MAPK信号通路

目的 观察~(18)F-FDG PET/CT影像组学MCC950使用方法判断乳腺癌人表皮生长因子受体2(HER2)表达状态的价值。方法 纳入100例乳腺癌患者，包括HER2(+)组28例、HER2(-)组72例，比较组间PET/CT参数，包括病灶最大标准摄取值(SUV_(max))及其标准差(SD)、平均标准摄取值(SUV_(mean))及肿瘤代谢体积的差异。于标准化后的PET图像中手transpedicular core needle biopsy动分割病灶ROI,获取其影像组学特征，根据降维后的影像组学特征及其系数的线性加权获得病灶影像组学风险评分(RRS);GSK1349572生产商针对差异有统计学意义的指标绘制受试者工作特征曲线，计算曲线下面积(AUC),评价其判断乳腺癌患者HER2状态的效能。采用Bootstrap 1000重复抽样进行内部验证，计算校正AUC,并以DeLong检验比较。以决策曲线分析评价患者净获益情况。结果 HER2(+)组病灶SUV_(max)、SUV_(mean)及SD均大于HER2(-)组(P均<0.05)。共获取704个影像组学特征，经筛选最终获得10个非零系数的特征用于计算RRS,HER2(+)组RRS大于HER2(-)组(P<0.001)。以RRS判断乳腺癌患者HER2状态的AUC大于病灶SUV_(max)、SUV_(mean)及SD(P均<0.05),其诊断敏感度为78.57%、特异度为77.78%。决策曲线分析结果表明，RRS可在较大概率阈值范围内带给患者更多净获益。结论 ~(18)F-FDG PET/CT影像组学用于判断乳腺癌HER2状态具有一定价值。

狂犬病、犬瘟热和犬细小病毒病是当前危害养犬业的三种重要传染病。为探讨狂犬病毒（RABV）、犬瘟热病毒（CDV）和犬细小病毒（CPV）灭活制备三联灭活疫苗的可行性，将该三种病毒HEP-Flury株、LN(10)1株和JL(18)1-Beagle株分别在BHK-21、Vero/DogSLAM（VDS）和F81细胞培养，经β-丙内酯灭活剂灭活后，分别与三种不同类型免疫佐剂（MONTANIDE GEL 02、ADJTezacaftor试剂-801(W)、Al(OH)_(3)）配制成三联灭活疫苗。疫苗经三次免疫比格犬后，通过测定动物血清抗体水平和攻毒保护情况评价其免疫效果。实验结果显示，不同佐剂的三联灭活疫苗对增强比格犬RABV、CDV和CPV血清抗体应答反应效果不同。其中ADJ-801(W)佐剂GDC-0068分子式能显著提高针对RABV、CDV和CPV三种病毒的抗体水平，疫苗三次免疫比格犬后血清抗体效价分别为7.4 EU/mL、1:50和1:1024；而Al(OH)_(3)佐剂效果较差，三免后抗体效价分别为4.01 EU/mL、1:6和1:256。疫苗三次免疫后，分别应用强毒CDV（SD(14)7）株和CPV（JL(18)1-Beagle）株对比格犬进行攻毒实验，实验结果显示，ADJ-801(W)组对SD(14)7和JL(18)1-Beagadult medicinele攻毒保护率均为100%，MONTANIDE GEL 02组攻毒保护率均为60%，而Al(OH)_(3)组攻毒保护率均为0，表明ADJ-801(W)佐剂制备的狂犬病、犬瘟热和犬细小病毒病三联灭活疫苗对比格犬提供较好的免疫保护作用。本研究为犬用狂犬病、犬瘟热和犬细小病毒病三联灭活疫苗的研制奠定了基础。

目的:对比分析人类表皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor2,HER-2)低表达与零表达乳腺癌的年龄分布、月经状态、激素受体、Ki-67表达水平、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移等临床病理特征差异;探讨HER-2蛋白表达强度对新辅助化疗疗效及预后的影响。方法:(1)通过TCGA数据库下载的乳腺癌转录组数据样本,从分子水平分析HER-2和ER、PR的表达关系;进一步对TCGA队列HER-2低表达与HER-2零表达之间的临床病理特征差异更多进行分析。(2)回顾性收集2017年1月至2021年12月在右江民族医学院附属医院收治的405例确诊为乳腺癌患者的临床病理资料、新辅助化疗(Neoadjuvant chemotherapy,NAC)的疗效及随访等资料。(3)对比分析HER-2低表达与HER-2零表达之间的临床病理特征的差异,以及两组新辅助化疗反应(pCR率)的异同及预后相关性分析;并与TCGA数据分析结果进行对比验证。结果:(1)基于TCGA数据库分析结果显示ER、PR的蛋白表达水平和m RNA表达水平在HER-2低表达乳腺癌病人中均更高;且ER、PR的基因表达水平与HER-2基因表达水平呈正相关。(2)本中心共纳入研究405名女性乳腺癌患者,年龄范围24～80岁(中位数49岁),其中HER-2低表达患者284例(70breast pathology.1%),HER-2零表达121例(29.9%),HER-2低表达组与HER-2零表达组相比,ER阳性率较高(88.7%vs69.4%,P<0.0001),PR阳性率也较高(71.1%vs57.0%,P=0.006)。两组间的年龄、月经状态、肿瘤直径、淋巴结转移、初诊时远处转移情况、组织学分级及Ki-67表达强度均无明显差异(P>0.05)。(3)HER-2低表达组pCR率显著低于HER-2零表达组(7.5%vs33.3%,P=0.02)。(4)HER-2低表达组相较HER-2零表达组,3年复发或转移率明显降低(4.9%vs13.1%,P=0.018)。(5)K-M生存分析结果显示所有病人中,HER-2零表达组和HER-2低表达组的DFS无明显差异(P=0.420);三年DFS率也无差异(P=0.250)。结论:(1)HER-2低表达组HR阳性率不论在蛋白及m RNA表达水平均显著高于HER-2零表达组,HER-2低表达乳腺癌Luminal分型比率更高,而TNBC比率较低。(2)HER-2低表达乳腺癌新辅助化疗的pCR率低于HER-2零表达乳腺癌患者。淋巴结转移情况、组织学分级、激素受体表达状态为pCR率的相关因素。(3)HER-2低表达乳腺癌患者的3年复发或转移率更低,但与HER-2零表达的中位DFS并无显著差异,二者的远期生存差异有待进一步观察。(4)HER-2低表达乳腺癌具有一定的临床病理特征性差异,但仍需更多分子及基因表达方面的证据来VP-16化学结构支持其成为乳腺癌的新亚型。

目的 了解脊髓灰质炎常规免疫策略调整后新沂市人群脊髓灰质炎抗体流行病学特征。方法 选择新沂市马陵山镇>6月龄人群为调查对象，收集出生日期、性别及既往脊髓灰质炎疫苗免疫史，采集外周静脉血约3.0 ml,采用WHO推荐的微Dibutyryl-cAMP采购量中和试验检测Ⅰ型和Ⅲ型脊髓灰质炎抗体，分析不同性别、不同免疫史间的差异，探讨抗体水平和抗体阳性率随年龄变化的趋势。结果 共调查460人，Ⅰ型和Ⅲ型脊髓灰质炎抗体几何平均滴度(GMT)分别为69.0和38.0,抗体阳性率分别为94.8%和89.3%;男性Ⅰ型(P=0.001)和Ⅲ型(P=0.008)抗体GMT均高于女性。GSK1349572溶解度除Ⅲ型抗体阳性率外，有明确免疫史人群Ⅰ型抗体阳性率(χ~2=5.55,P=0.02)和Ⅰ型、Ⅲ型抗体GMT(Ⅰ型：t=7.86,P<0.01,Ⅲ型：t=6.45,P<0.01)均高于surgical site infection免疫史不详人群；免疫3剂、4剂人群Ⅲ型抗体阳性率差异无统计学意义(χ~2=2.92,P=0.09)。结论 新沂市人群脊髓灰质炎抗体水平偏低，Ⅰ型和Ⅲ型脊髓灰质炎抗体水平存在差异，年龄和末次免疫后间隔时间是影响抗体水平的因素。

目的：探讨乳腺癌他莫昔芬（TAM）耐药的潜在机制。方法：筛选乳腺癌细胞HCC1937和MCF7的抗性细胞系（HCC1937/TR和MCF7/TR细胞）。TAM处理后，通过高通量测序和siRNA筛选鉴定乳腺癌细胞TAM耐药的关键分子。结果：高通量测序发现TAM可影响多个基因的表达水平。当敲低HSP90α时，HCC1937/FR细胞凋亡水平升高（P<0.05）。过表达HSP90α后，HCC1937/TR和MCF7/TR细胞凋亡水平显著降低（P<0.05）。敲低HSP90α后，MCF7/TR细胞凋亡水平显著升高（P<0.05）。在HCC1937和MCF7细胞中过表达HSP90α后用TAM处理，HCC1937和MCF7显示出对TAM抑制增殖的抵抗（P<0.05）。敲低HSP90α后，PI3K/Akt通路受到抑制。过表达HSP90α后，PI3K/Akt通路激活。PI3K/AGefitinib-based PROTAC 3配制kt通路抑制剂Pectolinarin或Milt更多efosine处理后再以TAM处理，HCC1937/TR和MCF7/TR细胞凋亡水平显著升高（P<0.05）。TAM处理后，MCF7/TR和HCC1937/TR细胞中medical nutrition therapymiR-5003-3p表达水平降低（P<0.05）。在HCC1937/TR和MCF7/TR细胞中，过表达miR-5003-3p后HSP90α表达水平降低（P<0.05）；敲低miR-5003-3p后，HSP90α表达水平升高（P<0.05）。TAM处理后过表达miR-5003-3p,HCC1937和MCF7细胞凋亡水平升高（P<0.05）;TAM处理后敲低miR-5003-3p,HCC1937和MCF7凋亡水平降低（P<0.05）。此外，敲低miR-5003-3p后，PI3K/Akt通路激活。过表达miR-5003-3p后PI3K/Akt通路受到抑制。结论：在受到持续化疗药物TAM处理后，乳腺癌细胞HCC1937和MCF7中靶向HSP90α mRNA的miR-5003-3p表达水平降低，HSP90α表达水平升高可激活PI3K/Akt通路，最终引起乳腺癌细胞对TAM耐药。

目的 探究超声引导下经皮射频消融术与腹腔镜肝切除术治疗小肝癌患者的效果及对肝功能、生存质量的影响。方法 选取2017年2月至2021年1月我院收治的90例小肝癌患者作为研究对象，根据随机数字表法将其分为切除组与消融组，各45例。切除组给予腹腔镜肝切除术，消融组给animal component-free medium予超声引导下经皮射频消融术。比较两组的治疗效果。结果 治疗后3 d，两组的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平高于治疗前，但消融组低于切除组（P<0.05）。消融组的手术时间、住院时间短于切除组，术中出血量少于切除组，治疗总费用低于切除组（P<0.05）。治疗后1个月，两组的物质功能、社会功能、躯体功能、心理功能评分均高于治疗前，且消融组高于切除组（P<0.05）。治疗后3 d，两组的癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）水平均低于治疗前（P<0.05）。消融组的术后并发症总发生率显著低于切除组（P<0.05）。两组的治疗总有效率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。两组的复发率、死亡Dolutegravir体内率比较，差异无统计学意义（P>0.0selleck产品5）。结论 超声引导下经皮射频消融术与腹腔镜肝切除术治疗小肝癌的效果相似，但前者可更好地减轻手术创伤及患者医疗负担，对肝功的影响更小，可提高患者生存质量。

目的 解析合成醋酸西曲瑞克的两种难解析杂质氨基酸序列及修饰，探讨氨甲酰基中性丢失效应在质谱氨基酸序列分析中的影响。方法 在合成工艺分析的基础上，利用静电场轨道阱质谱碰撞诱导解离，结合高能碰撞解离多级碎裂，解析无法合成纯品并且单一高能碰撞解离无法解析的两Tezacaftor分子式种杂质。结果 精氨酸侧链无修饰的杂质形成氢键，避免CMOS Microscope Cameras了氨甲酰基3-MA研究购买中性丢失。氨甲酰基中性丢失效应和空间位阻效应导致杂质3理论碎片与实测碎片不匹配。在杂质2的结构中，磺酸基与瓜氨酸羰基氧形成的氢键避免氨甲酰基中性丢失，但由于磺酸基位阻较小，发生N-S键断裂。结论 氨甲酰基中性丢失效应可能导致单一高能碰撞解离碎片与理论碎片不匹配，空间位阻效应、形成氢键也可能影响氨甲酰基中性丢失，因此当数据解析引擎显示不匹配时，还应深入分析推测氨基酸侧链的低能键，才能实现充分的杂质质控。

目MLN4924体内实验剂量的 探讨新型苦参碱衍生物ZS10抑制BEL-7402细胞增殖，诱导细胞凋亡的信号通路。方法 采用有机合成的方法，合成ZS10;采用MTT法，分析在作用时间分Biocontrol fungi别为24、48、72 h时，ZS10对BEL-7402细胞增殖的抑制作用，计算IC_(50);采用DAPI染色法，观察BEL-7402细胞状态；采用克隆形成法，观察BEL-7402细胞集落形成情况；采用流式细胞仪观察BEL-7402细胞周期阻滞情况和凋亡情况；采用Western blot法检测PI3K-AKT通路及相关蛋白表达水平。结果 获得新型苦参碱衍生物ZS10,并进行了结构表征；MTT结果表明，ZS10作用于BEL-7402细胞48 h, IC_(50)为(6.62±1.11)μmol·L~(-1);DAPI染色结果表明，给药浓度升高，细胞核发生明显改变；克隆形成结果表明，ZS10明显抑制BEL-7402细胞的集落形成；流式细胞术结果表明，ZS10诱导BEL-7402细胞凋亡并阻滞S期。Western blot结果显示，ZS10在浓度为0～8μmol·L~(-1)时，对PI3K/AKT通路及其相关蛋白具有调节作用，并呈剂量依赖性。与对照组比较，给药组PI3K、AKT、p-AKT和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平均明显降低，促凋亡蛋白Bax表达水平均明显升高，周期蛋白Cyclin D1和CDK2表达水平均明显降低，迁移蛋白EGFR、N-cadherin、Vimentin表达降低，E-cadherin表达升高。结MK-4827论 ZS10对肝癌细胞BEL-7402的生长、增殖具有抑制作用。

目的 探讨纳米雄黄酸飞品(Acid Cleaning-Realgar Nanoparticles,NRPP)对人乳腺癌细胞增殖、凋亡及对自噬的影响，并初步研究其可能作用机制。方法 采用CCK-8法检测不同浓度(0、10、20、40、60、80、100、120μg·mL-1)和不同干预时间(12、24、48 h)的NRPP对人乳腺癌MCF-7oral bioavailability、MDA-MB-231、MDAMB-435S细胞增殖的影响；荧光显微镜观察MDA-MB-435S细胞形态变化；Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡现象；透射电子显微镜(TEM)观察细胞超微结构变化；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡(Bcl-2和PARP)、自噬(LC3和p62)及自噬通路相关蛋白的表达水平。结果 NRPP对上述3种乳腺癌细胞的增殖均有显著的抑制作用，且呈现一定的浓度和时间依赖性。在荧光显微镜下观察，随着NRPP浓度的增大，细胞数量减少，细胞间隙增大，细胞逐渐皱缩、变圆、脱落，未见凋www.selleck.cn/products/smoothened-agonist-sag-hcl亡小体。TEM下观察，对照组细胞的细胞器状态良好，NRPDocetaxel核磁P组有明显的自噬体。Western blot结果显示Bcl-2和PARP表达量未发生明显的趋势变化；LC3Ⅱ/Ⅰ表达上调，p62表达下调，并呈一定的浓度和时间依赖性；PI3K/Akt/mTOR自噬通路蛋白表达量未发生明显的趋势变化；COXIV表达下调，并呈浓度依赖性。结论 NRPP可抑制3种乳腺癌细胞的增殖，且可能通过线粒体自噬诱导MDA-MB-435S细胞死亡。

目的:糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)严重影响人类健康,目前研究认为circRNA可参与多种疾病的细胞增殖、分化和代谢过程,包括DKD。本研究目的是探究circUBXN7在DKD患者血浆、模型小鼠肾组织和高糖下人肾小管上皮细胞中的表达及功能调控作用,并阐明circUBXN7是通过何种机制参与DKD的发展,为DKD的临床诊断提供新的依据。方法:采用circRNA芯片技术,检测6例正常人和6例糖尿病肾病患者血浆中差异表达的circRNAs,分析筛选出9个DKD密切相关的circRNAs。通过q RT-PCR验证这9个circRNAs在高低糖培养的HK2细胞中的表达,聚焦到表达差异最显著且表达丰度最高的circUBXN7。进一步通过q RT-PCR验证circUBXN7在DKD患者及正常对照人群血浆中的表达水平。利用生物信息学分析cirFG-4592研究购买cUBXN7的来源及环化位点,并通过Sanger测序验证其环化位点,g DNA实验验证circUBXN7是否是转录后水平环形转录本。采用RNA酶消化和放线菌素D处理后验证circUBXN7的稳定性,并通过核质分离实验和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)确定circUBXN7的定位。随后,我们构建了circUBXN7的过表达慢病毒和敲低si RNAs,通过q RT-PCR、western blot和免疫荧光(immunofluorescence,IF)探究过表达和敲低circUBXN7后对HK2细胞的上皮间质转化(epithelial mesenFetal Immune Cellschymal transition,EMT)及纤维化的影响。为探索circUBXN7的产生机制,通过q RT-PCR,染色质免疫沉淀实验(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)和双荧光素酶实验验证SP1与UBXN7启动子区域的结合,过表达和沉默SP1后检测circUBXN7和UBXN7的表达水平。为探究circUBXN7调控HK2细胞EMT和纤维化的机制,我们通过RNA pulldown、RIP、荧光原位杂交、免疫荧光验证circUBXN7与IGF2BP2结合和共定位。通过m6A2Target数据库检测SP1是IGF2BP2通过阅读m6A修饰位点结合的潜在靶基因,然后通过RIP和western blot实验验证IGF2BP2通过m6A基序识别并结合SP1的m RNA并调控其表达。然后,确定circUBXN7通过特异性结合m6A阅读蛋白IGF2BPCeralasertib采购2,识别SP1并调控其表达,从而影响糖尿病肾病的EMT和纤维化。最后,我们通过尾静脉向db/db小鼠注射circUBXN7过表达和敲低的慢病毒,构建circUBXN7上下调的模型小鼠,通过活体体内成像,q RT-PCR,FISH确认circUBXN7过表达和敲低慢病毒成功感染到小鼠肾脏。然后通过q RT-PCR,western blot和免疫荧光等探究circUBXN7在DKD小鼠在体内对肾脏组织的EMT和纤维化,DKD小鼠病情进展等的影响。结果:circRNA芯片检测发现在DKD患者血浆中有339个差异表达的circRNAs,其中有116个上调,223个下调。进一步分析发现,9个circRNAs与DKD密切相关(|Log_2(fold change)|>0.585,FDR<0.05),其中有4个上调,5个下调。q RT-PCR结果显示,circUBXN7在DKD患者血浆和高糖培养的HK2细胞中均高表达。Sanger测序结果找到circUBXN7的环化位点AGCA,通过g DNA实验我们发现circUBXN7是环形转录本且不存在于g DNA中。RNA酶消化和放线菌素D处理后,circUBXN7比内参和linear UBXN7更稳定。核质分离实验和FISH表明,circUBXN7主要定位于细胞质中。q RT-PCR、western blot和免疫荧光结果均表明,circUBXN7上调后可抑制E-ca的表达,促进Vim和α-SMA的表达,并且使Col-Ⅰ和TGFβ1表达水平升高,反之亦然。q RT-PCR和western blot结果表明,SP1在DKD病人和高糖下HK2细胞中高表达。Ch IP,双荧光素酶和q RT-PCR结果说明,转录因子SP1可以结合UBXN7的启动子区域,进而调控circUBXN7和UBXN7的表达。RNA pulldown和RIP结果显示,circUBXN7能与IGF2BP2特异性结合。RIP和western blot结果显示,IGF2BP2通过识别SP1的m RNA上的m6A基序与之结合,并且调控SP1的表达水平。放线菌素D实验,q RT-PCR和western blot说明,circUBXN7通过稳定SP1的m RNA来调控SP1的表达。RIP结果表明,circUBXN7过表达后,SP1可以更多地富集到IGF2BP2。Western blot结果显示,敲低IGF2BP2后,circUBXN7对SP1的促进作用减弱,说明circUBXN7通过募集IGF2BP2来稳定SP1并促进其表达。Western blot结果显示,下调SP1可以削弱过表达circUBXN7对HK2细胞EMT和纤维化的促进作用,相反,上调SP1可以抵消沉默circUBXN7后对HK2细胞EMT和纤维化的抑制作用。circUBXN7上下调慢病毒感染db/db小鼠后,活体成像,q RT-PCR和FISH显示,circUBXN7上下调慢病毒成功感染到肾脏组织。肾功能指标(24h尿蛋白量和尿微量白蛋白/尿肌酐)提示circUBXN7加重DKD小鼠病情。组织q RT-PCR,western blot和IF等表明circUBXN7促进DKD小鼠肾脏的EMT和纤维化,促进DKD病情发展。结论:高糖下肾小管上皮细胞转录因子SP1活化,通过入核结合circUBXN7基因启动子并促进其转录,异常高表达的circUBXN7特异性结合m6A阅读蛋白IGF2BP2,识别并促进胞质SP1的表达,形成SP1-circUBXN7/IGF2BP2-SP1正反馈环路,最终促进肾小管上皮细胞EMT、纤维化和DKD的发生发展。