MAPK信号通路

目的：通过网络药理学分析预测泽泻醇点击此处B作用于鼻咽癌的相关靶点和通路，探究作用机制并通过实验进行验证。方法：通过Pubchem、Pharmmapper、GeneCards等数据库搜索并获得泽泻醇B对鼻咽癌和EB病毒的相关作用靶点，并取得它们之间的交集靶点，之后运用Cytoscape软件构建出“药物—靶点—疾病—通路”关系网络，最后采用David数据库对靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）。CCK-8法及平板克隆实验检测泽泻醇B对鼻咽癌CNE-2细胞株在不同浓度的条件下的增殖抑制情况。Western blotting对预测出的通路靶SAG点蛋白的表达进行验证。结果：网络药理学研究结果显示，泽泻醇B抗鼻咽癌的潜在作用靶点共有71个，根据degree值由高到低排列筛选出相关性最强的10个靶点。GO功能注释得到分子功能条目544个，按照P值升序排列结果前15条显著富集的条目。KEGG分析显示与PI3K-Akt信号通路密切相关；涉及的关键基因包括：Akt1、MAPK1、HSP90AA1、MAPK14等。CCK-8及平板克隆实验的结果显示，泽泻醇B能有效地抑制鼻咽癌细胞增殖，并且抑制效果随着药物作用时间与药物浓度的提高而增强，western blotting实验结果显示，泽泻醇B可明显下调Akt蛋白和PI3K蛋白表达水平（P<0.05）。结论：泽泻醇B可以有效的抑制鼻咽癌CNE-2immunity innate细胞增殖，其抗鼻咽癌机制可能与抑制PI3K-Akt信号通路活性有关。

目的:探究依托咪酯对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭及糖酵解的影响和可能机制。方法:体外培养HeLa细胞，经不同剂量(0、0.2、0.4、0.8μGW-572016浓度g·ml~(-1))依托咪酯干预后，细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验、克隆形成实验、Transwell实验分别测定细胞增殖抑制率、克隆selleck NMR形成数、迁移细胞数和侵袭细胞数，试剂盒测定葡萄糖消耗量和乳酸产生量，蛋白质印迹实验测定M2型丙酮酸激酶(PKM2)、己糖激酶2(HK2)蛋白表达量，实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法测定细胞中SLCO4A1-AS1表达量。同时以正常宫颈细胞株Ect1/E6E7为对照，RT-qPCR法测定宫颈癌HeLa细胞中SLCO4A1-AS1表达量。转染SLCO4A1-AS1小干扰RNA至HeLa细胞或用0.8μg·ml~(-1)依托咪酯干预转染SLCO4A1-AS1过表达载体的HeLa细胞后，上述相同方法测定细胞增殖抑制率、克隆形成数、迁移细胞数和侵袭细胞数、葡萄糖消耗量、乳酸产生量及PKM2、HK2蛋白表达量。结果:依托咪酯增加HeLa细胞增殖抑制率，降低细胞克隆形成数、迁移细胞数和侵袭细胞数、葡萄糖消耗量、乳酸产生量及PKM2、HImage- guided biopsyK2蛋白表达量，同时降低细胞中SLCO4A1-AS1表达量。宫颈癌HeLa细胞中SLCO4A1-AS1表达量较Ect1/E6E7细胞升高。干扰SLCO4A1-AS1增加HeLa细胞增殖抑制率，降低细胞克隆形成数、迁移细胞数和侵袭细胞数、葡萄糖消耗量、乳酸产生量及PKM2、HK2蛋白表达量。上调SLCO4A1-AS1逆转依托咪酯对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭及糖酵解的影响。结论:依托咪酯可抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭及糖酵解，其作用机制可能与下调细胞中SLCO4A1-AS1表达有关。

目的 了解河南省60岁及MRTX1133核磁以上老年人糖尿病患病、知晓、治疗和控制的流行现状，为糖尿病防控工作提供科学依据。方法 对2015—2019年河南省45 488名60岁及以上常住居民进行问卷调查、体格检查和生化检测。结果 河南省60岁及以上老年人糖尿病患病人数为13 389Ecotoxicological effects人，其中糖尿病知晓人数为5754人，治疗人数为4742人，控制人数为1122人。患病、知晓、治疗和控制率分别为29.43%、42.98%、35.42%和8.38%。女性、城镇职工医保和居民医保、肥胖、高血压、血脂异常人群发生糖尿病的风险高；高龄、城市、高血压和血脂异常人群的糖尿病知晓、治疗和控制情况均较好(OLiproxstatin-1临床试验R值均>1)。结论 河南省60岁及以上老年人的糖尿病患病率有所降低，但知晓、治疗和控制情况并未明显改善。应针对农村、饮酒、肥胖、高血压、血脂异常人群加大糖尿病宣传教育和管理。

目的 旨在分析lncRNA-ATB对骨肉瘤Saos-2细胞增殖、周期S期聚集、迁移及凋亡的调控作用，并探究其对皮下骨肉瘤生长及细胞增殖影响。方法 实时定量-聚合酶链式反应(real tiMedical pluralismme quantity polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测lncselleck BMS-907351RNA-ATB在骨肉瘤组织HOS,Saos-2和U2OS细胞株及正常人成骨细胞株NHOst中的表达；CCK8、流式细胞法、Tunel及Transwell检测lncRNA-ATB对Saos-2细胞生物学功能调控能力；Ki67检测细胞增殖情况；利用Saos-2细胞构建骨肉瘤裸鼠移植瘤模型，检测裸鼠模型中皮下瘤体重量变化。结果 28例患者组织中，骨肉瘤组织中的lncRNA-ATB表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05)。与NHOst组相比，lncRNA-ATB在HOS,Saos-2和U2OS中均升高，其中Saos-2中表达最高(P<0.05)。ATB组Saos-2细胞的OD值高于NC组，ATB组Saos-2周期S期长于NC组(P<0.05)。siATB组Saos-2细胞OD值低于siNC组；siATB组Saos-2周期S期短于siNC组(P<0.05)。ATB组能抑制Saos-2细胞凋亡率，而siATB组后则相反增加Saos-2细胞的凋亡率，ATB组的细胞穿孔数多于NC组，siATB组少于siNC组(P<0.05)。ATB组皮下肿瘤重量Dorsomorphin研究购买重于NC组(P<0.05),siATB组皮下肿瘤重量轻于siNC组(P<0.05)。ATB组下骨肉瘤细胞核中阳性染色细胞百分比多于NC组，siATB组下骨肉瘤细胞核中阳性染色细胞百分比少于siNC组(P<0.05)。结论 lncRNA-ATB可以促进骨肉瘤的发生发展及恶性生物学功能，而利用RNA干扰技术，干扰lncRNA-ATB抑制骨肉瘤的病理进程。

目MK-2206细胞培养的：KRAS G12V是最为常见的KRAS突变类型之一，是一个T细胞表位抗原，目前尚无针对该位点的靶向previous HBV infection药物，本研究旨在克隆能够特异性识别该表位抗原的T细胞受体(T cell receptor, TCR),通过体内外实验对该TCR基因修饰T细胞(TCR engineered T cells, TCR-T)靶向KRAS G12V突变肿瘤的安全性和有效性进行评估。方法：从1例结直肠癌患者的肿瘤浸润淋巴细胞中获得靶向KRAS G12V_(8-16)表位的高亲和力TCR序列，构建该TCR慢病毒载体并感染人源T细胞，获得TCR-T。采用抗原肽激活、γ-干扰素(interferon-γ, IFN-γ)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)、T细胞体外增殖等实验，体外评价该TCR-T的免疫杀伤活性和脱靶-交叉反应性；通过体内实验评价该TCR-T的抑瘤效果、安全性等指标。结果：获得了能特异性识别HLA-A~*11:01限制性KRAS G12V_(8-16)表位的高亲和力TCR序列KVA11-01。K点击此处VA11-01 TCR-T能够显著杀伤体外过表达HLA-A~*11:01和KRAS G12V的多种肿瘤细胞。非特异杀伤实验显示，KVA11-01仅杀伤同时表达HLA-A~*11:01和KRAS G12V的肿瘤细胞。体内抑瘤实验显示，KVA11-01 TCR-T可以显著抑制PANC-1和HeLa(体外过表达HLA-A~*11:01和KRAS G12V)细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。TCR-T细胞可以显著浸润至肿瘤组织内部，有良好的实体肿瘤归巢能力。结论：KVA11-01 TCR-T能够在体内外有效靶向并杀伤携带KRAS G12V突变的多种恶性肿瘤细胞，具有良好的实体瘤组织归巢能力，KVA11-01 TCR-T有望成为携带KRAS G12V突变的实体恶性肿瘤患者的有效治疗手段。

目的 探究西罗莫司(SIR)对TIE2-L914F突变导致的静脉畸形(VM)血管内皮细胞增殖和凋亡的影响及其潜在分子机制。方法 干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中TEK受体酪氨酸激酶(TIE2)的表达以构建VM血管内皮细胞模型(TIE2-L914F组)。之后将部分VM血管内皮细胞模型暴露于1 000 ng/ml SIR 48 h(TIE2-L914F+SIR组),采用MTT和流式细胞术检测VM血管内皮细胞增殖和凋亡。采用qRT-PCR和Western blot检测CXC趋化因子配体(CXCL)1和CXCR2的mRNA及蛋白表达。结BMS-907351试剂果 与TIE2-L914F组细胞相比，TIE2-L914F+SIR组细胞增殖活力受到抑制，凋亡率升高，差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL1在TIE2-L914F细胞中表达升高，在SIR处理后降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与TIE2-L914F+pcDNA3.1组比较，TIE2-L914F+pcDNA-CXCL1组细胞增殖活力提高，凋亡率降低；而与TIE2-L914F+pcDNA-CXCL1组比较，TIE2-L914F+pcDNA-CXCL1+SIR组细胞增殖活力被抑制，凋亡率提高，差异有统计学意义(P<0.05)。此外，与TIE2-L914F组比较，TIE2-Lselleckchem914F+SIR组CXCR2表达降低(P<0.05)。结论 SIR能够抑制TIfungal superinfectionE2-L914F突变导致的VM血管内皮细胞增殖，诱导细胞凋亡，抑制CXCL1/CXCR2表达。

目的 本次研究重点分析临床诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移情况的过程中，应用超声诊断技术的临床诊断优势以及影像学表现。方法 以随机抽取的方式选取研究对象，60例研究对象均www.selleck.cn/products/BafilomycinA1来自我院，被确诊为患有乳腺癌，在2021年1月至2022年12月期间接受腋窝淋巴结转移筛查，将手术病理诊断结果作为诊断标准，为患者实施超声诊断，观察超声诊断的诊断效果，统计超声诊断的影像学selleck抑制剂特征。结果 通过超声检查，发现有53.33%的患者腋窝淋巴结发生转移，通过手术病理诊断，48.33%的患者腋窝淋巴结发生转移，由此可见，超声诊断应用于早期乳腺癌患者临床诊断过程中的特异度、灵敏度以及准确率分别为77.42%、86.21%、81.67%，与手术病理诊断结果相比，两种诊断方式一致性较高（Kappa=0.84）。通过超声诊断，在影像学特征方面，腋窝淋巴结转移患者的病灶边界不够清晰，存在微小钙化现象，回声不均匀，与腋窝淋巴结未转移患者相比，纵横径比<1.5的患者占比更大，差异具有统计学意义（P <0.05）；在血流信号分布方面，未转移患者门型占比更高，转移患者周边型占比更高，差异具有统计学意义（P <0.05）；在皮质形态方面，未转移患者狭窄型占比更高，转移患者组偏心增厚型占比更高，差异具有统计学意义（P <0.05）；两类患者均无淋巴门型，而且两类患者淋巴门型与向心增厚型占比对比差异不显著（P> 0.05）。结论 诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移情况的过程中，通过超声诊断技术，可以为临床诊断治疗提供参考依据，具有较高wildlife medicine特异度以及灵敏度，影像学特征明显，诊断价值较高，可广泛应用。

目的:观察Bioresorbable implants高频彩超在乳腺癌中的筛查诊断价值。方法:选取我院疑似乳腺癌患者100例(2019年4月至2021年4月),均进行高频彩超检查，并以病理学检测结果为金标准，评价高频彩超对在乳腺癌筛查中的诊断效能。结果:病理检测结果显示100例患者中43例诊断为乳腺癌、57例非乳腺癌，经过高频超声筛查乳腺癌阳性病例52例，乳腺癌阴性48例，高频超声检查早期乳腺癌的准确性为85.00%(85/100),灵敏度为93.02%(40/43),特异度为78.95%(www.selleck.cn/products/Bortezomib45/57),阳性预测值为76.92%(40/52)Dibutyryl-cAMP试剂,阴性预测值为93.75%(45/48);100例肿块中有55个(55.00%)为不规则形，其中43个(43.00%)镜下可见肿瘤组织直接侵犯周围脂肪组织或纤维组织；57个(57.00%)为椭圆形，其中30个(30.00%)切片局部可见包膜，未发现肿瘤组织直接浸润周围正常组织。结论:在乳腺癌筛查诊断中，高频彩超具有较高灵敏度，检出率高，能准确了解患者病情情况，是一种较便捷的乳腺癌筛查手段，值得借鉴。

目的：本论文深入探究黎药海南地不容抗乳腺癌活性化合物氧化克班宁对微管网络的破坏能力，研究氧化克班宁在分子层面和细胞层面对微管网络稳态的影响。方法：首先采用EBI位点竞争法和分子对接来确定氧化克班宁对微管位点的占据力；其次，采用Western Blot法检测STAT3、PAK1、CAMK4和PKA 检测氧化克班宁对微管蛋白的影响。结果：EBI位点竞争法结果显示，EBI与β-微管蛋白加合物比biostable polyurethaneβ-微管蛋白出现在分子量更小的区域（ctrl2）。分子对接结果显示，氧化克班宁可以占据微管蛋白的秋水仙碱位点。Western Blot结果显示，低、中、高三个浓度的氧化克班宁或阳性药Taxol作用MCF-7细胞48 h后，显著降低STAT3蛋白表达水平(P<0.01），显著降低PAK1和CAMK4蛋白表达水平(P<0.05，P<0.01），并且可降低PAK蛋白表达水平，与对照组差异均有统计学意义(P<0.01)。结论：氧化克班宁结合在微管蛋白秋水仙碱位点扰乱微管蛋白聚合，造成MCF-7细胞有丝分裂，从而导致MCF-7细胞死亡。氧化克班宁可Imidazole ketone erastin作用通过抑制MCF-7细胞中STAT3、PAK1、CAMK4和PKA蛋白的表达selleck NMR水平，干扰纺锤体形成，最终造成MCF-7细胞有丝分裂灾难。

目的 探讨散结消瘤方通过调节转化生长因子-β_1(TGF-β_1)/Smads信号通路及其介导的上皮间质转化(EMT)对小鼠乳腺癌皮下移植瘤的影响。方法 雌性BALB/cA裸小鼠40只，按体重随机分为模型组、环磷酰胺组、散结消瘤方低剂量组、散结消瘤方中剂量组、散结消瘤方高剂量组，每组8只。各组均采用人乳腺癌细胞株(MCF-7)接种法制备乳腺癌皮下移植瘤模型。造模第6天，环磷酰胺组给予环磷酰胺溶液30 mg/kg腹腔注射，散结消瘤方低、中、高剂量组分别给P falciparum infection予7.8 g/kg、15.6 g/kg、31.2 g/kg散结消瘤方灌胃，模型组给予生理盐水灌胃，均持续干预4周。比较各组小鼠瘤重和抑瘤率，免疫组化染色观察瘤组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)阳性表达情况，WesteErastin生产商rn blot法检测肿瘤组织中E-cadherin、Vimentin、twist、Snail、TGF-β_1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3蛋白表达情况，RT-PBelnacasan IC50CR法检测肿瘤组织中TGF-β_1、Smad2、Smad3 mRNA表达情况。结果 环磷酰胺组及散结消瘤方各组瘤重均明显低于模型组(P均<0.05);散结消瘤方高剂量组和环磷酰胺组瘤重均明显低于散结消瘤方低、中剂量组(P均<0.05),抑瘤率均明显高于散结消瘤方低、中剂量组(P均<0.05)。环磷酰胺组及散结消瘤方各组瘤组织中MMP-2、MMP-9阳性表达平均光密度值，Vimentin、twist、Snail、TGF-β_1蛋白相对表达量及p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3比值，TGF-β_1、Smad2、Smad3 mRNA相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05),瘤组织中E-cadherin蛋白相对表达量均明显高于模型组(P均<0.05);散结消瘤方高剂量组和环磷酰胺组上述各指标改善情况均明显优于散结消瘤方低、中剂量组(P均<0.05),散结消瘤方高剂量组与环磷酰胺组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 散结消瘤方对乳腺癌皮下移植瘤具有明显的抑瘤作用，其作用机制可能与调控TGF-β_1/Smads信号通路，逆转其所介导的EMT相关。