MAPK信号通路

研究背点击此处景:骨骼中调节骨形成的成骨细胞和调节骨吸收的破骨细胞之间维持着动态的平衡,这一过程被称为骨稳态。骨稳态一旦被破坏,如破骨细胞骨吸收活性增高会导致骨质疏松症。目前,临床上用于抑制破骨细胞骨吸收功能的双膦酸盐、降钙素类和雌激素替代疗法有一定的疗效,但是其药物副作用限制了它们的应用。因此,寻找新的治疗药物用于治疗破骨细胞相关疾病至关重要。近期研究表明,破骨细胞通过整合素黏附于骨基质形成密封区,由靠近骨表面的破骨细胞膜组成的褶皱膜释放质子和蛋白酶形成酸性微环境。因此,本研究针对破骨细胞的整合素蛋白和酸性微环境设计装载抗整合素药物Cilengitide的酸敏感纳米材料并验证其作用。研究目的:本研究的目的是探究Cilengitide对RANKL诱导的破骨细胞分化和黏附作用的影响,并进一步探究其分子机制。此外,我们根据破骨细胞骨吸收酸性微环境的特质,将Cilengitide和具有酸敏感特性的纳米材料相结合,进一步探究负载Cilengitide的酸敏感纳米材料后对RANKL诱导的破骨细胞分化和骨吸收的抑制作用,为Cilengitide应用于骨质疏松症提供了理论基础。研究方法:以RANKL诱导的骨髓来源的巨噬细胞分化为破骨细胞为模型,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色实验、肌动蛋白环(F-actin)染hepatolenticular degeneration色实验、骨吸收陷窝实验来验证Cilengitide对破骨细胞生成和骨吸收能力的影响;通过免疫印迹实验(Western Blot)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)、细胞黏附实验检测Cilengitide对破骨细胞生成和黏附相关通路的影响。并且基于Cilengitide对破骨细胞的作用,我们设计了酸敏感的生物材料并通过上述所提及的实验进一步检测装载Cilengitide的生物材料对破骨细胞分化和骨吸收作用的影响。实验结果:Cilengitide能够抑制RANKL诱导的破骨细胞的生成,尤其作用于破骨细胞分化的后期阶段。此外,Cilengitide能够抑制破骨细胞F-actin环的形成以及破骨细胞的骨吸收功能。黏附实验结果显示,Cilengitide明显抑制破骨细胞和骨基质蛋白的黏附。Cilengitide通过抑制整合素αvβ3下游的FAK/Src信号分子进而抑制破骨细胞的骨黏附功能,进而抑制破骨细胞骨吸收作用。最后,通过酸敏感纳米材料和Cilengitide结合应用于破骨细胞的分化阶段,结果显示,CLG@MSN-CS能够明显抑制破骨细胞的形成、F-actin的生成和骨吸收能力。结论:CileFer-1体内ngitide通过阻断αvβ3介导的FAK/Src信号通路抑制破骨细胞黏附和骨吸收能力;酸敏感纳米材料应用加强了Cilengitide的抑制作用,为后续的研究和应用提供了基础。

目的:探讨无症状绝经后子宫内膜增厚女性发生子宫内膜癌的相关高危因素,并探究无症状绝经后子宫内膜增厚女性较大可能发生子宫内膜恶性病变的子宫内膜厚度值。方法:回顾性分析2020年1月-2022年6月在河北北方学院附属第一医院门诊就诊的无症状绝经后但经阴道彩超提示子宫内膜增厚并于我院进一步行宫腔镜检查及子宫内膜活检的女性,收集并记录其相关资料Mass media campaigns,包CP-456773浓度括子宫内膜厚度、年龄、月经初潮年龄、绝经年龄、绝经时长、孕次、产次、BMI、子宫内膜活检病理结果、有无合并高血压及糖尿病,通过纳入标准及排除标准,符合研究标准的共125例。将病理结果分为子宫内膜良性病变和子宫内膜恶性病变两类,采用独立样本t检验或χ~2检验分析两类患者的一般临床资料。采用二元Logistic回归分析影响子宫内膜发生恶变的危险因素,并应用ROC曲线预测无症状绝经后子宫内膜增厚女性较大可能发生子宫内膜恶性病变的子宫内膜厚度值。结果:57.6%无症状绝经后子宫内膜增厚女性的病理结果为子宫内膜息肉。子宫内膜厚度、产次、糖尿病对子宫内膜发生恶变有显著影响(P<0.05)。二元Logistic回归分析显示,子宫内膜厚度及糖尿病是无症状绝经后子宫内膜增厚女性子宫内膜发生恶购买Entinostat性病变的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示无症状绝经后子宫内膜增厚女性ET=11.5mm时曲线下面积最大为0.757,灵敏度为1.000,特异度为0.470.结论:无症状的绝经后子宫内膜增厚女性最常见的病理类型为子宫内膜息肉。子宫内膜厚度及糖尿病是无症状绝经后子宫内膜增厚女性发生子宫内膜恶性病变的独立危险因素。当ET≥11.5mm时无症状绝经后子宫内膜增厚女性发现子宫内膜恶性病变的可能性较大。

目的 探究血清组织蛋白酶S(Cat S)和血小板反应蛋白-1(TSP-1)对消化道早癌患者内镜黏膜下剥离术（ESD）术中出血的诊断价值。方法 选取2019年6月-2022年6月在中国人民解放军总医院第一医学中心消化科收治的110例消化道早癌患者作为研究对象，根据患者术中的出血情况将其分为发生组（n=25）和未发生组（n=85），比较2组血清Cat S、TSP-1水平。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清Cat S、TSP-1水平对消化道早癌患者ESD术中出血的预测价值，采更多用logistic回归分析影响消化道早癌患者ESD术中出血的因素。结果 发生组患者合并溃疡比例（48.00%）和肿瘤直径[（3.04±0https://www.selleck.cn/products/Fulvestrant.html.17）cm]较未发生组[24.71%、（2.53±0.13）cm]高，差异均有统计学意义（t=4.992、16.025,P均<0.05）。发生组患者血清Cat S水平[（1.58±0.36）pg/mL]较未发生组[（1.14±0.21）pg/mL]高，TSP-1水平[（1.22±0.24）μg/L]较未发生组[（1.69±0.42）μg/L]低，差异均有统计学意义（t=7.669、7.128,P均<0.05）。ROC分析显示，Cat S、TSP-1水平诊断消化道早癌患者发生术中出血的曲线下面积（AUC）分别为0.793(95%CI:0.672～0.915)、0.768(95%CI:0.647～0.889)，二者联合检测的AUC为0.881(95%CI:0.789～0.973)。多因素logenetic servicegistic回归分析显示，肿瘤直径、Cat S水平是影响消化道早癌患者发生ESD术中出血的危险因素（OR=2.714、2.853）,TSP-1为保护因素（OR=0.871），差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 消化道早癌患者血清Cat S、TSP-1水平与ESD术中出血密切相关，且二者对ESD术中出血有一定的辅助诊断价值。

胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）是胆固醇分解为胆汁酸的限速酶，其催化胆固醇为7α-羟基胆固醇，7α-羟基胆固醇是重要的甾体药物及中间体。以人源CYP7A1作为研究对象，首先构建了重组毕赤酵母/pPIC3.5K-CYP7A1；然后对7αgenetic conditions-羟化酶进行分子改造，之后将酶与不同来源NADPH细胞色素氧化还原酶（CPR）适配，以提高目的产物7α-羟基胆固醇的产量。其中突变体G485A将7α-羟基胆固醇的产量提高了8.70%;5种不同来源的CPR与CYP7A1共表达毕赤酵母菌株均可提高7α-羟基胆固醇的产量，Liraglutide NMR并且罗汉果（Siraitia grosvenorii）来源的CPR(SgCPR)与CYP7A1适配性最好，使7α-羟基胆固醇的产率提高了82.26%；在以上研究的基础上，构建突变体G485A与SgCPR共表达毕赤酵母菌株，最终7α-羟基胆固醇的产量提高了133.79%，其产量为0.25 mg/L。实验在毕赤酵母中成功异源表达Mirdametinib体外人源胆固醇7α-羟化酶，并通过分子改造及与不同来源CPR适配的方法提高了7α-羟基胆固醇的产量。

目的:探究经尿道前列腺钬激光剜除术(HoLEP)治疗大体积良性前列腺增生(BPH)的疗效。方法:选取100例大体积BPH患者为研究对象，按不同手术方式分为HoLEP组和经尿道前列www.selleck.cn/products/sbe-b-cd腺电切术(TURP)组，每组各50例。比较两组患者手术一般情况、前列腺体积(PV)、前列腺功能[最大尿流率(Qmax)、残余尿量(RUV)、前列腺症状评分(IPSS)、国际勃起功能问卷-5(IIEF-5)]及并发症发生情况。结果:术后，HoLEP组膀胱冲洗时间、留置尿管时间、住院时间均短于TURP组(P<0.05);术中出血量、术后Hb下降量均低于TURP组(P<0.05)。术后6个月，HoLEP组PV小于TURP组(P<0.05)。术后1、6个月，与TURP组相比，HoLEP组术后Qmax更高，RUV、IPSS评分则均更低(PINCB018424纯度<0.05);但两组术后IIEF-5评分比较，差异无统计学意义(P>0.05)。HoLEP组术后并发症发生率低于TURP组(P<0.05)。结论:HoLEPgenetic algorithm在治疗大体积BPH时更具优势，可促进术后恢复、降低术后并发症发生率，临床疗效更佳。

目的：探讨芪参白虎汤灌肠在重症肺炎高热惊厥患儿退热中应用效果，分析其对脑源性神经生长因子(BDNF)、乙酰胆碱酯酶(AchE)水平以及免疫功能的影响。方法：将我科85例重症肺炎高热惊厥患儿以随机数字表法分为研究组43例和对照组42例。两组患儿入院后均接受抗Protein Conjugation and Labeling感染、止咳、化痰、平喘、抗惊厥等基础对症治疗，对照组接受擦浴、冷敷等物理降温护理措施，研究组接受芪参白虎汤灌肠干预。对比两组患儿退热效果、脑神经相关因子。结果：干预后，研究组患儿用药后30min、1h、2h腋温均低于对照组(P<0.05);研究组患儿退热起效时间、解热时间、惊厥消ICI 46474供应商失时间均短于对照组(P<0.05);干预3d后，研究组患儿BDNF、AchE高于对照组(P<0.05);干预结束后，研究组患儿CD4~+、CD4~+/CD8~+高于对照组，CD8~+低于对照组(PZ-VAD-FMK半抑制浓度<0.05)。结论：芪参白虎汤灌肠在重症肺炎高热惊厥患儿退热应用中具有显著退热效果，能显著改善患儿大脑神经功能及免疫功能，值得临床推荐。

荧光素酶在科学研究中具有广泛的应用,其中作为报告基因研究最多,大多在细胞内发生,还可以应用于ATP检测、焦磷酸测序等。许多突变北美萤火虫荧光素酶已经被开发出来产生不同的生物发光颜色、提高酶稳定性或催化效率,然而,这些并没有实现发光强度及热稳定性的显著提高。本课题主要通过理性设计的方法对北美萤火虫荧光素酶进行分子改造,以获得在酶活性较原始酶活性不下降的前提下,酶热稳定性显著提高的突变体,并将其应用于药物筛选。本课题基于共识序列查找和表面氨基酸替换的理性设计方法,构建了35个单位点突变体,进行实验验证发现了6个与野生型相比热稳定性和酶活性提高的单位点突变体,分别为T214N、S201T、L530I、A532R、T290P、K28R,其中对应突变体在35℃金属浴10min后的热稳定性与野生型相比均分别提高了20.31、0.72、1.82、1.16、4.75、0.83倍。室温下测Ceralasertib作用定了对应突变体的酶活,酶的活性相比野生型分别提高了4.5、1.3、1.3、1.0、0.7、0.3倍。对它们进行迭代组合突变,获得了27个多位点组合突变体荧光素酶,测定其在35℃金属浴不同时间(5-25 min)后的Single Cell Analysis残余活性,结果发现金属浴5 min后,野生型荧光素酶的残余活性不到5%,而L530I/T214N/T290P、S201T/L530I/T214N/T290P、A532R/T214N/T290P、T214N/T290P组合突变体在金属浴5 min后残余活性仍然比较高,分别为82%、80%、57%、47%。然后将得到的最优突变体L530I/T214N/T290P应用于药物筛选细胞系构建中,结果显示,L530I/T214N/T290P突变体在selleck FG-4592药物筛选中具有更高的灵敏度,相比野生酶,其测定药物IL-6的IC50值从1.309变为1.034,证实了优化荧光素酶突变体酶活性的提高。

目的 探讨不全羧化骨钙素（ucOCN）对Erastin诱导小鼠海马神经元HT22铁死亡的作用。方法 以HT22海马神经元为研究对象，采用Erastin处理HT22细胞诱导铁死亡，实验分为CON组、ucOCN组、Erastin组、Erastin+ucOCN组。采用CCK-8细胞活力分析实验检测各组细胞的增殖情况，光学显微镜下观察不同组细胞形gibberellin biosynthesis态变化，Live/Dead染色检测细胞存活情况，超氧化物阴离子荧光探针（DHE）检测细胞活性氧确认细节（ROS）含量，TMRE探针检测线粒体膜电位，实时荧光定量PCRABT-263体外(qRT-PCR)检测siRNA序列对OCN的干扰效率，Western印迹实验检测不同组细胞铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白的表达水平。结果 以30μmol/l Erastin作用于HT22细胞24 h后明显降低了细胞活力，诱导细胞死亡，增加细胞内活性氧含量并降低了线粒体膜电位。与Erastin组相比，Erastin+ucOCN组细胞存活率有所升高，细胞内ROS水平显著降低，线粒体膜电位有所恢复；Western印迹实验结果显示，ucOCN能够促进铁死亡细胞内GPX4和SLC7A11蛋白的表达。结论 ucOCN对Erastin诱导细胞铁死亡具有抑制作用。

目的 探讨重组人血小板生成素(rhTPO)联合异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)对急Urinary tract infection性髓系白血病(AMCaptisol价格L)患者血小板恢复的影响。方法 选取2020年1月—2021年12月本院收治的74例AML患者为研究对象，随机分为对照组和观察组，每组37例。对照组予以allo-HSCT治疗，观察组予以rhTPO联合allo-HSCT治疗。比较治疗后两组血小板重建时间和血小板恢复时间、凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白(FIB)、部分凝血活酶时间(APTT)]、炎症因子指标[降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)及白细胞介素-6(IL-6)]、血管指标[血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子C(VEGF-C)]以及治疗期间的不良反应发生情况。结果 治疗后，观察组血小板重建时间和血小板恢复时间均短于对照组(P<0.05);观察组APTT和PT水平低于对照组，FIB水平高于对照组(均P<0.05);观察组PCT、CRP及IL-6水平低于对照组(P<0.05);观察组VEGF和VEGF-C水平高于对照组(P<0.05RP56976分子式)。治疗期间，对照组不良反应总发生率低于观察组(P>0.05)。结论 rhTPO联合造血干细胞移植治疗AML可以缩短血小板重建时间和血小板恢复时间，增强凝血功能，缓解炎症反应，提高造血微环境的血流供应，安全性好。

目的 设计化疗相关问题药学监护路径并评估其是否有助于发现并干预化疗患者的药物相关问题（DRPs）。方法 GSK1349572半抑制浓度通过药学监护Plant biology实践经验建立并实施化疗相关问题药学监护路径表与流程图。将该药学监护路径实施前后入住我院接受化疗的患者分为对照组（实施前，60例）与观察组（实施后，64例），提取对照组患者相关病历用以评估DRPs，对观察组患者进行化疗相关问题药学监护并提取DRPs。比较两组患者的基本情况、化疗情况、DRPs类别与干预情况、化疗所致不良反应、DRPs的欧洲医药保健网（PCNE）分类、DRPs发生时间、DRPs涉及的药物类别。结果 两组患者的基本情况、化疗方案与化疗药物类别比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。对照组与观察组分别有46、37例患者发生DRPs。两组DRPs均主要发生在化疗期间，且主要为化疗前期。利用化疗相关问题药学监护路径，DRPs的识别率从对照组的52.17%显著提高至观察组的91.89%(P<0.05)，干预率从对照组的32.61%显著提高至观察组的72.97%(P<0.05)，不良反应发生率从对照组的28.33%显著降低至观察组的12.50%(P<0.05)。对照组DRPs的主要问题类型为治疗有效性，主要涉及药物为辅助抗肿瘤药，主要发生原因为超适应证JQ1体外给予辅助抗肿瘤药；观察组DRPs的主要问题类型为治疗有效性和治疗安全性，主要涉及药物为止吐药，主要发生原因为预防化疗所致恶心呕吐用药不足。结论 化疗相关问题药学监护路径的实施有助于临床药师更好地识别与干预化疗患者的DRPs，减少化疗所致不良反应的发生。