MAPK信号通路

为提高条纹小鲃在常温下养殖生产操作及运输中的存活率，将野外采集的条纹小鲃经循环水暂养驯化14 d,在水温(25.0±0.5)℃下，开展三卡因和丁MC3香酚对体质量(0.28±0.09) g条纹小鲃的有效麻醉试验：分别经质量浓度为140 mg/L的三卡因Decitabine抑制剂、质量浓度为25 mg/L的丁香酚深度麻醉后的离水暴露试验，分别经质量浓度为10 mg/L的三卡因、质量浓度为8 mg/L的丁香酚镇静后的模拟运输试验，探讨常温下不同操作目的2种麻醉剂的应用效果。试验结果显示，三卡因和丁香酚麻醉条纹小鲃的有效质量浓度分别为100～140 mg/L、20～30 mg/L。经质量浓度140 mg/L三卡因、质量浓度25 mg/L丁香酚深度麻醉的条纹小鲃，在空气中分别暴露6、8 min内复苏率为100%。选择三卡因质量浓度10 mg/L、丁香酚质量浓度8 mg/L模拟运输，48 h内均以鱼水质量比1∶15效果最佳；如运输72 h,可Substructure living biological cell使用三卡因麻醉，以鱼水质量比1∶20效果最佳，存活率达90.74%。试验结果表明，三卡因和丁香酚均对条纹小鲃有良好的麻醉效果，在实际应用中应根据不同的操作目的并结合其他要素，选用合适的麻醉质量浓度。

目的：探究原发性肺癌患者结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）感染调查及Notch信号通路表达情况。方法：选取2022年1月至2022年6月在重庆大学附属肿瘤医院接受根治术治疗的96例原发性肺癌患者为研究对象，采用原位分子杂交技术和抗酸染色法对肺组织的MTB及其L型进行检测，药敏试验分析其耐药性，测序MC3价格鉴定靶基因位点突变情况，蛋白印迹法检测肺组织Notch1、Notch2和Notch3蛋白表达。结果：96例原发性肺癌组织标本MTB-L型阳性率为3Opportunistic infection8.54%(37/96)，阳性患者痰标本共分离出MTB-LPCI-32765菌株68株；分离MTB-L型菌株对一线抗结核药物耐药率为60.29%(41/68)，其中对异烟肼、链霉素、利福平及乙胺丁醇联合使用耐药率最高（22.06%）；分离MTB-L型菌株对二线抗结核药物耐药率为36.76%(25/68)，其中对氧氟沙星单一用药耐药率最高（14.70%）;MTB-L型菌株药物靶基因突变率前3位分别为异烟肼靶基因katG S315T(45.58%)、链霉素靶基因rpsL K43R(42.65%)、利福平靶基因rpoB S450L(20.59%);MTB-L型感染阳性患者肺组织中Notch1、Notch2、Notch3蛋白相对表达量高于MTB-L型阴性者（P<0.05）。结论：原发性肺癌患者MTB感染类型主要为L型，其耐药形势严峻，合并MTB-L型感染患者存在Notch信号通路的异常激活。

目的 探索核酸适配子特异性结合幽门螺杆菌(H.pylori)血型抗原结合黏附素(BabA)对H.pylori宿主细胞黏附的阻断作用。方法 培养H.pylori菌株并提取基因组，并设计引物PCR扩增BabA基因，扩增获得的BabA基因克隆、构建至原核表达质粒，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化后作为靶标，利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)筛选能够特异性结合BabA的单链脱氧核苷酸(ssDNA)适配Wnt-C59使用方法子；酶联寡IgE-mediated allergic inflammation聚核苷酸吸附试验(ELONA)法检测并评估候选适配子的特征；随后Panobinostat分子量在体外细胞水平和小鼠感染模型中，分别采用流式细胞术和菌落计数验证ssDNA适配子阻断H.pylori黏附的效果，同时利用ELISA检测小鼠胃黏膜细胞匀浆中白细胞介素6(IL-6)、 IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-10和IL-4的水平。结果提取H.pylori ATCC 43504基因组并构建了pET32a-BabA质粒，诱导后并纯化重组蛋白相对分子质量(M_r)约为39 000;经肽指纹图谱(PMF)分析其与BabA蛋白一致；以此为靶标运用SELEX筛选获得5个候选适配子，经分析鉴定适配子A10、 A30和A42识别相同位点，A3和A16与上述三个适配子各自识别不同的位点。适配子体外能够显著阻断H.pylori的黏附，且动物模型实验证明适配子经灌胃处理后，对胃黏膜的H.pylori定植有阻断效果，且能够减轻诱导的炎症反应，适配子治疗组胃黏膜匀浆中IL-4、 IL-6、 IL-8和TNF-ɑ水平低于模型组。结论 适配子特异性结合BabA封闭H.pylori与胃黏膜上皮细胞的黏附能够阻断H.pylori在胃黏膜的定植。

目的 使用网络药理学方法预测虎眼万年青治疗癌症（Cancer）的药理作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库检索虎眼万年青活性成分，使用SwissADME数据库对其活性成分的靶点进行分析预测，使用PharmgKb、OMIM、DrugBank数据库获取与癌症相关的靶点基因，采用Cytoscape3.7.0软件构建“成分靶点网络”及“蛋白质互作网络”，对关键活性组分进行筛选。通过Metascape数据库，对关键靶点的GO及KEGG通路进行富集分析；最后探讨“活性成分-靶点-信号通路”的关系。结果 预测到虎眼万年青的活性成分靶点430个，Cancer相关靶点4Tumour immune microenvironment76个，相互作用的交集靶点蛋白74个，研究得到虎眼万年青化学成分对癌症的治疗作用主要是通过如下信号通路：Pathways in cancer、PI3K-Akt signaling pathway、Prostate cancer、Focal adhesion、Ras signaling pathwselleck合成ay、MicroRNAs in cancer、Chemical carcinogenesis-receptor activation、Lipid and atherosclerosis、EGFR tyrosine kinase inhibitor resistance、Endocrine resistance；研究得到山奈酚、大黄素甲醚、9,12-十八碳二烯酸、汉黄芩素、甲酸辛酯等13个关键抗炎作用的活性成分和EGFR、ALB、ESR1、AKT1、ERBB2、HSP90AA1、SRC、BCL2L1、Pselleck产品TGS2、MAPK1靶点。结论 本研究通过网络药理学方法对虎眼万年青抗肿瘤的作用机制进行了分析，虎眼万年青抗癌作用体现了多成分、多靶点、多途径的特点，预测了虎眼万年青中化合物抗肿瘤的物质基础和作用机制，为虎眼万年青进一步的研究和开发提供参考。

目的 使用网络药理学方法预测虎眼万年青治疗癌症（Cancer）的药理作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库检索虎眼万年青活性成分，使用SwissADME数据库对其活性成分的靶点进行分析预测，使用PharmgKb、OMIM、DrugBank数据库获取与癌症相关的靶点基因，采用Cytoscape3.7.0软件构建“成分靶点网络”及“蛋白质互作网络”，对关键活性组分进行筛选。通过Metascape数据库，对关键靶点的GO及KEGG通路进行富集分析；最后探讨“活性成分-靶点-信号通路”的关系。结果 预测到虎眼万年青的活性成分靶点430个，Cancer相关靶点4Tumour immune microenvironment76个，相互作用的交集靶点蛋白74个，研究得到虎眼万年青化学成分对癌症的治疗作用主要是通过如下信号通路：Pathways in cancer、PI3K-Akt signaling pathway、Prostate cancer、Focal adhesion、Ras signaling pathwselleck合成ay、MicroRNAs in cancer、Chemical carcinogenesis-receptor activation、Lipid and atherosclerosis、EGFR tyrosine kinase inhibitor resistance、Endocrine resistance；研究得到山奈酚、大黄素甲醚、9,12-十八碳二烯酸、汉黄芩素、甲酸辛酯等13个关键抗炎作用的活性成分和EGFR、ALB、ESR1、AKT1、ERBB2、HSP90AA1、SRC、BCL2L1、Pselleck产品TGS2、MAPK1靶点。结论 本研究通过网络药理学方法对虎眼万年青抗肿瘤的作用机制进行了分析，虎眼万年青抗癌作用体现了多成分、多靶点、多途径的特点，预测了虎眼万年青中化合物抗肿瘤的物质基础和作用机制，为虎眼万年青进一步的研究和开发提供参考。

背景青少年抑郁障碍患病率高，且患者多伴有非自杀性自伤（NSSI）行为。改善青少年抑郁障碍患者病情已成为临床关注的重点。目的 探讨心智化家庭治疗（MBFT）对青少年抑郁障碍患者抑郁症状及NSSI行为的影响，为促进青少年抑郁障碍患者康复提供参考。方法 于2022年1月—12月选取武汉市精神卫生中心收治的符合《国际疾病分类www.selleck.cn/products/liproxstatin-1（第10版）》（ICD-10）抑郁障碍诊断标准的90例青少年抑郁障碍患者为研究对象，采用随机数字表法分为研究组（n=44）和对照组（n=46）。两组均接受常规干预，研究组在此基础上接受为期8周、每周1次、每次60 min的MBFT干预。分别于干预前和干预第1、2、4、8周末，对两组患者进行汉密尔顿抑郁量表24项版（HAMD-24）、自我效能感量表（GSES）、匹兹堡睡眠质量指数量表（PSQI）以及渥太华自我伤害调查表（OSI）评定。结果 重复测量方差分析结果显示，干预前和干预第1、2、4、8周末，两组HAMD-24评分（F=69.621、15.428、29.623,P均?0.05）、OSI总评分（F=176.642、37.682、21.873,P均?0.05）、GSES评分（F=215.236、57.421、27.857,P均?0.05）和PSQI评分（F=268.541、61.863、33.867,P均?0.05）的时间主效应、组别主效应以及组别与时间的交互效应均有统计学意义。单独效应分析显示，干预第2、4、8周末，研究组和对照组HAMD-24评分（t=5.567、8.645、6.233,P均?0.01）、OSI总评分（t=3.675、11.817、9.632,P均?0.01）、GSES评分（t=23.462、31.709、12.750,P均?0.01selleck HPLC）、PSQI评分（t=9.664、22.457、9.333,P均?0.01）差异均有统计学意义。结论 MBFT可能有助于改善青少年抑Coloration genetics郁障碍患者的抑郁症状、NSSI行为和睡眠质量，提升其自我效能感。

目的 探究山柰酚对阿霉素诱导的肾损伤大鼠的保护作用，并初步探究其可能的作用机制。方法 采用阿霉素注射法建立肾损伤模型大鼠，分为模型组、山柰酚低、中、高剂量组、山柰酚高剂量+EX527(SISAG IC50RT1特异性抑制剂)组，另设置空白对照组(n=10)；对造模当天、1周、2周、4周24 h尿液尿蛋白量进行检测cultural and biological practices；全自动生化分析仪检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平；ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)水平；HE染色检测肾组织病理形态学变化情况；透射电镜观察肾组织超微结构；流式细胞术检测肾组织细胞的凋亡情况；Western blot法检测肾组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)、p38丝裂原活化蛋白BYL719研究购买激酶(p38MAPK)、p-p38MAPK、核因子κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的蛋白水平。结果 与空白对照组相比，造模后1周、2周、4周模型组24 h尿液尿蛋白量升高，Scr、BUN、TNF-α、IL-1β水平均升高，肾组织损伤评分、组织细胞凋亡率升高，p-p38MAPK/p38MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65、Bax、Caspase-3的蛋白水平升高，SIRT1、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)；给予模型大鼠低、中、高剂量山柰酚干预后，上述指标均得到显著逆转(P<0.05)，而SIRT1特异性抑制剂EX527能显著下调SIRT1的表达(P<0.05)，减弱高剂量山柰酚对肾损伤的保护作用。结论 山柰酚对阿霉素诱导的肾损伤大鼠的肾组织具有保护作用，其机制可能与上调SIRT1表达，抑制p38MAPK信号通路活化，减少肾组织细胞凋亡有关。

目的 初步探讨植物鞘氨醇(phytosphingosine, PHS)对白血病细胞凋亡的影响及其可能机制。方法 采用人白血病细胞株K562及SUP-B15作为研究模型，CCK-8法检测细胞活力，EdU检测细胞DNA合成能力，RNA-seq检测PHS处理后差异表达基因，GO功能富集及KEGG信号通路富集分析PHS可能作用的分子途径，CTD数据库和Discovery Studio软件对PHS进行反向找Puromycin临床试验靶，Discovery Studio软件对PHS和BCL-2进行分子对接，流式细胞术检测细胞凋亡变化，JC-1染色检测线粒体膜电位变化，Western blot检测凋亡相关分子蛋白水平表达变化。结果 PHS能抑制K562和SUP-B15细胞增殖，且呈剂量和时间依赖性。PHS的半数抑制浓度在K562细胞中分别为17.67μmol/L(24 h)和12.52μmol/L(48 h),在SUP-B15细胞中分别为17.58μmol/L(24 h)和14.86μmol/L(48 h)。20μmol/L PHS作用白血病细胞48 h后，能显著抑制细胞DNA的合成(P<0.05)。对PHS作用于K562细胞后差异基因进行GO富集分Spectrophotometry析发现PHS可能参与细胞凋亡正向调控、细胞质膜及组分、激酶结合与活性等生物功能。反向找靶结果提示，BCL-2作为PHS作用靶点的可能性最高。PHS作用白血病细胞48 h后细胞凋亡率显著增加(P<0.05),呈剂获悉更多量依赖性；线粒体膜电位下降，抗凋亡蛋白BCL-2表达下调(P<0.05),Cleaved caspase-3及Cleaved caspase-9蛋白表达上调(P<0.05)。结论 PHS诱导白血病细胞发生线粒体依赖性细胞凋亡，抑制白血病细胞增殖，并可能与PHS/BCL-2结合体有关。

甘露寡糖(Mannan oligosaccharides,MOS)是一种常见的益生元,因其优异的抗氧化特性和免疫刺激作用,常作为功能性饲料添加剂,在畜禽和水产养殖中广泛应用。本研究首先通过生长试验考察MOS对草鱼(Ctenopharyngodon idella)肠道生长发育、肠道菌群、短链脂肪酸和肠道消化吸收功能影响及可能机制;第二,通过建立攻毒模型,考察MOS对肠道结构和免疫屏障功能影响及可能机制;第三,通过体外试验,以草鱼原代肠道上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)和原代肠道巨噬细胞(Macrophage,MΦ)为研究对象,建立免疫应激模型,考察MOS对肠细胞增殖和免疫调节的影响,进一步揭示MOS调控草鱼肠道免疫屏障功能的作用机制。主要研究内容和结果如下:1.MOS对草鱼肠道生长发育、消化吸收功能和健康指数的影响试验选取540尾健康草鱼(215.85±0.30 g)进行60天生长试验,共设6个处理组(MOS添加水平分别为:0、200、400、600、800和1000 mg/kg),每个处理组3个重复,每个重复30尾草鱼。结果表明,饲粮添加不同水平的MOS能显著增加草鱼肠道长度、皱襞高度、肝胰脏、肠道、头肾和脾脏的重量及相关健康指数(P<0.05),促进草鱼功能器官的生长发育;增加肠道双歧杆菌和乳酸杆菌的数量、丙酸和丁酸的含量(P<0.05),降低大肠杆菌和嗜水气单胞菌的数量以及乙酸的含量(P<0.05),优化草鱼肠道菌群和短链脂肪酸的生成,其中以400 mg/kg MOS组效果最佳。饲粮添加不同水平的MOS能显著增加草鱼肝胰脏和肠道的糜蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力(P<0.05),增加不同肠段的刷状缘酶活力(P<0.05),促进草鱼肠道的消化和吸收能力;能上调前、中和后肠阴离子氨基酸转运载体(SLCA2α和SLC1A3)、阳离子氨基酸转运载体(SLC7A1)、中性氨基酸转运载体(SLC1A5、SLC7A5和SLC7A8等)和阳离子和中性氨基酸转运载体(SLC7A6、SLC7A7和SLC7A9等)的m RNA水平(P<0.05),促进草鱼肠道对氨基酸的转运;上调前、中和后肠的TOR的m RNA水平和蛋白水平(P<0.05),结果说明MOS促进草鱼肠道氨基酸转运可能与TOR信号途径的激活有关。2.攻毒条件下,MOS对草鱼肠道结构和免疫屏障功能的影响在试验一基础上,试验二建立了嗜水气单胞菌攻毒模型,每个处理组选取15尾体重接近的健康草鱼,进行腹腔注射嗜水气单胞菌,攻毒时间为14天,探索了MOS对草鱼肠道结构和免疫功能的影响及作用机制。2.1攻毒条件下,MOS对草鱼肠道抗氧化能力的影响结果表明,饲粮添加不同水平的MOS能显著降低草鱼前、中和后肠活性氧水平、丙二醛和蛋白质羰基含量(P<0.05),提高前、中和后肠Cu Zn SOD、CAT、GST、GR和GPx的酶活力和m RNA水平(P<0.05),进而提高草鱼肠道抗氧化损伤能力,其中大部分指标以400 mg/kg MOS组效果最佳;进一步研究发现,饲粮添加不同水平的MOS显著上调PKCδ和Nrf2的m RNA水平和蛋白水平(P<0.05),说明MOS可能通过MR/PKCδ/Nrf2/Keap1信号途径调控草鱼肠道抗氧化能力。2.2攻毒条件下,MOS对草鱼肠道结构完整性的影响结果表明,饲粮添加不同水平的MOS能降低二胺氧化酶和D-乳酸的含量(P<0.05),保护草鱼肠道结构完整性;上调ZO-1、Occludin和Claudin-b等紧密连接蛋白和JAMA、E-cadherin和α-catenin等黏附连接蛋白的m RNA水平、ZO-1和Occludin的蛋白水平(P<0.05),说明MOS能增强草鱼肠道顶端连接复合体的结构完整,其中大部分指标以400 mg/kg MOS组效果最佳。饲粮添加不同水平的MOS能显著下调MLCK、Rho A、ROCK和NMII的m RNA水平和Rho A的m RNA和Rho A的蛋白水平(P<0.05),说明MOS可能通selleck AZD2281过抑制MLCK和Rho A/ROCK信号调控顶端连接复合体蛋白表达,从而保护IECs之间结构完整性。2.3攻毒条件下,MOS对草鱼肠道免疫屏障功能的影响结果表明,饲粮添加不同水平的MOS还能显著降低草鱼肠炎发病率(P<0.05),提高草鱼前、中和后肠溶菌酶和ACP活力和补体C3、C4和Ig M的含量(P<0.05),上调C1、C2和C3等补体分子的m RNA水平(P<0.05),上调β-defensi-1、Hepcidin和LEAP-2A等抗菌肽的m RNA水平(P<0.05),说明MOS能提高草鱼肠道非特异性免疫力,其中大部分指标以600 mg/kg MOS组效果最佳;进一步研究发现,饲粮添加不同水平的MOS能下调TNFα、IL-1β和IL-6等促炎细胞因子和上调IL-10、TGF-β1和IL-4/13B等抗炎细胞因子m RNA水平(P<0.05),说明MOS能抑制肠道的炎症反应,其中大部分指标以600 mg/kg MOS组效果最佳;此外,饲粮添加不同水平的MOS能显著下调草鱼前、中和后肠TLR2、TLR5、NF-κBp65、c-Rel、IKKβ和IKKγ等受体及相关信号分子的m RNA水平,下调My D88、TRAF6、IRAK1和NF-κBp65等信号分子的m RNA水平和蛋白水平(P<0.05),但对TLR1、TLR4、TRIF、NF-κBp52和IKKα的m RNA水平无影响(P>0.05),说明MOS可能通过调控TLR2/5/NF-κBp65信号(而不通过TLR1和TLR4)途径缓解草鱼肠道炎症反应。3.MOS对草鱼肠道细胞免疫功能的影响及可能机制试验二的结果表明,适宜水平的MOS能提高草鱼肠道结构完整性和免疫功能。试验三拟通过体外试验,建立草鱼原代IECs和MΦLPS免疫应激模型,进一步验证MOS对肠道细胞免疫功能的影响及可能机制。试验三共设计两个细胞试验:1)LPS诱导条件下,不同水平MOS对原代肠道IECs和MΦ免疫应激的影响;2)MOS对原代肠道IECs和MΦ免疫应激影响可能途径。3.1 LPS诱导条件下,MOS对原代肠道IECs和MΦ免疫应激的影响为研究MOS对草鱼IECs和MΦ增殖的影响,采用CCK-8法测定。共设计6个处理,分别为0(Ctrl)、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mg/m L MOS组,每组6个重复。结果表明,与对照组相比,IECs和MΦ在MOS添加浓度为0.4、0.6、0.8和1.0 mg/m L时,IECs和MΦ增殖能力显著增强(P<0.05),其中均以0.6 mg/m L MOS组效果最佳,说明0.4-1.0 mg/m L浓度的MOS对IECs和MΦ增殖均有效。为研究MOS对草鱼原代肠道IECs和MΦ免疫功能的影响及可能途径,筛选基于LPS(IECs诱导浓度:20μg/m L,MΦ诱导浓度:40μg/m L)诱导条件下适宜水平的MOS作用浓度,共设计7个处理,分别为0(Ctrl)、0(LPS)、0.2(LPS+MOS)、0.4(LPS+MOS)、0.6(LPS+MOS)、0.8(LPS+MOS)和1.0 mg/m L(LPS+MOS)。结果表明,在LPS免疫应激条件下,0.6-1.0 mg/m L MOS均能显著降低草鱼肠道IECs和MΦ炎症反应,其中TNFα、IL-1β、IL-6和IL-8的AZD9291体外m RNA水平显著下调(P<0.05),而IL-10显著上调(P<0.05),均以0.6 mg/m L MOS组效果最佳。3.2 LPS诱导条件下,MOS对原代肠道IECs和MΦ免疫应激影响可能途径为进一步探讨MOS对原代IECs和MΦTLRs信号的影响,细胞试验3.2共设置两个试验。第一个试验共设计4个处理,分别为Ctrl、MOS(0.6 mg/m L)、LPS(20μg/m L或40μg/m L)、LPS+MOS(LPS:20μg/m L或40μg/m L,MOS:0.6 mg/m L),探讨生理条件下和LPS诱导下,MOS对草鱼原代IECs和MΦ免疫反应的影响及可能途径;IECs(LPS:20μg/m L)研究结果表明,与LPS组相比,LPS+MOS组TGF-β1和TGF-β2的m RNA水平显著上调(P<0.05),TNFα、IL-1β、IL-6和IL-8的m RNA水平显著下调(P<0.05),TLR5和NF-κBp65的m RNA水平、My D88、IRAK1、TRAF6和NF-κBp65的蛋白水平均显著下调(P<0.05),说明MOS可能通过抑制TLR5/My D88/NF-κBp65信号途径(而不是通过TLR1、TLR2和TLR4)缓解草鱼IECs炎症反应;MΦ(LPS:40μg/m L)研究结果表明,与LPS组相比,LPS+MOS组IL-10、TGF-β1和TGF-β2的m RNA水平显著上调(P<0.05),TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12p35和IL-12p40的m RNA水平显著下调(P<0.05),TLR2、TLR5和NF-κBp65的m RNA水平、TLR2、My D88、IRAK1、TRAF6和NF-κBp65的蛋白水平显著下调(P<0.05),说明MOS可能通过抑制TLR2/5/NF-κBp65信号途径(而不是通过TLR1和TLR4)缓解草鱼肠道MΦ炎症反应。第二个试验共设计6个处理,分别为Ctrl、LPS(20μg/m L或40μg/m L)、LPS+MOS(LPS:20μg/m L或40μg/m L,MOS:0.6 mg/m L)、LPS+TH1020(LPS:20μg/m L或40μg/m L,TH1020:0.5μM或3μM)、LPS+C29(LPS:20μg/m L或40μg/m L,C29:50μM)、LPS+TH1020+C29(LPS:20μg/m L或40μg/m L,TH1020:0.5μM或3μM,C29:50μM),探讨LPS诱导条件下,对比MOS与TLR2/5抑制剂对草鱼IECs和MΦ中TLRs/NFκB介导炎症反应的抑medical subspecialties制效果。IECs(LPS:20μg/m L,TH1020:0.5μM,C29:50μM)研究结果表明,与LPS组相比,LPS+MOS组上调TGF-β2的m RNA水平(P<0.05),下调TNFα、IL-1β、IL-6和IL-8的m RNA水平(P<0.05),下调My D88、IRAK1、TRAF6和NF-κBp65的m RNA水平和蛋白水平(P<0.05),LPS+MOS组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的m RNA水平显著低于LPS+C29组(P<0.05),IL-1β和IL-6的m RNA水平显著低于LPS+TH1020组(P<0.05),TNF-α、IL-1β、IL-6的m RNA水平和NF-κBp65蛋白水平显著低于LPS+TH1020+C29组(P<0.05),说明0.6 mg/m L MOS能缓解草鱼IECs炎症反应,且效果要优于单独或联合抑制剂的使用效果;MΦ(LPS:40μg/m L,TH1020:3μM,C29:50μM)结果表明:与LPS组相比,LPS+MOS组上调IL-10和TGF-β1的m RNA水平,下调TNFα、IL-1β、IL-6、IL-12p35和IL-12p40的m RNA水平,下调My D88、IRAK4、IRAK1、TRAF6和NF-κBp65的m RNA水平和蛋白水平(P<0.05),且LPS+MOS组的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-12p35的m RNA水平显著高于LPS+TH1020组(P<0.05),IL-1β、IL-6和IL-12p35的m RNA水平显著高于LPS+C29(P<0.05),TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-12p35的m RNA水平和NF-κBp65蛋白水平显著高于LPS+TH1020+C29组(P<0.05),说明0.6 mg/m L MOS能缓解草鱼肠道MΦ炎症反应,且效果要弱于单独或联合抑制剂的使用效果。综上所述,MOS能促进生长中期草鱼肠道生长发育和抗病能力,这与其增强肠道消化吸收能力、结构完整性和免疫功能密切相关。MOS可能通过激活Nrf2信号途径提高肠道抗氧化能力和抑制MLCK和Rho A信号途径,增强肠道顶端连接复合体,维持肠道细胞结构和细胞间结构完整性;还可能通过下调TLR2和TLR5(而不是TLR1和TLR4),抑制NF-κBp65信号途径,调节草鱼肠道免疫屏障功能。以肠炎发病率为标识,体重为200-800 g的草鱼饲粮中MOS的推荐添加量为499.1 mg/kg。

目的 探讨Shell biochemistry青黛对湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠抗炎修复和免疫功能的影响，并探讨其机制。方法 60只大鼠随机分为6组，分别为对照组、模型组、青黛低剂量组、青黛中剂量组、青黛高剂量组以及柳氮磺胺吡啶（SASP）组、每组10只。青黛低、中、高剂量组分别ig 0.6、1.2、2.4 g/kg青黛悬浊液，SASP组ig 500 mg/kg柳氮磺吡啶悬浊液，对照组、模型组ig等体积生理盐水。检测各组大鼠血清白细胞介素（IL）-4、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量；流式细胞术检测外周血单个核细胞（PBMC）中CD4~+、CD8~+T淋巴细胞百分率；放射免疫法检测超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平；荧光实时定量PCR法检测蛋白激酶（ERK）、购买Belnacasanp38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）和MEK mRNA相对表达；免疫印迹法检测ERK、p38 MAPK和MEK蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组大鼠血清中IL-4、IL-10降低，TNF-α升高，PBMC中CD4~+、CD8~+T淋巴细胞含量降低，大鼠结肠组织中ERK、p38 MAPK mRNA和蛋白表达升高、MEK mRNA和蛋白表达降低（P<0.05）；与模型组相比，青黛低、中、高剂量组大鼠血清中IL-4、IL-10升高，TNF-α降低，PBMC中CD4~+、CD8~+T淋巴细胞升高，购买DorsomorphinERK、p38 MAPK mRNA和蛋白表达降低，MEK mRNA和蛋白表达升高（P<0.05），青黛低、中、高剂量组间比较差异存在统计学意义（P<0.05）。对照组肠组织结构完好，模型组结肠肠壁糜烂、溃疡形成，炎症明显；青黛低剂量组仍伴随较大溃疡形成及炎症浸润；青黛中剂量组肠壁轻微增厚；青黛高剂量组与SASP组肠壁结构尚完整，有极少量炎症细胞浸润。结论 青黛能够降低湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠机体内炎症因子的产生，抑制炎症反应，促进免疫功能的恢复，其机制与调节ERK/p38 MAPK/MEK信号通路有关。