Epi-1对牙髓干细胞炎症反应及成牙本质向分化作用的体外研究

目的:抗菌肽Epi-1具有广谱的抗菌性能和免疫调节作用,并参与神经、血管组织损伤修复,但对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)的作用尚不明确。本研究旨在探讨Epi-1对hDPSCs炎症反应及成牙本质向分化的作用。方法:采用CCK-8法筛选Epi-1适宜Protein Tyrosine Kinase抑制剂的作用浓度。在LPS刺激下,通过qRT-PCR、western blot、ROS染色等分析炎症因子mRNA、NF-κB信号通路蛋白的表达及活性氧的生成,通过ALP染色、茜素红染色等分析成牙本质向分化相关基因及蛋白的表达,观察Epi-1是否对hDPSCs具有炎症调节及成牙本质向分化的作用。结果:2.5μgMAPK抑制剂/mL、5μg/mL Epi-1对hDPSCs无明显细胞毒性,可抑制NF-κB通路的激活,下调炎症因子IL-6、IL-1β、ILMedial proximal tibial angle-8的表达,减少ROS的生成,提高LPS刺激下hDPSCs的ALP活性,上调成牙本质向分化相关基因及蛋白的表达,促进矿化结节的形成。结论:2.5μg/mL、5μg/mL Epi-1通过抑制NF-κB通路的激活减轻LPS引起的hDPSCs炎症反应及氧化应激反应,可一定程度上促进炎症微环境下hDPSCs的成牙本质向分化。