MAPK信号通路

目的 通过敲低N6-甲基腺嘌呤（m6A）甲基转移酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白（WTAP）在皮肤鳞癌（cSCC）细胞中的表达，探购买ZD1839讨WTAP对cSCC细胞增殖，迁移和侵袭能力的影响。方法 选取人cSCC细胞A431、SCL-1及正常人表皮角质形成细胞HaCaT,Western blotting法及qRT-PCR法分别检测各细胞中WTAP蛋白及mRNA表达。选取WTAP蛋白及mRNA表达最高的A431细胞转染WTAP敲低慢病毒shWTAP-1、shWTAP-2、shWTAP-3及阴personalised mediations性对照慢病毒shNC，使用qRT-PCR与Western blotting验证转染效率。选取敲低差异最显著的shWTAP-3转染细胞作为WTAP敲低组，sh点击此处NC转染细胞作为对照组。采用比色法检测细胞m6A表达，CCK-8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 WTAP敲低组m6A表达低于对照组，各时点细胞OD值均低于对照组，克隆形成数少于对照组，穿膜细胞数、细胞迁移率低于对照组（P均<0.05）。结论 敲低WTAP可抑制cSCC细胞的增殖、侵袭和迁移，该作用可能通过下调m6A表达来实现。

目的 系统评价急性髓系白血病（AML）治疗的卫生经济学评价研究。方法 计算机检索PubMed、EMbase、Cochrane Library、CBM、CNKI和WanFang Data数据库，以及CRD database卫生经济学专业数据库，并手工检索卫生经济学领域的相关杂志和各国HTA机构网站，全面搜集关于selleck产品AML治疗药物的经济学评价研究。检索时限均从建库至2022年6月。参考CHEERS清单对文献质量进行评价。总结目前国内外已发表AML治疗卫生经济学评价的基本特征，分析评价模型结构mediating analysis及方法学差异，并比较药物的经济性。结果 共纳入17个研究，分别从卫生体系、患者、全社会和医疗保险支付方角度出发进行成本-效果分析，评价模型比较统一，但在方法和结果报告上存在差异，质量有待加强。研究对象主要是去甲基化药、靶向药与传统化疗方案进行比较，以及不同化疗组合方案、不同药物剂量之间的比较。结Galunisertib溶解度论 基于真实世界数据的研究主要聚焦于传统化疗方案，而马尔可夫等经济学评价模型，更多应用于近年研发的靶向药和去甲基化药物。与对照方案相比，基于阿糖胞苷的化疗方案、米哚妥林以及地西他滨更具有成本-效果。

目的 探Spontaneous infection究12导联动态和常规心电图在无症状冠心病心肌缺血伴发心律失常诊断中的价值。方法 选取2021年6月-2022年6月在我院诊治的95例冠心病患者为研究对象，均进行12导联动态心电图、常规心电图检查，比较两种诊断方式无症状心肌缺血检出率、不同心律失常（室性心律失常、房MRTX849化学结构性心律失常、短阵室上性心动过速、房室传导阻滞）检出率、12导联动态心电图检测有无症状心肌缺血发作时间分布情况。结果 12导联动态心电图心肌缺血检出率为81.05%，高于常规心电图检出率的58.94%(P<0.05);12导联动态心电图室性心律失常，房性心律失常的期前收缩二、三联律和成对期前收缩，短阵室上性心动过速，房室传导阻滞检出率均高于常规心电图（P<0.05），室性心律失常、房性心律失常的频发期前收缩检出率比较，差异无统计学意义（P>0.05）;12导联动态心电图检查无症状心肌缺血ST改变发作频率大于有症状心肌缺血患者（P<0.05），且有症状、无症状心肌缺血ST改变发作频率最高时间均为06∶00～12∶00、12∶00～18∶00。结论 12导联动态心电图可提高无症状冠心病心肌缺血伴发心律失常诊断效能，可提高心肌缺血、心律失常检出率，并且对有症状和无症状心肌缺血加以鉴别，明确冠心病心肌缺血高发时间段PD0325901作用，为临床有效治疗和预防心肌缺血发生提供可靠的参考依据。

云母是最常见的硅酸盐矿物,有机云母发酵提CX-5461取液是由黄岗岩和青梅为主要原料,适当温度条件下发酵提取获得。具有抗菌、抗炎、抗氧化和抗肿瘤等功效。炎症作为许多疾病的基本病理过程,具有发病快、诱发慢性疾病等特点,严重时会对人体造成不可逆转的伤害。国家癌症研究中心曾有报告显示,世界上1/6的癌症都是由细菌、病毒感染引起炎症而来。感染fine-needle aspiration biopsy乙肝或丙肝病毒,会导致患者患上肝炎,使肝脏长期重复受损和修复,增加肝癌风险。肝Compound 3临床试验癌是最常见的恶性肿瘤之一,越来越多的患者饱受肝癌的病痛折磨,因此,肝癌的治疗成为了医学界的关注热点。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/m TOR)信号通路的异常激活与肝癌的发生密切相关,为其靶向治疗提供了潜在的靶点。本研究旨在探讨有机云母的抗炎作用和通过调控PI3K/AKT/m TOR信号通路,诱导肝癌细胞凋亡和对肝癌细胞增殖、迁移能力的影响。首先验证有机云母的抗炎活性,MTT实验验证有机云母对RAW264.7细胞的活性影响,再从炎症理论角度出发,以脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞系(RAW264.7)造成炎症细胞模型,随后通过对细胞的一氧化氮(Nitric Oxide,NO)释放量的检测和对促炎细胞因子的检测判断有机云母是否具有抑炎作用。随后,验证有机云母对人肝癌细胞系(Hep G2)的抑制作用,采用体外培养肝癌Hep G2细胞的方法,检测有机云母对其活性行为的影响;同时通过测定有机云母应用前后细胞内部信号分子表达及活性的变化,从而确定有机云母影响肝癌细胞的分子机制。分别予以不同浓度的有机云母处理后,首先采MTT实验验证有机云母对Hep G2细胞和正常人肝脏细胞系(L02)细胞的活性影响;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;再用TUNEL细胞凋亡检测实验检测肝癌细胞的早期凋亡情况;随后通过q RT-PCR检测PI3K/AKT/m TOR信号通路相关基因和凋亡基因BCL2的表达,最后用蛋白质印迹法检测细胞中m TOR、Akt和PI3K蛋白的表达水平。结果:在抗炎相关实验中,有机云母在浓度为1%和2%时,对RAW 264.7细胞无明显毒害作用。有机云母能够降低LPS刺激的RAW264.7细胞分泌一氧化氮的水平,能够降低RAW 264.7细胞中炎症相关的肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-1α(Interleukin-1α,IL-1α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的m RNA表达水平。在抗肿瘤相关实验中,有机云母在浓度为1%和2%时,对L02细胞无明显毒害作用,且此时对肝癌Hep G2细胞的毒性大于对人正常肝细胞L02的毒性。与对照组相比,1%和2%有机云母处理组Hep G2细胞的增殖和迁移能力均明显降低,作用于Hep G2细胞48h后能显著诱导肝癌细胞凋亡,而且能够降低Hep G2细胞中PI3K/AKT/m TOR相关通路基因m TOR、Akt、PI3K和凋亡基因BCL2的m RNA表达水平,Western blot结果显示m TOR、Akt、PI3K蛋白表达量减少,蛋白水平的明显下调提示有机云母对Hep G2细胞的抑制作用可能是通过调控PI3K/Akt/m TOR信号通路引起的。综上所述,有机云母可以减轻由脂多糖诱导的细胞炎症;并且可以抑制肝癌细胞增殖,表现出显著的抑制肝癌作用,且在一定程度上与PI3K/Akt/mTOR通路有关。

目的：探讨多学科团队协作护理在糖尿病合并高血压患者中的应用效Regorafenib果。方法：以2019年8月1日～2021年8月31日收治的糖尿病合并高血压患者98例作为研究对象，根据随机数字表法分为对照组和实验组各49例，对照组采用常规护理，实验组采用多学科团队协作护理；比较两组护理前后自我管理行为[采用糖prostate biopsy尿病患者自我管理行为量表(SDSCA)]、糖尿病综合控制情况[采用糖尿病控制量表(CSSD70)]、血糖[包括空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA_1c)]及血压[包括收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]水平变化情况。结果：护理后，两组SDSCA中饮食、运动、血糖监测、药物治疗、足部护理评分均高Captisol纯度于护理前(P<0.01),且实验组高于对照组(P<0.01);护理后，两组CSSD70中并发自觉症状、生活习惯、治疗情况、生存技能、治疗目标、疾病知识评分均高于护理前(P<0.01),且实验组高于对照组(P<0.01,P<0.05);护理后，两组FBG、2 hPG、HbA_1c、SBP、DBP均优于护理前(P<0.01),且实验组优于对照组(P<0.01,P<0.05)。结论：多学科团队协作护理对糖尿病合并高血压患者自我管理行为、糖尿病控制均有改善效果，且平稳血压和血糖指标，提升治疗效果，加快患者恢复正常指标速率。

基于网络药理学和细胞实验探讨龙葵治疗乳腺癌的作用机制。利用TCMSP数据库、Swiss-Target-Prediction和文献挖掘等方法收集龙葵的活性成分7种，通过GeneCards数据库收集与乳腺癌相关靶基因110个，运用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-活性成分-靶点-疾病”网络，将潜在靶点导入STRING 11.5数据库中获取PPI网络，使用DAVID数据库对潜在靶点进行selleck抑制剂GO及KEGG富集分析。GO功能富集分析发现694个结果。KEGG通路富集分析发现128个结果（P < 0.05），涉及癌症、PI3K/Akt、MAPK等相关的信号通路。运用AutoDock-vina 1.1.2软件对龙葵中的7种关键活性成分，梣皮树脂醇、β-胡萝卜素、谷甾醇、薯蓣皂苷元、澳洲茄Symbiotic organisms search algorithm碱、胆固醇及槲皮素与潜在靶点AKT1、ESR1、EGFR、SRC、MAPK1进行分子对接，结果显示预测的关键成分薯蓣皂苷元与核心靶点AKT1和EGFR等具有较好的结合性。细胞实验结果表明，不同浓度的薯蓣皂苷元可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖并促进细胞凋亡，薯蓣皂苷元可调控EGFVX-661试剂R、AKT1以及p-AKT1蛋白的表达，同时薯蓣皂苷元可下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达、上调促凋亡蛋白Bax表达。综上结果表明，龙葵抗乳腺癌的潜在作用机制可能与调控MDA-MB-231细胞增殖及凋亡等过程相关，且通过两个关键靶基因AKT1和EGFR发挥作用。

目的 初步探讨天然小分子HEP-14对黑色素瘤SK-Mel-103细胞的抑制作用及相关机制。方法 用不同浓度的HEP-14(2.5～40μmol/L)处理黑色素瘤SK-Mel-103细胞后，CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞的存活率和克隆的形成，流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡，Transwell实验检测细胞迁移能力，RT-qPCR检测CDGadolinium-based contrast medium271和STAT3基因水平的表达，Western blot检测CD271、STAT3、p-STAT3蛋白水平的表达，细胞免疫荧光检测进一步证实CD271在细胞内的表达。结果 与对照组比较，天然小分子HEP-14能有效抑制SK-Mel-103细胞的生长和克隆的形成(P<0.05),诱导细获悉更多胞G_2/M期阻滞(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05)和抑制细胞的迁移。HEP-14显著抑制SK-Mel-103、SK-Mel-147和SK-Mel-28细胞STAT3的磷酸化(P<0.05),下调CD271的表达(P<0.05)。结论 天然小分子HEP-14能有效抑制黑色素瘤细胞生长并诱导其凋亡；可能通过抑此网站制STAT3的激活下调CD271的表达，从而抑制黑色素瘤细胞的迁移。

目的 探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）不稳定型心绞痛患者经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后并发恶性心律失常的危险因素，并据此建立风险预测列线图模型。方法 回顾性分析2018年1月至2021年12月因冠心病不稳定型心绞痛于郑州市第七人民医院心内三病区接受PCI的486例患者Staurosporine使用方法的临床资料，根据术后6个月是否并发恶性心律失常将患者分为并发组（63例）和未并发组（423例）。采用多因素LoHepatic resectiongistic回归分析冠心病不稳定型心绞痛PCI术后并发恶性心律失常的危险因素，建立风险预测列线图模型。绘制受试者工作特征（ROC）曲线以评估列线图模型的预测效能，并绘制校准曲线，采用Bootstrap自抽样法内部验证预测列线图模型的区分度。结果 并发组与未并发组比较，患者年龄、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、吸烟史、术前心肌梗死溶栓治疗（TIMI）血流分级0级、冠状动脉（冠脉）多支病变、心功能Killip分级Ⅲ～Ⅳ级、并发糖尿病、低血钾、PCI术后无/慢复流占比均高于未并发组（P<0.05），发病至PCI时间≥6 h占比大于未并发组（P<0.05）；两组患者的体质指数（BMI）、性别和病程、并发高血压、并发慢性阻塞性肺疾病占比比较均无统计学意义差异（P>0.05）；多因素Logistic回归分析结果显示年龄、吸烟史、发病至PCI时间≥6 h、术前TIMI血流分级0级、冠脉多支病变、心功能Killip分级Ⅲ～Ⅳ级、并发糖尿病、hs-CRP、低血钾、PCI术后无/慢复流均是冠心病不稳定型心绞痛PCI术后并发恶性心律失常的危险因素（P<0.05）；将上述危险因素作为预测指标，构建冠心病不稳定型心绞痛PCI术后并发恶性心律失常的风险预测列线图模型，ROC曲线分析结果显示，列线图预测冠心病不稳定型心绞痛并发恶性心律失常的曲线下面积（AUC）为0GSKJ4研究购买.794(95%CI:0.755～0.829,P<0.05)，灵敏度为73.02%，特异度为86.05%;Bootstrap自抽样法内部检验的一致性指数为0.796，该列线图模型区分度良好，校准曲线与标准曲线贴合较好。结论 年龄、吸烟史、发病至PCI时间≥6 h、术前TIMI血流分级0级、冠脉多支病变、Killip分级Ⅲ～Ⅳ级、并发糖尿病、hs-CRP、低血钾、PCI术后无/慢复流均是冠心病不稳定型心绞痛PCI术后并发恶性心律失常的危险因素，据此构建的列线图模型对指导临床筛选高风险患者以预防患者术后恶性心律失常的发生具有重要意义。

背景和目的:ADH5(alcohol dehydrogenase 5)是乙醇脱氢酶家族的成员之一,它的主要功能是降解细胞内的S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)和S-羟甲基谷胱甘肽(S-hydroxymethylglutathione,HMGSH)。通过代谢 GSNO-活性一氧化氮和谷胱甘肽形成的化合物,ADH5可以间接调控蛋白质的亚硝化修饰,所以ADH5 又名亚硝基谷胱甘肽还原酶(S-nitrosoglutathione reductase,GSNOR)。通过代谢HMGSH-甲醛和谷胱甘肽形成的加合物,ADH5可以降解甲醛以减少其造成的DNA损伤。ADH5在细胞内具有促进线粒体自噬和抗氧化的功能。研究发现缺失ADH5的小鼠更易受致癌物的诱导发生肝癌,展示了 ADH5的抗肿瘤功能,而在非小细胞肺癌中ADH5发挥何种功能尚未明确。因此,本课题旨在研究ADH5在非小细胞肺癌中的具体功能及可能的机制。方法:1、通过TCGA数据库、GEPIA数据库以及Kaplan-Meier分析观察ADH5在非小细胞肺癌中的表达情况以及和预后的关系,收取非小细胞肺癌临床组织样品、实验室培养肺癌细胞系,对组织样品和细胞样品进行RNA和蛋白提取,进行qRT-PCR和Western blot实验从两个水平检测ADH5在非小细胞肺癌中的表达水平。2、使用ADH5过表达质粒和shRNA构建非小细胞肺癌细胞系H358及PC9过表达和敲低ADH5的稳定细胞系,进行CCK8、克隆形成及Transwell实验,观察ADH5的过表达和敲低对非小细胞肺癌的生长、转移及侵袭的影响。通过裸鼠成瘤实验检测过表达ADH5对皮下肿瘤的大小和重量的影响,对肿瘤组织进行免疫组化染色检测肿瘤增殖指标Ki67的表达情况。3、通过GEPIA数据库分析ADH5和肿瘤可塑性调控蛋白SOX2、SOX9的关系。通过Western blot实验检测稳定细胞系中SOX9的蛋白水平。使用TGF-β1处理ADH5过表达细胞系,观察TGF-β1对过表达ADH5细胞的形态的影响,Western blot实验检测过表达及敲低细胞系中Smad2/3、EMT和AKT信号通路。对过表达及敲低ADH5的细胞系使用自噬抑制剂CQ后进行Western blot实验和免疫荧光实验检测LC3和P62的变化,通过qRT-PCR实验检测线粒体动力学相关蛋白的变化。结果:1、数据库显示ADH5在非小细胞肺癌中表达下降与预后不良相关。qRT-PCR与Western blot实验显示,与正常肺上皮细胞BEAS-2B相比,非小细胞肺癌细胞H1299的ADH5mRNA和蛋白水平增加,H1975的ADH5mRNA水平增加,A549、HCC827、H358、PC9、H460 的 ADH5mRNA 水平下降,A549、HCC827、H358、PC9、H1975、H460的ADH5蛋白水平下降;与癌旁组织相比,非小细胞肺癌组织中ADH5的mRNA和蛋白水平均下降。2、qRT-PCR和Western blot实验结果显示,与Vector组相比,过表达组ADH5的RNA及蛋白水平明显升高,与shControl组相比,敲低组ADH5的RNA及蛋白水平下降。CCKSTM2457 MW8及克隆形成实验结果显示,与Vector组相比,过表达组细胞生长速度下降,细胞克隆团数目减少;与shControl组相比,敲低组细胞生长速度增加,细胞克隆团数目增加。Transwell实验发现,与Vector组相比,过表达组迁移及侵袭能力增加;与shPF-02341066Control组相比,敲低组迁移及侵袭能力下降。裸鼠成瘤实验结果发现,与Vector组相比,过表达组的皮下肿瘤体积和重量均下降,对皮下肿瘤进行免疫组化实验,结果显示,与Vector组相比过表达组的肿瘤Ki67表达水平下降。3、GEPIA数据库显示ADH5与SOX2无明显相关,与SOX9正相关。Western blot实验发现过表达组中SOX9表达增加而敲低组中SOX9表达下降。使用TGF-β1处理ADH5过表达细胞系48h,发现Vector组细胞形态明显变化而过表达组不受影响;Western blot结果显示与Vector组相比,过表达组细胞的磷酸化Smad2/3水平明显增加,与shControl组相比,敲低组细胞的磷酸化Smad2/3水平明显下降;与Vector组相比过表达组的N-Cadherin、Snail以及磷酸化AKT的蛋白水平增加而E-Cadherin表达减少,与shControl组相比,敲低组细胞的N-Cadherin、Snail以及磷酸化AKT的蛋白水平下降而E-Cadherin表达增加。使用CQ后,与Vector组相比,过表达组的LC3 Ⅱ/Ⅰ和P62的水平增加,与shControl组相比,敲低组的LC3 Ⅱ/Ⅰ和P62的水平下降;免疫荧光实验显示,使用CQ后,与Vector组相比,过表达组的LC3的水平增加;qRT-PCR实验发现线粒动力学相关蛋白DRP1在ADH5过表达组中RNA水平增加,OPA1在敲低组中RNA水平增加。结论:1periodontal infection、ADH5在非小细胞肺癌中的蛋白水平和RNA水平均下降。2、ADH5在非小细胞肺癌中发挥抑制增殖和促进迁移的作用,与肿瘤细胞的可塑性相关。3、ADH5可能通过Smad2/3信号通路和自噬介导非小细胞肺癌的可塑性。

目的 研究补肾调泡周期疗法组方（逍遥散、三子汤）对大鼠原代卵巢颗粒细胞增殖、分泌功能及抗苗勒氏管激素（AMH）、抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体（AMHR2）、Smad同源物4(Smad4)表达的影响。方法 6～8周龄SD雌鼠20只随机分为空白组、阳性药物组（7.8 IU·kg~(-1)FSH）、逍遥散组（12 g·kg~(-1)）、三子汤组（16 g·kg~(-1)）各5只，连续给药4 d后采血，制备含药血清。选取21～25日龄SD雌鼠提取大鼠卵巢颗粒细胞，贴壁生长至70%，用免疫荧光法进行大鼠卵巢颗粒细胞纯度鉴定。培养成功的大鼠原代卵巢颗粒细胞分别用各组含药血清培养液培养，CCK-8法筛选各组含药血清最佳干预浓度；各组采用最佳干预浓度培养细胞，CCK-8法检测各组颗粒细胞24、48、72、96 h增殖情况；ELISA法检测各组颗粒细胞培养液上清AMH、雌二醇（E_2）及孕酮（P）浓度；Western Bolt法检测各组颗粒细胞AMH、AMHR2和Smad4蛋白表达；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组颗粒细胞中AMH、AMHR2和Smad4 mRNA表达水平。结果 与空白组比较，各组含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖均有促进作用（P<0.05,P<0.01）；与阳性药物组比较，三子汤组促进颗粒细胞增殖作用最佳（P<0.01），逍遥散次之（P<0.05）；各组颗粒细胞增殖与含药血清干预时间呈正相关，干预48 h启动细胞增殖活性，96 h细胞增殖达到高峰。与空白组CP-456773体内比较各组颗粒细胞培养液上清AMH、E_2及P的浓度均明显升高（P<0.05,P<0.01）；与阳性药物组比较，逍遥散组促P分泌效果更佳（P<0.05）。与空白组比较各组卵巢颗粒细胞AMH、AMHR2、Smad4蛋白表达水平明显升高（P<0确认细节.05,P<0.01），阳性药物组AMHR2蛋白表达较逍遥散、三子汤组升高明显（P<0.01）。与空白组比较各组卵巢颗粒细胞AMH、AMHR2、Smad4 mRNA表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01），其中三子汤组AMH、AMHR2 mRNA表达明显优于阳性药物组与逍遥散组（P<0.01）。结论 补肾调泡周期疗法组方genetic absence epilepsy逍遥散、三子汤能促进大鼠原代卵巢颗粒细胞增殖并与干预时间呈正相关性，促进颗粒细胞分泌甾体激素和AMH，并可能通过上调AMH、AMHR2、Smad4蛋白及mRNA表达，促进卵泡发育和成熟，并以此改善卵巢生殖和内分泌功能。