MAPK信号通路

目的通过对中老年乙肝肝硬化患者的肾功能各项指标的比较分析,探讨中老年乙肝肝硬化患者合并肾损伤的发生率及其相关危险因素,有效预防中老年乙肝肝硬化患者肾损伤及早期治疗,并根据患者的肾功能是否合理选择抗病毒药物,延缓病情进展和并发症发生。方法收集2021年12月至2022年12月宁夏医科大学总医院感染疾病科的患者,选取明确诊断慢性乙型病毒性肝炎患者37例,乙型肝炎肝硬化患者336例为研究对象,收集患者一般临床资料及相关检查,根据患者肾功能Empagliflozin指标分为肾损伤组共75例作为研究组,非肾损伤组共231例作为对照组。应用SPSS26.0统计软件分析数据进行统计描述与推断,选取检验水准α=0.05。结果本次研究共纳入慢性乙型肝炎患者有37例,肾损伤发生率11.0%,乙型肝炎肝硬化患者306例,肾损伤发生率24.5%,两组肾损伤发生率比较差异有统计学意义(P<0.05)。年龄<45岁乙肝肝硬化患者Recurrent infection有30例,肾损伤发生率为6.7%,≥45岁乙肝肝硬化患者有306例,肾损伤发生率为24.5%,两组肾损伤发生率比较差异有统计学意义(P<0.05)。其中用ETV疗程≥10年患者肾损伤发生率为13.5%,ETV疗程<肾损伤发生率为5.1%,两组肾损伤发生率差异有统计学意获悉更多义(P<0.05)。性别、高血压病、糖尿病、高尿酸血症、腹膜炎、腹腔积液、低蛋白血症、电解质紊乱、HBV DNA>10~7(IU/ml)与肾损伤的发生存在相关性。结论1.中老年乙型肝硬化患者相比较青年乙肝肝硬化患者、慢乙肝患者更容易合并肾损伤。2.中老年乙肝肝硬化有高血压病、高尿酸血症,出现腹腔积液、低蛋白血症、电解质紊乱是肾损伤发生的危险因素。3.中老年乙型肝炎肝硬化患者服用恩替卡韦≥10年疗程的,治疗过程中也会引起肾损伤。

目的:研究~(13)C-尿素呼气试验在儿童幽门螺杆菌感染中的应用价值及分析儿童幽门螺杆菌感染的临床特征。方法:回顾性分析2021年5月至2022年3月江西省儿童医院具有消化道症状的2361例患儿~(13)C-尿素呼气试验结果(Delta over ATM/ATR抑制剂baseline,DOB)及临床特征。所有患儿均行~(13)C-尿素呼气试验和血常规,其中169例进行了胃镜和病理组织学检查。按年龄分为学龄前期(4～6岁),学龄期(7～11岁)和青春期(12～16岁)。结果:(1)共2361例患儿,男1317例,女1044例,男:女=1.26:1,中位年龄为8岁(4岁～16岁),其中学龄前期827例,学龄期1235例及青春期299例。(2)在2361例具有消化道症状患儿中,幽门螺杆菌阳性的临床表现分别为腹痛489例(70.06%),恶心呕吐78例(11.17%),纳差52例(7.45%),口腔异味29例(4.15%),其它症状50例(7.16%);幽门螺杆菌阴性的临床表现分别为腹痛1162例(69.87%),恶心呕吐191例(11.49%),纳差117例(7.04%),口腔异味89例(5.35%),其它症状104例(6.25%)。幽门螺杆菌阳性与阴性的临床表现比较,差异无统计学意义(Pselleck PD-0332991=0.70)。(3)幽门螺杆菌总体阳性率为29.56%(698/2361),其中,学龄前期阳性率22.37%(185/827),学龄期阳性率33.36%(412/1235)和青春期阳性率33.78%(101/299)。三组数据幽门螺杆菌阳性率存在统计学差异(c~2=31.65,P<0.001)。学龄期幽门螺杆菌阳性率与青春期相比,无统计学差异(P>0.05);学龄前期geriatric medicine与学龄期、青春期均存在统计学差异(P<0.001),且幽门螺杆菌阳性率随着年龄增大而增高。(4)学龄前期男性幽门螺杆菌阳性率为23.68%,女性阳性率为20.92%;学龄期男性幽门螺杆菌阳性率为35.70%,女性阳性率为30.26%;青春期男性幽门螺杆菌阳性率为34.64%,女性阳性率为32.50%,在各年龄段男性幽门螺杆菌阳性率均高于女性。(5)~(13)C-尿素呼气DOB值与胃十二指肠疾病无相关性(P=0.08)。(6)幽门螺杆菌阳性组,血红蛋白低于正常下限发生率17.91%(125/698);幽门螺杆菌阴性组,血红蛋白低于正常下限发生率11.55%(192/1663),两组之间比较差异存在统计学意义(P<0.001)。结论:1、儿童幽门螺杆菌感染率较高,男性感染率高于女性,且感染率总体随着年龄增大而增高。2、~(13)C-尿素呼气试验有助于儿童H.pylori感染的诊断,但~(13)C-尿素呼气DOB值不能作为判断幽门螺杆菌感染引起胃十二指肠疾病病变程度的依据。3、幽门螺杆菌感染可以导致儿童贫血的发生。

建筑彩画具有悠久的历史底蕴,是弥足珍贵的建筑文化遗产,伴随着古建筑的发展而成为我国传统木构建筑营造技艺的重要体系,从大的方面可归纳为官式彩画和地方彩画两种,两者间既存有很深的内在联系,又各具风格。内蒙古地区在受北京地区官式彩画与青海、山西等地区地方彩画的匠作技艺影响下,其建筑彩画衍生出AY-22989生产商特定区域环境下独特的彩画特征。库伦旗位于东北地区向内蒙古中部、西部地区过渡的东部核心地带,其遗存召庙及彩画数量较多且保存较为完整,库伦三大寺作为本地区历史地位最高、建造规模最大的召庙建筑群,其建筑彩画融汇了蒙、藏、汉艺术之长,是清官式彩画在少数民族地区拓展演化的典型案例,更是各地方彩画糅合的集中表达。本文首先通过medical psychology对库伦三大寺建筑概况的分析,以遗存彩画为主要研究对象,其他彩画作为辅助,对其整体彩画进行分类分析,来完善库伦三大寺彩画的基本资料;其次通过对不同类型建筑构件的彩画构图、色彩、纹样进行详细分析,总结出库伦三大寺建筑彩画的艺术特征,并从历史、政治、文化等多方面影响因素分析导致特征演化的深层次缘由,从而探寻其演化机制和价值所在;最后通过对本地区匠人的谱系探析,实际修复案例的构图尺寸换算、纹饰提取描绘、色彩检测分析及颜料选用介绍,来结合匠师匠作技艺和利用现代修复保护手段,展开针对库伦三大寺彩画的修复实验,并为当地遗存彩画的保护与修缮提供可靠的参考依据。通过对库伦三大寺建筑彩画全面且系统的研究,不仅可以充实内蒙古地方彩画的研究内容,同时还能为今后本地域建筑彩画的理论及修复研究提供思路与参考,使本地域建筑彩画以一种新的姿态呈现在大众视野内,更加希望能让人们关注彩画这种传统艺术表现形式的同时了解更多优秀的传统建BI 10773纯度筑文化遗产。

目的:抑郁障碍广泛被大家关注的是情绪低落、兴趣减退等主要症状,而抑郁障碍患者常常伴有明显的认知功能损害,影响其社会功能及预后,艾司西酞普兰、帕罗西汀是目前临床上常用的两种抗抑郁药物,可改善患者认知功能。本研究通过检测抑郁患者药物治疗前后下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPG)激素、下丘脑-垂体-甲状腺轴(hypothalamic-pituitary-thyroid axis,HPT)激素水平,以及评估治疗前后抑郁状态及认知功能水平,分析患者认知功能的改善是否与HPG、HPT激素的变化有关,从而寻找抑郁障碍患者认知功能改变的潜在生物标记物。方法:收集2021年3月1日-2022年Embryo biopsy9月30日于山东省精神卫生中心住院治疗的148例首发抑郁障碍患者为研究对象。随机分为两组,A组接受艾司西酞普兰药物治疗,B组接受帕罗西汀药物治疗。在患者入院当日使用自制调查问卷收集一般人口学资料,包括性别、年龄和学历,临床一般资料,包括病程、是否首次发病、首次发病年龄和家族史,使用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评估患者抑郁状态,使用蒙特利尔认知评估表(Mo CA)评估患者认知功能。次日晨7时检测入组患者甲状腺激素五项、性激素六项。经过8周治疗后,再次评估患者抑郁状态及认知功能,次日晨7时检测患者甲状腺激素五项、性激素六项。结果:1.经过8周药物治疗后两组患者HAMD量表总分及其五个因子:焦虑/躯体、认知障碍、迟缓、体重、睡眠障碍评分均显著下降(P均<0.05);两组患者Mo CA量表总分均显著提高(P均<0.05),其七个因子中,A组患者视空间与执行功能、命名、注意、语言、延迟回忆、定向评分较治疗前均显著提高(P均<0.05),B组患者视空间与执行功能、命名、语言、抽象、延迟回忆、定向中评分较治疗前显著提高(P均<0.05)。2.治疗前后HAMD得分差值比较:A组患者总分、认知障碍、迟缓、睡眠障碍差值大于B组(P均<0.05)。治疗前后Mo CA得分差值比较:A组患者总分、注意、语言差值大于B组,延迟回忆差值小于B组(P均<0.05)。3.A组患者血清TT3、FT3、TT4、FT4、LH浓度较治疗前均明显下降,TSH浓度较治疗前明显上升(P均<0.05);B组患者血清TT3、FT3、TT4、FT4、PRL浓度较治疗前均明显下降(P均<0.05)。4.A组患者治疗前后血清FT4浓度差值大于B组患者治疗前后血清FT4浓度差值,A组患者治疗前后血清PRL浓度差值小于B组患者治疗前后血清PRL浓度差值(P均<0.05)。5.抑郁状态改善的相关因素:A组认知障碍差值分与血清T浓度差值呈负相关,与血清PRL浓度差值呈正相关;体重差值分与血清TT3、FT3、Prog浓度差值呈正相关(P均<0.05)。B组HAMD总分差值分与血清TSH浓度差值呈负相关,与血清FSH浓度差值呈正相关;认知障碍差值分与血清TSH浓度差值呈负相关;迟缓差值分与血清LH、FSH浓度差值呈正相关;体重差值分与血清TT3、TT4浓度差值呈正相关(P均<0.05)。6.认知功能改善的相关因素:A组Mo CA总分差值与血清FT3、TT4、FT4浓度差值呈负相关;视空更多间与执行功能差值分与血清TT4、FT4浓度差值呈负相关;注意差值分与血清TT4、FT4浓度差值呈负相关;语言差值分与血清FT3、TT4、FT4浓度的差值呈负相关,与血清PRL浓度的差值呈正相关;延迟回忆差值分与血清TT3、FT3、TT4、FT4浓度的差值呈负相关;定向差值分与血清TT4、FT4浓度差值呈负相关(P均<0.05)。B组Mo CA总分差值分与血清TSH、PRL浓度的差值呈正相关;命名差值分与血清TT3浓度的差值呈正相关;语言差值分与血清TT3浓度的差值呈正相关;抽象差值分与血清TT3浓度的差值呈正相关(P均<0.05)。7.艾司西酞普兰治疗组认知功能改善的影响因素:基线FT4浓度是语言因子分改善的影响因素(β=-1.978,P<0.05),F=1.828,模型拟合度R~2=0.245;基线Prog、PRL浓度是注意因子分改善的影响因素(β=-0.137,P<0.05;β=0.018,P<0.05),F=1.583,模型拟合度R~2=0.219。结论:1.经艾司西酞普兰和帕罗西汀药物治疗后,患者抑郁状态和认知功能均有明显改善,但经艾司西酞普兰药物治疗后改善的程度较大。2.经艾司西酞普兰药物治疗后,患者血清FT4浓度明显下降,与经帕罗西汀药物治疗患者相比,下降程度较大。3.经艾司西酞普兰治疗后,患者抑郁状态的改善与血清T、PRL、TT3、FT3、Prog浓度的变化有关。经帕罗西汀治疗后,患者抑郁状态的改善与血清TSH、FSH、LH、TT3、TT4浓度的变化有关。4.经艾司西酞普兰治疗后,患者认知功能的改善改变与血清TT3、FT3、TT4、FT4、PRL浓度的变化有关。经帕罗西汀治疗后,患者认知功能的改善改变与血清TSH、PRL、TT3浓度的变化有关。5.患者FT4浓度越低,SAG半抑制浓度经艾司西酞普兰治疗后语言改善越显著,Prog、PRL越低,经艾司西酞普兰治疗后注意改善越显著。

第一部分PLCE1基因单核苷酸多态性在广西壮族儿童中的分布特点目的:分析PLCE1(Phospholipase CE1,PLCE1)基因单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorephism,SNP)位点rs17109674、rs10786156、rs3740360、rs2274224在广西壮族儿童中的分布情况,并同时比较其在不同民族、地区的基因型和等位基因型频率分布差异。方法:选取100例在右江民族医学院附属医院健康体检的广西壮族儿童,运用二代测序技术检测PLCE1基因rs17109674、rs10786156、rs3740360及rs2274224四个位点的SNP。通过哈迪-温伯格平衡(Hardy-WeinLiraglutide MWberg Equilibrium,HWE)遗传定律评估样本是否具有群体代表性,应用SPSS22.0统计软件分析实验数据,运用卡方检验或fisher确切概率法比较上述各位点的基因型及等位基因型频率在广西壮族儿童中与其他民族及地区的分布差异。结果:1.PLCE1 SNP位点基因型及等位基因型在广西壮族儿童中分布情况:(1)广西壮族儿童中PLCE1基因rs17109674位点检测出G(63.5%)、A(36.5%)等位基因型和GG(36.0%)、GA(55%)、AA(9.0%)基因型;rs10786156位点检测出G(63.5%)、C(36.5%)等位基因型和GG(44.0%)、GC(39.0%)、CC(17.0%)基因型;rs3740360位点检测出A(76.0%)、C(24.0%)等位基因型和AA(60%)、AC(32%)、CC(7.0%)三种基因型;rs2274224位点检测出C(62.5%)、G(37.5%)等位基因型和CC(42.0%)、CG(41.0%)、GG(17.0%)基因型。PLCE1基因rs17109674、rs10786156、rs3740360及rs2274224四个SNP位点的基因型频率在健康的广西壮族男、女性儿童中分布差异无统计学意义(P>0.05)。(2)PLCE1基因rs17109674、rs10786156、rs3740360及rs2274224四个SNP位点的等位基因的频率在健康的广西壮族男、女性儿童中分布差异也无统计学意义(P>0.05)。2.PLCE1基因SNP位点在不同民族及地区分布情况:(1)rs17109674基因型及等位基因频率与千人基因组计划(1000 Genomes)数据库中公布的北京汉族人群、日本人Clinically amenable bioink群相比,差异具有统计学意义(P<0.05),但与西双版纳傣族人群比较差异无统计学意义(P>0.05);与芬兰人群相比,基因型频率分布差异有统计学意义(P<0.05),等位基因型分布差异无统计学意义(P>0.05)。(2)rs10786156位点基因型及等位基因型频率与1000 Genomes数据库中北京汉族人群、日本人群及芬兰人群相比,差异具有统计学意义(P<0.05),但与西双版纳傣族人群比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)rs3740360位点基因型及等位基因型频率与1000 Genomes数据库中北京汉族人群、芬兰人群相比,差异具有统计学意义(P<0.05),但与西双版纳傣族人群及日本人群比较差异无统计学意义(P>0.05)。(4)rs2274224位点基因型及等位基因型频率与1000 Genomes数据库中的北京汉族人群、日本人群、芬兰人群相比差异具有统计学意义(P<0.05),但与西双版纳傣族人群比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:广西壮族儿童PLCE1基因rs17109674、rs10786156、rs3740360、rs2274224四个SNPs位点在不同地区分布不尽相同,具有地域性。第二部分PLCE1基因多态性及其血清学水平与广西壮族儿童原发性肾病综合征相关性的研究目的:探讨PLCE1基因rs17109674、rs10786156、rs3740360、rs2274224四个SNP位点与广西壮族儿童原发性肾病综合征(Primary nephrotic synrome,PNS)发生及其对激素治疗的反应的相关性,同时研究PLCε1(Phospholipase Cε1,PLCε1)蛋白血清学水平在广西壮族PNS患儿中的表达情况,分析其意义。方法:采用回顾性研究,选取广西壮族PNS患儿155例及同期健康体检广西壮族儿童100例作为研究对象。运用Fast Target联合二代测序技术对PLCE1基因rs17109674、rs10786156、rs3740360、rs2274224四个SNP位点进行基因分型;同时用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测样本的PLCε1蛋白血清浓度。采用SPSS22.0统计软件进行实验数据分析,运用HWE遗传定律评估健康对照组样本有无群体代表性,卡方检验或Fisher确切概率法分析基因型及等位基因型分布差异,logistic回归分析各SNP位点与广西壮族儿童PNS发病及其对激素治疗的反应的相关性,Mann-Whitney U秩和检验,分析各组间PLCε1蛋白浓度水平差异,连锁不平衡及单体型分析采用SHEsis软件。结果:(1)rs3740360位点基因型、显性模型(AC+CCvs AA)、等位基因型频率在PNS组与健康对照组间分布差异有统计学意义(X~2=11.725,P=0.03;X~2=8.884,P=0.003;X~2=5.770,P=0.016)。rs3740360位点显性模型AC+CC基因型、AC基因型及C等位基因与PNS发病风险相关,将性别、年龄等混杂因素排除后提示AC+CC基因型、AC基因型、C等位基因仍与PNS发病风险相关(OR:0.449,95%CI:0.256-0.786,P=0.005;OR=0.354,95%CI:0.188-0.667,P=0.001;OR=0.615,95%CI:0.390-0.971,P=0.037)。(2)rs17109674、rs10786156、rs2274224三个位点基因型、等位基因型频率在PNS组及健康组间分布差异无统计学意义(P>0.05)。进一步经逻辑回归分析,同时排除性别、年龄等混杂因素后进行逻辑回归校正,两次结果均显示上述3个位点基因型、等位基因与PNS发病风险无关(P>0.05)。(3)rs17109674、rs10786156、rs3740360、rs2274224四个位点基因型、等位基因频率在激素敏感型肾病综合征(SSNS)与激素耐药性型肾病综合征(SRNS)间分布差异无统计学意义(P>0.05)。进一步经逻辑回归分析,同时排除性别、年龄等混杂因素后进行逻辑回归校正,两次结果均显示上述4个位点基因型、等位基因与SRNS发病风险无关(P>0.05)。(4)PLCE1基因rs17109674、rs10786156、rs3740360、rs2274224四个位点存在连锁不平衡。(5)单倍体型结果显示:AGCG、GGCC、GGAG单倍体型在PNS组与健康对照组间分布差异有统计学意义(OR:0.282,95%CI:0.079-1.008,P=0.038;OR:0.327,95%CI:0.111-0.967,P=0.034;OR:4.616,95%CI1.179-18.069,P=0.016),提示AGCG、GGCCAZD1152-HQPA分子式单倍体型可能降低广西壮族儿童PNS发病风险,而GGAG单倍体型可能增加广西壮族儿童PNS的发病风险。(6)PNS组血清PLCε1蛋白水平显著低于健康组对照组,差异具有统计学意义(P<0.001);SRNS组中PLCε1蛋白水平也低于SSNS组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)rs3740360位点可能与广西壮族儿童PNS发病相关,其中AC基因型、AC+CC基因型、C等位基因可能降低广西壮族儿童PNS的发病风险。(2)rs17109674、rs10786156、rs3740360、rs2274224四个SNPs位点在PLCE1基因上存在连锁不平衡;AGCG、GGCC单倍体型可能降低广西壮族儿童PNS的发病风险,而GGAG单倍体型可能增加广西壮族儿童PNS的发病风险。(3)血清PLCε1蛋白水平可能为广西壮族儿童PNS一种保护性蛋白,可能与广西壮族儿童PNS对激素治疗的反应相关。

目的 基于内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路探究姜黄素（curcumin, Cur）对人增生性瘢痕成纤维细胞（human hypertrophic scar fibroblasts, HSFbs）的影响及其作用机制。方法 选取自2022年2月至2023年3月，新疆医科大学第一附属医院整形美容外科就诊的6例增生性瘢痕患者，获取其增生性瘢痕组织，经体外培养增生性瘢痕成纤维细胞；通过CCK-8实验法检测不同浓度的Cur对HSFbs细胞增殖活性的影响Wnt-C59分子量，根据增殖活性结果数据分析后将实验分为空白组、1/2半抑制浓度（IC50）组、IC50组；EDU检测细胞增殖能力；流式细胞术检测Cur干预后各组细胞的凋亡能力；流式细胞术检测Cur作用24 h后细胞周期的影响；划痕实验检测Cur作用24 h后细胞的迁移能力；Western blot检测Cur作用24 h后细胞中与内质网应激相关蛋白ATFVX-765分子量4、CHOP、Cleaved-Caspase-12表达。结果 随着Cur药物浓度的逐渐增高，HSFbs的细胞增殖活性逐渐降低，且呈现出明显的浓度依赖性，其IC50值为71.33μmol/L；细胞周期实验中Cur干预HSFbs 24 h后，将大多数的HSFbs阻滞在G1期；实验分组的Cur干预24 h后显著减弱了HSFbs的迁移能力；显著促进了HSFbs的凋亡；Western blot实验后结果数据显示，Cur可以显著上调细胞中ATF4、CHOP、Cleaved-Caspase-12的蛋白表达水平。结论 Cur可通过激活内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路调节相关蛋白，抑制HSFbs细胞增殖及迁移，促进HSFbs细armed conflict胞凋亡。

目的 分析丹酚A(SA)调控CD147-基质金属蛋白酶(MMPs)通路对大鼠缺血性脑卒中后的神经保护作用。方法 随机选取40只健康SD大鼠，10只为对照组，余30只采用线栓法建立缺血性脑卒中模型，小、高剂量组分别给予15、30μg/kg SA腹腔注射，模型组、正常组给予等量生理盐水。测定各组大鼠脑rifamycin biosynthesis组织内氧化应激因子、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、炎性细胞因子间黏附分子(ICAM)-1、5-羟色胺(HT)Rapamycin及MMPs、CD147蛋白表达，分析SA对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用。结果 相比模型组、小剂量组，高剂量组Longa评分、脑梗死体积显著降低(P<0.05)。与正常组相比，模型组、小剂量组、高剂量组过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、5-HT水平降低，丙二醛(MDA)、MCP-1、ICAM-1、CD147、MMPs水平升高，差异有统计学意义(P<0.05);相比模型组、小剂量组，高剂量组CAT、SOD、5-HT水平较高，MDA、MCP-1、ICAM-1、CD147、MMPs水平较低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SA可有效减轻缺血CB-839浓度性脑卒中导致的神经功能损伤，减少梗死体积，抑制氧化应激反应、炎症反应，促进5-HT释放，对神经功能损伤发挥量好的保护作用，其机制可能与抑制CD147-MMPs通路激活相关。

目的阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是最常见的神经退行性疾病之一,脑组织的能量代谢障碍在其发生发展过程中具有极其重要的作用。前期研究显示,针灸可通过提高大脑能量代谢来改善AD认知功能障碍,但其关键机制尚不明确。本研究运用空间转录组测序(spatial transcriptomics,ST)等技术,从大脑海马区基因表达及其功能探索等方面,探讨艾灸对AD海马区能量代谢的促进作用,并进一步明确其关键机制。方法将筛选合格的5月龄APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组和APP/PS1+MOX组,同月龄雄性C57BL/6J小鼠作为Ctrl组,每组20只。选取“百会”、“涌泉”穴进行艾灸干预,每日1次,每次30 min,每周5次,连续4周。左右“涌泉”穴隔日交替使用。治疗结束后,(1)运用Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力;运用免疫荧光技术检测海马区病理标志物β-淀粉样蛋白(beta-Amyloid(1-42),Aβ_(1-42))和磷酸化Tau蛋白(phosphorylated tau,p-Tau)的表达;(2)运用ST测序,通过分析海马区差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)Src抑制剂、功能富集及运用Seurat package的Add Module Score功能计算代谢相关通路基因集的表达分数,以研究艾灸是否影响海马区能量代谢;运用生化实验检测血清中葡萄糖含量,海马组织中的丙酮酸、乳酸和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量;运用透射电镜检测线粒体结构变化;(3)运用ST测序,通过分析代谢相关的共同差异表达基因(common differentially expressed genes,co-DEGs)及运用Cytoscape软件中的cyto Hubba插件中的Mc Creight(MCC)算法筛选其中的核心基因,以探索艾灸影响海马区能量代谢的关键机制;运用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)、免疫荧光和蛋白免疫印迹技术检测相关基因及蛋白的表达;运用免疫荧光和蛋白免疫印迹技术检测海马区突触可塑性相关蛋白突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95)和突触素(Synaptophysin,SYN)的表达。结果1.艾灸改善APP/PS1小鼠认知功能及抑制海马区病理标志物产生的效应观察(1)Morris水迷宫实验结果:与Ctrl组相比,APP/PS1组定位航行实验中的平均逃逸潜伏期和平均游泳路程明显增加(均P<0.001),而空间探索实验中的平台穿越次数、目标象限滞留时间百分比、目标象限游程百分比明显减小(P<0.001,P<0.01,P<0.01);与APP/PS1组相比,APP/PS1+MOX组定位航行实验中的平均逃逸潜伏期和平均游泳路程显著下降(P<0.01,P<0.001,P<0.001),而空间探索实验中的平台穿越次数、目标象限滞留时间百分比和目标象限游程百分比显著增加(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。(2)病理标志物Aβ_(1-42)和p-Tau免疫荧光结果:与Ctrl组相比,APP/PS1组海马的CA1区、CA3区和DG区的Aβ_(1-42)和p-Tau的阳性表达均显著上升(P<0.01,P<0.01,P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.001);与APP/PS1组相比,APP/PS1+MOX组海马的CA1区、CA3区和DG区的Aβ_(1-42)和p-Tau的阳性表达均明显减少(P<0.01,P<0.01,P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.001)。2.基于空间转录组测序研究艾灸对APP/PS1小鼠海马区能量代谢的影响(1)ST测序分析结果:对海马区DEGs进行分析,与Ctrl组相比,APP/PS1组有1287个DEGs;与APP/PS1组相比,APP/PS1+MOX组有500个DEGs;其中艾灸作用的关键DEGs有368个。通过京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,APP/PS1组vs.Ctrl组、APP/PS1+MOX组vs.APP/PS1组的DEGs均主要富集到三个方面的通路,包括亨廷顿病、AD、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、帕金森病在内的神经退行性疾病相关通路,氧化磷酸化、柠檬酸循环(TCA循环)、丙酮酸代谢等在内的多条重要代谢相关通路,以及谷氨酸突触、长时程增强以及突触囊泡循环在内的突触相关通路;基因本体论(Gene Ontology,GO)富集结果显示,APP/PS1组vs.Ctrl组、APP/PS1+MOX组vs.APP/PS1组的DEGs富集的条目也基本一致,生物过程(Biological Process,BP)主要包括核糖体生物发生、氧化磷酸化等,细胞定位(Cellular Component,CC)主要包括核糖体、线粒体蛋白复合物和突触后密度等,分子功能(Molecular Function,MF)主要包括核糖体结构组成等。基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)结果显示,APP/PS1组vs.Ctrl组的全基因集富集了29条KEGG通路,APP/PS1+MOX组vs.APP/PS1组则富集了25条KEGG通路,与前面分析结果一致,两个全基因集均富集到包括帕金森病、亨廷顿病、AD和肌萎缩性脊髓侧索硬化症在内的神经退行性疾病相关通路,以及氧化磷酸化、丙酮酸代谢在内的代谢相关通路,且上述通路在APP/PS1组selleck化学vs.Ctrl组和APP/PS1+MOX组vs.APP/PS1组中具有相反的趋势;同时,两个全基因集也富集到了氧化磷酸化、线粒体蛋白复合物等与代谢功能相关的GO条目,均趋势相反。对海马区各个spot代谢相关通路基因集进行打分,结果显示,与Ctrl组相比,APP/PS1组的CA1区、CA3区和DG区的分数明显下降(均P<0.001);与APP/PS1组相比,APP/PS1+MOX组各亚区的分数显著增加(均P<0.001)。(2)代谢功能相关指标检测结果:通过生化实验检测发现,与Ctrl组相比,APP/PS1组血清中的葡萄糖含量明显升高(P<0.01),而海马组织中的丙酮酸、乳酸和ATP含量降低(P<0.01,P<0.05,P<0.01);与APP/PS1组相比,APP/PS1+MOX组血清中的葡萄糖含量降低(P<0.05),而海马组织中的丙酮酸、乳酸和ATP含量增多(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。线粒体透射电镜结果显示,Ctrl组海马区线粒体形态规则,两层膜结构清晰;APP/PS1组线粒体形态异常,线粒体膜模糊增厚,嵴破裂溶解;APP/PS1+MOX组线粒体超微结构与Ctrl组相似,形态较规则,内外膜结构清晰。与Ctrl组相比,APP/PS1组海马区线粒体数量增加,长度明显减小(P<0.05,P<0.01);APP/PS1+MOX组相较于APP/PS1组,线粒体数量减少,长度增加(P<0.05,P<0.01)。3.基于空间转录组测序探索艾灸促进APP/PS1小鼠海马区能量代谢的关键靶点(1)代谢相关co-DEGs分析结果:将368个艾灸作用的关键DEGs与代谢相关通路基因集取交集,获得31个代谢相关co-DEGs,其在Ctrl组与APP/PS1+MOX组的表达水平相似。筛选代谢相关co-DEGs中MCC分数排名前10位的核心基因,包括Ndufs6、Ndufb4、Ndufa12、Ndufs5、Ndufc2、Ndufb11、Ndufb6、Atp5h、Atp5o及Sdhd,以线粒体呼吸链复合体Ⅰ亚基的编码基因为主。(2)呼吸链复合体Ⅰ亚基的qRT-PCR、免疫荧光及免疫蛋白印迹检测结果:与Ctrl组相比,APP/PS1组海马区的Ndufs6、Ndufb4、Ndufa12、Ndufs5、Ndufc2、Ndufb11及Ndufb6的m RNA表达水平均显著降低(P<0.001,P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.05);与APP/PS1组相比,APP/PS1+Prosthesis associated infectionMOX组复合体Ⅰ各亚基的m RNA表达水平均明显增加(P<0.001,P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.001,P<0.05,P<0.05)。并且与Ctrl组相比,APP/PS1组海马区的Ndufs6蛋白表达量显著减少(P<0.001),且其在海马各亚区阳性表达均下降;与APP/PS1组相比,APP/PS1+MOX组的Ndufs6蛋白表达量明显增加(P<0.01),且其在海马各亚区阳性表达均上升。(3)突触可塑性相关分析结果:将368个艾灸作用的关键DEGs与突触相关基因集取交集,获得10个突触相关co-DEGs,对其在海马区各个spot的表达量进行打分,与Ctrl组相比,APP/PS1组的表达分数明显减少(P<0.001);APP/PS1+MOX组相较于APP/PS1组,表达分数明显增加(P<0.001)。对三组海马区各个spot的代谢相关co-DEGs和突触相关co-DEGs的表达水平进行相关性分析,发现二者表达水平呈正相关(r=0.707,P<0.001)。进一步通过免疫荧光和蛋白免疫印迹对突触可塑性相关蛋白PSD95、SYN进行检测,与Ctrl组相比,APP/PS1组海马区的PSD95、SYN蛋白表达量显著减小(P<0.001,P<0.05),且CA1区和DG区的PSD95/SYN阳性共表达下降;APP/PS1+MOX组相较于APP/PS1组,海马区的PSD95、SYN蛋白表达量明显增加(P<0.001,P<0.05),且CA1区和DG区的PSD95/SYN阳性共表达上升。结论1.艾灸可改善APP/PS1小鼠学习记忆能力,抑制海马区病理标志物Aβ_(1-42)和p-Tau蛋白的产生。2.艾灸能促进海马区氧化磷酸化、丙酮酸代谢等多条代谢相关通路基因及线粒体内膜蛋白复合物基因的表达,并能提高海马区能量代谢产物的含量及改善线粒体结构。3.线粒体呼吸链复合体Ⅰ亚基可能是艾灸促进APP/PS1小鼠海马区能量代谢的关键靶点,且通过其提高的能量代谢可能与突触可塑性的改善相关。

第一部分:δ-阿片受体激活后对帕金森病模型发挥神经保护作用的研究目的:帕金森病是老年人常见的一种以运动功能障碍为主要特征的神经退行性疾病,发病人群主要集中在60岁以上的老年人。目前帕金森病经典的治疗方案是多巴胺替代治疗和抗胆碱能药物治疗,虽然可以缓解症状但仍有许多局限性。因此我们迫切的需要开发更多的更有效的治疗PD的药物。研究表明δ-阿片受体可能是潜在的治疗靶点,但仍需更多实验支持并探究机制,因此我们在这一部分探究了 δ-阿片受体激活后对帕金森病模型发挥的神经保护作用。方法:研究基于PC12细胞及C57BL/6小鼠,建立PD细胞及动物模型,设立对照组、PD 组、PD+DADLE 组、PD+DADLE+Naltrindole 组、PD+Naltrindole组。利用CCK-8法和LDH漏出率的检测,同时倒置显微镜下观察细胞形态,评估δ-阿片受体在MPP+诱导的细胞的神经保护作用。通过行为学实验评估运动症状、免疫荧光法测定黑质及纹状体区酪氨酸羟化酶,评估δ-阿片受体在MPTP诱导的小鼠的神经保护作用。结果:1、PC12细胞模型:用倒置显微镜观察结果显示,在MPP+、MPP++DADLE+Naltrindole组、MPP++Naltrindole组中观察到漂浮的细胞,对照组及MPP++DADLE组形态正常。CCK-8检测结果显示,与对照组(98.50%±1.17%)相比 MPP+组(52.50%±2.58%)细胞活力下降(P<0.01),与 MPP+组比较 MPP++DADLE 组(82.50%±3.08%)细胞活力增加(P<0.01)。LDH检测显示,与对照组(4.95%±0.24%)相比MPP+组(28.72%±1.49%)LDH泄漏率增加(P<0.01),与 MPP+组比较 MPP++DADLE 组(10.00%±3.08%)LDH泄漏率下降(P<0.01)。2、C57BL/6小鼠模型:行为学实验结果显示,MPTP组小鼠的运动距离(t=86.09,P<0.01)及平均速度(t=28.34,P<0.01)显著低于对照组,而MPTP+DADLE处理小鼠的运动距离(t=6.83,P<0.01)和平均速度显著(t=21.44,P<0.01)高于MPTP组小鼠。免疫荧光结果显示,与对照组比较,MPTP组小鼠黑质区(t=28.34,P<0.01)和纹状体区(t-30.50,P<0.01)TH阳性的细胞数显著减少。而与MPTP组小鼠比较,MPTP+DADLE处理小鼠的黑质区(t=33.80,P<0.01)和纹状体区(t=13.83,P<0.01)TH阳性的细胞数显著增加。结论:1、δ-阿片受体可改善MPP+诱导的PC12细胞的细胞形态、减轻细胞毒性、提高细胞活力;2、δ-阿片受体可改善MPTP诱导的C57BL/6小鼠运动障碍、减轻黑质及纹状体区多巴胺能神经元的损伤。第二部分:6-阿片受体激活后通过上调Nrf2抑制MPTP诱导的C57BL/6小鼠多巴胺能神经元中铁死亡的研究目的:虽然目前已知帕金森病的主要病理改变是黑质和纹状体中多巴胺能神经元的丢失,但这种改变的确切机制尚不清楚。有研究表明多巴胺能神经元的丢失可能与铁死亡密切相关。因此我们在这一部分探究激活δ-阿片受体在MPTP诱导的C57BL/6小鼠中的神经保护作用与铁死亡的关联及其潜在机制。方法:建立MPTP诱导的C57BL/6小鼠模型,设立对照组、MPTP组、MPTP+铁死亡抑制剂(Ferrostatin-1)组、MPTP+DADLE 组、MPTP+DADLE+Naltrindole组、MPTP+Naltrindole组。利用行为学实验评估运动症状,免疫荧光法测定黑质及纹状体区酪氨酸羟化酶。利用ELISA测定小鼠脑组织中丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平,评估脂质过氧化情况。利用透射电镜观察线粒体形态变化。采用WB,评估Nrf2、GPX4、SLC7a11等抗铁死亡蛋白的表达水平。结果:1、行为学实验结果提示,MPTP+F errostatin-1处理小鼠的运动距离(t=32.52,P<0.01)和平均速度(t=33.80,P<0.01)显著高于MPTP处理小鼠,且MPTP+F errostatin-1 组与 MPTP+DADLE 组比较运INCB018424配制动距离(t=1.19,P=0.26)无统计学意义。免疫荧光结果提示,MPTP+F errostatin-1处理小鼠的黑质区(t=21.44,P<0.01)及纹状体区(t=14.45,P<0.01)的酪氨酸羟化酶阳性细胞数显著高于MPTP处理小鼠。与MPTP+DADLE组比较,MPTP+Ferrostatin-1组的黑质区(t=1.55,P=0.16)及纹状体区(t=0.12,P=0.90)酪氨酸羟化酶阳性细胞数无统计学差异。2、通过ELISA测定,MPTP组小鼠的中脑黑质组织内MDA(t=25.48,P<0.01)及4-HNE(t=7.67,P<0.01)水平显著高于对照组。与MPTP组小鼠比较,MPTP+DADLE组小鼠的中脑黑质组织内MDA(t=24.19,P<0.01)及4-HNE(t=2.34,P<0.05)水平显著下降,MPTP+DADLE+Naltrindole 组与MPTP+DADLE 组比较 MDA(t=22.70,P<0.01)及4-HNE(t=2.87,P<0.05)水平显著升高。MPTP+F errostatin-1组小鼠的中脑黑质组织内MDA(t=31.15,P<0.01)及4-HNE(t=5.87,P<0.01)水平显著低于MPTP组小鼠。与MPTP+DADLE 组比较,MPTP+F errostatin-1 组的中脑黑质组织内 MDA(t=2.01,P=0.07)及4-HNE(t=2.51,P=0.06)水平无统计学差异。3、通过TEM检测了小鼠中脑黑质组织中神经元细胞内超微结构的改变,对照组正常形态的线粒体,线粒体脊和线粒体外膜完整。MPTP组的线粒体脊消失和线粒体外膜被破坏。MPTP+F errostatin-1处理的小鼠和MPTP+DADLE处理小鼠的中脑黑质神经元细胞内线粒体脊未见消失和线粒体外膜未被破坏,神经元细胞内线粒体形态完整。4、WB结果显示,与对照组比较,MPTP组的GPX4(t=178.70,P<0.01)、SLC7a11(t=40.36,P<0.01)、Nrf2 6.68,P<0.01)的表达水平显著降低。与MPTP组的小鼠比较,MPTP+DADLE组小鼠的中脑黑质组织中的GPX4(t=91.31,P<0.01)、SLC7a11(t=34.59,P<0.01)、Nrf2(t=16.13,P<0.01)表达水平显著升高,MPTP+DADLE+Naltrindole 组较 MPTP+DADLE 组的 GPX4(t=68.15,P<0.01)、SLC7a11(t=30.55,P<0.01)、Nrf2(t=8.15,P<0.01)表达水平又显著下降。MPTP+F errostatin-1组小鼠的中脑黑质组织中的GPX4(t=118.0,P<0.01)、SLC7a11(t=50.78,P<0.01)、Nrf2(t=19.84,P<0.01)表达水平显著高于MPTP组小鼠。同时MPTP+F errostatin-1组小鼠的中脑黑质组织中的 GPX4(t=2.36,P=0.07)、SLC7a11(t=0.64,P=0.55)、Nrf2(t=0.46,P=0.91)表达水平与MPTP+DADLE组无统计学意义。结论:1、δ-阿片受体与铁死亡抑制剂对MPTP诱导C57BL/6小鼠均具有神经保护作用;2、δ-阿片受体与铁死亡抑制剂对MPTP诱导C57BL/6小鼠均可抑制脂质过氧化水平及线粒体破坏且效果一致;3、δ-阿片受体可能通过上调Nrf2、SLC7a11、GPX4表达抑制了MPTP诱导C57BL/6小鼠多巴胺能神经元中的铁死亡。第三部分:δ-阿片受体激活后通过Nrf2-GPX4/SLC7a11通路抑制MPP+诱导的PC12细胞铁死亡的研究目的:铁死亡参与了帕金森病的发病机制。本研究在动物模型中发现δ-阿片受体(DOR)激活后通过Nrf2抑制铁死亡。于是本研究在细胞模型中进一步进行验证,探究激活δ-阿片受体是否通过Nrf2-GPX4/SLC7a11通路抑制铁死亡发挥抗帕金森病作用。方法:本研究构建MPP+诱导的PC12细胞模型,设立对照组、MPP+组、MPP++Ferrostatin-1 组、MPP++DADLE 组、MPP++DADLE+Naltrindole 组、MPP++Naltrindole组。采用CCK-8法和LDH漏出率检测,评估细胞毒性及活力。使用Western blot评估抗铁死亡蛋白(GPX4和SLC7a11)和Nrf2蛋白表达水平。使用ELISA测量丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平,评估脂质过氧化水平。selleckchem VX-445使用JC-1染色,在MPP+诱导的细胞中测定线粒体膜电位。利用SiRNA技术在PC12细胞模型中敲低Nrf2,激活DOR后评估细胞毒性及活力,测定GPX4、SLC7a11、Nrf2蛋白表达水平,评估脂质过氧化水平,测定线粒体膜电位。结果:1、细胞毒性及活力结果显示,与MPP+组相比,MPP++DADLE组的PC12细胞生存率显著增加(t=17.60,P<0.01)、LDH漏出率显著降低(t=18.62,P<0.01)。与MPP+组相比,MPP++F errostatin-1组的PC12细胞存活率显著增加(32.80%±1.79%,P<0.05)、LDH 泄漏率显著降低(22.70%±0.66%,P<0.05)。MPP++DADLE 组和 MPP++F errostatin-1 组的细胞存活率(t=10.56,P=0.26)无统计学意义。与MPP++DADLE组比较,MPP++DADLE+SiRNA(-)组的细胞生存率无统计学意义(t=0.19,P=0.85),但MPP++DADLE+SiRNA(Nr2)组的细胞生存率显著降低(t=15.80,P<0.01)。与 MPP++DADLE 组比较,MPP++DADLE+SiRNA(-)组的LDH漏出率无统计学意义(t=0.44 P=0.66)。但MPP++DADLE+SiRNA(Nrf2)组的LDH漏出率显著增加(t=14.30,P<0.01)2、WB结果显示,与对照组比较,MPP+组的GPX4(t=9.10,P<0.01)、SLC7a11(t=8.64,P<0.01)、Nrf2(t=3.92Prior history of hepatectomy,P<0.01)的表达水平显著降低。与 MPP+组比较,MPP++DADLE组中的 GPX4(t=5.35,P<0.01)、SLC7a11(t=6.80,P<0.01)、Nrf2(t=3.91,P<0.01)表达水平显著升高,但 MPP++DADLE+Naltrindole 组较MPP++DADLE 组的 GPX4(t=5.14,P<0.01)、SLC7a11(t=5.50,P<0.01)、Nrf2(t=4.00,P<0.01)表达水平又显著下降。MPP++Ferrostatin-1 组中的 GPX4(t=4.87,P<0.01)、SLC7a11(t=4.72,P<0.01)、Nrf2(t=3.38,P<0.01)表达水平显著高于MPP+组。同时MPP++F errostatin-1组与MPP++DADLE组的GPX4(t=2.73,P=0.052)、SLC7a11(t=058,P=0.59)、Nrf2(t=0.78,P=0.44)表达水平无统计学意义。与 MPP++DADLE 组比较,MPP++DADLE+SiRNA(-)组Nrf2(t=0.17,P=0.86)、GPX4(t=0.77,P=0.48)、SLC7a11(t=1.71,P=0.16)的表达水平无统计学意义。但 MPP++DADLE+SiRNA(Nrf2)组 Nrf2(t=5.49,P<0.01)、GPX4(t=4.13,P<0.01)、SLC7a11(t=7.27,P<0.01)的表达水平显著低于 MPP++DADLE 组。3、ELISA结果显示,在MPP+诱导的PC12细胞中MDA(t=19.50,P<0.01)及4-HNE(t=5.27,P<0.01)水平显著高于对照组。与MPP+组比较,MPP++DADLE 组(t=16.92,P<0.01)和 MPP++F errostatin-1 组(t=15.53,P<0.01)的MDA水平显著下降。与MPP+组比较,MPP++DADLE组(t=3.35,P<0.01)和 MPP++F errostatin-1 组(t=4.12,P<0.01)的4-HNE 水平显著降低。MPP++DADLE 组和 MPP++F errostatin-1 组间的 MDA(t=0.36,P=0.72)及4-HNE(t=0.26,P=0.79)水平无统计学差异。与 MPP++DADLE 组比较,MPP++DADLE+SiRNA(-)组的 MDA(t=0.11,P=0.91)及4-HNE(t=0.28,P=0.78)水平无统计学意义。但MPP++DADLE+SiRNA(Nrf2)组的 MDA(t=17.70,P<0.01)及 4-HNE(t=1.94,P<0.05)水平显著增加。4、线粒体膜电位结果显示,与对照组比较,MPP+组的膜电位水平显著下降(t=86.09,P<0.01)。与MPP+组比较,MPP++DADLE组的膜电位水平显著增加(t=35.52,P<0.01)。但 MPP++DADLE+Naltrindole 组较 MPP++DADLE 组显著降低(t=33.51,P<0.01)。MPP++F errostatin-1组的膜电位水平显著高于MPP+组(t=24.83,P<0.01)。MPP++Ferrostatin-1 组与 MPP++DADLE 组的膜电位水平无统计学意义(t=1.07,P=0.31)。与MPP++DADLE组比较,MPP++DADLE+SiRNA(-)组的线粒体膜电位水平无统计学意义(t=0.10,P=0.92),但 MPP++DADLE+SiRNA(Nrf2)组的线粒体膜电位水平显著增加(t=33.21,P<0.01)。结论:1、δ-阿片受体减轻MPP+诱导的PC12细胞的细胞毒性、提高细胞活力、同时抑制脂质过氧化并改善线粒体膜电位,Nrf2敲低后δ-阿片受体的上述作用被逆转;2、δ-阿片受体与铁死亡抑制剂通过上调Nrf2、SLC7a11、GPX4表达抑制了 MPP+诱导PC12细胞中的铁死亡,Nrf2敲低后δ-阿片受体的抗铁死亡作用被逆转;3、δ-阿片受体可能通过Nrf2-GPX4/SLC7a11通路抑制MPP+诱导PC12细胞中的铁死亡,发挥抗帕金森病作用。

目的 探讨脊髓背购买RepSox根神经节(dorsal root ganglion, DRG)中转录因子锌指X连锁复制C(zinc finger X-linked duplicated C,ZXDC)介导CCL2/CCR2信号通路对慢性压迫性神经损伤(chronic construction injury model, CCI)诱导神经性疼痛的作用及机制。方法 构建小鼠坐骨神经慢性压迫性损伤模型，免疫荧光染色、Western blot法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测正常情况和CCI造模后DRG中ZXDC及CCL2表达变化；将实验动物分为假手术(Sham)组、CCI+AAV-NC组和CCI+AAV-ZXDC siRNA组；Western blot法和免疫荧光染色检测各组小鼠CCI造模后各时间点DRG中ZXDC、CCL2和CCR2表达，RT-qPCR检测DRG中促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β mRNA表达，机械性缩足反射测试检测神经性疼痛行为改变。结果 ZXDC表达定位在DRG大、中、小神经元。CCI损伤后1～3天DRG中ZXDC和CCL2蛋白和mRNA表达显著增高，CCI后7天二者表达显著降低，ZXDC和CCL2mRNA表达量呈正相关(P均<0.05)。CCI后3天，与Sham组比较，CCI+AAV-NC组和CCI+AAV-ZXDC siRNA组ZXDC、CCL2、CCR2蛋白表达、TNF-α和IL-1β mRNA表达显著增高，其中CCI+AAV-ZXDC siRNA组较CCI+AAV-NC组ZXDC、CCL2、CCR2蛋白表达、TNF-α和IL-1β mRNA显著降低(P均<0.05)。与Sham组比较，CCI+AAV-ZXDC siRNA组和CCI+AAV-NC组CCI后各时间点机械缩足阈值均显著降低，其中CCI后7天，CCI+AAV-ZXDC siRNA组机械缩足阈值显著高于CCI+AAV-NC组(P均<0.05)。结论 脊髓背根神经节ZX购买Baf-A1DC基因敲减通过抑制CCL2/CCR2信号通路介导CCI诱导的神经selenium biofortified alfalfa hay性疼痛。