MAPK信号通路

甲状腺自身免疫（Thyroid Autoimmunity， TAI）与妊娠不良结局相关性是本领域研究热点，其中单纯甲状腺抗体增高可不依赖促甲状腺激素（Thyroid Stimulating Hormone， TSImmunomodulatory actionH）降低而独立导致流产发生。中医学认为，脾脏象理论与TAI合并流产病机关系密切，其中脾主运化可滋养胞胎；脾气之升使胎附胞宫；脾气之卫可致胎无邪扰。因此，将脾脏象理论中“运化水谷”、“脾气主升”和“脾旺不受邪”三方面统称为“脾滋获悉更多胎气”理论。此与母胎界面中螺旋动脉形成、滋养细胞、免疫排斥与ABT-263 NMR容受等功能颇具有相似性。其中胚胎免疫细胞中的1型巨噬细胞（Type-1 Macrophage，M1）/2型巨噬细胞（Type-2 Macrophage，M2）极化失衡为TAI合并流产的潜在机制，M1、M2表现出来的独特表型在建立母胎相互作用的免疫学方面起着关键作用。因此对两者进行取象比类，以蜕膜巨噬细胞极化失衡为本病西医病理基础，“脾滋胎气”理论为中医基础，取“滋化源、举中气、御邪气”之意，探讨与蜕膜巨噬细胞极化中“螺旋动脉重塑、滋养细胞植入、母胎界面免疫耐受”功能之间的相关性，为中医药现代化研究提供可靠的依据，并为TAI合并流产的发病机制提供了新的研究思路。

目前,癌症仍是威胁人类生命和健康的重要疾病之一。尽管传统的癌症治疗技术,例如手术切除、药物化疗、放射治疗等,提高了部分患者的生存率,但是由于肿瘤的复杂性和多变性,这些治疗方式仍不足以满足所有病人的需求。近年来,随着纳米技术的飞速进步,易于改性及功能化的纳米材料因其小尺寸效应、生物相容性和实体瘤的高渗透长滞留效应(enhanced permeability and retention,EPR)等独特优势被逐渐运用到肿瘤治疗中,并开发了一系列基于纳米技术的肿瘤治疗模式。声动力治疗(sonodynamic therapy,SDT)是一种利用超声波能量激活富集在病灶biomarker risk-management部位的声敏剂产生活性氧物质(reactive oxygen species,ROS)来杀死细胞的新型肿瘤治疗模式。与传统的光动力疗法相比,声动力疗法安全性高、具有良好的组织穿透能力,可以对肿瘤深部组织进行治疗。近年来,研究人员开发了各种类型的声敏剂用于SDT治疗肿瘤,并取得了一些满意的治疗效果。其中,无机纳米材料因其稳定性高、易于功能化、具有良好的生物相容性等特点,受到了研究者们的广泛关注。然而,大多数无机纳米材料受到本身结构的限制,导致声催化效率较低,需要通过其他策略来提升声动力性能。结合近年来的研究结果表明,依靠单一的治疗模式难以取得理想的疗效,所以通过多种治疗手段联用的多功能纳米平台已经成为肿瘤治疗的研究重点。在本论文中主要围绕发展新型声催化无机纳米材料用于声动力治疗研究。通过不同的策略来增强无机纳米材料的声敏化性能,并联合其他治疗手段,构建了用于声催化介导的多功能纳米复合治疗平台。主要研究内容包括以下两部分:(1)通过水热法合成了具有中空介孔的二氧化钛(TiO_2)纳米球,并将非金属氮化碳量子点(g-C_3N_4 QD)表面沉积到TiO_2上,随后封装化疗药物罗米地辛(Romdepsin,RMD),最终形成了基于异质结构负载RMD的可超声激活的多功能纳米反应器(TCR),实现了www.selleck.cn/products/XL184声动力和化疗的联合疗法。后续通过各种体外表征手段评估各项理化性质。在细胞水平上,利用小鼠乳腺癌细胞探究TCR纳米复合材料产生ROS能力,通过实验结果表明该纳米复合材料在声动力治疗与化疗的联合作用下对肿瘤细胞显示出明显的毒性作用,诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡。同时,能够有效触发免疫原性细胞死亡。通过尾静脉注射后,TCR能通过EPR效应在肿瘤区selleck Liproxstatin-1域被动高效富集,在超声作用下产生ROS及控制RMD的释放,以此实现肿瘤的联合治疗。通过免疫检查点抑制剂(PD-L1抗体)联合治疗,可以有效抑制远端转移瘤及肺部转移,显示出优异的抗肿瘤能力。(2)有研究表明缺陷型无机纳米材料在保持良好生物相容性的同时,可以提升传统无机纳米材料的性能,增强其声催化的效率。由此我们通过二次煅烧的方法合成了一种具有声动力性能的铁锚定氮缺陷型纳米催化剂(FeN_v/CN)。然后通过体外结构表征及化学探针证实该缺陷型纳米催化剂的声敏化效率及催化性能,发现由于缺陷引起的能带结构变化,增强了声动力产生ROS的能力。后续通过在表面修饰聚乙二醇(PEG)以及共价偶联小分子穿膜肽(cRGD),增加其血液循环时间以及主动靶向肿瘤的能力,得到了最终负载cRGD的缺陷型纳米复合材料(FPR)。随后通过细胞层面证实了在cRGD的存在下提高了细胞摄取能力。伴随着超声及催化产生大量ROS并消耗GSH,产生细胞毒性,并抑制谷胱甘肽过氧化物酶活性,破坏癌细胞内氧化还原平衡,最终导致脂质过氧化物累积,诱发铁死亡。通过体内实验结果表明,这种治疗方式可以诱导癌细胞发生免疫原性死亡,从而抑制肿瘤发生。该纳米平台可以有效提高肿瘤的治疗效果。

壳寡糖作为天然的阳离子低聚糖,具有良好的水溶性、生物相容性及易被生物体吸收利用等特点,并具备抗氧化性、抗炎及抗菌性等多种生物活性,应用潜力引起学术各界的广泛关注。然而其抑菌活性十分有限,不能满足高效的发展需求,通过化学修饰在壳寡糖中引入活性官能团是增强抑菌活性的有效手段。本研究合成了系列含直链烷基、三烷基季铵盐、卤代苄基和氟化苄基的壳寡糖吡啶盐类衍生物。通过红外光谱、核磁共振波谱对衍生物进行结构表征,通过体外抑菌实验利用肉汤稀释法、K-B纸片法、圆盘扩散法测定壳寡糖吡啶盐类衍生物对有害细菌的抑菌能力,利用菌丝生长速率法、圆盘扩散法评估壳寡糖衍生物对常见植物致病真菌的抑菌能力。筛选Elexacaftor试剂出活性优良的壳寡糖衍生物,并研究同一系列、不同结构目标化合物的活性规律。本文为了制备具有优良抑菌活性的壳寡糖衍生物,通过N,N’-羰基二咪唑催化烟酸与壳寡糖反应得到壳寡糖烟酸接枝衍生物为中间体,以此为基础与不同链Laboratory biomarkers长的溴代烷烃亲核取代反应得到含溴代烷基的壳寡糖吡啶盐类衍生物,并对其进行结构表征以及体外抑菌活性测定。结果表明,通过引入吡啶阳离子来提升正电荷密度和引入直链烷基来提升疏水性和亲脂性,在很大程度上提高了壳寡糖的抑菌活性。在壳寡糖衍生物中,通过提升正电荷密度来提升其抑菌活性是一种有效的手段。在本论文中,以增加正电荷密度为基本点,首先合成不同链长的溴丙基三烷基溴化铵,再与壳寡糖烟酸接枝衍生物亲核取代反应得到含三烷基季铵盐的壳寡糖吡Adavosertib采购啶盐类衍生物。其中吡啶盐不仅作为活性基团直接增强抑菌活性,而且作为反应桥梁连接了三烷基季铵盐。壳寡糖衍生物中正电荷密度进一步增加,增强了抑菌活性。虽然含直链烷基和三烷基季铵盐的壳寡糖衍生物抑菌活性均有增强,但其仍有提升的空间,而含卤素的芳香类化合物通常具有良好的生物活性并且具有广泛的应用。在壳寡糖烟酸接枝衍生物的基础上,将含不同种类卤素和不同数量氟原子的苄溴引入到壳寡糖分子中,并对其结构表征鉴定和抑菌活性评估。结果表明,所有含卤代苄基的壳寡糖吡啶盐类衍生物的抑菌活性得到了显著的提升。特别是含2,3,4-三氟化苄基的壳寡糖衍生物有着最强的抑菌活性,对哈氏弧菌的MIC值0.03125为mg/m L、MBC值为0.0625 mg/m L,对灰葡萄孢菌的抑制率达到了84.35%。由此可见,通过引入吡啶盐增加正电荷密度和卤素原子增强电负性,得到了具有更高抑菌活性的产物。本文系统地合成了一系列含直链烷基、三烷基季铵盐和卤代苄基的壳寡糖吡啶盐类衍生物,为壳寡糖应用的高附加值开发提供了坚实的理论基础,为新型高分子抗菌生物制剂提供了新思路。

目的 运用网络药理学方法，对四VE-822临床试验逆散“异病同治”抑郁症、功能性消化不良和乳腺增生的物质基础及作用机制进行探讨研究。方法 通过TCMSP数据库获取四逆散可能的活性成分，利用Swiss Target Prediction数据库预测活性成分的潜在靶点；在GenecardHepatic functional reserve、Disgenet、OMIM等数据库检索抑郁症、功能性消化不良和乳腺增生的相关靶点；通过STRING网站了Adavosertib解蛋白质互作关系并运用Cytoscape3.8.0软件进行可视化；利用DAVID数据库进行基因本体论（GO）分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析。结果 预测得到四逆散“异病同治”的活性成分125个和共同作用靶点246个，富集分析得到569个GO功能和157条信号通路（P <0.01,FDR <0.01），分析其作用机制可能与癌症、PI3K-Akt、内分泌耐药、HIF-1等信号通路有关。结论 四逆散具有多成分、多靶点、多通路治疗抑郁症、功能性消化不良和乳腺增生的作用特点，为四逆散“异病同治”科学内涵的诠释提供新的研究思路与方法。

近年来,研究发现滨海湿地优势植被翅碱蓬(Suaeda salsa)逐年退化,目前关于翅碱蓬的研究主要集中在其退化原因上,而关于如何修复翅碱蓬退化鲜有研究。植物激素是能够调控植物生长发育的一种小信号分子,通过施加外源植物激素研究其对翅碱蓬生长的作用机制,在修复翅碱蓬退化方面具有重要selleck MDV3100意义。本研究以辽河口湿地翅碱蓬为研究对象,通过对翅碱蓬叶片施加低浓度(0.1 mg/L)、中浓度(0.3 mg/L)、高浓度(0.5 mg/L)的2,4-表油菜素内酯(2,4-Epibrassinolide,EBR)以及低浓度(0.1μmol/L)、中浓度(1μmol/L)、高浓度(10μmol/L)的独角金内酯(Strigolactones,SLs)类似物GR24进行盆栽实验。基于翅碱蓬生长参数、关键代谢物以及碳、氮稳定同位素组成,探究EBR和GR24对翅碱蓬生长的调控机理。研究所得结论如下:(1)通过测定翅碱蓬生物量、光合参数及其产物和抗氧化酶活性,探究EBR和GR24对翅碱蓬生长的影响。研究结果表明,低、中浓度EBR和中浓度GR24增加了翅碱蓬生物量,而高浓度EBR降低了翅碱蓬生物量。EBR和GR24可以促进翅碱蓬光合作用,其中,中浓度EBR促进效果最佳。EBR和GR24也提高了翅碱蓬抗氧化能力。(2)通过测定内源植物激素含量、油菜素内酯(Brassinolide,BL)和SLs生物合成及信号传导路径中的关键物质含量和酶活性、氨基酸和可溶性蛋白含量,研究EBR和GR24对翅碱蓬内源植物激素代谢的影响机制。研究结果表明,施加不同浓度EBR抑制了翅碱蓬叶中乙烯(ETH)生物合成,中、高浓度EBR促进了BL生物合成。高浓度EBR会促进翅碱蓬SLs的生物合成,并增加其内源脱落酸(ABA)含量。而施加不同浓度GR24都促进翅碱蓬SLs生物合成,抑制叶中ETH生物合成。同时,高浓度GR24抑制翅碱蓬BL生物合成,增加内源ABA含量。此外,在施加不同浓度EBR和GR24后,翅碱蓬Medical error地上部可溶性蛋白含量降低。低、中浓度EBR增加了翅碱蓬叶中氨基酸含量。(3)通过测定C、N含量及其稳定同位素组成,探究EBR和GR24对翅碱蓬生长的作用机理。研究结果表明,翅碱蓬地下部水分利用效率(WUE)显著高于地上部。施加不同浓度EBR,提高了土壤氮有效性和氮转化。低、中浓度EBR增强了翅碱蓬对N的吸收,提高了翅碱蓬地下部氮利用效率(NUE),而高浓度抑制地下部NUE并降低其体内C、N含量,分别降低31.17%、22.22%。施加不同浓度GR24,中浓度GR24增加翅碱蓬体内N含量及其根中δ~(15)N值,降低了叶中δ~(15)N值,N含量增加了25.93%。而高浓度GR24降低翅碱蓬体内N含量及其根中δ~(15)N值,增加了翅碱蓬叶中δ~(15)N值LGK-974配制,N含量降低了25.93%。总之,通过上述研究发现,低、中浓度EBR和中浓度GR24不同程度促进了翅碱蓬生长,这为修复翅碱蓬退化提供了新依据。

蓝靛果忍冬籽作为加工副产物常常被废弃,果籽的充分利用将有利于提高蓝靛果忍冬资源的经济价值。蓝靛果忍冬籽油含有大量不饱和脂肪酸,其中共轭亚油酸含量丰富且已被证实具有优异的生物活性,因此蓝靛果忍冬籽油是一种具有较高营养价值的功能性植物籽油。但由于植物籽油这类亲脂性化合物的理化性质不稳定,易受外界不利因素的干扰发生氧化和酸败,导致籽油原有活性成分受损,影响蓝靛果忍冬籽油的推广使用。将籽油微胶囊化后可以显著降低其氧化速度,保护有效活性成分,籽油的光热稳定性和生物利用度得以加强。本文以蓝靛果忍冬籽油为研究对象,采用超声辅助乙醇提取蓝靛果忍冬籽油,并使用超声辅助分子包埋法进行蓝靛果忍冬籽油微胶囊的制备,同时对其理化性质和生物活性进行了测定。主要研究成果如下:(1)使用响应面分析法分别优化了超声辅助乙醇提取蓝靛果忍冬籽油以及超声辅助分子包埋法制备蓝靛果忍冬籽油微胶囊的工艺。其中,以产油率为评价指标,得到籽油的最佳提取工艺条件为料液比1:22 g/m L、超声温度42℃、超声功率395 W、超声时间39 min,此时最佳产油率可达39.15±0.24%。使用羟丙基-β-环糊精为壁材,蓝靛果忍冬籽油为芯材,以包埋率为评价指标,得到籽油微胶囊的最佳制备工艺为壁材浓度6:1m L/mg、壁芯比5:1 g/g、包埋时间63 min、包埋温度59℃,此时最佳包埋率为70.34±0.13%,最佳产率为7systems biology5.28±0.39%。(2)对蓝靛果忍冬籽油微胶囊进行基本理化性质的测定结果表明,微胶囊含水量为1.43±0.09%,溶解度为98.62±0.31%,休止角为34.65±0.28°,密度为0.68±0.03g/cm,平均粒径为216.21±5.32 nm。荧光显微镜、扫描电镜(SEM)观察到蓝靛果忍冬籽油微胶囊结构紧实无缝隙,呈不规则的块状结构。紫外光谱(UV-Vis)、傅里叶红外变换光谱(FTIR)、X-射线衍射(XRD)、核磁共振氢谱(~1H NMR)的表征,从谱学的角度进一步证实了微胶囊包合物的形成;此外,热重(TG)和差热(DSC)分析证明微囊化后的蓝靛果忍冬籽油热稳定性得到显著加强。(3)对不同储藏环境下的蓝靛果忍冬籽油微胶囊芯材保留率的测定表明,4℃的储藏条件可以显著减缓芯材的释放,避光和干燥的环境也更利于蓝靛果忍冬籽油微胶囊的储藏。对蓝靛果忍冬籽油微胶囊过氧化值和共轭二烯值的测定表明,籽油微胶囊的形成能够有效延缓芯材在温度、氧气、光照等不利环境中的氧化速度,籽油微胶囊具有良好的氧化稳定性。气相质谱联用仪对籽油微胶囊脂肪酸组成含量分析表明微囊化处理对籽油脂肪酸影响较小,微胶囊中不饱和脂肪酸相对含量为71.109%。体外释放模拟实验表明,蓝靛果忍冬籽油微胶囊可在胃液中释放少量芯材,进入肠液后芯材持续释放。(4)对蓝靛果忍冬籽油微胶囊的体外生物活性研究结果表明,籽油微胶囊在0-80μg/m L范围内无细胞毒性。籽油微胶囊可以剂量依赖的方式逆转由Na OL引起的脂质积累,同时具有调节Hep G2细胞NAFLD模型中TC/TG、HDL-C/LDL-C、ALT/AST水平的能力,能够加速脂质代谢,减少肝细胞损伤。籽油微胶囊可缓解H_2O_2造成的细胞活力下降,并随着浓度的增加,氧化应激模型INCB28060内的ROS水平显著下降。综上,本研究合理利用蓝靛果忍冬副产物资源,优化了蓝靛果忍冬籽油的提取工艺,建立了一种超声-分子包埋制备籽油微胶囊的新Enasidenib临床试验方法。该方法制备的蓝靛果忍冬籽油微胶囊安全无毒,富含共轭亚油酸等多不饱和脂肪酸,具有良好的氧化稳定性,同时具有体外降血脂、抗氧化的生物活性。本研究减少了蓝靛果忍冬的油料损失,为蓝靛果忍冬籽油的多领域深度开发和产业化奠定基础。

现阶段,由动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)所导致的血管疾病已成为世界范围内第一大类致死疾病。AS疾病是以血管内膜增生为特征的慢性炎症性疾病。血管内膜增生的主要表现形式是血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖与迁移。赖氨酸特异性脱甲基酶1(lysine-specific demethylase,LSD1)是一种广泛参与细胞增殖过程的表观遗传修饰酶,然而,LSD1对血管平滑肌细胞增殖和血管内膜增生的作用暂未揭示,其作用及机制仍有待深入研究。基于此,本研究以“LSD1与血管内膜增生的相关性”为基础,围绕“LSD1在小鼠血管内膜增生中的作用机制”这一科学问题展开,并围绕LSD1这一潜在靶点,初步寻找预防或治疗血管内膜增生的潜在干预策略。首先,本研究检测了LSD1在血管内膜增生患者和小鼠的血管组织样本中表达情况;其次,研究采用慢病毒感染的方式敲低或过表达血管组织中的LSD1,探究LSD1在小鼠血管内膜增生中的作用及机制;此外,使用LSD1抑制剂(R)-TML104进一步探究LSD1是否是治疗血管内膜增生的潜在靶点,并探讨其对小鼠血管内膜增生以及血管平滑肌细胞增殖的影响;最后,以丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1(Clostridium butyricum CGMCC0313.1,CB0313.1)的使用为干预策略,检测丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1对LSD1表达的影响及对小鼠血管内膜增生的作用,以期为丁酸梭状芽孢杆菌精准干预血管内膜增生疾病提供理论基础,为其进一步实现临床应用提供帮助。本研究的主要结论如下:1.LSD1在血管内膜增生过程中表达升高为了探究LSD1与血管内膜增生的相关性,应用血管内膜增生病人临床样本及小鼠血管内膜增生模型,结合组织免疫荧光实验和蛋白质免疫印迹实验等,评估血管内膜增生临床病人狭窄血管组织、小鼠血管内膜增生组织及血小板衍生生长因子(plateletderived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导增殖的血管平滑肌细胞中LSD1的表达。实验结果显示:(1)与人的正常血管组织相比,LSD1在临床病人狭窄血管组织样本中表达升高(p<0.01);(2)与假手术对照组小鼠血管组织相比,LSD1在小鼠血管内膜增生组织中表达升高(p<0.01);(3)与空白对照组细胞相比,LSD1在PDGFImidazole ketone erastin说明书-BB诱导增殖的血管平滑肌细胞中表达升高(p<0.01)。以上结果表明,LSD1在血管内膜增生过程中的表达升高。2.LSD1通过调控P21的表达促进血管平滑肌细胞增殖为了探究LSD1在小鼠血管内膜增生的作用及机制,应用小鼠血管内膜增生模型,结合H&E染色实验、组织免疫荧光染色实验、蛋白质免疫印迹实验、5-Ethynyl-2′-Deoxyuridine(Ed U)实验以及Transwell实验等,评估敲低或过表达LSD1对小鼠血管内膜增生、血管平滑肌细胞增殖及迁移的composite biomaterials影响。实验结果显示:(1)敲低LSD1显著减少小鼠血管内膜新生面积、降低细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达(p<0.01);过表达LSD1则促进小鼠血管内膜增生中血管平滑肌细胞增殖(p<0.01);(2)敲低LSD1显著抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移(p<0.01);过表达LSD1则促进PDGFBB诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移(p<0.01);(3)LSD1可能通过调控组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化修饰(Histone-3 lysine-4 di-methylation,H3K4me2)降低p21的表达促进血管平滑肌细胞增殖。以上结果表明,LSD1可促进小鼠血管内膜增生和血管平滑肌细胞增殖。3.LSD1抑制剂可降低血p38 MAPK抑制剂管平滑肌细胞增殖和小鼠血管内膜增生为了探究LSD1抑制剂((R)-4,6-dimethoxy-3-(4-methoxy phenyl)-2,3-dihydro-1Hindanone[(R)-TML104])对小鼠血管内膜增生的影响及机制,应用小鼠血管内膜增生模型,结合H&E染色实验、组织免疫荧光染色实验、蛋白质免疫印迹实验、Ed U实验以及Transwell实验等,评估LSD1抑制剂(R)-TML104干预对小鼠血管内膜增生和血管平滑肌细胞增殖能力的影响。实验结果显示:(1)(R)-TML104显著减少小鼠血管内膜增生面积,降低Cyclin D1和PCNA的表达(p<0.01);(2)(R)-TML104显著抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移(p<0.01)(3)(R)-TML104通过升高Sirtuin 1(SIRT1)的表达来降低活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生,抑制小鼠血管内膜增生(p<0.01);(4)(R)-TML104通过降低核转录因子(nuclear factor kappa B,NF-κB)乙酰化抑制NADPH氧化酶4(NADPH Oxidase 4,NOX4)的表达,进而减少ROS的产生(p<0.01)。以上结果表明,(R)-TML104具有一定的抑制小鼠血管内膜增生和血管平滑肌细胞增殖的作用。4.丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1抑制小鼠血管内膜增生为了探究丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1对LSD1的表达和小鼠血管内膜增生的作用,应用小鼠血管内膜增生模型,结合H&E染色实验、组织免疫荧光染色实验等,评估丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1对小鼠血管内膜增生面积的影响、增殖标记物蛋白表达、肠道紧密连接蛋白及血清脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的影响。实验结果显示:(1)丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1显著减少小鼠血管内膜增生面积、降低细胞增殖标志蛋白PCNA的表达和LSD1的表达(p<0.01);(2)丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1通过增加丁酸含量显著抑制小鼠血管内膜增生(p<0.01);(3)丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1显著降低高脂饮食引起的小鼠肠道屏障损伤,显著上调肠道紧密连接蛋白ZO-1、ZO-2、Occludin的表达和显著降低血清LPS的含量(p<0.01)。以上结果表明丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1可能具有一定的抑制小鼠血管内膜增生的作用。综上所述,本研究旨在寻找血管内膜增生疾病的潜在治疗靶点及手段,通过使用药理学方法系统性地阐明LSD1在血管平滑肌细胞增殖中的作用机制及干预研究。本研究从LSD1可调控H3K4me2甲基化修饰影响p21转录的角度,探讨LSD1在血管平滑肌细胞增殖中的作用机制,并通过LSD1抑制剂(R)-TML104的研究进一步证明LSD1可能是治疗血管内膜增生的潜在靶点。在应用方面,发现丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1可缓解小鼠肠道屏障损伤、降低LPS易位和抑制小鼠血管内膜增生。本研究为LSD1成为血管内膜增生治疗的潜在靶点提供了新思路,为丁酸梭状芽孢杆菌CB0313.1在治疗血管内膜增生疾病的应用提供了理论支持。

背景:近些年来,无托槽隐形矫治技术因为相比于传统的固定矫治技术具有美观、舒适、使用简便等优势而在临床中受到了广大患者的青睐。然而临床研究发现,在戴用无托槽隐形矫治器的患者中,可能会发生不同程度的牙釉质脱矿,口腔卫生控制不佳时甚至会引发龋齿、牙周病等并发症,给正畸矫治过程和最终的疗效带来负面影响。引起釉质脱矿的主要原D-Lin-MC3-DMA使用方法因是口腔致病菌在牙面的生长、繁殖和生物膜的形成,因此,研制具有抗菌效果的隐形矫治器材料具有重要的临床意义。目的:本研究旨在开发新型抗菌隐形矫治器材料,以期改善正畸治疗过程中牙齿表面细菌生物膜定植而引发的口腔健康问题,同时期望为抗菌隐形矫治材料的发展提出新的思路。方法:本研究将0 wt%、10 wt%、20 wt%、30 wt%的压电钛酸钡纳米颗粒(BaTiO_3NPs)均匀分散于聚对苯二甲酸乙二醇酯-1,4-环己烷二甲醇酯(poly(ethylene terephthalateco-1,4-cylclohexylenedimethylene terephthalate),PETG)中,合成了PETG/BaTiO_3NPs(0 wt%、10wt%、20 wt%、30 wt%)膜片。通过扫描电子显微镜(Scanning electron microscope,SEM)、X射线衍射(X-ray diffraction technique,XRD)和拉曼光谱仪(Raman Spectra)表征了材料的微观结构、形貌和组成成分;在人工唾液环境下测试了材料的7天唾液吸收率;用水接触角测试仪测试了材料的表面疏水性;通过综合热分析仪评估了材料的热稳定性能;通过平板菌落计数法和生物膜定量实验评估了材料表面对变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)生物膜的抑菌效果;通过CCK-8实验和Calcein-AM/PI细胞毒性实验评估了材料的生物相容性。结果:(1)SEM、XRD和Raman Spectra表征结果证实了PETG/BaTiO_3NPs复合物材料的成功合成;(2)PETG/BaTiO_3NPs(0 wt%、10 wt%、20 wt%、30 wt%)膜片的7天唾液吸收率分别为0.66%、0.37%、0.61%、0.52%,引入BaTiO_3NPs后,复合物膜片的7天唾液吸收率低于PETG基体膜片,表明复合物膜片具有相对的唾液环境稳定性;(3)PETG/BaTiO_3NPs(0 wt%、10 wt%、20 wt%、30 wt%)膜片表面的水接触角分别为66.2±4.7°、70.6±5.5°、72.3±3.9°、80.5±7.3°,引入BaTiO_3NPs后,复合物膜片的表面疏水性高于PETG基体膜片,并且随着BaTiO_3NPs含量的增加,其表面疏水性逐渐增强;(4)引入BaTiO_3NPs的复合物膜片和PETG基体膜片的初始分解温度(约380℃)和终分解温度(约460℃)无显著差异,表明PETG/BaTiO_3NPs复合物膜片的热稳定性能良好;(5)BaTiO_3NPs的Cholestasis intrahepatic引入使PETG/BaTiO_3NPs复合物膜片在低频机VX-765作用械刺激作用下具有抗菌性能,抗菌效果与材料的极化和BaTiO_3NPs的含量有关,随着BaTiO_3NPs含量的增加(10 wt%、20 wt%、30 wt%),复合物膜片的抗菌活性增强,抗菌率分别为19.35±4.35%、37.64±5.75%、42.90±3.72%;同时,含有BaTiO_3NPs的复合材料在表面极化处理后抗菌性显著增强,抗菌率分别为41.65±2.34%、63.15±4.98%、67.39±5.35%。极化复合物膜片抗菌率的增强与细菌细胞环境中活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)的积累相关。(6)CCK-8实验结果显示,与材料浸提液共培养24 h、48 h、72 h后的L-929细胞存活率达到92.62%以上。CCK-8实验和Calcein-AM/PI细胞毒性实验结果一致表明引入BaTiO_3NPs后的复合物膜片以及极化处理后的PETG/BaTiO_3NPs复合物膜片均具有良好的生物相容性。结论:本研究成功制备了PETG/BaTiO_3NPs抗菌复合材料,与PETG基体材料相比,PETG/BaTiO_3NPs抗菌复合材料的唾液吸收率降低、表面疏水性增强,具有良好的生物相容性,BaTiO_3NPs可以作为抗菌隐形矫治器改性材料,具有潜在的临床应用前景。

目的 探讨舒筋活血胶囊调控酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)信号通路对大鼠膝骨关节炎（KOA）的影响及其机制。方法 采用Hulth法制备大鼠KOA模型，将60只大鼠分为假手术组（Sham组）、KOA组、舒筋活血胶囊组（SJHX组）（472.5 mg/kg舒筋活血胶囊灌胃）、AG490组（5.0 mg/kg的JAK2抑制剂AG490腹腔注射），每组15更多只。HE染色与番红O-固绿染色观察滑膜组织Galunisertib纯度与软骨组织病理变化，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清白细胞介素（IL）-10、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平，免疫荧光法检测M1/M2型巨噬细胞极化，免疫组化染色检测IL-1β、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、基质金属蛋白酶（MMP）-13蛋白表达，Western blot检测JAKsubstrate-mediated gene delivery2/STAT3通路相关蛋白。结果 与Sham组比较，KOA组大鼠关节面不平整，滑膜组织与软骨组织结构破坏，病理评分增加，血清IL-1β、TNF-α水平明显升高，IL-10水平降低，滑膜组织IL-1β、iNOS、MMP-13、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3表达水平及M1、M2型巨噬细胞、M1/M2比值升高（P<0.05）；与KOA组比较，SJHX组与AG490组大鼠滑膜组织与软骨组织病理损伤减轻，病理评分降低，血清IL-1β、TNF-α水平降低，IL-10水平升高，滑膜组织IL-1β、iNOS、MMP-13、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3表达水平及M1巨噬细胞、M1/M2比值降低（P<0.05）。结论 舒筋活血胶囊可通过抑制JAK2/STAT3信号通路激活，调节M1/M2巨噬细胞极化，改善KOA大鼠滑膜炎症状。

光疗作为一种新兴的肿瘤治疗手段受到了研究人员的广泛关注,研究多功能的、稳定的、治疗效果良好的光诊疗剂是光疗技术的关键。受半导体催化剂的启发,研究人员采用光学性能良好的窄带隙纳米半导Adavosertib分子式体作为光诊疗剂,对其光学性能和生物相容性加以调控和改善,从而实现了近红外波段光源照射下的光疗。Bi基半导体纳米材料已广泛应用到放射治疗、生物传感器、重金属离Dermato oncology子探测器、抗菌药物、癌症联合治疗和生物成像等各个领域。纳米Bi_2S_3材料,具有较好的计算机断层扫描成像,光热治疗和放射治疗能力,其较窄的半导体带隙使其可以被近红外光源激发,是一种极具潜力的光诊疗剂。然而,在光疗中应用的Bi_2S_3基纳米材料因对近红外区波段光源的吸收能力弱、光生载流子复合快等问题,限制了其在光疗领域的进一步应用。本论文聚焦以上问题,通过调控硫化铋纳米结构的光学性能,得到了更高摩尔消光系数的硫化铋纳米材料以及硫化铋的类三元异质纳米结构。论文主要研究内容如下:1.带隙很大程selleck NVP-TNKS656度上影响纳米半导体药物的紫外可见光光谱吸收,通过合适的手段调控硫化铋的带隙,便可以提高其在808 nm波长处的吸收,进而提高光疗效果。通过改变实验参数影响合成的硫化铋颗粒大小以及多晶聚集的紧凑程度,实现了硫化铋的带隙调控。基础材料表征和体外性能检测表明,在优化条件下制得的硫化铋具有高摩尔消光系数,同时能够延长载流子分离时间,提高光动力治疗的性能。活体实验表明,在808 nm波长的激光照射下,可以实现肿瘤的光热光动力协同治疗,能够有效地抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长。2.异质纳米结构为解决半导体光生载流子复合快的问题提供了方案,因此设计合理的硫化铋异质结构成为了提高Bi_2S_3基纳米材料性能的一种有效手段。我们合成了均一的硫化铋纳米颗粒,在其表面生长致密的金颗粒形成金层后,再将硫化铋-金作为种子继续生长硫化铋薄层,制得了硫化铋-金-硫化铋的类三元异质结。该纳米异质结构具有合适的尺寸以及良好的生物相容性,可以作为光热及光动力治疗的光敏剂。实验表明其具有良好的光热光动力性能,同时对Hela肿瘤细胞有较好的杀伤效果。