MAPK信号通路

目的 探讨瓜蒌皮注射液治疗稳定型心绞痛（SAP）的作用机制。方法 检索相关文献，获取制剂活性成分，采用SwissTargetPrediction数据库预测其靶点。利用GeneCards数据库获取SAP疾病靶点；利用Venny 2.1平台获取共有靶点；利用MetaScape软件对作用靶点进行基因本体论（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，利用Cytoscape 3.9. 1软件构建成分-靶点-通路网络，通过String数据库构建selleckchem Roxadustat蛋白相互作用网络；通过基因表达综合（GEO）数据库获取的差异表达基因和分子对接进行验证，采用PyMOL 2.3. 0软件进行可视化分析。结果 共获得制剂活性成分57个，靶点517个，其中26个作用于SAP。核心活性成分为黄酮类，如木犀草素、芦丁、木犀medieval London草苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和香叶木素-7-O-β-葡萄糖苷，核心靶点为TNF,FGF2,MMP-9,ICAM1,EGFR等。基因主要富集于37个GO功能（其中CFTR抑制剂生物过程20个，分子功能9个，细胞组成8个）及9条KEGG通路。验证结果表明，活性成分可特异性作用于部分疾病差异表达基因。核心活性成分与靶点的结合能均小于-10.6 kcal/mol。结论 瓜蒌皮注射液可能通过多种活性成分作用于多个特异性靶点，进而通过多通路发挥抗炎、抗氧化应激、抗凋亡作用，从而治疗SAP。

目的 观察补肾活血调神针刺法对肾虚痰瘀型脑梗死后轻度认知障碍患者精神行为症状和记忆执行功能的影响。方法 纳入86例脑梗死后轻度认知障碍患者,按随机数字表法分为两组,每组43例。对照组进行常规认知康复训练,观察组采用补肾活血调神针刺法联合常规认知康复训练进行治疗。比较两组治疗前后蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment, MoCA)评分、简易精神状态评价量表(mini-mental state examination, MMSE)评分、神经精神问卷(neTamoxifenuropsychiatric inventory, NPI)评分、Rivermead行为记忆量表(Rivermead behavioural memory test, RBMT)评分和执行缺陷综合征行为学评价测试(behavioral assessment of dysexecutive syndrome, BADS)评分的变化。比较两组治疗前后血清丙二醛(malondialdehyde, MDA)、晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products, AOPP)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)renal medullary carcinoma水平。结果 两组治疗后MMSE评分、MoCA评分、BADS评分和RBMT评分均较同组治疗前升高(P<0.05),NPI评分以及血清MDA、AOPP、IL-6和ILselleckchem VX-445-1β水平均较同组治疗前降低(P<0.05)。观察组治疗后MMSE评分、Mo CA评分、BADS评分和RBMT评分均高于对照组(P<0.05),NPI评分以及血清MDA、AOPP、IL-6和IL-1β水平均低于对照组(P<0.05)。结论 在常规认知康复训练基础上,补肾活血调神针刺法可改善肾虚痰瘀型脑梗死后轻度认知障碍患者的认知、执行和记忆功能,降低精神行为症状,降低氧化应激和炎症反应。

寻找更多目的 基acquired antibiotic resistance于Klotho/血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）信号通路探讨大蒜素对盐敏感性高血压（SSH模型大鼠肾脏的影响。方法 本实验时间为2022年2—6月。将24只健康SPF级Dahl盐敏感大鼠随机分为正常盐组、高盐组和高盐+大蒜素组，每组8只。正常盐组大鼠给予0.3%氯化钠饲料喂养。高盐组和高盐+大蒜素组大鼠给予8%氯化钠饲料喂养以制备SSH模型，在此基础上，高盐+大蒜素组大鼠给予大蒜素16 mg/kg口服。三组大鼠均干预4周。比较三组大鼠干预前及干预1、2、3、4周尾动脉收缩压，干预4周后肾功能指标[尿蛋白、血肌酐及肾脏重量/体质量（KW/BW）比值]、肾组织病理学改变、氧化应激指标[丙二醛、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）水平]和肾组织Klotho、AT1R表达水平及其mRNA、蛋白相对表达量。结果 干预1周，高盐组大鼠尾动脉收缩压高于正常盐组（P<0.05）；干预2、3、4周，高盐组大鼠尾动脉收缩压高于正常盐组，高盐+大蒜素组大鼠尾动脉收缩压低于高盐组（P<0.05）。干预4周后，高盐组大鼠尿蛋白、血肌酐、KW/BW比值高于正常盐组，高盐+大蒜素组大鼠尿蛋白、血肌酐、KW/BW比值低于高盐组（P<0.05）。HE染色结果显示，与正常盐组相比，高盐组大鼠肾间质伴有炎症浸润；与高盐组相比，高盐+大蒜素组大鼠肾脏病理损伤相对减轻，局部可见少量炎症细胞浸润。Masson染色结果显示，与正常盐组相比，高盐组视野内观察到大量胶原纤维沉积，肾组织纤维化严重；与高盐组相比IDN-6556纯度，高盐+大蒜素组大鼠肾组织纤维化明显减轻。干预4周后，高盐组大鼠肾组织丙二醛水平高于正常盐组，肾组织SOD、GSH水平低于正常盐组（P<0.05）；干预4周后，高盐+大蒜素组肾组织丙二醛水平低于高盐组，肾组织SOD、GSH水平高于高盐组（P<0.05）。干预4周后，高盐组大鼠肾组织Klotho表达水平及其mRNA、蛋白相对表达量低于正常盐组，AT1R表达水平及其mRNA、蛋白相对表达量高于正常盐组（P<0.05）；干预4周后，高盐+大蒜素组大鼠肾组织Klotho表达水平及其mRNA、蛋白相对表达量高于高盐组，AT1R表达水平及其mRNA、蛋白相对表达量低于高盐组（P<0.05）。结论大蒜素能有效改善SSH模型大鼠肾功能，减轻其肾组织损伤、胶原纤维沉积及肾脏氧化应激损伤，其机制可能与大蒜素调控Klotho/AT1R信号通路有关。

目的 观察达格列净联合二甲双胍治疗2型糖尿病的临床效果。方法 选取2019年4月—2020年8月北京首颐矿山医院收治的2型糖尿病患者140例，采用随机数字表法分为联合治疗组(n=70)及二甲双胍组(n=70)。二甲双胍组在常规饮食干预和运动治疗RP56976说明书基础上采用盐酸二甲双胍片治疗，联合治疗组在常规饮食干预和运动治疗基础上采用达格列净片联合盐酸二甲双胍片治疗，2组均治疗12周。比较2组治疗效果，治疗前后血糖[(空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))]水平、氧化应激反应指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]、脂代谢指标[体质指数(BMI)、血尿酸(UA)]、胰岛功能指标[空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素β细胞分泌指数(MCC950HOMA-β)]。结果 联合治疗组总有效率为94.29%,高于二甲双胍组的81.43%(χ~2=5.423,P=0.020)。治疗12周后，2组FBG、2 hPG及HbA_(1c)水平均低于治疗前，且联合治疗组低于二甲双胍组(P<0.01);2组SOD水平高于治疗前，MDA、UA、BMI均低于治疗前，且联合治疗组SOD水平高于二甲双胍组，MDA、UA、BMI低于二甲双胍组(P<0.01);2组FINS、HOMA-β均高于治疗前，HOMA-IR均低于治疗前，且联合治疗组FINS、HOMA-β高于二甲双胍组，HOMA-IR低于二甲双胍组(P<0.01)。结论 达格列净联合二甲双胍治疗2型糖尿病效果较好，可降低患者血糖，改善氧化应激反应Aβ pathology和调节脂代谢，并明显提高患者胰岛功能。

目的 探讨化瘀通络方联合电子艾灸对阵发性房颤消融术后气虚血瘀证的临床疗效。方法 将120例阵发性房颤患者随机分为对照组与治疗组各60例。对照组脱落4例，剩余56例患者术后给予西医常规治疗。治疗组脱落4例，剩余56例患者在对照组基础上，运用化瘀通络方联合电子艾灸治疗。比较两组治疗8周的中医疗效。运用超声诊断仪检测患者左心房前后径(left atrial anteriorpoE7080分子式sterior diameter, LA-ap)、左心房电机械传导时间(left atrial electromechanical conduction time, LAEMT)、右心房储器期应变(right atrial reservoir strain, RASr)的水平。运用24小时心电图仪测定患者房颤发作次数、总心搏数、最长持续时间的水平。检测两组治疗前后中性粒细胞/淋巴细胞的比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio, NLR)、单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇(monocyte/HDL-C ratio, MHR)水平。运用房颤患者生活质量量表(atrial fibrillation effect on quality-of-life, AFEQT)评估患者的生活质量。结果 患者在治疗8周后，治疗组的总有效率为94.64%,明显高于对照组的82.14%(P<0.05)。治疗后两组的LA-ap、LAEMT显著降低，RASr显著升高(P<0.05);治疗后治疗组的LA-ap、LAEMT低于对照组Membrane-aerated biofilter，RASr高于对DS-3201配制照组(P<0.05)。治疗后两组的房颤发作次数、总心搏数、最长持续时间明显低于治疗前，且治疗组较对照组更低(P<0.05)。治疗后两组的NLR、MHR低于治疗前，且治疗组较对照组更低(P<0.05)。治疗后两组的AFEQT及各项评分均显著升高，治疗组较对照组升高更明显(P<0.05)。结论 化瘀通络方联合电子艾灸可提高阵发性房颤消融术后气虚血瘀证的疗效，进一步减轻房颤症状，改善心房功能，提高患者的生活质量，可能与减轻炎症和氧化应激反应有关。

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)相关性胃炎患儿感染的Hp类型、胃黏膜闭锁蛋白阳性表达率及胃黏膜炎症程度间的关系。方法 选取2018年6月—2021年12月于我院接受胃镜检查并且确诊为Hp相关性胃炎的90例患儿作为研究对象。采用免疫印迹法检测患儿血清HZ-IETD-FMK分子式p抗体表达情况，对Hp进行血清学菌株分型，并观察患儿胃黏膜病理变化；采用免疫组织化学定量法检测胃黏膜闭锁蛋白阳性表达率，分析Hp菌株类型、胃黏膜闭锁蛋白阳性表达率及胃黏膜炎症程度间的关系。结果 Ⅰ型菌株感染患儿胃黏膜闭锁蛋白阳性表达率显著低于Ⅱ型及中间型(P<0.05),Ⅱ型与中间型比较无显著差异(P>0.05)。不同Hp菌株感染患儿胃黏膜炎症程度有显著差异(H=18.013,P<0.01),Ⅱ型轻于Ⅰ型及中间型(P<0.05),Ⅰ型与中间型差异无统计学意义(P>0.05)。胃黏膜轻、中、重度炎症患儿的闭锁蛋白阳性表达性率分别为80.0%、35.1%和11.6%,3种炎症程度患儿闭锁蛋白阳性表达率均有显著checkpoint blockade immunotherapy差异(χ~2=19.655,P<0.05)。结论 Hp相关性胃炎患儿的胃黏膜闭锁蛋白阳性表达率与Hp菌株类型及胃黏膜炎症程度有关，Ⅰ型菌株感染和胃黏膜重度炎症时闭锁蛋白阳性表达率最低；不同类型菌株感染所致胃黏膜炎症程度不同，Ⅱ型菌株感获悉更多染所致胃黏膜炎症程度最轻。Hp抗体分型检测或可预测胃黏膜紧密连接和炎症程度，胃黏膜闭锁蛋白有望成为治疗Hp相关性胃炎的重要靶点。

目的 观察麝香酮调控脂肪酸合成酶(Fas)/脂肪酸合成酶配体(FasL)信号通路对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞凋亡的影响，探讨陈树泉“辛温通络”理论治疗DCM的作用机制。方法 将SD大鼠分为空白组、DCM组、麝香酮低剂量组(0.68 mg/kg麝香酮)、麝香酮高剂量组(2.72 mg/kg麝香酮)、二甲双胍组(140 mg/kg二甲双胍)购买Emricasan、麝香酮高剂量+重组人FasL蛋白(rh-FasL)组(2.72 mg/kg麝香酮+0.017 mg/kg rh-FasL),每组12只。除空白组外，其他组均采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素方式构建DCM大鼠模型，建模成功后，给药1次/d,持续6周。末次处理结束后，检测各组大鼠空腹血糖、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS);采用苏木素-伊红(HE)染色法、Masson染色法分别检测心肌组织病理损伤及纤维化程度；采用分光光Anti-idiotypic immunoregulation度法检测心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量；采用TUNEL染色法观察心肌细胞凋亡情况；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测心肌组织中裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Fas、FasL蛋白表达。结果 与空白组比较，DCM组大鼠心肌组织病理损伤严重，空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达升高，LVEF、LVFS、SOD活性降低，差异有统计学意义(P<0.05);与DCM组比较，麝香酮低剂量组、麝香酮高剂量组、二甲双胍组大鼠心肌组织病理损伤减轻，空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达降低，LVEF、LVFS、SOD活性升高，差异有统计学意义(P<0.05);与麝香酮低剂量组比较，麝香酮高剂量组、二甲双胍组大鼠心肌组织病理损伤减轻，空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达降低，LVEF、LVFS、SOD活性升高，差异有统计学意义(P<0.05);与麝香酮高剂量组比较，麝香酮高剂量+rh-FasL组大鼠心肌组织病理损伤加剧，空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、3-MA作用Bax、Fas、FasL蛋白表达升高，LVEF、LVFS、SOD活性降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 麝香酮可能通过抑制Fas/FasL通路抑制DCM大鼠氧化应激及心肌细胞凋亡。

目的 了解当前热量限制和热量限制模拟物在炎症性疾病中的研究现状。方法 检索国内外相关研究的文献，对热量限制及热量限制模拟物影响免疫细胞、炎症反应及它在临床应用的相关研究进行综述并分析。结果 热量限制作为一种饮食疗法，通过限制每日的能量摄入，调节细胞代谢途径及能量模式而影响免疫系统和功能，减轻炎症反应程度及改善机体症状，它在衰老、2型糖尿病、心血管疾病、骨关节炎、神经退行性疾病中得到越来越多的重视。同时，研究发现一些热量限制模拟物如白藜芦醇、雷帕霉素、二甲双胍等在产生同热量限制相似效果的同时而不需要严格限制饮食。结论 目前对热量限制的研究较多，但目前Compound 3分子量仍无公认且统一的热量限制方案，使之难以在临床实践中应用；热量限制模拟物的出现，在产生同热量限制相似效果的同时而不需要严格限制饮食，更符合人体生MK-1775理并使患者受益。目前对这些药物如rishirilide biosynthesis何通过调节代谢途径来预防炎症有了一定的认识，其间关系复杂，未来可优先考虑将免疫代谢这一新领域提出的知识应用于预防与年龄相关疾病中的炎症，并将抗炎药物重新用作治疗与年龄相关疾病的治疗选择。

造血作用(Haematopoiesis)是不同类型血细胞在造血组织中增殖、分化并释放的复杂过程。血淋巴细胞是无脊椎动物主要的免疫细胞,其增殖和分化是机体免疫防御的核心LXH254体内实验剂量基础,也是维持免疫稳态的关键。造血组织是重要的免疫器官之一,其能够为血细胞活动提供环境。目前为止,对于长牡蛎机体内造血作用相关的研究较少,其造血作用发生位点尚不明确,造血作用调控机制仍不清晰,这严重限制了对长牡蛎免疫、造血作用研究,并进一步影响到病害防控相关工作的展开。本研究采用生物信息学、分子生物学、细胞生物学和免疫学等技术方法对长牡蛎(Crmedieval Londonassostrea gigas)造血位点进行鉴定并对其造血作用调控机制进行深入研究,明确了长牡蛎造血作用相关分子特征及功能,初步鉴定了长牡蛎造血作用相关位点,并探究了血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)对长牡蛎造血过程的调控作用,取得如下结果:1.确认了长牡蛎造血作用相关分子特征其在血淋巴细胞增殖中的调节作用在长牡蛎中鉴定得到增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),ATP结合盒转运蛋白G2(ATP-binding cassette transporter G2,ABCG2),血管内皮生长因子VEGF及其受体VEGFR的同源分子,上述分子均含有保守的功能结构域。Cg PCNA和Cg ABCG2在长牡蛎鳃组织和性腺中表达水平较高,分别分布于血淋巴细胞的细胞核内和细胞膜上。Cg VEGF和Cg VEGFR在鳃组织和血淋巴细胞中均有较高水平表达,分别分布于血淋巴细胞的细胞质中和细胞膜上。造血相关细胞因子r Cg Astakine刺激后,长牡蛎无粒细胞及鳃组织内Cg PCNA表达水平显著上升,且鳃组织内Cg PCNA与Ed U标记在细胞核中可以共定位分布。采用RNAi技术抑制Cg ABCG2表达,发现Ed U阳性细胞占总血淋巴细胞比例降低,且处于S期的血淋巴细胞比例显著下降。注射r Cg VEGF后,血淋巴细胞和鳃组织中Ed U阳性细胞数量均显著增多。灿AZD1152-HQPA体内实验剂量烂弧菌刺激后,长牡蛎血淋巴细胞中Cg PCNA、Cg ABCG2、Cg VEGF和Cg VEGFR的m RNA表达水平均显著上升。结果表明上述分子可能参与长牡蛎血淋巴细胞增殖过程。2.发现了靠近绞合区鳃丝基部是长牡蛎造血位点将长牡蛎鳃组织分为8个不同区域,利用q RT-PCR技术检测造血相关转录因子、细胞周期相关分子以及免疫效应分子等在不同区域鳃组织中表达情况。结果显示,造血相关转录因子(Cg GATA,Cg SCL,Cg Runx)、细胞增殖相关细胞因子(Cg Astakine)、细胞周期相关分子(Cg PCNA,Cg CDK2)以及潜在干祖细胞标记分子(Cg SOX_2,Cg ABCG2)在靠近绞合区的鳃组织中表达水平高于其他区域,而免疫效应分子防御素(Cgdefensin-1,Cgdefensin-2,Cg Bigdefensin)及细胞因子(Cg IL17-3,Cg IL17-6)等在靠近绞合区的鳃组织中表达水平低于其他区域。组织化学染色检测结果显示靠近绞合区的鳃组织中部分细胞的细胞核呈近圆形,具有核质比较大的特征。且该区域存在大量Ed U阳性细胞,这类细胞主要富集于内鳃瓣普通鳃丝顶端。通过Ed U滞留标记方法检测到该区域内少量细胞在标记后较长时间仍可被Ed U染色,且呈干细胞标记(Cg SOX_2)阳性。结果表明靠近绞合区鳃丝基部是长牡蛎造血位点,Cg SOX_2阳性细胞可能是干祖细胞样细胞。3.明确了VEGF-VEGFR-MAPK通路在造血位点细胞增殖和迁移中发挥调控作用灿烂弧菌刺激后,造血位点内Cg VEGF和Cg VEGFR的m RNA表达水平显著上升。采用RNAi技术抑制Cg VEGFR表达后使用r Cg VEGF刺激,循环血淋巴细胞中细胞周期相关分子(Cg PCNA,Cg CDK2)及造血相关转录因子(Cg GATA,Cg Runx)表达水平显著下降,且循环血淋巴细胞中Ed U阳性细胞所占比例显著下降。同时,造血位点内Ed U阳性细胞聚集且数量上升。造血位点内MAPK通路中关键激酶Erk和p38的磷酸化水平显著下降,且造血相关转录因子(Cg SCL,Cg Runx)及细胞迁移相关基质金属蛋白酶(Cg MMP)表达水平显著下降,基质金属蛋白酶抑制剂(Cg TIMP)表达水平显著上升。采用RNAi技术抑制Cg VEGFR表达后使用VEGFR激动剂牛磺胆酸钠刺激,检测到循环血淋巴细胞中细胞周期相关分子、造血相关转录因子以及循环血淋巴细胞中Ed U阳性细胞所占比例下降。造血位点内Ed U阳性细胞聚集,MAPK通路中关键激酶Erk和p38的磷酸化水平显著下降,造血相关转录因子及细胞迁移相关分子表达变化。注射Brivanib或Semaxanib抑制Cg VEGFR磷酸化抑制剂后使用r Cg VEGF刺激,同样检测到循环血淋巴细胞及造血位点内相应变化。上述结果表明,Cg VEGF与受体结合后介导MAPK通路的激活并调节下游造血相关转录因子及细胞迁移相关基质金属蛋白酶表达,参与调控长牡蛎造血位点内细胞增殖及迁移。综上所述,Cg PCNA、Cg ABCG2、Cg VEGF和Cg VEGFR进化保守并参与长牡蛎细胞增殖的调节,长牡蛎造血位点位于靠近绞合区鳃丝基部,且VEGF-VEGFR-MAPK通路参与调控造血位点中细胞增殖和迁移过程。本研究为深入研究血淋巴细胞的发生发育过程及其在贝类免疫防御中的作用奠定了重要基础,并为水产动物疾病防控相关研究提供理论支持。

目的 探讨SMRACAD1对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法对癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库中373个胃癌组织和32个正常组织的SMRACAD1表达进行差异分析及京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）富集分析，采用蛋白印迹法（Western blot,WB）和实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chauto-immune responseain reaction,qPCR）检测SMRACAD1在人正常胃黏膜上皮细胞（GES-1）、人胃癌细胞（HGC-27）和人胃腺癌细胞（AGS）的表达。构建AGS细胞下调SMRACAD1表达和空白对照模型，平板克隆和CCK-8实验检测AGS细胞的增殖能力，划痕实验检测迁移能力，Transwell实验检测迁移和侵袭能力。WB检测SMRACAD1下调后对上皮-间充质转化（epithelial-mesenchyPR-171分子式mal transition,EMT）相关蛋白表达（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、PD-0332991试剂Snail）及PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。结果 SMRACAD1在胃癌组织和AGS细胞中高表达。下调SMRACAD1表达抑制了AGS细胞增殖、侵袭和迁移能力（P <0.05），抑制了AGS细胞EMT过程和PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活。结论SMARCDA1在胃癌组织和胃癌细胞系中表达上调，通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活下调SMRACAD1表达可抑制胃癌细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT。