异代谢产物179个，含量最高的5NSC 1259730个代谢物主要包括氨基酸、脂质、吡喃酸、吡喃酮和植物类激素等物质。其中氨基酸含量在Myc、Pri和FB阶段基质中逐渐降低，而吡喃酸和吡喃酮类化合物含量逐渐升高。植物类激素中的赤霉素在Pri和FB阶段基质中含量较高，茉莉酸在Myc阶段基质中含量较高。对不同发育阶段绣球菌植物类激素进行检测，发现赤霉素GA7仅在原基中检测到，12-氧代植物二烯酸在子实体中含量显著升高。不同比较组所有的差异代谢物KEGG分析显示嘌呤代谢、鞘脂信号通路和甘油磷脂代谢等通路显著富集。【结论】氨基酸是Myc阶段基质中重要的代谢物，吡喃酸、吡喃酮和植物类激素可能与Pri和FB阶段基质利用过程中的生理生化调控有关。

目的探讨胰腺癌术后患者的家庭肠内营Necrotizing autoimmune myopathy养状况,分析营养情况与患者生活质量和体力状况的关系。方法对130例胰腺癌术后3个月内患者采用营养风险筛查量表(NRS2002)进行营养评估,同时进行家庭肠内营养状况及生活质量、ZPS体力状况调查。结果 55.38%患者有营养风险;家庭肠内营养以口服为主(63.08%),营养制剂主要为家庭匀浆膳(63.0selleck MLN82378%),胃肠道和带管并发症发生率分别为41.54%、15.38%;不同家庭肠内营养方式及有无并发症患者NRS2002评分比较,差异有统计学意义(均P<0.01);不同营养状Dibutyryl-cAMP纯度况患者生活质量的功能领域、气促及ZPS得分差异有统计学意义(均P<0.01)。结论胰腺癌术后患者家庭肠内营养以口服家庭匀浆膳为主,并发症发生率较高;营养状态影响患者生活质量和体力状况。需加强对患者家庭肠内营养的评估,及早发现营养风险并给予有效干预,以改善患者营养状况,提高其生活质量及体力。

目的 探讨周围性肺癌（PLC）与肺炎性假瘤的CT征象对比及鉴别。方法 选取2017年1月至2022年1月收治的21例PLC及35例肺炎性假瘤患者，均经手术病理确诊，回顾性分析其临床资料，比较两者CT征象差异。结果 肺炎性假瘤与PLMEK抑制剂C的空洞、钙化、空泡征比例相比无显著差异（P>0.05），肺Distal tibiofibular kinematics炎性假瘤患者分叶征、毛刺征、血管集束征、胸膜CHIR-99021核磁凹陷征比例明显低于PLC，切线征、尖角征明显高于PLC(P<0.05);PLC组增强扫描后肺动脉期CT净增强值较对照组低，主动脉期、延迟期60 s、90 s、120 s CT净增强值较对照组高（P<0.05）;PLC/CT可见小片块状影，呈块状或球型病灶，密度均匀，增强扫描可见动脉期强化不明显，主动脉期可见明显强化；肺炎性假瘤多为单发结节影，边界清晰，密度均匀或不均匀，32例（91.43%）可见病灶内点状钙化，病灶周边表现为斑片或结节影。结论 分叶征、毛刺征、切线征、尖角征、血管集束征、胸膜凹陷征等为鉴别肺炎性假瘤及PLC的重要CT征象，CT对两种疾病具有一定鉴别价值，值得应用。

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)表达水平及临床意义。方法 选取我院收治并确诊的114例NSCLC患者作为观察组，另外选取同时期来我院进行体检的40例健康人作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测两组血清sST2、suPAR水平；采用Spearman相关分析探讨血清sST2、suPAR与分化程度、病灶直径、临床分期、淋巴结转移的相关性；采用ROC曲线评价血清sST2、suPAR及两者联合诊断NSCLC的价值。结果 观察组血清sST2、suPAR水平为(6.47±0.79)ng/mL、(10.65±2.71)ng/mL均高于对照组(2.53±0.41)ng/mL、(4.34±2.03)ng/mL(P均<0.01)。低分化患者血清sST2、suPAR水平高于中高分化患者，病灶直径>3.0cm患者血清sST2、suPAR水平高于病灶直径≤3.0cm患者，Ⅲ/Ⅳ期患者血清sST2、suPAR水平高于Ⅰ/Ⅱ期患者，淋巴结转移的患者血清sST2、suPAR水selleck NMR平高于未发生淋巴结转移患者(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示，血清sST2、suPAR与分化程度呈负相关，与病灶直径、点击此处临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示，血清sST2、suPAR诊断NSCLC的AUC(95%CI)分别为0.759(0.708～0.810)、0.814(0.763～0.865),截点值为4.53ng/mL、7.51ng/mL,特异度分别为76.59%、78.47%,敏感度分别为84.67%、82.36%,二者联合检测的Amedical birth registryUC(95%CI)为0.912(0.861～0.963),特异度为85.79%,敏感度为81.34%。结论 血清sST2、suPAR水平在NSCLC患者中均升高，并且与NSCLC的发生、发展有关，能够作为早期诊断NSCLC的实验室指标，有临床推广的价值。

第一部分胰蛋白酶原基因突变在小鼠慢性胰腺炎中的致病作用研究目的:胰蛋白酶原基因(PRSS1)的突变可导致人类遗传性慢性胰腺炎。然而,目前还不清楚PRSS1的突变模式如何促进疾病的发展。因此,我们研究了人源的PRSS1突变在小鼠体内表达的效果。研究方法:在全长型胰腺弹性蛋白酶基因(Elastase)启动子的控制下,在胰腺腺泡细胞中特异性表达了不含突变的人源PRSS1基因和编码R122H突变的PRSS1(PRSS1~(R122H)),BAC小鼠作为对照。予小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)诱导慢性胰腺炎,并进一步建立喂养酒精或高脂饮食诱导的慢性胰腺炎小鼠模型。收集胰腺组织,进行组织学、western blot、q RT-PCR和免疫组化等检测。测定胰腺匀浆中胰蛋白酶(Trypsin)活性和糜蛋白酶C(CTRC)活性。研究结果:表达PRSS1或PRSS1~(R122H)突变的转基因小鼠的胰腺仅出现局灶性炎症改变,在PRSS1~(R122H)小鼠中更为突出。与对照组相比,PRSS1或PRSS1~(R122H)小鼠胰腺中NRF2水平升高,CTRC水平降低(适应性保护反应),胰酶活性没有差异,并不会导致自发性慢性胰腺炎的发生。与PRSS1小鼠或对照小鼠相比,注射LPS后会加剧PRSS1~(R122H)小鼠的胰腺炎症。在酒精喂养或高脂饮食后,表达PRSS1~(R122H)的小鼠比PRSS1小鼠或对照小鼠发生更严重的慢性胰腺炎,表现为更多的DNA损伤、腺泡细胞凋亡、胶原沉积、胰蛋白酶活性和炎症细胞浸润的增加。说明PRSS1~(R122H)结合环境因素的损伤会打破保护性反应造成的稳态,引起严重的慢性胰腺炎。研究结论:PRSS1~(R122H)的转基因小鼠会促进环境损伤因素诱发的炎症反应,增加慢性胰腺炎的严重程度。这些小鼠可作为人类遗传性胰腺炎的模型,并可用于研究LPS、酒精或高脂饮食诱导的慢性胰腺炎的发生机制。第二部分PRSS1~(R122H)突变对环境损伤因素合并Kras突变所致慢性胰腺炎的作用研究目的:明确在环境损伤因素作用下,胰蛋白酶原突变导致的慢性炎症和Kras内源性突变在小鼠慢性胰腺炎中是否存在相互作用。研究方法:利用BAC Elastase-Cre ERT工具鼠与携带Loxp-STOP-Loxp调控表达内源性Kras G12D/+突变的小鼠(LSL-Kras G12D/+,LSL)杂交,得到的BAC Ela Cre ERT;KrasG12D/+双重转基因小鼠(LSL/BAC),可以由外源性的Tamoxifen给药诱导Cre重组酶活性及胰腺腺泡特异的Loxp-STOP-Loxp剪切,即可在所有的胰腺腺泡细胞特异性表达内源性Kras G12D突变。再将LSL/BAC小鼠分别与第一部分中的在胰腺腺泡细胞中特异性表达人源PRSS1基因(PRSS1)和编码PRSS1~(R122H)突变(R122H)的转基因鼠杂交,获得PRSS1/LSL-Kras G12D/BAC(P/L/B)和PRSS1~(R122H)/LSL-Krimmune phenotypeas G12D/BAC(R/L/B)的三重转基因小鼠,可在Tamoxifen诱导下分别得到人源PRSS1和Kras G12D单突变,以及PRSS1~(R122H)和Kras G12D双突变在小鼠胰腺腺泡细胞的特异性表达,进行genotyping确认基因型。分别给予高脂和酒精饮食喂养28天,处死后收取胰腺进行病理学评估、天狼星红染色、纤维化指标检测、炎症细胞标志物免疫组化染色、TUNEL凋亡检测和cleaved caspase 3免疫荧光检测、胰蛋白酶活性和CTRC活性检测。研究结果:经高脂或酒精饮食喂养后,与P/L/B组小鼠相比,R/L/B组小鼠胰腺组织H&E染色结果显示更严重的慢性胰腺炎,表现为更多的腺泡细胞萎缩、炎症细胞浸润和纤维化形成;天狼星红染色可见R/L/B小鼠比P/L/B小鼠胰腺存在更多的胶原沉积,纤维化标志物Collagen-1和胰腺星状细胞活化标志物α-SMA的m RNA和蛋白表达水平R/L/B组均显著高于P/L/B组;R/L/B组小鼠胰腺的炎症细胞标志物(F4/80、CD4Rapamycin5、MPO)免疫组化阳性染色面积显著多于P/L/B组;R/L/B组小鼠的TUNEL凋亡信号水平和cleaved caspase 3免疫荧光阳性细胞明显多于P/L/B组。R/L/B组小鼠胰蛋白酶活性明显高于P/L/B组小鼠,但R/L/B组与R/B组小鼠间胰酶活性无显著差异,存在基因突变的小鼠胰腺CTRC的m RNA和蛋白表达量均低于BAC对照组,而双突变的R/L/B组和仅存在R122H突变的R/B组间小鼠CTRC表达无显著差异。研究结论:PRSS1~(R122H)突变可加重环境损伤因素合并Kras G12D突变所致的慢性胰腺炎,且PRSS1~(R122H)突变为始动因素,机制是双突变可增加胰蛋白酶活性,造成腺泡细胞凋亡,炎症加重。第三部分PRSS1~(R122H)突变合并Kras突变在慢性胰腺炎-癌转化中的协同作用及机制研究研究目的:探讨PRSS1~(R122H)和Kras G12D双突变在慢性胰腺炎-癌转化中是否存在协同作用,并找寻其中可能的机制。研究方法:以BAC对照小鼠、PRSS1/LSL-Kras G12D/BAC(P/L/B)和PRSS1~(R122H)/LSL-KrasG12D/BAC(R/L/B)三重转基因小鼠为模型,观察致癌表型差异及相关通路改变,并通过体内实验和体外实验两个层面进行验证。三组小鼠经高脂和酒精饮食喂养28天后处死收取胰腺组织,进行H&E染色,观察ADM和Pan IN病理改变,并对面积进行统计,通过免疫组化染色和免疫荧光检测ADM和Pan IN的常用标志物。采用琼脂糖珠“pulldown”实验检测胰腺Kras活性,western blot检测下游ERK、AKT/m TOR通路蛋白表达,q RT-PCR、western blot和免疫组化染色检测ATF3及NF-κB的表达。BAC、P/L/B和R/L/B三组小鼠诱导基因型表达后分离提取的原代腺泡细胞进行3D培养,加入酒精刺激,观察腺泡细胞是否出现导管样化生。研究结果:经高脂和酒精饮食喂养后,R/L/B双突变小鼠发生更严重的ADM和Pan IN,Tezacaftor体内实验剂量免疫组化染色和免疫荧光检测ADM的标志物Amylase、MIST 1和CK19的改变,免疫组化染色检测Muc5、Ki-67及阿利新蓝染色明确Pan IN范围,结果均是R/L/B组小鼠的胰腺更明显。Kras活性检测发现R/L/B组小鼠胰腺中活化的Kras蛋白含量高于P/L/B组,且Kras下游p ERK蛋白表达水平以及ATF3和NF-κB的表达也更高。R/L/B组小鼠3D培养后的腺泡细胞经酒精刺激后导管结构形成更多。研究结论:PRSS1~(R122H)突变合并环境因素损伤可使腺泡细胞发生更严重的内质网应激,ATF3表达显著上调,进而活化NF-κB通路,正反馈持续激活Kras活性及下游ERK通路,导致ADM和Pan IN的发生。总结上述研究,可得出结论如下:胰蛋白酶原PRSS1~(R122H)突变能加重环境因素诱导的慢性胰腺炎,腺泡细胞发生更严重的内质网应激,ATF3表达显著上调,进而活化NF-κB通路,对存在Kras G12D突变的小鼠形成“二次打击”,导致Kras持续活化及下游ERK通路的激活,诱导腺泡细胞凋亡,发生ADM及Pan IN。即PRSS1~(R122H)可加重环境因素诱导Kras G12D突变介导的慢性胰腺炎-癌转化。本研究首次将基因突变与环境因素在慢性胰腺炎-癌转化中的相互作用联系到一起并在模式动物中得以验证,有助于深入认识慢性胰腺炎-癌转化的发生机制,为双突变的慢性胰腺炎患者的临床管理提供参考,为更好地预防和治疗这一病理进程提供潜在靶标。

旨在探究苦参苍术颗粒是否通过调节肝组织胆固醇代谢，改善致病性大肠杆菌诱导的肉鸡肝组织胆固醇合成异常。将40只21日龄白羽肉鸡随机分为空白对照组、模型对照组、苦参苍术低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组8只。模型对照组和苦参苍术组分别胸部肌肉注射0.7 mL致病性大肠杆菌菌液(8.37algal bioengineering×10~8 CFU·mL~(-1)),苦参苍术组在接种菌液24 h后，在饮水中分别添加不同剂量的苦参苍术颗粒(低剂量组：3.6 g·L~(-1),中剂量组：5.5 g·L~(-1),高剂量组：7.3 g·L~(-1)),自由饮水，连用7 d。试验结束，所有试验肉鸡处死，收集血液，采集组织样品，称体重和各器官重；采用石蜡切片技术观察肝组织形态变化；检测血清和肝组织中总胆固醇(total cholesterol, TCH)、甘油三酯(hepatic triglyceride, TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein-cholesterol, HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)含量的变化；采用RT-qPCR检测肝组织中胆固醇代谢相关基因的变化。结果显示，与空白对照组相比，模型对照组肉鸡体重显著降低，肝脏指数和血清TG含量显著增加(P<0.05),肝小叶中央静脉周围和肝血窦内有炎性细胞浸润，肝细胞排列紊乱，同时肝组织中TG含量以及SREBP裂解激活蛋白(SREBP cleavage activating protein,SCAP) mRNA相对表达量也显著降低(P<0.05);和模型对照组相比，低剂量组显著增加了肉鸡体重和肝中LDL-C含量(P<0.05),降低了肝脏指数和血清中TG含量(P<0.05),且肝组织形态结构得到改善；和模型对照组相比，中剂量组显著升高了肝HDL-C、LDL-C含量及LDL-C/HDL-C的比值(P<0.05),3羟基3甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3Erdafitinib体外-met点击此处hylglutaryl coenzyme A reductase,HMGCR)、调节元件结合蛋白2(sterol regulator element-binding protein-2,SREBP2)、SCAP mRNA相对表达量也显著提高(P<0.05)。和模型对照组相比，高剂量组显著降低了血清中TG含量(P<0.05),显著增加肝中LDL-C含量(P<0.05),同时显著增加了LDL-C/HDL-C比值(P<0.05)。综上所述，苦参苍术颗粒可通过调节肉鸡肝组织胆固醇代谢，缓解大肠杆菌感染所致的肝组织胆固醇合成异常。

目的 探究磁共振弥散加权成像(DWI-MRI)联合电子计算机断层(CT)增强扫描评估中央型肺癌患者放化疗效果的临床价值。方法 选取76例接受放化疗治疗的中央型肺癌患者作为研究对象，治疗前后分别进行DWI-MRI、CT增强扫描，统计患者定量参数表观扩散系数(ADC)、不同部位中央肺癌情况，评估DWI-MRI、CT增强扫描对中央型肺癌患者放化疗效果的临床价值。结果 放化疗前，CT增强扫描、DWI-MRI及二者联合检查的ADC差异无统计学意义(F=1.759,P=0.242);放化疗2、4、8周后，3种检查方法的ADC均高于放化疗前，CT增强扫描的ADC最低，差异均有统计学意义(P<0.05)。与DWI-MRI、CT增强扫描相比，二者联合检查肺门区肿块、纵膈淋巴结肿大、支气管腔内的检出率上升，差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线表明，联合检查评估mesoporous bioactive glass中央型肺癌放化疗效果的准确度(89.75%)高于CT增强扫描(82.35%)和DWI-MRI(79.36%)单项诊断，ABT-263差异有PF-07321332纯度统计学意义(P<0.05)。结论 DWI-MRI联合CT增强扫描对中央型肺癌患者放化疗效果的评估价值较高，可为临床早期预防、治疗中央型肺癌提供资料依据。