目的:Fulvestrant中药化学小分子是中草药中的活性成分,现代药理学证明其具有多种药用特性,如抗氧化,抗癌,抗菌等作用,是新药开发的重要来源。紫檀芪(Pterostilbene,PT)属于多羟基二苯乙烯类化合物,是紫檀中抗真菌的重要活性成分。PT对肝脏具有积极的保护作用,然而其具体的作用机制尚不明确,相关研究的文献较少。慢性或重度肝脏损伤常常伴有的纤维化病变是非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的重要组织学特征之一,同时也是肝硬化重要的发病原因。肝血管内皮细胞在纤维化过程中起关键的调节作用。在NASH中,FGFR抑制剂主要组织相容性复合体I类(MHC-I)和II类(MHC-II)复合物大量生成,免疫细胞过度激活,使得肝脏内炎症因子大量释放从而加重了肝脏的纤维化。据此,我们主要研究PT是否能够抑制血管内皮免疫蛋白酶体介导的抗原递呈作用同时改善肝纤维化从而减轻NASH的发展,并揭示其潜在机制,进而为NASH治疗新药物的研发提供新思路。方法:A:非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型与药物治疗:首先选取8-10周龄的健康C57BL/6小鼠,随机分为对照组与脂肪性肝炎组。对照组,每日给予普通饲料及灭菌水。非酒精性脂肪性肝炎模型组每日给予高脂饲料(21.1%脂肪+41%蔗糖+1.25%胆固醇)和高糖溶液(23.1 g/L d-果糖+18.9g/L d-葡萄糖),持续12天,并每3天给予腹腔注射20%溶于橄榄油的CCl_4溶液。于注射CCl_4后的第二天腹腔给药PT 10 mg/kg(生理盐水稀释),最后一次给药结束后第二天取材(第12天)。将实验小鼠使用戊巴比妥钠注射液腹腔注射安乐死,然后分别进行解剖。采集小鼠的完整肝组织和加入抗凝剂的血清样本。使用ALT和AST试剂盒评估小鼠肝功能。用Sirius Red和Masson评价肝组织损伤。免疫组化实验检测α-SMA和Collagen I蛋白表达及纤维化程度。免疫荧光染色检测炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18、免疫蛋白酶体亚基LMP7、MHC-I和MHC-II蛋白的表达;采用Real-time PCR方法检测给药前后小鼠IL-1β、IL-6、IL-18 m RNA基因水平的变化。B:CCl_4诱导的肝纤维化模型与药物治疗:选取8-10周龄的健康C57BL/6小鼠,随机分为对照组与肝纤维化肝炎组。对照组,每日给予普通饲料及灭菌水。并每3天给予小鼠腹腔注射20%的四氯化碳溶液(1.paediatric primary immunodeficiency6mg/kg)。每于第一次注射…