MAPK信号通路

目的：观察对鼻咽癌同步放疗患者应用信息-动机-行为技巧(IMB)模型的健康教育联合张口锻炼自我管理干预的效果，评估其对患者癌性疲乏及自我效能的影响，为临床干预该疾病提供参考依据。方法：选择拟接受同步放化疗的85例鼻咽癌患者群体作为本次研究对象，按照入院先后顺序并结合医院年收治患者量将其随机分为对照组43例和观察组42例。对照组实施常规护理干预，观察组在对照组基础上施行基于IMB模型的健康教育联合张口锻炼自我管理，比较两组患者干预前后癌因性疲乏(CFS评分)及自我效能评分(SUPPH评分),评估干预前后患者生活质量评分(FACT-G评分)。结果：(1NN2211生产商)干预前两组CFS评分比较，差异无统计学意义(P>0.05);干预后观察组患者CFS评分低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.0Raf抑制剂5)。(2)干预前两组患者SUPPH评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后观察组患者SUPPH的评分高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)干预前两组FACT-G评分比较Medical alert ID差异无统计学意义(P>0.05);干预后观察组患者FACT-G评分高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：对鼻咽癌同步放化疗患者而言，采取IMB模型健康教育联合张口锻炼的自我管理干预临床成效显著，与常规护理干预相比，该方式能够明显减轻患者的癌因性疲乏程度，同时还可以提高患者的自我效能及生活质量。

目的 探究德谷门冬双胰岛素（IDegAsp）与甘精胰岛素（IGlar）治疗口服降糖药控制不佳2型糖尿病（T2DM）的临床疗效。方法 以2020年3月-2022年3月天津市武清区人民医寻找更多院收治的84例口服降糖药控制不佳T2DM患者为研究对象，采用随机数字表法分Cardiac biomarkers为IDegAsp组（42例）和IGlar组（42例），IDegAsp组应用德谷门冬双胰岛素治疗，IGlar组给予甘精胰岛素治疗，比较两组血糖指标[糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 hPBG）]、血糖波动情况[最大血糖波动幅度（LAGE）、餐后血糖波动幅度（PPGE）]、胰岛功能[空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）]、体NVP-TNKS656纯度重指数、日平均胰岛素剂量、不良反应。结果 两组治疗后HbA1c、FPG、2 hPBG水平低于治疗前，且IDegAsp组低于IGlar组（P<0.05）;IDegAsp组LAGE、PPGE小于IGlar组（P<0.05）;IDegAsp组FINS高于IGlar组，HOMA-IR低于IGlar组（P<0.05）；两组治疗后体重指数均大于治疗前，但IDegAsp组体重指数小于IGlar组，且日平均胰岛素剂量少于IGlar组（P<0.05）;DegAsp组不良反应发生率低于IGlar组（P<0.05）。结论 IDegAsp与IGlar对口服降糖药控制不佳T2DM患者均具有确切降糖作用，但IDegAsp的降糖效果更为显著，其用药剂量更少，可减少胰岛素治疗引起的血糖波动及体重变化，改善胰岛功能，降低低血糖等发生风险。

研究背景糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)作为糖尿病最常见的心血管并发症之一,是指不伴随高血压和冠状动脉等心血管疾病下心脏的结构和功能受到损伤。临床上主要表现为心脏扩大、心肌舒张及收缩功能下降,是糖尿病患者心衰及猝死的重要原因。研究表明,(前)肾素受体[(pro)renin receptor,PRR]是肾素的特异性受体,作为RAS系统的重要组分,是糖尿病发病及其导致终末器官损害的关键因素。焦亡,作为一种伴随炎症级联反应的新型细胞死亡方式,也参与DCM病理过程。此外,Netosis,中性粒细胞抵御外界刺激的形式,可由焦亡炎症分子激活,依旧参与了 DCM病理过程。但关于DCM的现有研究中,尚未有研究探讨PRR是否参与DCM中心肌细胞焦亡以及PRR是否通过影响Netosis的产生及调控焦亡-Netosis环路影响DCM心肌细胞焦亡,故探讨PRR对DCM心肌细胞焦亡的影响及其机制,可能对于治疗DCM提供新的靶点和思路。研究目的1.通过构建糖尿病心肌病大鼠模型,观察DCM心肌组织中PRR、caspase-1NSC 125973作用、IL-1β、IL-18等焦亡相关分子的表达情况;2.通过构建过表达PRR的腺病毒载体,观察PRR过表达对DCM心肌组织中caspase-1、IL-1β、IL-18等焦亡相关分子表达水平、DCM心功能的影响;3.通过提取原代心肌细胞,构建过表达PRR的腺病毒载体,观察原代心肌细胞中PRR与caspase-1、IL-1β、IL-18等焦亡相关分子的表达情况,并收集细胞上清液刺激中性粒细胞,观察PRR过表达对高糖刺激下的中性粒细胞NETs的影响。接着阻断焦亡通路,观察PRR过表达对NETs形成的影响;4.通过中性粒细胞强刺激剂PMA刺激中性粒细胞产生NETs,提取NETs与原代心肌细胞孵育,观察NETs对心肌细胞焦亡的影响。研究方法1.PRR过表达腺病毒载体构建:于Genbank基因库中查询大鼠PRR基因序列(Gene ID:302526),并授权上海吉玛公司构建PRR基因过表达载体[由腺病毒(adenovirus)包被],同时构建空病毒载体Ad-EGFP作为基因过表达的对照。2.DCM大鼠模型构建:适应性喂养60只8周龄的Wistar大鼠。一周后,随机分为4组:对照组、DCM组、Ad-EGFP组、Ad-PRR组,其中DCM组、Ad-EGFP 组、Ad-PRR 组禁食 过夜后,于腹腔内注射高剂 量链脲佐菌素(STZ)(60mg/kg)。1周后,若测得血糖>11.1mmolCaptisol生产商/L,且伴有多饮、多尿、多食等典型糖尿病症状,则判定为糖尿病模型造模成功。继续喂养12周后,行超声检查各组大鼠心功能,当出现心腔扩大,且伴有收缩功能减弱则视为DCM造模成功。随后,DCM组、Ad-EGFP组、Ad-PRR组分别经尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)、Ad-EGFP(1 × 109fu/100μL,PBS 溶解)、Ad-PRR(1 × 109fu/100μL,PBS溶解)。病毒注射2周后,每组随机选取大鼠数量的一半检测病毒转染效率。病毒注射4周后,将各组大鼠麻醉后行超声检测心功能,并取材以备后续实验。3.分别于造模前、后测量大鼠体重、血糖。4.心功能检测:慢病毒注射4周后使用VEVO770成像系统检测各组大鼠心功能。检测前使用3%水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉大鼠,并剔除毛发以暴露胸部。5.采用免疫组织化学染色法观察心肌组织中PRR、TGF-β、胶原Ⅰ,胶原Ⅲ等纤维化蛋白的表达量。6.采用HE染色法观察心肌组织结构变化。7.采用免疫组织化学染色法观察心肌组织中caspase-1、IL-1β、IL-18等焦亡蛋白的表达量。8.原代心肌细胞提取:取0～3日龄乳鼠心脏,并用预冷的PBS冲洗,剪碎,两步法消化后,过滤留取上清液,以1000rpm、25℃离心10 min。使用差速贴壁法留取较纯的心肌细胞,再用心肌细胞培养液悬浮。悬浮后接种至六孔板。9.原代心肌细胞干预:将原代心肌细胞分为正常组、高糖组、AD-EGFP组、AD-PRR组,其中,Ad-PRR组及Ad-EGFP组在分别转染Ad-PRR、Ad-EGFP后,同高糖组一起给予高糖刺激,观察PRR过表达对caspase-1、IL-1β、IL-18等焦亡相关蛋白的影响。10.应用免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织及心肌细胞中PRR、caspase-1、IL-1β、IL-18等分子的蛋白表达水平。11.中性粒细胞提取:提取大鼠外周新鲜抗凝全血,分别加入试剂A,B,离心机4℃ 700g离心30min。离心结束后可见试管中出现明显的双层白色细胞层,其中上层细胞为单核细胞层,下层细胞为中性粒细胞层。用吸管小心吸取中性粒细胞层于离心管中,清洗再离心以纯化。12.NETs激发:应用PMA刺激中性粒细胞激发NETs,并提取纯化NETs刺激原代心肌细胞,检测其焦亡相关蛋白的表达。13.应用ocular infection酶联免疫吸附实验(ELISA)检测心肌细胞培养上清液中IL-1β、IL-18的含量。14.统计学分析:使用GraphPad 9.0软件处理各组数据,用平均数±标准差表示各组实验数据,采用单因素方差分析法分析多组数据间的相互比较。其中,P<0.05判定为差异有统计学意义。研究结果1.在DCM大鼠心肌组织中PRR表达水平升高,焦亡相关蛋白caspase-1、IL-1β、IL-18等表达水平增加。2.过表达PRR可明显增加DCM大鼠心肌组织中胶原纤维沉积,恶化DCM心功能。3.原代心肌细胞过表达PRR可以促进中性粒细胞NETs的产生,使用焦亡封闭受体孵育心肌细胞发现中性粒细胞NETs产生减少。4.NETs可加重PRR过表达基础上的心肌细胞焦亡程度,加重糖尿病心肌病心肌病变。结论及意义在DCM模型中,高血糖可刺激PRR表达升高并伴随DCM焦亡、心肌纤维化等水平升高。过表达PRR明显增加DCM心肌组织中焦亡水平及心肌纤维化水平,进而加重DCM心功能损伤。同时心肌细胞PRR过表达可刺激中性粒细胞NETs产生,反之NETs又加重心肌细胞焦亡,且阻断焦亡通路中性粒细胞NETs产生减少,这表明PRR通过调控焦亡-NETs环路参与了 DCM心肌焦亡,加重糖尿病心肌病心肌损伤。这可能为DCM的治疗提供新思路和靶点。

目的:探讨糖醛酸代谢相关酶二羰基/L-木酮糖还原酶(dicarbonyl and L-xylulose reductase, DCXR)对人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma, ccRCC)细胞增殖、迁移的影响及其潜在机制，并检测DCXR表达水平与肾癌患者的临床相关性。方法:利用生物信息学Tofacitinib化学结构检测DCXR在泛癌及肾癌中的表达情况。应用定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白质印迹法方法，检测2022年6月30日—2023年1月30日期间解放军总医院第一医学中心收集的30例新鲜ccRCC组织与配对的癌旁组织，同时检测人ccRCC细胞株786-O、ACHN及人胚肾细胞株293T中DCXR的表达情况。将DCXR过表达载体分别转染入786-O、ACHN细胞，利用qRT-PCR与蛋白印迹法检测过表达效率，CCK-8(cell counting kit-8)实验、克隆形成实验检测细胞增殖；划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移。对肾癌组织芯片进行免疫组织化学染色及临床相关性分析。最后通过GSEA富集分析预测DCXR可能参与调节的信号通路。结果:生物信息学显示肾癌中DCXR显著下调。在mRNA及蛋白水平上Cell Culture Equipment，肿瘤组织DCXR表达低于配对的癌旁肾组织，差异有统计学意义(P<0.05)。肾癌细胞786-O、ACHN中DCXR表达较人胚肾细胞低。过表达DCXR组786-O、ACHN细胞增殖活力及细胞克隆率均低于空载对照组，差异有购买Decitabine统计学意义(P<0.05)。过表达DCXR组786-O及ACHN细胞划痕愈合面积及Transwell细胞迁移数均低于空载对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。通过对本中心ccRCC组织芯片染色及相关临床数据分析显示，DCXR表达情况与ccRCC预后相关(P<0.05)。结论:DCXR在ccRCC中表达下降，过表达DCXR可抑制ccRCC的细胞增殖、迁移能力，并可能作为预测患者预后判断的生物学标记物。

2019年出现的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)极大地改变了人们的日常生活,已经在全球造成超过6亿病例和600万死亡例。与细胞中的脱氧核糖核酸(DNA)分子不同,在SARS-CoV-2微粒中,腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)和胸LBH589分子量腺嘧啶(T)这四种碱基被编码为RNA分子链。充分了解病毒的RNA分子结构和功能对于了解SARS-CoV-2在人体细胞的感染过程至关重要。在实现RNA单碱基测序的多种方法中,以纳米孔为基础的测序方法已成为第三代测序方法的代表。然而,单碱基酶在纳米孔中停留时间缩短,这导致该方法受到信号差的限制。近年来,针尖增强拉曼光谱(TERS)已成为表征各种核碱基纳米粒子、病毒和细菌的强大分析工具。在本研究中,使用了TERS技术对SARS-CoV-2分离的RNA片段进行纳米级成像。主要研究内容与相关结论如下:1)对四种标准碱基(Medical nurse practitionersA、T、G、C)样品进行TERS测试,结果发现TERS探针在碱基上不同位置时测到的TERS光谱的峰位和峰强均有较大的变化。为了解释上述现象,使用第一性原理,建立了金/银原子分别作用于四种碱基(A、T、G、C)不同位置时可能的几何结构模型,对不同振动模式的拉曼强度进行了计算。计算结果表明,金属原子作用在碱基上不同位点时改变了化学键的长度,从而导致不同振动模式的拉曼强度产生明显变化。理论计算的结果和TERS在碱基上不同位CH-223191置测试到的TERS光谱变化吻合较好。2)对四种标准碱基(A、T、G、C)样品以及假病毒微粒进行了远场拉曼光谱测试,参照四种标准碱基的拉曼光谱,对含有四种碱基(A、T、G、C)的假病毒微粒的远场拉曼光谱进行了特征峰值的指认,并完成初步归属问题。在室温环境下,使用TERS技术对SARS-CoV-2 RNA微粒进行了纳米尺度的高分辨率成像。针对同种碱基的TERS光谱变化较大的困难,可以通过计算TERS峰位相对于A、T、G、C碱基TERS标准峰位的最小均方根误差来确定核酸碱基中不同位置的碱基类型。获得基因片段后,通过搜索Gen Bank数据库确定核苷酸坐标。

目的 比较免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitor,ICI）联合放化疗与同步放化疗治疗晚期食管癌的疗效及安全性。方法 回顾性分析2019年1月至2023年1月于安徽医科大学第二附属医院接受治疗的67例晚期食管癌患者的临床资料。根据治疗方案不同将纳入患者分为联合组（n=35）和放化疗组（n=32）。比较两组患者的无进展生存（progress fGalunisertib生产商ree survive,PFS）、客观缓解率（objeEmpagliflozin体内实验剂量ctive remission rate,ORR）、疾病控制率（disease controBiomimetic scaffoldl rate,DCR）和不良反应。结果 联合组患者的中位PFS显著长于放化疗组（12.6个月vs. 6.3个月，χ~2=16.288,P<0.001）；联合组患者的ORR显著高于放化疗组（54.3%vs. 21.9%,P=0.011）；联合组患者的DCR显著高于放化疗组（77.1%vs. 53.1%,P=0.045）。联合组患者的治疗相关不良反应及放化疗相关不良反应发生率均显著低于放化疗组（P<0.05）；联合组出现免疫相关不良反应11例，均为1～2级不良反应。结论 ICI联合放化疗可提高晚期食管癌患者的疗效，不良反应可接受。

目的:探讨瑞马唑仑复合阿芬太尼在无痛宫腔镜手术中的麻醉效果和安全性。方法:选取2022年5月～2022年10月本院收治的100例拟行宫腔镜检查的患者,采用随机数字表法将其分为瑞马唑仑复合阿芬太尼组(RA组,n=50)和丙泊酚复合阿芬太尼组(PA组,n=50)。两组患者诱导前均静脉注射阿片类镇痛药物阿芬太尼10ug/kg,麻醉诱导开始后RA组患者静脉泵注苯磺酸瑞马唑仑6mg·kg~(-1)·h~(-1),PA组患者静脉注射丙泊酚1.5mg/kg。记录两组患者入室(T_0)、改良警觉/镇静评分(MOAA/S)为0时(T_1)、扩张宫颈(T_2)、手术结束(T_3)、麻醉苏醒(T_4)时间点的心率(HR)、平均动脉压(MAP)、血氧饱和度(Sp O_2)、呼吸频率(RR)变化情况,记录两组麻醉诱导时间、手术时间、麻醉苏醒时间,比较两组注射痛、呼吸抑制、低血压、低氧血症、术中体动、咳嗽等不良反Healthcare-associated infection应发生情况,记录两组术后6h访视时的疼痛评分视觉模拟评分法(VAS)、术后恶心呕吐(PONV)发生率情况。结果:组间比较,RA组患者在T_1、T_2、T_3、T_4时刻的HR、MAP、Sp O_2明显高于PA组,差异有统计学意义(P<0.05),两组组间的RR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。组内比较,RA组:与T_0时刻点的HR、MAP和Sp O_2相比较,T_1、T_2时刻的HR、MAP和Sp O_2下降,差异有统计学意义(P<0.05),组内不同时间点的RR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PA组:与T_0时刻点的HR、MAP和Sp O_2相比较,T_1、T_2、T_3、T_4时刻的HR、MAP和Sp O_2下降,差异有统计学意义(P<0.05)。组内不同时间点的RR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RA组麻醉诱导时间大于PA组,麻醉苏醒时间小于PA组,差异有统计学意义(P<0.05),两组手术时间Tamoxifen核磁比较差异无统计学意义(P>0.05)。RA组注射痛、呼吸抑制、低血压和低氧血症发生率低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05)。RA组和PA组患者术中体动、咳嗽发生率差异无统计学意义(P>0.05)。RA组和PA组患者术后VAS评分、PONV发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在使用同剂量阿芬太尼的基础上,瑞马唑仑在无痛宫腔镜诊疗中可提供与丙泊酚相似的麻醉效果,同时还具有血流动力学稳定、低氧血症发生率低、术后苏醒迅速GNE-140浓度、并发症少等特点,具有可靠的安全性,可在临床推广应用。

为提高三角帆蚌采珠副产物的利用率，本研究开发利用蚌肉多糖（Hyriopsis cumingii PFamilial Mediterraean Feverolysaccharide， HCP），探究了蚌肉多糖对正常细胞的增殖迁移效果和对UVB损伤细胞的修复作用。采用DEAE纤维素-52阴离子交换、葡聚糖G-100凝胶和纳滤法分离纯化蚌肉多糖，采用高效液相色谱、高效凝胶渗透色谱和红外光谱对各组分进行结构检测，并通过细胞增殖实验、细胞划痕实验、UVB损伤实验、蛋白表达检测探究多糖组分的抗UVB损伤效果及作用机制。结果表明，分离纯化得到了三个均一的多糖组分，其中组分2（HCP-2）是蚌肉多糖中对细胞增殖发挥主要作用的组分，且能够促进HaCaT细胞迁移；随着HCP-2浓度的增加，促进UVB损伤细胞活力恢复的效果也越明显；在样品浓度相同的情况下，修复效果优于保护效果；HCP-2上调了抗E7080凋亡蛋白bcAntineoplastic and I抑制剂l-2表达，抑制了凋亡相关蛋白casp9、p-Akt、p-p38表达，说明HCP-2能够通过调控UVB损伤后的细胞凋亡来修复HaCaT细胞。综上所述，蚌肉多糖能够抑制细胞凋亡，为后续在食品、保健品等领域的开发应用提供理论基础。

目的：探讨CXCR4抑制剂AMD3100对奥沙利Elexacaftor细胞培养铂耐药的影响及其作用机制。方法：构建奥沙利铂耐药细胞HCT116;q-PCR和Western blot检测耐药组与对照组CXCR4表达及PI3K-AKT信号通路磷酸化水平。q-PCR和Western blot检测CXPI3K/Akt/mTOR抑制剂CR4抑制剂AMD3100刺激上述细胞系后PI3K-AKT信号通路磷酸化水平变化。CCK8检测AMD3100抑制CXCR4或联合应用AKT抑制剂LY294002对奥沙利铂耐药细胞的耐药性影响。结果：不同浓度奥沙利铂刺激后，耐药组细胞活性无显著变化，而对照组细胞活性随奥沙利铂浓度增加而显著下降。q-PCR和Western blot检测发现耐药组细胞CXCR4表达和PI3K-AKT磷酸化水平显著上升（P<0.05）。给予CXCR4抑制剂AMD3100后，CXCR4表达和PI3K-AKT磷酸化水平显著下降（P<0.05）。结论：CXCR4通过激活PI3K-AKT信号通路在结肠癌奥沙利铂耐药中发挥作用。AMD3100能够增强耐药细胞对奥沙利铂的敏感性，可能成为对抗结肠癌化疗耐immunochemistry assay药的潜在治疗药物。

目的:探讨振幅整合脑电图(aEEG)对新生儿低血糖脑损伤的早期诊断和预后评估的价值。方法:选择2021年5月至2022年8月在我院NICU住院的60例低血糖新生儿作为观察组，另选取同期本院出生60例无脑损伤的新生儿作为对照组。比较观察组与对照组aEEG监测结果，并分析aEEG监测结果异常程度与患儿患病风险的相关性。根据神经评分法(NBNA)评分结果将观察组患儿细分为预后良好组与预后较差组，比较两组aEEG监测结果，并分析aEEG监测结果LY2835219 IC50异常程度与患儿预后的相关性。结果:观察组与对照组aEEG背景活动与连续性评估结果存在明显差异(P<0.05);预后良好组与预后较差组aEEG背景活动与连续性评估结果存在selleck明显差异(P<0.05)。相关性分析结果显示，aEEG背景活动异常程度及连续性异常程度均与新生immune priming儿低血糖脑损伤的发病风险呈正相关(P<0.05);且与新生儿低血糖脑损伤的预后结局负相关(P<0.05)。结论:新生儿低血糖脑损伤aEEG监测结果与未发生脑损伤的新生儿存在较大差异，临床可通过对新生儿进行aEEG监测来评估其低血糖脑损伤的发生风险，同时还能对患儿治疗结局进行预测，为相关治疗方案的制定与改善提供充分数据参考。