MAPK信号通路

为了研究黑果枸杞花青素(Anthocyanins from Lycium ruthenicum Murr,ALR)对人肝癌HepG2细胞凋亡与自噬相互作用的MLN8237供应商影响。将ALR与3-MA(自噬抑制剂)结合，采用Hoechst染色、流式细胞术、qRT-PCR和Western Blot法，测定人肝癌HepG2细胞核形态、凋亡率和凋亡因子(包括JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3)的mRNA表达及蛋白表寻找更多达情况。将ALR与AG490(凋亡通路抑制剂)结合，使用qRT-PCR及Western Blot法检测人肝癌HepG2细胞自噬因子(LC3、LC3-Ⅱ)的mRNA表medical aid program达及蛋白表达情况。结果表明:ALR结合3-MA后可诱导人肝癌HepG2细胞核出现明显的凋亡形态变化，提高人肝癌HepG2细胞凋亡率，显著抑制JAK2、STAT3的mRNA表达(P <0.05)，显著抑制p-JAK2、p-STAT3的蛋白表达(P <0.05); ALR结合AG490后可显著提高LC3的mRNA表达及LC3-Ⅱ的蛋白表达(P <0.05)。综上所述，抑制细胞自噬可促进ALR诱导的人肝癌HepG2细胞凋亡，促进人肝癌HepG2细胞凋亡可增强细胞自噬。

目的 探讨早期胃癌术后感染患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、二胺氧化酶(DAO)、肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)水平及与胃肠功能恢复的相关性。方法 选取2016年1月-2020年12月连云港市第一人民医院收治的100例早期胃癌手术患者,根据术后3 d是否发生手术部位感染分为感染组17例、未感染组83例,比较两组一般资料、术前和术后3 d血清胃泌素、胃动素、TNF-α、DAO、IFABP水平,采用Pearson分析血清TNF-α、DAO、IFABP水平与胃肠功能恢复的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC)分析血清TNF-α、DAO、IFABP预测感染的价值。结果 感染Topical antibiotics组术前、术后3 d TNF-α、DAO、IFABP高于未感染组(P<0.05);感染组术前、术后3 d胃泌素、胃动素低于未感染组(P<0.05);术前血清TNF-α、DAO、IFABP与术前胃泌RAD001使用方法素、胃动素呈负相关(P<0.05);血清TNF-α、DAO、IFABP预测感染的AUC依次为0.791、0.833、0.755;血清TNF-α+DAO+IFABP预测感染的AUC为0.936(P<0.05)。结论 早期胃癌术后感SBE-β-CD溶解度染患者血清TNF-α、DAO、IFABP升高与胃肠功能恢复有关,有望成为预测术后感染的分子标志物,对感染高风险者采取一定干预,预防感染的发生,对促进术后胃肠功能恢复具有积极意义。

目的研究lnc-MALAT1在高葡萄糖诱导的肝星状细胞活化及肝纤维化的作用及分子机制方法在IG12细胞株中构建高葡萄糖（high glucose，HG，45mM）和常规葡萄糖（normal glucose，NG，5.5mM）培养模型，观察高葡萄糖诱导对α-SMA等成纤维细胞标志物及lnc-MALAT1表达的影响。在普通培养的细胞株中，过表达lnc-MALAT1后通过蛋白印迹法检测α-SMA等成纤维细胞标志物的表达。染色质免疫共沉淀检测过表达lnc-MALAT1及敲低FOXO1表达对lnc-MALAT1与SIRT1启动子结合的影响。Tofacitinib蛋白印迹法检测敲低lnc-MALAT1及过表达SIRT1对TGF-β信号通路Soluble immune checkpoint receptors的影响。结果在IG12细胞株中，HG组的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（vimentin）、结蛋白（desmin）、胶原蛋白（collagen）V等表达明显升高，lnc-MALAT1表达也明显升高。在普通培养的细胞株中过表达lnc-MALAT1，α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白、结蛋白、胶原蛋白V等表达也明显升高。在IAdavosertib浓度G12细胞系中过表达lnc-MALAT1，lnc-MALAT1与SIRT1启动子结合增多。在过表达lnc-MALAT1的基础上，进一步用靶向FOXO1的siRNA敲低FOXO1表达，则lnc-MALAT1与SIRT1启动子结合有所减少。使用siRNA敲低lnc-MALAT1表达，SIRT1和TGF-β1的表达降低，SMAD2和SMAD3的磷酸化水平降低，但SMAD2/3总蛋白的表达没有明显改变。在使用siRNA敲低lnc-MALAT1表达的基础上过表达SIRT1，TGF-β1的表达升高，SMAD2和SMAD3的磷酸化水平升高，SMAD2/3总蛋白的表达没有显著改变。

目的探讨淋巴结数量指标在N1c期结直肠癌患者预后中的价值。方法回顾性分析2010年1月至2015年12月在中国医学科学院肿瘤医院, 以及美国监测、流行病学和最终结果(SEER)数据库中初治且行根治性手术的pTxN1cM0期结直肠癌患者的临床病理资料, 纳入N1c期患者1 165例, 其中中国医学科学院肿瘤医院85例[男54例, 女31例;中位年龄58(范围:32～80)岁];SEER数据库1 080例[男566例, 女514例;中位年龄66(范围:24～98)岁]。探讨淋巴结总数或阴性淋巴结数、阳性淋巴结对数比(LODDS)在N1c期结直肠癌患者中的预后价值。结果淋巴结总数或阴性淋巴结数的最佳截断值为13枚, LODDS的最佳截断值为-1.43。在85例中国医学科学院肿瘤医院病例中, N1c1期(淋巴结总数或阴性淋巴结数≥13枚, 69例)和LODDS1组(LODDS≤-1.43, 69例)患者的5年生存率均为80.9%, 均高于N1c2期(淋巴结总数或阴性淋巴结数13枚, 16例)和LODDS2组(LODDS-1.43, 16例)患者(均为53.3%, 均P=0.002)。在1 080例SEER数据库病例中, NMLN4924分子式1c1期(837例)和LODDS1组(LODDS≤-1.43, 837例)患者的5年生存率均为64.7%, 均高于N1c2期(243例)和LODDS2组(LODDS-1.43, 243例)患者(均为52.2%, 均P0.001)。Cox多因素风险回归模型分析结果显示, 无论在中国医学科学院肿瘤医院病例, 还是SEER数据库病例中, 淋巴结总数或阴性淋巴结数13枚均是影响N1c期结直肠癌患者总生存时间的危险因素, HR(95Predictive medicine%CI)分别为3.794(1.539～9.349)、1.588(1.232～2.048)selleckchem;而LODDS≤-1.43均是影响N1c期结直肠癌患者的总生存时间的保护因素, HR(95%CI)分别为0.264(0.107～0.650)、0.630(0.488～0.812)。结论淋巴结总数或阴性淋巴结数和LODDS是N1c期结直肠癌患者预后的影响因素, 临床上对N1c期结直肠癌患者应该按淋巴结总数或阴性淋巴结数和LODDS进行预后分层, 并制定不同的辅助治疗方案。

目的 通过奥沙利铂（Oxaliplatin,OXA）浓度梯度法构建耐药细胞株，探讨OXA治疗胃癌时的耐药机制，为逆转耐药策略提供实验依据。方法 采用OXA浓度梯度培养人胃癌细胞MGC-803，复制OXA耐药细胞株模型（MGC-803/OXA），用倒置显微镜观察细胞的形态学变化、检测细胞耐药指数RI；用流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡，RT-qPCR检测耐药相关基因MDR-1、MRP、ERCC1mRNA表达，Western blot检测耐药相关基因蛋白MDR-1、MRP、ERCC1及自噬相关蛋白P62、Beclin-1和LC3表达；同时用透射电镜观察细胞中自噬体数量及结构变化。结果 OXA浓度梯度培养成功构建耐药细胞株MGC-803/OXA，半抑制浓度（ICAZD2281作用50）为62.Dorsomorphin半抑制浓度33μmol/L,RI为7.01(RI> 5符合耐药株的要求)；MGC-803/OXA细胞株细胞增殖减慢，细胞周期出现G2/M期延长，细胞凋亡率降低，MDR-1、MRP、ERCC1耐药相关基因和蛋白表达高于MGC-803，表明成功构建了胃癌耐药细胞模型MGC-803/OXA；与MGC-803相比，MGC-803/OXA中P62表达降低、Beclin-1表达和LC3-II/I比值增高，具有典型的、内含胞浆成分的空泡状双层膜样结构的自噬体，且数量显著增加。结论 OXA浓tumor biology度梯度法能成功构建耐药细胞株，表现为增殖减慢、G2/M期延长、凋亡减少，并且自噬水平增强。

目的 探讨microRNA-200a干扰肺癌患者外周血B细胞白细胞介素(IL)-18的表达。方法 收集47例非小细胞肺癌患者(研究组)与同期进行体检的健康人(对照组)的外周血，分离两组CD19 B淋巴细胞并在体外培养，应用实时荧光定量聚合酶链反应(PHCV hepatitis C virusCR)检测两组细胞中microRNA-200a与IL-18 mRNA表达水平，构建microRNA-200a脂质体与肺癌小鼠模型，将脂质体转入小鼠模型体内，观察瘤体生长情况，用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测脂质体处理前后小鼠血清中IL-18表达水平并分析microRNA-200a与IL-18的相关性。结果 研究组外周血CD19B淋巴细胞中miRNA-200a、IL-18表达水平显著低于对照组(P<0.05);RP56976作用在对照组CD19B淋巴细胞中转染miRNA-200a脂质体与空白脂质体并LPS诱导后，miRNA-200a脂质体组miRNA-200a及IL-18 mRNA表达水平显著高于空白脂质体组(P<0.05);实验第12天对荷瘤小鼠的瘤体生长情况进行检测，miRNA-200a脂质体处理组瘤体显著小于AZD6738核磁空白脂质体组(P<0.05),miRNA-200a脂质体处理组小鼠血清中IL-18水平显著高于空白脂质体组(P<0.05);处理前，研究组细胞培养液中IL-18水平显著高于对照组(P<0.05);脂质体处理后，miRNA-200a脂质体组培养液的IL-8水平显著高于空白脂质体组(P<0.05)。结论 肺癌患者中低microRNA-200a、低IL-18表达的水平，为通过过表达miRNA-200a调控IL-18表达从而发挥抗肿瘤作用的药物研发提供可靠的理论与实验基础。

目的 探讨恶性实体肿瘤和血液系统恶性Intestinal parasitic infection肿瘤患者血清抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(dsDNA)抗Pexidartinib核磁体的特点。方法 纳入2016年7月～2018年2月我院收治的恶性实体肿瘤患者316例(恶性实体肿瘤组)、血液系统恶性肿瘤患者297例(血液系统恶性肿瘤组)和同期来院健康体检者307例(对照组),采用间接免疫荧光法(IIF)检测不同滴度ANA阳性率、在荧光显微镜下判断荧光模型、采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测抗dsDNA抗体阳性率和水平并进行组间比较。结果 恶性实体肿瘤组和血液系统恶性肿瘤组患者ANA(1∶320)阳性率均高于对照组(P<0.05)。3组患者ANA(1∶1 000)阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)。恶性实体肿瘤组患者的荧光模型以颗粒型最多，但3组PCI-32765作用间比较差异无统计学意义(P>0.05)。血液系统恶性肿瘤组荧光模型以混合型最多，高于恶性实体肿瘤组(P<0.05)。3组患者抗dsDNA抗体阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。血液系统恶性肿瘤组抗dsDNA抗体水平分别高于恶性实体肿瘤组和对照组(P<0.05)。结论 恶性肿瘤患者血清中ANA滴度较正常人高，自身抗体阳性且无相应临床表现或治疗效果不佳的患者应进行肿瘤筛查，避免漏诊。恶性实体肿瘤患者以ELISA法检测血清抗dsDNA抗体的阳性率与正常人群比较无明显差异，该抗体阳性但无相应临床表现的患者在临床中应进行随访观察。

目的：探索脑内皮细胞黏附分子（CERCAM）与结肠癌患者预后的关系，利用COX模型建立具有良好预后判断价值的列线图并予以验证。方法：下载TCGA及GTEx数据库中结肠癌及正常组织中CERCAM表达水平及患者临床特征数据，收集南京市第一医院收治的4例结肠癌患者的癌及癌旁组织样本进行验证，通过差异分析、通路Proanthocyanidins biosynthesis富集分析以及生存分析等方法探索CERCAM的组织定位、功能及预后价值。通过COX回归筛选出结肠癌的预后危险因素，基于CERCAM及各危险因素构建列线图，分别使用一致性指数、校准曲线、时间依赖性受试者工作特征曲线进行验证与评价，根据危险分层绘制生存曲线。结果：结肠肿瘤组织中CERCAM基因的表达水平显著低于正常组织（P<0.001），在肿瘤患者中，CERCAM高表达人群总生存期（P=0.034）及存活状态（P=0.002）显著劣于低表达组，且CERCAM与癌症信号通路（proteoglycans in cancer）以及PI3K-Akt信号通路的活化有关联。Cox分析显示，CERCAM表达水平（HR=2.23,P=0.015）、T分期（HR=5.64,P=0.015）、M分期（HR=2.62,P=0.022）是结肠癌预后的独立危险因素，血管浸润（HR=2.30,P=0.089）是危险因素，利用上述Belnacasan浓度因素建立列线图，一致性指数提示区分度好，且训练集与测试集一致；校准曲线、受试者工作特征曲线同样显示该列线图的预测能力较好。通过危险分层绘制生存曲线，结果提示高风险组有更低的生存率（P<0.000 1）。结论：CERSTM2457纯度CAM高表达与结肠癌患者不良预后密切相关，且可能与癌症中蛋白聚糖及PI3K-Akt信号通路相关，基于CERCAM建立的列线图优于传统预测模型，对结肠癌患者生存预后的评估具有一定临床价值，这种实用的模型有助于患者风险分层及治疗方案的优化。

目的：基于网络药理学与分子对接技术分析当归芍药散治疗卵巢癌(ovarian cancer)的药理机制。方法：结合文献和中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform, TCMSP)对当归芍药散成分和作用靶点进行检索，将药物靶点和Genecards数据库所载卵巢癌靶标进行对比，结果输入STRING数据库，并在Cytoscape3.8.0软件中制作网络图。采用Rstudio软件进行基因本体(gene ontology, GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)通路富集分析。利用PyMOL软件对排名前5位的活性成分和核心靶标进行分子对接可视化分析。结果：筛选共得药物活性成分70个，涉及VEGFA、RELA、PTGS2、MMP9、TP53、JUN、PGR等98个作用靶标；GO功能富集分析、KEGG信号通路富集结果显示：当归芍药散治疗卵巢癌主要通过药物反应、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、雌二醇反应等调节磷酸酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase-Akt signal transduction pathway/protBio-based productionein kinase B,PI3K/Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)等信号通路；分子对接结果表明黄芩素、鞣花酸与靶标蛋白有较好的结合活性。结论：当归芍药散治疗卵巢癌可能与V更多EGFA、TP53、PTGS2、PGR等作用靶标及调节PI3K-Tezacaftor使用方法Akt、MAPK、VEGF等信号通路有关，黄芩素、鞣花酸可能是其发挥作用的主要成分。

目的 探讨低密度脂蛋白受体1(LPR1)基因多态性与幽门螺杆菌(Hp)感染后胃癌易感性的关联。方法2018年1月—2020年1月北京医院收治的胃癌患者180例为病例组,根据Hp免疫experimental autoimmune myocarditis球蛋白(Ig)G抗体检测结果,将其分为Hp阳性组、阴性组;另选同期年龄匹配的健康体检者40名为对照组,采用聚合酶链反应(qPCR)检测LPR1 rs688、rs5925、rs11172113和rs2228671位点的基因多态性,采用单因素和多因素Logistic回归模型分析LPR1基因多态性与Hp感染后胃癌易感性的关系。结果 病例组LPR1基因rs688位点CC基因型及C基因频率分布均于高于对照组(P<0.05),Logistic回归模型分析结果显示,rs688 CC基因型(OR=1.246)、携带rs688 C等位基因(OR=2.337)是影响胃癌发生的危险因素(P<0.05)。在位点rs688,Hp感染阳性组携带CC基因型频率、C基因频率高于Hp阴性组(P<0.05),Logistic回归模型分析结果显示,rs688 CC基因型(OR=3Bafilomycin A1体内实验剂量.245)、携带rs688 C等位基因(OR=3.518)是影响胃癌患者Hp感染发生的危险因素(P<0.05)。结论 LPR1的rs688位点CAZD9291使用方法C基因型、C等位基因是胃癌发生的易感基因,且与Hp感染对胃癌易感性有协同作用;而rs5925、rs11172113和rs2228671位点的基因多态性可能与胃癌的发病无关。