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橄榄[Canarium album(Lour.)Rauesch.]为药食同源果树,“福州橄榄”已成为全国农产品地理标志登记保护产品。果实的鲜食品质决定了果品的商品价值,传统的橄榄栽培多以实生苗种植,后代变异大,绝大部分品种口味苦涩,鲜食品质较差;因此选育涩味较淡、回甘明显的鲜食LY2157299配制品种,满足消费者需求成为了生产上急需解决的问题,而充分了解橄榄果实的代谢组成及品质差异形成原因能够为优良橄榄选育工作奠定基础。本研究采用模糊数学感官评价结合理化特性与电子舌检测对橄榄进行鲜食品质分析,进而选择鲜食品质差异显著的橄榄品种(系)采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)联用技术进行代谢物鉴定及KEGG通路分析,探究果实代谢物与果实品质的关系,筛选影响果实鲜食口感的代谢物;结合转录组通过加权基因共表达网络分析挖掘调控橄榄酚类合成相关转录因子,对候选转录因子进行SSR分子标记开发,利用开发的多态性SSR位点对总酚、果形指数等数量性状进行关联分析,鉴定这些数量性状的关键功能位点,以对位点所在的基因进行功能验证,同时为橄榄功能性分子标记辅助育种奠定理论基础和实践依据。主要研究结论如下:1.运用德尔菲法结合九级标度法构建橄榄鲜食感官评价因子权重,各指标权重排序依次为回甘度(45.8%)、涩味度(31.1%)、化渣性(12.0%)、硬度(8.1%)、香气(3.0%);其中回甘度与涩味度的权重和占比76.9%,说明是否回甘和涩味强弱是影响橄榄鲜食品质的主要因子。运用建立的鲜食品质感官评价因子权重对10个品种(系)橄榄进行感官模糊数学综合评价,感官评价得分与酚糖比呈极显著相关(P<0.01),与总酚、可溶性糖、硬度呈显著相关(P<0.05);进一步运用多频脉冲电子舌对橄榄品质进行检测区分,电子舌信号特征值聚类结果与总酚、可溶性糖、酚糖比、感官评价得分结果吻合。结合感官评价、理化指标及电子舌结果把10个品种(系)分为3个类别,三棱榄、甜榄1号、东山长穗、青皮长营、平阳3号归为一类,鲜食品质好;平阳1号、平阳2号、惠圆归为一类,鲜食品质中等;自来圆、子阳1号归为一类,鲜食品质差。2.利用电子舌信号特征值与感官评价得分、理化指标进行多元逐步回归建模,发现多频脉冲电子舌特征信号值能够对橄榄理化指标进行有效预测,其中对酚糖比预测效果最好(R~2=0.832);感官综合评价预测模型认为,化学指标预测效果优于电子舌信号特征值的拟合结果,模型拟合性R~2均小于0.6,分别为0.589、0.542。研究结果为橄榄品质特征快速检测,及优良单株选育快速判定提供了实践参考。3.以鲜食品质差异显著的4个品种(系)橄榄进行广泛靶向代谢组分析,共鉴定到651个代谢物。初级代谢产物277个,包括糖及醇类35个(5.38%)、有机酸55个(8.45%)、氨基酸及其衍生物70个(10.75%)、核苷酸及其衍生物34个(5.22%)、脂类71个(10.91%)、维生素12个(1.84%);次级代谢产物365个,包括类黄酮145个(22.27%)、酚酸103个(15.82%)、香豆素16个(2.46%)、木脂素17个(2.61%)、单宁44个(6.76%)、茋类7个(1.08%)、醌类1个(0.15%)、萜类5个(0.77%)、生物碱27个(4.15%);其它9个。4.通过2组鲜食品质差异显著橄榄代谢物的成对比较分析,基于变量投影重要性与差异倍数筛选出26个影响橄榄鲜食品质的特征差异代谢物,包括氨基酸及其衍生物(6个)、有机酸(2个)、脂质(2个)、酚类化合物(16个),其中酚类化合物包括酚酸类物质(3个)、黄酮(3个)、黄酮醇(2个)、黄烷醇(3个)以及水解单宁(5个)。根据26个特征代谢物,建立了成熟过程橄榄鲜食品质差异的代谢网络,代谢网络的变化包括多数氨基酸及其衍生物的显著降低和水解单宁、黄酮醇、黄烷-3-醇的显著增加,体现在鲜食口感上则与回甘及涩味度有关;鲜食品质好的橄榄在甜味型氨基酸L-天冬酰胺与N,N-二甲基甘氨酸生物合成代谢途径上积累较高;鲜食品质差的橄榄则在水解单宁(二酰基诃子酰基葡萄糖、没食子酰没食子酸甲酯、榛子素A)、黄酮醇[桑色素-3-O-木糖苷、槲皮素-3-O-(6’-没食子酰)半乳糖苷Compound 3临床试验]、黄烷-3-醇[7-O-没食子酰基特利色黄烷、儿茶素-(7,8-bc)-4α-(3,4-二羟基苯基)-二氢-2-(3H)-酮、儿茶素-(7farmed snakes,8-bc)-4β-(3,4-二羟基苯基)-二氢-2-(3h)-酮]合成途径上积累较高,酚类化合物主要体现为口感上的苦涩味。5.对鲜食品质差异显著的2组橄榄品种(系)共有差异基因进行KEGG通路富集分析,发现在酚类代谢的“类黄酮生物合成”途径显著富集,随后利用转录组结合酚类特征代谢物,通过加权基因共表达网络分析挖掘到292个调控酚类物质合成的转录因子Unigene与51个酚类合成结构基因Unigene相关,对292个转录因子进行功能注释,隶属52个基因家族;292个候选转录因子Unigene中检测到99个Unigene序列含有SSR位点(33.90%),最终开发了53个(53.54%)有效性SSR分子标记,12个(22.64%)多态性SSR分子标记;12条含多态性SSR标记的转录组序列全部在Swiss Prot数据库中被注释到,12个多态性位点来自8个基因家族,包括锌指蛋白基因家族4个[C2H2(2个)、C3H(1个)、C2C2(1个)],MYB基因家族2个,SNF2、HB、B3、b HLH、NAC和b ZIP家族各1个。6.基于酚类物质合成调控候选转录因子开发的12个多态性SSR分子标记在59份橄榄种质中存在连锁不平衡(37.88%),因此可采用关联分析对标记位点所在基因进行功能验证。通过GLM模型进行关联分析,分别以P值和Q值为协变量,12个SSR标记与总酚关联的变异解释率在0.2%～38.4%之间,变异解释率最高的位点SSR64来自b HLH基因家族,该位点也对果实表型指标(纵径、横径和果形指数)解释率最高;同时鉴定到标记SSR59、SSR77两个位点与横径显著关联,标记SSR59、SSR72两个位点与果形指数显著关联,SSR59、SSR72与SSR77分别来自C2H2、MYB和b ZIP基因家族;研究结果不仅对标记位点所在的酚类合成候选转录因子进行了功能验证,也说明控制数量性状基因存在“一因多效”及“一效多因”现象。

目的 探讨盐酸奥洛他定联合组织胺人免疫球蛋白治疗慢性OIT oral immunotherapy荨麻疹的临床价值。方法 选取2019年10月至2020年11月朝阳市第二医院收治的慢性荨麻疹患者86例作为研究对象，采用随机数字表法分为观察组（n=43）与对照组（n=43）。对照组采用盐酸奥洛他定单独治疗，观察组在对照组基础上加用组织胺人免疫球蛋白治疗。比较两组疗效、病情评分、血清免疫球蛋白E(IgE)水平、症状改善情况、白细胞计数（WBC）、5-羟色胺（5-HT）水平及不良反应发生率。结果 观察组治疗有效率93.02%(40/43)较对照组74.42%(32/43)高（P<0.05）；治疗后，AM-2282 MW观察组病情评分较对照组低（P<0.05）；治疗后，观察组血清IgE水平较对照组低（P<0.05）；治疗后，观察组瘙痒时间、持续发作时间较对照组少，风团直径较对照组短，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后，观察组WBC水平较对照组低，5-HT水平较对照组高，差异有统计学意义（P<0.05）；观察Elexacaftor分子量组不良反应发生率9.30%(4/43)与对照组11.63%(5/43)比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论采用盐酸奥洛他定联合组织胺人免疫球蛋白治疗慢性荨麻疹，可提高疗效，改善免疫功能和临床症状，安全性高。

目的 探讨1,3-β-葡聚糖诱导炎症小鼠的肺组织自噬水平，为肺组织炎症的预防、诊断及治疗提供依据。方法Liproxstatin-1体外 将20只实验小鼠分为两组，1,3-β-葡聚糖实验组、生理盐水对照组，每组10只。小鼠非暴露气管灌注1,3-确认细节β-葡聚糖，于灌注后第3天、第28天分别收集小鼠肺组织。采用苏木素伊红和Masson染色，观察肺组织病理改变；采用Western blot检测小鼠体内自噬特异性蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和自噬相关蛋白sequestosome 1(p62)的表达水平。结果 镜下可见，与对照组相比，实验组小鼠肺组织出现大量炎症细胞和胶原沉积。Western blot结果显示，实验组小鼠体内LC3-Ⅱ表达水平较对照组升高（t=-2.932,P<0.05）,p62表达水平较对照组升高（t=-5.15stomatal immunity1,P<0.05）。结论 1,3-β-葡聚糖可明显著提高小鼠肺组织自噬特异性蛋白LC3及自噬相关蛋白p62的表达水平，证明肺组织炎症的小鼠细胞自噬水平升高。

急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)是一种以肾功能急速下降为特征,具有高发病率和致死率的综合征,如不及时干预可严重威胁人类及小动物的健康。顺铂(Cisplatin,CDDP)是广谱抗癌药物,其肾毒性是诱导AKI的常见因素之一。由于AKI发病机制复杂且目前尚未发现令人满意的干预手段,因此寻找能有效预防和治疗AKI的安全药物仍是医学及兽医学上需迫切解决的问题。维生素D受体(Vitamin D receptor,VDR)可被活性维生素D及维生素D类似物激活,在机体内发挥抗氧化抗炎等生物作用。前期研究发现,CDDP诱导的AKI小鼠体内VDR水平显著下降,提示激活体内VDR可能是防治AKI的有效手段,但具体分子机制尚不可知。基于此,本研究进行了如下试验:(1)首先,将40只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为两组,对照组(C组,腹腔注射生理盐水)和模型组(CDDP组,腹腔注射20mg/kg CDDP),CDDP处理72 h后获得AKI小鼠模型,通过转录组学及代谢组学联合分析,筛选出关键信号通路。(2)随后,将60只7周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为四组,分别为C组、VDR组(腹腔注射0.2μg/kg帕立骨化醇,每天一次)、VDR+CDDP组(帕立骨化醇处理的第6天,腹腔注射CDDP)、CDDP组。CDDP处理72 h后观察动物状态,称量体重,将动物进行安乐死并采集血液和组织样本,应用生化试剂盒、ELISA试剂盒检测小鼠肾脏功能;通过苏木精&伊红(Hematoxylin&Eosin,H&E)染色、透射电子显微镜(Transmission electron microscope,TEM)、实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,q RT-PCR)、抗氧化试剂盒、TUNEL染色、蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)、免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)、免疫荧光(Immunofluorescence,IF)等方法,检www.selleck.cn/products/smoothened-agonist-sag-hcl测小鼠肾脏组织病理学变化、氧化应激水平、线粒体动力学及能量代谢相关基因、炎症细胞因子、细胞凋亡、细胞铁死亡、相关通路基因表达及共定位情况。(3)最后,将30只6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为两组,VDR+CDDP组和关键信号通路干预组(Znpp组,帕立骨化醇处理前五天开始腹腔注射5mg/kg的Znpp,每天一次),在CDDP处理72 h后收集样本进行相关检测,确定VDR肾保护作用的具体分子机制。体外使用HK2细胞系进行机制的验证。主要研究结果如下:(1)转录组学代谢学联合分析结果表明,CDDP诱导的AKI小鼠肾脏组织差异转录基因和差异代谢物共同富集到72个Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路中,其中显著差异的转录基因和代谢物共同富集到4个KEGG通路中,即代谢途径、HIF-1信号途径、谷胱甘肽代谢途径和丁酸代谢途径。(2)小鼠在注射CDDP后,体重显著下降,且小鼠表现精神极度沉郁、无食欲、眯眼蜷缩状。肾脏功能检测结果显示,CDDP组小鼠体内血液尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(Serum creatinine,Scr)、肾损伤分子1(Kidney injury molecule 1,Kim-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Neutrophil gelatinase-associated lipocalin,Nagl)均显著升高,提示小鼠肾损伤模型成功建立。HK2细胞在CDDP处理后,细胞活力明显下降,说明CDDP诱导HK2细胞损伤。VDR显著降低AKI小鼠体内BUN、SCr、Kim-1、Nagl水平,提高CDDP暴露的HK2细胞活力,说明VDR可提高肾脏功能。(3)小鼠肾脏组织病理学检测结果显示,CDDP组小鼠肾脏组织中肾小管上皮细胞明显脱落,组织间隙可见大量炎性细胞浸润,而VDR+CDDP组小鼠肾脏组织中炎性细胞减少,肾小管上皮细胞脱落较少或呈脱落状。应用WB检测组织内炎性细胞因子的表达,发现CDDP组小鼠肾脏组织和HK2细胞中肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)和核转录因子kappa B(Nuclear transcription factor-κB,NF-κB)的蛋白表达水平显著升高,而VDR+CDDP组的肾脏及HK2细胞中炎性细胞因子蛋白水平较CDDP组显著下降,说明VDR可改善CDDP诱导的肾脏炎症损伤。(4)对小鼠肾脏组织超微结构观察发现,VDR干预后,CDDP诱导的AKI小鼠肾脏线粒体嵴断裂明显减少。应用q RT-PCR和WB方法进一步检测线粒体动力学相关基因的表达,发现VDR可降低CDDP诱导的AKI小鼠肾脏中线粒体动力相关蛋白1(Dynamin-related protein 1,Drp1)和线粒体分裂蛋白1(Mitochondrial fission 1 protein,fis1)的m RNA和蛋白表达,并显著上调视神经萎缩因子(Optic atrophy 1,Opa1)、线粒体融合蛋白1(Mitochondrial fusion protein 1,Mfn1)、Mfn2的表达水平。此外,CDDP暴露的HK2细胞中线粒体活性与Opa1水平呈正相关,与Drp1和fis1水平呈负相关,说明CDDP诱导肾脏线粒体过度分裂,进而导致线粒体损伤。而VDR+CDDP组小鼠肾脏及HK2细胞中Drp1、fis1水平显著低于CDDP组,Opa1、Mfn1、Mfn2的水平显著升高,说明VDR通过维持肾脏线粒体动力学平衡来减轻CDDP诱导的线粒体损伤。(5)对小鼠肾脏组织能量代谢水平检测发现VDR明显提高CDDP诱导的AKI小鼠肾脏组织中Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase和Ca~(2+)-ATPase的活性,并显著上调CDDP暴露的小鼠肾脏组织中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)、丙酮酸脱氢酶复合体X(Pyruvate dehydrogenase complex component X,PDHX)的m RNA及蛋白表达水平。体外试验结果显示VDR预处理CDDP暴露HK2细胞中LDH、PK、PDHX的蛋白水平升高,说明VDR在一定程度上消除了CDDP对肾脏能量代谢水平的负面影响。(6)应用氧化应激试剂盒检测发现,VDR显著提高AKI小鼠肾脏组织中谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)水平,增加超氧化物歧化酶2(Superoxide dismutase 2,SOD2)的荧光强度,并抑制过氧化氢(Hydrogen peroxide,H_2O_2)丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的累积。此外,通过荧光染色发现,VDR明显减弱了CDDP处理的小鼠肾脏和HK2细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的积聚。这些结果说明VDR可提高肾脏抗氧化水平,并抑制氧化物的累积,进而缓解CDDP诱导的肾脏氧化损伤。此外,应用试剂盒、IF、荧光探针及WB方法检测小鼠肾脏及HK2细胞中亚铁离子(Ferrous ion,Fe~(2+))含量和谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)表达水平,发现VDR明显抑制CDDP诱导的小鼠肾脏和HK2细胞中Fe~(2+)的蓄积,并提高GPX4的表达,结合GSH及MDA检测结果可知,VDR改善了CDDP诱导的肾脏细胞铁死亡。(7)TUNEL染色结果显示,VDR明显减少了CDDP诱导的小鼠肾脏组织细胞凋亡的数量。应用q RT-PCR、IHC和WB方法检测细胞凋亡相关基因的表达,发现VDR显著上调AKI小鼠肾脏组织中B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达水平,抑制细胞色素C(Cytochrome C,Cyt C)、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase 3)、PD0325901Caspase9和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)的表达。AO/EB染色发现VDR减少CDDP暴露的HK2细胞的凋亡,细胞内凋亡相关蛋白表达结果与体内试验一致,说明VDR通过减少肾脏细胞凋亡在一定程度上改善CDDP诱导的AKI。(8)转录组学及代谢组学KEGG富集联合分析,发现HIF-1信号途径在AKI小鼠肾脏组织中显著富集。应用q RT-PCR检测HIF-1信号通路关键基因HIF-1α和HO-1水平,发现CDDP诱导的AKI小鼠肾脏组织中HIF-1α和HO-1的m RNA表达水平均显著高于C组,但低于VDR+CDDP组。应用IF方法检测HIF-1α和HO-1在肾脏组织和HK2细胞中共定位情况,发现CDDP组和VDR+CDDP组小鼠肾脏组织中HIF-1α均明显进入细胞核,但CDDP组HO-1在胞质中的表达明显少于VDR+CDDP组。体外试验结果与体内相似,即CDDP暴露的HK2细胞中HIF-1α没有或极少进入细胞核,并且CDDP组细胞中HIF-1α和HO-1荧光强度均高于C组,弱于VDR+CDDP组。这些结果说明,HIF-1α和HO-1可能分别作为缺氧感应因子和应激蛋白在肾脏受到CDDP刺激后高表达,而VDR可促进HIF-1α进入细胞核内调控HO-1进而发挥抗氧化、抗炎、抗凋亡等作用。此外,使用HIF-1α/HO-1信号通路抑制剂锌原卟啉(Protoporphyrin IX zinc,Znpp)预处理VDR+CDDP组小鼠和HK2细胞,发现VDR的肾脏保护作用减弱,进一步说明VDR通过调控HIF-1α/HO-1信号通路减轻CDDP诱导的肾脏损伤。综上所述,VDR可改善CDDP诱导的肾脏组织结构损伤和功能障碍,具体分子机制为VDR上调HIF-1α/HO-1信号通路来维持线粒体动力学平衡,提高肾脏能量代谢水平,阻止线粒体过度分裂诱导大量ROS累积,进而减轻肾脏氧化损伤、炎症、细胞凋亡和细medical photography胞铁死亡,最终改善CDDP诱导的AKI。本研究从VDR调控HIF-1α/HO-1信号通路的角度探讨其对CDDP诱导AKI的保护机制,为人类及小动物AKI的防治提供新的思路和试验数据,并在一定程度上丰富了VDR的生物学作用。

本研究旨在运用CCRG 81045纯度生物信息学方法探讨疏肝降脂颗粒调节铁死亡治疗非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease， NAFLD)的潜在分子机制。通过网络药理学方法获取“疏肝降脂颗粒-铁死亡”潜在的交集靶点，基于GSE89632数据集筛选“疏肝降脂颗粒-NAFLD-铁死亡”交集靶点的差异表达基因(differentially expressed genes，DEGs)并运用R4.2.2软件进行相关性分析、富集分析和免疫浸润分析。对GSE89632数据集的样本进行共识聚类，构建机器学习模型筛选关键DEGs，构建列线图模型并验证；对关键基因进行临床相关性分析。共获得18个“疏肝降脂颗粒-NAFLD-铁死亡”DEGs。DEGs具有相互调控、介导辅助性T细胞(T helper cell，Th)17分化、甲状腺激素、酪氨酸激酶受体 (receptor tyrosine protein kinase，ErbB)、白细胞介素-17(interleukin-17，C59溶解度 IL-17)等信号通路和免疫调节作用。RF模型为最优机器学习模型，极光激酶A (aurora kinase A，AURKA)、固醇调节元件结合转录因子1 (sterol-regulatory element binding proteins 1，SREBF1)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1，HMOX1)、MYC和JUN是RF模型中重要性排名前五的基因，HMOX1、JUN与BMI呈正相关。列线图模型可以较好的预测NAFLD患病风险。本研究发现疏肝降脂颗粒调节铁死亡治疗NAFLD可能是通过AURKA、SREBF1、HMOX1、MYC和JUN等差异铁死亡基因之间的网络调控作用及其介导的免疫调节、Th17细胞分化、甲状腺激素信号通路、ErbB信号通路和IL-17信号通路等途径实现的。基于AURKA、SREBF1、HMOX1、MYC和JUN的列线图模型不但能够较准确地诊断NAFLD，而且可以间接评估疏肝降脂颗粒治疗NAFLIgE-mediated allergic inflammationD的效能。

目的：筛选得到更优启动子，为血友病基础研究和基因治疗提供更有力的工具。方法：用生物信息学方法分析高Genetic heritability丰度表达持家基因的启动子，遴选潜在候选启动子；构建GFP报告基因载体，以EF1α启动子为对照，考察新型启动子载体的包装效率及报告基因的转录和活性；装载F9基因，考察候选启动子的活力。结果：筛选得到最具潜力的RPS6启动子；RPS6pro-LV和EF1αpro-LV在慢病毒包装上没有差异，二者病毒滴度一致。在293T细胞中，RPS6proLV和EF1αpro-LV的转导效率、平均荧光强度与慢病毒剂量成正比。两种启动子在不selleckchem Colforsin同类型细胞中的转导效率均呈现293T>HEL>MSC的规律；相较于EF1αpro-LV,RPS6pro-LV在MSC细胞中具有更高的荧光强度；对感染E-616452两种启动子病毒的HEL细胞进行长期培养，发现RPS6pro-LV具有更稳定的活性。K562细胞RT-q PCR、Western blot及细胞培养上清FIX活性（FIX∶C）检测结果显示，EF1α-F9、RPS6-F9组FIX表达均高于空载对照组，EF1α-F9与RPS6-F9组之间FIX表达量无显著差异。结论：经筛选和优化，得到一个可广泛用于外源基因表达的新型启动子，通过长期培养和活性基因表达证实该启动子的高度稳定性和高效活力，为血友病基础研究和临床基因治疗提供了一个有力工具。

目的 对不明原因复发性流产患者夫妇进行维生素D受体(VDR)基因多态性分析，探讨VDR基因多态性与不明原因复发性流产的相关性。方法 纳入127例不明原因复发性流产患者和88例正常生育对照LXH254说明书人群作为研究对象，对维生素D基因受体4个多态位点ApaI(rs7975232)、BsmI(rs1544410)、FokI(rs2228570)、TaqI(rs731236)进行一代测序，分析基因多态位点基因型频率在病例组和对照组的差异。结果 VDR基因相关的4个多态位点：ApaI基因位点在野生型、杂合型及突变型均发现，实验组分别为55.12%,35.43%,9.45%,对照组43.18%,45.45%,11.36%,两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。BsmI基因位点发现野生型及杂合型，未发现突变型，实验组分别为88.8%,11.2%,对照组86.36%,13.64%,两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。FokI基因位点发现野生型、杂合型及突变型，实验组分别为29.84%,42.74%,27.42%,对照组25%,46.59%,28.41%,两组比较，差异无统selleckchem E7080计学意义(P>0.05)。TaqI基因位点发现野生型及杂合型，未Infectious larva发现突变型，实验组分别88.89%,11.11%,对照组86.36%,13.64%,两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 VDR基因常见的多态位点与不明原因复发性流产的发生可能无相关性，需进一步扩大样本研究证实。

目的 探究血浆肝素+蛋白MK-1775采购（heparin binding pprotein,HBP）联合降钙素原（procalcitonin,PCT）+C-反应蛋白（c-reactive protein,CRP）在脓毒症及脓毒性休克患者诊断中的作用。方法 选取2020年1—12月张家港市第一人民医院重症医学科收治的脓毒症及Insulin biosimilars脓毒性休克患者156例，按脓毒症指南标准，分为轻度组56例、严重组62例和休克组38例。按临床预后，可分为存活组117例、死亡组39例。另选同期健康体检者59名为健康组。检查HBP、PCT、CRP等临床指标。结果 脓毒症组LY2835219细胞培养HBP(83.45±5.29)μg/L、PCT(8.19±1.25)μg/L、CRP(87.94±5.37)mg/L水平高于健康组的（4.82±0.58）μg/L、（0.24±0.02）μg/L、（1.34±0.21）mg/L，差异有统计学意义（P<0.05）。休克组HBP、PCT、CRP水平比严重组、轻度组高，且严重组HBP、PCT、CRP水平比轻度组高，差异有统计学意义（P<0.05）。生存组HBP、PCT、CRP水平低于死亡组，差异有统计学意义（P<0.05）。依据生存组、死亡组患者HBP、PCT、CRP水平，绘制ROC曲线，HBP、PCT、CRP和HBP+PCT+CRP对患者预后预测AUC各为0.823、0.830、0.781、0.935。结论 脓毒症及脓毒性休克患者，行血浆肝素+蛋白联合降钙素原+C-反应蛋白诊断有一定价值，且能对病情程度、预后等给予敏感反应。

松材线虫是松材线虫病(PWD)的重要病原,严重危害我国林业生产。路德维希肠杆菌AA4(Enterobacter ludwigii)是我们从植物根部筛选到的一种具有促生长作用的细菌。该菌株已经被证实具有杀松材线虫活性,对松树枯萎病具有防病效果。本研究以菌株AA4和松材线虫为研究对象,selleckchem Liproxstatin-1通过基因敲除,荧光定量P购买SB431542CR等方法进一步探索研究菌株AA4的杀松材线虫机制,获得了菌株AA4与杀松材线虫活性相关基因rpoS、ipdC,初步研究了基因rpoS、ipdC对AA4杀松材线虫活性的影响,获得了以下研究结果:(1)通过研究路德维希肠杆菌AA4基因rpoS,得到杀线虫活性和防病能力显著下降的rpoS突变体。基因rpoS突变体杀松材线虫活性从AA4的83.33%降至29.33%。(2)通过研究路德维希肠杆菌AA4基因ipdC,得到杀线虫活性和防病能力显著下降的ipdC突变体。基因ipdC突变体杀松材线虫活性从AA4的83.33%降至27.67%。通过荧光定量PCR检测结果发现,AA4中基因rpoS突变后基因ipATP bioluminescencedC的表达量降低,降低AA4合成吲哚乙酸的能力,影响菌株AA4的杀松材线虫活性。(3)路德维希肠杆菌AA4能够合成吲哚乙酸。AA4合成吲哚乙酸为44.81 mg/L,基因rpoS突变体合成吲哚乙酸为7.92 mg/L,下降了82.33%;基因ipdC突变体合成吲哚乙酸为1.17 mg/L,下降了97.39%。由此证明基因rpoS对菌株AA4合成吲哚乙酸有影响。(4)AA4ΔrpoS在松材线虫上的定殖能力显著下降,基因rpoS突变体菌株的运动能力与形成生物膜能力显著减弱。σ因子RpoS通过调控AA4的运动性和生物膜的形成影响菌株在松材线虫体内的定殖能力,影响菌株AA4的杀松材线虫活性。研究为阐明路德维希肠杆菌AA4杀松材线虫作用机制,为防松材线虫病有益微生物制剂的开发和高效应用提供理论指导。

目的 探讨保肺化纤方经转化生长因子（TGF）-β1/smad2/3、wnt1/β-连环蛋白（catenin）信号通路减轻博来霉素（BLM）/PM2.5暴露诱导的特发性肺纤维化（IPF）大鼠肺组织胶原沉积的作用机制。方法 SD大鼠随机分为对照（Control）组、BLM+PM2.5（Model）组、保肺化纤方（BHF）组、吡非尼酮（Phereditary melanomaFD）组、XAV-939组、BHF+PFD组、BHF+XAV-939组。采用一次性气管内雾化博来霉素法制备IPF大鼠模型，大气PM2.5实时浓购买S63845缩全身暴露和给予相应药物干预。检测大鼠肺功能，观察肺组织病理和胶原沉积；采用免疫组化技术检测肺组织I、IV型胶原（COL）、TGF-β1、smad2/3、β-catenin蛋白水平；采用qPCR技术检测肺组织TGF-β1、smad2/3、wnt1、β-cateninmRNA水平。结果 与Control组比较，Model组大鼠肺功能显著降低（P <0.01），肺组织可见大量炎症细胞浸润，肺泡壁断裂、增厚，胶原沉积等肺纤维化特征性病理改变，肺组织胶原容积分数（CVF）、COLⅠ、COLⅣ蛋白及TGF-β1、smad2/3、β-catenin基因与蛋白表达均显著升高（P <0.01）；与Model组比较，各治疗组均有效改善大鼠肺组织病理改变，显著降低肺组织CVF及COLⅠ、COLⅣ、T此网站GF-β1、smad2/3、β-catenin蛋白表达水平（P <0.05，P <0.01），同时BHF组、BHF+PFD组、BHF+XAV-939组均能显著提高大鼠肺功能（P <0.05，P <0.01），明显下调肺组织TGF-β1、smad2/3、β-catenin基因表达水平（P <0.01）；与PFD组比较，BHF+PFD组大鼠肺组织COLⅠ、TGF-β1蛋白及smad2、β-catenin基因表达均显著降低（P <0.05，P <0.01）；与XAV-939组比较，BHF+XAV-939组smad3基因表达显著降低（P <0.01）。结论 保肺化纤方可改善BLM/PM2.5诱导的IPF大鼠肺组织病理损伤，减少胶原沉积，提高肺功能，改善肺纤维化，其机制可能与下调TGF-β1/smad2/3、wnt1/β-catenin通路有关。