MAPK信号通路

基于网络药理学和细胞实验探讨龙葵治疗乳腺癌的作用机制。利用TCMSP数据库、Swiss-Target-Prediction和文献挖掘等方法收集龙葵的活性成分7种，通过GeneCards数据库收集与乳腺癌相关靶基因110个，运用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-活性成分-靶点-疾病”网络，将潜在靶点导入STRING 11.5数据库中获取PPI网络，使用DAVID数据库对潜在靶点进行selleck抑制剂GO及KEGG富集分析。GO功能富集分析发现694个结果。KEGG通路富集分析发现128个结果（P < 0.05），涉及癌症、PI3K/Akt、MAPK等相关的信号通路。运用AutoDock-vina 1.1.2软件对龙葵中的7种关键活性成分，梣皮树脂醇、β-胡萝卜素、谷甾醇、薯蓣皂苷元、澳洲茄Symbiotic organisms search algorithm碱、胆固醇及槲皮素与潜在靶点AKT1、ESR1、EGFR、SRC、MAPK1进行分子对接，结果显示预测的关键成分薯蓣皂苷元与核心靶点AKT1和EGFR等具有较好的结合性。细胞实验结果表明，不同浓度的薯蓣皂苷元可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖并促进细胞凋亡，薯蓣皂苷元可调控EGFVX-661试剂R、AKT1以及p-AKT1蛋白的表达，同时薯蓣皂苷元可下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达、上调促凋亡蛋白Bax表达。综上结果表明，龙葵抗乳腺癌的潜在作用机制可能与调控MDA-MB-231细胞增殖及凋亡等过程相关，且通过两个关键靶基因AKT1和EGFR发挥作用。

目的 初步探讨天然小分子HEP-14对黑色素瘤SK-Mel-103细胞的抑制作用及相关机制。方法 用不同浓度的HEP-14(2.5～40μmol/L)处理黑色素瘤SK-Mel-103细胞后，CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞的存活率和克隆的形成，流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡，Transwell实验检测细胞迁移能力，RT-qPCR检测CDGadolinium-based contrast medium271和STAT3基因水平的表达，Western blot检测CD271、STAT3、p-STAT3蛋白水平的表达，细胞免疫荧光检测进一步证实CD271在细胞内的表达。结果 与对照组比较，天然小分子HEP-14能有效抑制SK-Mel-103细胞的生长和克隆的形成(P<0.05),诱导细获悉更多胞G_2/M期阻滞(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05)和抑制细胞的迁移。HEP-14显著抑制SK-Mel-103、SK-Mel-147和SK-Mel-28细胞STAT3的磷酸化(P<0.05),下调CD271的表达(P<0.05)。结论 天然小分子HEP-14能有效抑制黑色素瘤细胞生长并诱导其凋亡；可能通过抑此网站制STAT3的激活下调CD271的表达，从而抑制黑色素瘤细胞的迁移。

目的 探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）不稳定型心绞痛患者经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后并发恶性心律失常的危险因素，并据此建立风险预测列线图模型。方法 回顾性分析2018年1月至2021年12月因冠心病不稳定型心绞痛于郑州市第七人民医院心内三病区接受PCI的486例患者Staurosporine使用方法的临床资料，根据术后6个月是否并发恶性心律失常将患者分为并发组（63例）和未并发组（423例）。采用多因素LoHepatic resectiongistic回归分析冠心病不稳定型心绞痛PCI术后并发恶性心律失常的危险因素，建立风险预测列线图模型。绘制受试者工作特征（ROC）曲线以评估列线图模型的预测效能，并绘制校准曲线，采用Bootstrap自抽样法内部验证预测列线图模型的区分度。结果 并发组与未并发组比较，患者年龄、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、吸烟史、术前心肌梗死溶栓治疗（TIMI）血流分级0级、冠状动脉（冠脉）多支病变、心功能Killip分级Ⅲ～Ⅳ级、并发糖尿病、低血钾、PCI术后无/慢复流占比均高于未并发组（P<0.05），发病至PCI时间≥6 h占比大于未并发组（P<0.05）；两组患者的体质指数（BMI）、性别和病程、并发高血压、并发慢性阻塞性肺疾病占比比较均无统计学意义差异（P>0.05）；多因素Logistic回归分析结果显示年龄、吸烟史、发病至PCI时间≥6 h、术前TIMI血流分级0级、冠脉多支病变、心功能Killip分级Ⅲ～Ⅳ级、并发糖尿病、hs-CRP、低血钾、PCI术后无/慢复流均是冠心病不稳定型心绞痛PCI术后并发恶性心律失常的危险因素（P<0.05）；将上述危险因素作为预测指标，构建冠心病不稳定型心绞痛PCI术后并发恶性心律失常的风险预测列线图模型，ROC曲线分析结果显示，列线图预测冠心病不稳定型心绞痛并发恶性心律失常的曲线下面积（AUC）为0GSKJ4研究购买.794(95%CI:0.755～0.829,P<0.05)，灵敏度为73.02%，特异度为86.05%;Bootstrap自抽样法内部检验的一致性指数为0.796，该列线图模型区分度良好，校准曲线与标准曲线贴合较好。结论 年龄、吸烟史、发病至PCI时间≥6 h、术前TIMI血流分级0级、冠脉多支病变、Killip分级Ⅲ～Ⅳ级、并发糖尿病、hs-CRP、低血钾、PCI术后无/慢复流均是冠心病不稳定型心绞痛PCI术后并发恶性心律失常的危险因素，据此构建的列线图模型对指导临床筛选高风险患者以预防患者术后恶性心律失常的发生具有重要意义。

背景和目的:ADH5(alcohol dehydrogenase 5)是乙醇脱氢酶家族的成员之一,它的主要功能是降解细胞内的S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)和S-羟甲基谷胱甘肽(S-hydroxymethylglutathione,HMGSH)。通过代谢 GSNO-活性一氧化氮和谷胱甘肽形成的化合物,ADH5可以间接调控蛋白质的亚硝化修饰,所以ADH5 又名亚硝基谷胱甘肽还原酶(S-nitrosoglutathione reductase,GSNOR)。通过代谢HMGSH-甲醛和谷胱甘肽形成的加合物,ADH5可以降解甲醛以减少其造成的DNA损伤。ADH5在细胞内具有促进线粒体自噬和抗氧化的功能。研究发现缺失ADH5的小鼠更易受致癌物的诱导发生肝癌,展示了 ADH5的抗肿瘤功能,而在非小细胞肺癌中ADH5发挥何种功能尚未明确。因此,本课题旨在研究ADH5在非小细胞肺癌中的具体功能及可能的机制。方法:1、通过TCGA数据库、GEPIA数据库以及Kaplan-Meier分析观察ADH5在非小细胞肺癌中的表达情况以及和预后的关系,收取非小细胞肺癌临床组织样品、实验室培养肺癌细胞系,对组织样品和细胞样品进行RNA和蛋白提取,进行qRT-PCR和Western blot实验从两个水平检测ADH5在非小细胞肺癌中的表达水平。2、使用ADH5过表达质粒和shRNA构建非小细胞肺癌细胞系H358及PC9过表达和敲低ADH5的稳定细胞系,进行CCK8、克隆形成及Transwell实验,观察ADH5的过表达和敲低对非小细胞肺癌的生长、转移及侵袭的影响。通过裸鼠成瘤实验检测过表达ADH5对皮下肿瘤的大小和重量的影响,对肿瘤组织进行免疫组化染色检测肿瘤增殖指标Ki67的表达情况。3、通过GEPIA数据库分析ADH5和肿瘤可塑性调控蛋白SOX2、SOX9的关系。通过Western blot实验检测稳定细胞系中SOX9的蛋白水平。使用TGF-β1处理ADH5过表达细胞系,观察TGF-β1对过表达ADH5细胞的形态的影响,Western blot实验检测过表达及敲低细胞系中Smad2/3、EMT和AKT信号通路。对过表达及敲低ADH5的细胞系使用自噬抑制剂CQ后进行Western blot实验和免疫荧光实验检测LC3和P62的变化,通过qRT-PCR实验检测线粒体动力学相关蛋白的变化。结果:1、数据库显示ADH5在非小细胞肺癌中表达下降与预后不良相关。qRT-PCR与Western blot实验显示,与正常肺上皮细胞BEAS-2B相比,非小细胞肺癌细胞H1299的ADH5mRNA和蛋白水平增加,H1975的ADH5mRNA水平增加,A549、HCC827、H358、PC9、H460 的 ADH5mRNA 水平下降,A549、HCC827、H358、PC9、H1975、H460的ADH5蛋白水平下降;与癌旁组织相比,非小细胞肺癌组织中ADH5的mRNA和蛋白水平均下降。2、qRT-PCR和Western blot实验结果显示,与Vector组相比,过表达组ADH5的RNA及蛋白水平明显升高,与shControl组相比,敲低组ADH5的RNA及蛋白水平下降。CCKSTM2457 MW8及克隆形成实验结果显示,与Vector组相比,过表达组细胞生长速度下降,细胞克隆团数目减少;与shControl组相比,敲低组细胞生长速度增加,细胞克隆团数目增加。Transwell实验发现,与Vector组相比,过表达组迁移及侵袭能力增加;与shPF-02341066Control组相比,敲低组迁移及侵袭能力下降。裸鼠成瘤实验结果发现,与Vector组相比,过表达组的皮下肿瘤体积和重量均下降,对皮下肿瘤进行免疫组化实验,结果显示,与Vector组相比过表达组的肿瘤Ki67表达水平下降。3、GEPIA数据库显示ADH5与SOX2无明显相关,与SOX9正相关。Western blot实验发现过表达组中SOX9表达增加而敲低组中SOX9表达下降。使用TGF-β1处理ADH5过表达细胞系48h,发现Vector组细胞形态明显变化而过表达组不受影响;Western blot结果显示与Vector组相比,过表达组细胞的磷酸化Smad2/3水平明显增加,与shControl组相比,敲低组细胞的磷酸化Smad2/3水平明显下降;与Vector组相比过表达组的N-Cadherin、Snail以及磷酸化AKT的蛋白水平增加而E-Cadherin表达减少,与shControl组相比,敲低组细胞的N-Cadherin、Snail以及磷酸化AKT的蛋白水平下降而E-Cadherin表达增加。使用CQ后,与Vector组相比,过表达组的LC3 Ⅱ/Ⅰ和P62的水平增加,与shControl组相比,敲低组的LC3 Ⅱ/Ⅰ和P62的水平下降;免疫荧光实验显示,使用CQ后,与Vector组相比,过表达组的LC3的水平增加;qRT-PCR实验发现线粒动力学相关蛋白DRP1在ADH5过表达组中RNA水平增加,OPA1在敲低组中RNA水平增加。结论:1periodontal infection、ADH5在非小细胞肺癌中的蛋白水平和RNA水平均下降。2、ADH5在非小细胞肺癌中发挥抑制增殖和促进迁移的作用,与肿瘤细胞的可塑性相关。3、ADH5可能通过Smad2/3信号通路和自噬介导非小细胞肺癌的可塑性。

目的 研究补肾调泡周期疗法组方（逍遥散、三子汤）对大鼠原代卵巢颗粒细胞增殖、分泌功能及抗苗勒氏管激素（AMH）、抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体（AMHR2）、Smad同源物4(Smad4)表达的影响。方法 6～8周龄SD雌鼠20只随机分为空白组、阳性药物组（7.8 IU·kg~(-1)FSH）、逍遥散组（12 g·kg~(-1)）、三子汤组（16 g·kg~(-1)）各5只，连续给药4 d后采血，制备含药血清。选取21～25日龄SD雌鼠提取大鼠卵巢颗粒细胞，贴壁生长至70%，用免疫荧光法进行大鼠卵巢颗粒细胞纯度鉴定。培养成功的大鼠原代卵巢颗粒细胞分别用各组含药血清培养液培养，CCK-8法筛选各组含药血清最佳干预浓度；各组采用最佳干预浓度培养细胞，CCK-8法检测各组颗粒细胞24、48、72、96 h增殖情况；ELISA法检测各组颗粒细胞培养液上清AMH、雌二醇（E_2）及孕酮（P）浓度；Western Bolt法检测各组颗粒细胞AMH、AMHR2和Smad4蛋白表达；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组颗粒细胞中AMH、AMHR2和Smad4 mRNA表达水平。结果 与空白组比较，各组含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖均有促进作用（P<0.05,P<0.01）；与阳性药物组比较，三子汤组促进颗粒细胞增殖作用最佳（P<0.01），逍遥散次之（P<0.05）；各组颗粒细胞增殖与含药血清干预时间呈正相关，干预48 h启动细胞增殖活性，96 h细胞增殖达到高峰。与空白组CP-456773体内比较各组颗粒细胞培养液上清AMH、E_2及P的浓度均明显升高（P<0.05,P<0.01）；与阳性药物组比较，逍遥散组促P分泌效果更佳（P<0.05）。与空白组比较各组卵巢颗粒细胞AMH、AMHR2、Smad4蛋白表达水平明显升高（P<0确认细节.05,P<0.01），阳性药物组AMHR2蛋白表达较逍遥散、三子汤组升高明显（P<0.01）。与空白组比较各组卵巢颗粒细胞AMH、AMHR2、Smad4 mRNA表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01），其中三子汤组AMH、AMHR2 mRNA表达明显优于阳性药物组与逍遥散组（P<0.01）。结论 补肾调泡周期疗法组方genetic absence epilepsy逍遥散、三子汤能促进大鼠原代卵巢颗粒细胞增殖并与干预时间呈正相关性，促进颗粒细胞分泌甾体激素和AMH，并可能通过上调AMH、AMHR2、Smad4蛋白及mRNA表达，促进卵泡发育和成熟，并以此改善卵巢生殖和内分泌功能。

[目的]对比集采与原研氯吡格雷在治疗冠心病PCI术后患者中的临床有效性、安全性和经济性,为进一步在临床上全面推广集采氯吡格雷提供可靠科学依据。[方法]选取2019年12月至2020年12月在昆明医科大学第一附属医院住院行PCI手术治疗的80例冠心病患者作为研究对象,研究对象在服用氯吡格雷前,通过CYP2C19基因检测技术测得基因表型,将研究对象分为快代谢型(CYP2C19*1*1)、中代谢型(CYP2C19*1*2、CYP2C19*1*3)、慢代谢型(CYP2C19*2及CYP2C19*3)三个代谢亚组,三个亚组中研究对象的例数及所占比例分别为34(42.5%)、36(45.0%)、10(12.5%)。在每个代谢亚组内再将研究对象随机等分为集采组及原研组,其中快代谢型集采组及原研组各17例、中代谢型集采组及原研组各18例、慢代谢型集采组及原研组各5例。集采组(N=40)采用集采仿制的氯吡格雷(商品名:帅信,国药准字H20123116)口服治疗,原研组(N=40)采用进口原研的氯吡格雷(商品名:波立维,国药准字J20080090)口服治疗。两组研究对象在PCI术后常规应用阿司匹林(1Core functional microbiotas00mg,QD)治疗的基础上,均服用等强化双倍剂量的氯吡格雷(75mg,BID),1个月后调整为一般维持剂量(75mg,QD)且连续服用至少1年。应用血栓弹力图仪检测两组研究对象在PCI术后口服氯吡格雷强化剂量第5天及维持剂量第5天的血小板药物通道抑制率(ADP抑制率)及残余血小板功能(MA-ADP)。1年后对研究对象进行随访,并对研究对象的运动负荷试验改善情况、支架内血栓或再狭窄、心肌缺血、心血管不良事件、药物不良反应及药品经济学效应进行对比分析。[结果]1.两组研究对象临床基线资料对比:集采组和原研组的性别、年龄、血小板、ALT、总胆固醇、甘油三酯、HDL、LDL、UA、CR、PT、APTT、INR、收缩压、舒张压、心率、BMI、空腹血糖等基本更多临床资料无统计学差异(P>0.05)。CYP2C19基因多态性分型及冠心病类型无统计学差异(P>0.05)。两组研究对象PCI手术情况,包括病变血管类型、病变血管位置、手术复杂程度、球囊扩张、支架数量、支架直径、支架长度、支架成功开通病变血管、术后TIMI血流等方面比较均无统计学差异(P>0.05)。阿司匹林、他汀类药物、ACEI/ARB类药物、β受体阻滞剂、利尿剂、CCB类药物等基线用药无统计学差异(P>0.05)。2.两组口服强化剂量的氯吡格雷(75mg,BID)第5天及1个月后改为维持剂量(75mg,QD)第5天ADP抑制率的对比:集采组和原研组在口服强化剂量第5天ADP抑制率比较无统计学差异(62.61±10.165 VS 64.80±6.694,P>0.05);1 个月后改为维持剂量第 5 天 ADP 抑制率均较前升高,组内前后比较均有统计学差异(t=-20.926 VS t=-20.254,P<0.05);维持剂量第5天与强化剂量第5天的ADP抑制率升高幅度比较无统计学差异(P>0.05)。两组药品的ADP抑制效果在两次不同时间点均无统计学差异(Fisher=1.723 VS Fisher=1.708,P>0.05)。3.两组口服强化剂量的氯吡格雷(75mg,BID)第5天及1个月后改为维持剂量(75mg,QD)第5天MA-ADP比较:集采组和原研组在口服强化剂量第5天MA-ADP 比较无统计学差异(40.87±4.960 VS 39.78±3.722,P>0.05);1个月后改为维持剂量第5天两组MA-ADP同样无统计学差异(38.33±4.930VS 38.70±3.444,P>0.05),组内前后比较均有统计学差异(t=6.561 VSt=4.157,P<0.05);两组MA-ADP在两次不同时间点是否落在正常治疗窗内均无统计学差异selleck HPLC(Fisher=1.870 VS Fisher=2.855,P>0.05)。4.三个不同 CYP2C19 代谢型亚组ADP抑制率及MA-ADP的对比:快代谢型亚组中,集采组和原研组在两次不同时间点,ADP 抑制率(t=0.391 VSt=-0.455)、ADP 抑制效果(χ2=0.486 VSχ2=0.234)、MA-ADP(t=0.015 VSt=-1.668)、MA-ADP 时间窗(Fisher=1.030 VS Fisher=0.366)四组指标上均无统计学差异(P>0.05)。各自组内ADP抑制率前后对比(t=-18.310 VSt=-11.949)均具有统计学意义(P<0.05)。在中代谢型亚组中,集采组和原研组在两次不同时间点,ADP抑制率(t=-0.953 VS t=-1.529)、ADP抑制效果(χ2=1.125 VS χ2=0.114)、MA-ADP(t=1.191 VS t=0.178)、MA-ADP 时间窗(Fisher=1.029 VS Fisher=2.000)四组指标上均无统计学差异(P>0.05)。两组各自组内ADP抑制率前后对比(t=-15.280 VS t=-13.728)均具有统计学意义(P<0.05)。在慢代谢型亚组中,集采组和原研组在两次不同时间点,ADP抑制效果(Fisher=2.500 VS Fisher=4.452)、MA-ADP(t=1.075 VSt=1.317)、MA-ADP 时间窗(Fisher=2.500)三组指标上均无统计学差异(P>0.05),但在两次ADP抑制率(t=-3.156 VS t=-2.513)、各自ADP抑制率前后对比(t=-3.707 VS t=-8.407)具有统计学意义(P<0.05)。集采组在PCI术后口服强化剂量的氯吡格雷(75mg,BID)第5天及1个月后改为维持剂量(75mg,QD)第5天的ADP抑制率与原研组相比均有统计学差异(43.02±8.025 VS 56.52±5.206/51.92±12.83 VS 68.02±6.375,P<0.05)。5.1 年后随访的相关观察指标分析:两组的改良型运动负荷试验改善情况无统计学差异(Fisher= 0.356,P>0.05)。.服药1年内支架内血栓、再狭窄及药物不良反应发生率均无统计学差异(Fisher=0.157,P>0.05)。6.药物经济学评价指标进行对比:集采氯吡格雷(C/E=0.840)与原研氯吡格雷(C/E=2.124)进行比较具有更佳的平均成本-效果。[结论]集采与原研氯吡格雷在治疗冠心病PCI术后患者过程中,无论在术后抗血小板的强化剂量期或是维持剂量期,两种药品所表现的的临床疗效、安全性及不良反应方面无明显差异。集采氯吡格雷更具有经济学效应,在确保疗效及安全性的前提下更能降低患者医疗费用的支出,更有利于今后在临床上全面推广。原研氯吡格雷对CYP2C19慢代谢型患者抗血小板有效性方面相较于集采氯吡格雷效果更佳,对行PCI手术治疗的冠心病患者抗血小板治疗前检测CYP2C19基因型,并根据基因型结果选择合适的抗血小板药物有利于患者的远期预后,更能推动精准个体化医疗在临床上广泛实施。

目的:探究MRI联合数字X线摄影对非肿块型乳腺癌(NMBC)的诊断价值。方KPT-330分子量法:回顾性分析96例进行磁共振Cell Imagers及数字X线摄影检查并经病理学证实的非肿块型乳腺病变患者的临床资料，以术后病理检查结果为金标准，评价MRI、数字X线摄影及二者联合对NMBC的诊断价值。结果:96例非肿块型乳腺病变中，良性病变59例(良性组),恶性病变37例(恶性组);MRI检查显示，恶性组表观弥散系数(ADC)值高于良性组(P<0.05),不均匀强化、Ⅲ型TIC比例高于良性组(P<0.05)selleckchem RP56976;数字X线摄影检查显示，恶性组出现单纯微小钙化、结构紊乱征象比例高于良性组(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析显示，MRI联合数字X线摄影诊断NMBC的曲线下面积大于单一检查(P<0.05);联合诊断特异度为82.81%,敏感度为85.37%。结论:MRI及数字X线摄影联合诊断可优势互补，提高对NMBC诊断效能。

目的：分析高龄孕妇发生妊娠期高血压疾病（HDCP）的影响因素。方法：回顾性分析2018年11月至2020年11月该院收治的60例高龄孕妇的临床资料，观察HDCP发生情况，根据是否发生HDCP分为发生组（n=14）和未发生组（n=46）。统计两组一般资料，分析高龄孕妇发生HDCP的影响因素。结果：60例高龄孕妇中发生HDCP 14例（23.33%），未发生HDCP 46例（76.67%）；两组medication persistence产次、流产史、被动/主动吸烟、不良生活方式、生殖道感染史、妊娠胎数比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；两组年龄、孕前体质量指数（BMI）、高血压家族史、妊娠期糖尿病、负性情绪、规范产检比较，差异均有统Galunisertib计学意义（P<0.05）;Logistic回归分析结果显示，年龄偏高、孕前BMI偏高、有高血压家族史、有妊娠期糖尿病、存在负性情绪、未规范产检均为影响高龄孕妇发生HDCP的危险因素（OR>1,P<0.05）。结论：年龄偏高、孕前BMI偏高、有高血压家族史、有妊娠期糖尿病、存在负性情KD025抑制剂绪、未规范产检均为影响高龄孕妇发生HDCP的危险因素。

目的:探讨番石榴叶提取物(GLE)对抵抗素诱导的人膝关节软骨细胞炎症的缓解作用及机制。方法:对人膝关节软骨细胞进行培养，并将其分为对照组、抵抗素组及不同浓度(30、60、120μg/ml)GLE组。使用5shoulder pathology00 ng/ml抵抗素诱导分离的软骨细胞。通过实确认细节时荧光定量(RT-qPCaptisol分子量CR)检测细胞微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)表达水平。通过CCK-8实验检测各组细胞增殖情况。通过流式细胞术和Western blot检测各组细胞凋亡率及凋亡蛋白表达情况。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和TNF-β1表达情况。结果:与对照组比较，抵抗素组软骨细胞miR-181a-5p表达水平升高(P<0.05)。与抵抗素组比较，60、120μg/ml GLE组软骨细胞miR-181a-5p表达水平降低(均P<0.05)。与对照组比较，抵抗素组细胞OD值降低(P<0.05)。与抵抗素组比较，GLE组细胞OD值升高(P<0.05)。与对照组比较，抵抗素组细胞凋亡率、裂解形式的半胱氨酸蛋白酶蛋白-3(Cl-caspase-3)及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)关联X蛋白(Bax)表达水平升高，Bcl-2蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与抵抗素组比较，GLE组细胞凋亡率、Cl-caspase-3及Bax蛋白表达水平降低，Bcl-2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。与对照组比较，抵抗素组IL-6、TNF-α及TNF-β1水平升高(均P<0.05)。与抵抗素组比较，GLE组IL-6、TNF-α及TNF-β1炎症因子水平降低(均P<0.05)。结论:番石榴叶提取物可缓解抵抗素诱导的人膝关节软骨细胞炎症，其机制可能与降低miR-181a-5p表达有关。

目的 探讨桂枝甘草汤治疗心律失常的可能作用机制及配伍意义。方法 30只SD大鼠随机分为桂枝组（桂枝单煎液120 mg/ml）、甘草组（甘草单煎液60 mg/ml）、桂枝甘草单煎液混合selleck合成组（桂枝单煎液+甘草单煎液混合180 mg/ml）、桂枝甘renal medullary carcinoma草汤同煎液组（桂枝和甘草同煎液180 mg/ml）、对照组（生理盐水），每组6只。各组每天灌胃相应药物1 ml/100 g,3天后腔静脉取血制备含药血清。分离豚鼠心室肌细胞，设桂枝血清组、甘草血清组、桂枝甘草单煎液混合血清组、桂枝甘草汤同煎液血清组、对照血清组，每组5个复孔；各组以体积比分别加入10%和15%浓度含药血清，培养24 h后分别检测各组在0、20、30、40、50 mV条件下慢激活延迟整流钾电流（IKs）电流密度。HEK293细胞分组及干预方法同心室肌细胞，培养24 h后分别检测各组在0、20、30、40、50 mV条件下快激活延迟整流钾电流（IKr）尾电流密度及IKr尾电流动力学参数（包括激活半电压、斜率因子）。结果 在10%浓度药物干预下，0、20、30、40、50 mV时各组IKs电流密度比较差异均无统计学意义（P>0.05）,20、30、40、50 mV时各组IKr尾电流密度比较差异均无统计学意义（P>0.05）。RSL3供应商在15%浓度药物干预下，与对照血清组比较，甘草血清组和桂枝甘草单煎液混合血清组各电压IKs电流密度均降低，桂枝血清组30、40、50 mV时IKs电流密度降低，桂枝甘草汤同煎液血清组50 mV时IKs电流密度降低（P<0.05）；桂枝甘草汤同煎液血清组各电压IKr尾电流密度均降低，桂枝甘草单煎液混合血清组50 mV时IKr尾电流密度降低，甘草血清组0 mV时IKr尾电流密度升高（P<0.05）。在15%浓度药物干预下，与甘草血清组比较，桂枝甘草汤同煎液血清组30 mV时IKs电流密度升高，各电压IKr尾电流密度均降低（P<0.05）；与桂枝血清组比较，桂枝甘草汤同煎液血清组30、40、50 mV时IKr尾电流密度降低（P<0.05）。与对照血清组比较，在10%药物浓度干预下，各组IKr尾电流激活半电压均减小（P<0.05）；在15%药物浓度干预下，各组IKr尾电流激活半电压均减小（P<0.05），甘草血清组、桂枝血清组斜率因子减小（P<0.05）。结论 桂枝甘草汤可在一定程度上抑制心室肌细胞IKs及HEK293细胞IKr，这可能是其治疗心律失常的作用机制之一，且方中桂枝和甘草配伍具有协同增效的作用。