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目的：探讨低分子肝素联合利伐沙班在预防下肢骨折患者下肢深静脉血栓形成Tofacitinib中的应用价值。方法：选取行手术治疗的58例下肢骨折患者为研究对象。随机分为对照组与观察组各29例。对照组单纯使用低分子肝素治疗，观察组在此基础上加用利伐沙班治疗。比较两组患者术后1 d凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D二聚体(D-D)、组织型纤溶酶原激活剂抗原(tPA-Ag)]检测结果、感染指标[C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)]检测结果、术后下肢肿胀改善时间、术后疼痛改善时间、术后住院时间以及术后并发症(下肢深静脉血栓形成、静脉血栓栓塞、肺栓塞)情况的差异。结果：观察组术后1 d PT、APTT、FIB、tPA-Ag检测结果均高于对照组，D-D检测结果低于对照组，两组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察MRTX1133组术后1 d CRP、WBC、PCT、IL-6检测结果均低于对照组，两组比较比差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后下肢肿胀改善时间、疼痛改善时间及住院时间均短于对照组，两组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后下肢深静脉血栓形成hereditary risk assessment发生率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);两组静脉血栓栓塞、肺栓塞发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：低分子肝素联合利伐沙班能够改善下肢骨折患者凝血功能和感染指标，预防下肢深静脉血栓形成，促进术后恢复。

目的 观察肠炎宁颗粒联合蒙脱石散治疗小儿轮状病毒性肠炎的临床情况。方法 选取2020年3月—2021年7月海南医学院第二附属医院收治的130例小儿轮状病毒性肠炎患儿，采用随机数字表法将所有患儿随机分为对照组和治疗组，每组各65例。对照组口服蒙脱石散，6个月以下患儿每次1/3袋，1～2岁患儿每次2/3袋，3岁以上患儿每次1袋，3次/d。治疗组在对照组基础上口服肠炎宁颗粒，6个月以下患儿每次1/3袋，1～2岁患儿每次2/3袋，3岁以上患儿每次1袋，3次/d。两组患儿治疗时间均为5d。比较两组临床疗效、主要症状改善时间、中医症候评分、血清炎症因子和肠道菌群。结果治疗后，治疗组患儿总有效率显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后，治疗组的退热时间、止泻时间、止吐时间明显购买NSC 127716短于对照组（P<0.05）。治疗后，两组患儿大便清稀、低热、呕吐、食欲不振、腹胀、口渴评分较治疗前下降明显（P<0.05），且治疗组中医症候评分降低更显著（Bioavailable concentrationP<0.05）。治疗后，两组血清C反应蛋白（CRP）、白细BMN 673溶解度胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均显著降低（P<0.05），治疗组血清炎症因子水平较对照组更低（P<0.05）。经治疗，两组双歧杆菌、嗜酸乳杆菌较治疗前显著增加，大肠杆菌均显著下降（P<0.05），治疗组双歧杆菌、嗜酸乳杆菌较对照组更高，大肠杆菌较对照组更低（P<0.05）。结论 肠炎宁颗粒联合蒙脱石散可有效治疗小儿轮状病毒性肠炎，改善临床症状和中医症候，其作用机制可能与调节肠道菌群、抑制炎症等有关。

目的:探究前列腺液中白细胞介素(Interleukin,IL)-8的浓度与良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)临床资料、手术安全性及治疗效果之间的相关性,为BPH的诊治提供新的思路,为BPH患者手术安全性和预后的评估提供新的临床依据。方法:收集2021年11月-2022年8月在江汉大学附属医院泌尿外科确诊为良性前列腺增生且行经尿道前列腺等离子双极电切术的患者64例。按入院流程收集患者基本临床资料,测定患者血清前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)、C反应蛋白浓度、血红蛋白浓度,对患者术前国际前列Z-IETD-FMK使用方法腺症状评分(International Prostate Symptoms Score,IPSS)及生活质量评分(quality of life,QOL)进行评估,测定患者前列腺体积大小、残余尿量、术前最大尿流率。所有患者术前通过前列腺按摩留取前列腺液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)对前列腺液中IL-8的浓度进行测定。所有患者根据前列腺增生诊断治疗指南诊断有手术指征并完成手术治疗。术后留置三腔导尿管持续膀胱冲洗,待膀胱冲洗清亮后停止冲洗,尿液清亮后拔除导尿管,观察患者排尿情况,颜色是否清亮,是否发生尿潴留及尿失禁等。出院3个月后再次测定患者最大尿流率,评估患者IPSS评分及QOL评分。记录各项观察指标,并进行统计学相关性分析和回归分析。结果:1.前列腺液中IL-8的浓度与术前患者膀胱残余尿(r=0.83)、血清C反应蛋白浓度(r=0.61)、IPSS评分(r=0.75)、QOL评分(r=0.78)、既往发生过尿潴留(r=0.77)呈明显正相关,与患者最大尿流率(r=-0.90)关系最密切,呈负相关。与患者年龄(r=0.41)和血清PSA(r=0.60)中度相关,差异具有统计学意义(p<0.001)。BPH患者前列腺体积(r=0.18)与前列腺液中IL-8浓度相关性不密切,差异无统计学意义(p=0.150,p>0.05)。2.BPH患者前列腺液中IL-8浓度与患者术中出血量(r=0.87)、术后膀胱冲洗时间(r=0.95)有显著的相关性,与患者手术时间(r=0.67)、留置导尿时间(r=0.73)也相关明显,均呈正相关。差异具有统计学意义(p<0.001)。与术后未出现并发症的患者相比,发生并发症患者的前列腺液中IL-8浓度相对较高。3.患者术后最大尿流率、IPSS评分、QOL评分改善明显,差异具有统计学意义(p<0.001)。患者最大尿流率变化率(r=0.76)、QOL评分变化率(r=-0.73)与患者前列腺液IL-8浓度相关性明显,而与IPSS评分变化率(r=-0.38)有中度相关性。差异具有统计学意义(p<0.001)。前列腺液IL-8浓度与患者最大尿流率变化率呈明显正相关性,与QOL评分变化率、IPSS评分变化率呈明显负相关性,差异具有统计学意义(p=0.002、p<0.001)。结论:前列腺液中IL-8浓度与BPH患者术前膀胱残余尿、C反应蛋白浓度、PSA水平、IPSS评分、QOL评分、既往发生过尿潴留,以及术中出血量、手术时间、术后膀胱冲洗和留置导尿的时间呈明显正相关。与患者术前最大尿流率、术后IPSS评分和QOL评分变化率BMS-907351纯度呈明显负相关,而与患者前列腺体积没有明显相关性。表明前列腺液中IL-8浓度升高可能提示BPH患者临床症状更重,手术安全性和手术效果可能不及预期。因此,ILsecondary infection-8有可能为BPH的诊治提供一种无创性的检测方法,为BPH患者治疗方式的选择以及预后的评估提供新的可靠的临床依据。

目的 探讨胆南星对帕金森病（PD）模型小鼠的改善作用及可能机制。方法 将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、胆南星低剂量组[0.39 g/（kg·d）]、胆南星高剂量组[1.56 g/（kg·d）]和阳性对照药左旋多巴片组[80 mg/（kg·d）]，每组12只。除正常组小鼠注射等体积生理盐水外，其余各组连续5 d腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶[MPTP,35 mg/（kg·d）]建立亚急性PD模型；造模完成后连续给药治疗7 d，于造模前1 d、造模第5天和末次给药后进行爬杆实验和线悬挂测试。采用免疫荧ABT-263价格光法检测小鼠脑黑质中酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元数量；采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及脑黑质中IL-1β、TNF-α、环氧合酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平；采用Western blot法检测小鼠脑黑质中cAMP依赖的蛋白激酶催化亚单位α(PKA C-α)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)以及铁蛋白重链多肽1(FTH1)蛋白的表达。结果 末次给药后，与正常组比较，模型组小鼠爬杆时间显著延长（P<0.01），线悬挂评分显著降低（P<0.01），脑黑质中TH阳性神经元数量显著减少（P<0.01），血清中IL-1β、TNF-α水平和脑黑质中IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS水平显著升高（P<0.01），脑黑质中GPX4、PKA C-α和FTH1蛋白表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较，胆南星高剂量组小鼠上述指标水平均显著回调（P<0.05或P<0.01）。结论 胆南星能够改善MPTP诱导的PD模型小鼠运动能力障碍，减少脑黑质TH神经元Telaglenastat IC50死亡，对模型小鼠具有神经保护作用；这可能与其激活PKA信号通路来抑制神经炎症和神经元Biotoxicity reduction细胞铁死亡有关。

目的 探讨长链非编码RNA MAGF-AS1(lncRNA MAFG-AS1)、长链非编码RNA RPPH1(lncRNA RPPH1)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)患儿血清中的表达水平，并分析其与病理学参数的相关性。方法 选取83例ALL患儿作为ALL组，83例非恶性血液病患儿作为非恶性血液病组，同期83例健康体检儿童作为对照组。比较3组研究参与者入院时血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平，不同病理学参数ALL患儿血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平比较，分析血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平与病理学参数的相关性，受试者操作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平联合检测对ALL的诊断价值。结果 入院时ALL组血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平>非恶性血液病组>对照组，差异有统计学意义(P<0.05);ALL患儿血清lncRNA MAFG-AS1、lncRSAHA molecular weightNA RPPH1表达水平比较：白细胞计数<50×10~9 L~(-1)患儿低于白细胞计数≥50×10~9 L~(-1)患儿，乳酸脱氢酶(LDH)水平<250 U·L~(-1)患儿低于LDH水平≥250 U·L~(-1)患儿，有淋巴结肿大患儿高于无淋巴结肿大患儿，低危型患儿<中危型患儿<高危型患儿(P<0.05);ALL患儿血清lncRNA MAFG-AS1表达水Blood-based biomarkers平与白细胞计数、LDH水平、淋巴结肿大、危险度分层呈正相关(r=0.671、0.699、0.704、0.583,P<0.05);ALL患儿血清lncRNA RPPH1表达水平与白细胞计数、LDH水平、淋巴结肿大、危险度分层呈正相关(r=0.711、0.645、0.596、0.607,P<0.05);以ALL患儿DS-3201分子量为阳性标本，以非恶性血液病患儿为阴性样本，绘制ROC曲线，入院时血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平联合诊断ALL的曲线下面积(AUC)为0.802(95%CI:0.746～0.863),优于各指标单一诊断。结论 血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平与ALL患儿病理学参数有关，二者联合检测对ALL诊断具有较高价值。

研究背景骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种骨代谢紊乱疾病,随着人口老龄化的发展,OP发病率明显升高,其并发性骨折的严重后果对绝经后女性的身体健康和生活质量构成了严重威胁。OP成为全球公共卫生问题。根据中医理论,肾Q-VD-Oph配制藏精,主骨,生髓。肾精充足,则骨髓化生有源,骨骼得其滋养而强劲有力;肾精亏虚,则骨髓化生乏源,骨骼失其所养而痿软无力,故要补肾填精。左归丸是中医著名的“补肾”方剂,出自《景岳全书》,大量临床、动物实验研究证实了左归丸的抗骨质疏松效应。红曲具有燥胃消食降浊,活血和血而散伤功效,实验证实了红曲能够减少破骨细胞分化,促进骨形成。本研究在左归丸原方基础上加红曲,即左归丸加红曲方,本课题预实验证实,左归丸加红曲方减少去卵巢大鼠骨丢失效果优于左归丸,但目前其机制尚未完全清楚。随着“肠-骨”轴概念的提出,肠道菌群、短链脂肪酸(Short chain fatty acids,SCFAs)与骨代谢的相关性不断得到证实。OP伴有肠道菌群的改变,肠道菌群的失调也会加重或导致OP,SCFAs由肠道菌群酵解肠道中碳水化合物而来。SCFAs可调节p38MAPK通路抑制破骨细胞(Osteoclast,OC)分化;SCFAs与OC表面的特异性受体GPR41结合,抑制p38MAPK-NFATc1破骨细胞分化通路,抑制前体细胞分化为成熟OC。因此我们选择经典的OC相关通路:SCFAs-GPR41-p38MAPK作为本研究的通路。因此,我们做出如下科学假设:左归丸加红曲方是否调控SCFAs-GPR41-p38MAPK通路发挥抗骨质疏松效应?第一部分:左归丸加红曲方对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及对SCFAs-GPR41-p38MAPK信号通路的影响实验方法1.制备OP大鼠模型,SD雌性大鼠分为空白对照组(NC)、假手术组(SHAM)、模型组(OVX)、戊酸雌二醇组(EV,0.018mg/mL)、左归丸(ZGW,0.945g生药/mL)、左归丸加红曲方组(ZH,1.08g生药/mL)。观察大鼠阴道涂片、称取大鼠体重、子宫湿重来评估造模情况。通过Micro-CT检测大鼠骨密度(BMD)、检测骨组织形态计量学指标、观察骨组织病理改变(HE染色和TRAP染色)2.各组大鼠血清TRAP、BALP和BGP水平(ELISA检测法)、骨吸收相关指标 OPG、RANKL、CTSK、TRAP mRNA(qRT-PCR检测法)和 c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP蛋白(WB和IHC检测法)表达情况。3.通过16S rRNA基因测序技术检测各组大鼠粪便微生物多样性变化。通过各组大鼠肠道菌群OTU分析图、Alpha和Beta多样性分析观察肠道菌群多样性的变化;在门水平和属水平上分析各组大鼠肠道菌群相对丰度变化和组间差异菌群,观察左归丸加红曲方对去卵巢大鼠肠道菌群多样性和丰度的影响。4.采用气质联用(GC-MS)检测各组大鼠外周血清中SCFAs总量及乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸和己酸的含量,结合PLS-DA分析、单变量分析、支持向量机分析,观察左归丸加红曲方对去卵巢大鼠外周血清中SCFAs及差异代谢物的影响。5.qRT-PCR法检测各组大鼠骨组织p38mRNA表达情况;IHC法检测各组大鼠骨组织p38蛋白和WB法检测各组大鼠骨组织GPR41、P-p38蛋白的表达情况,探索左归丸加红曲方对去卵巢大鼠SCFAs-GPR41-p38MAPK信号通路的影响。实验结果1.各组大鼠一般情况表现。造模12周后,假手术大鼠阴道涂片呈现动情前期-动情期-动情后期-动情间期的规律周期变化。去卵巢大鼠阴道涂片呈现持续间期特征,规律动情周期消失。与SHAM组比较,OVX组大鼠体重显著增加(p<0.01);与OVX组比较,EV组、ZGW组、ZH组大鼠体重明显下降(p<0.01)。与SHAM组比较,OVX组大鼠子宫系数显著降低(p<0.01);与OVX组比较,EV组、ZGW组、ZH组子宫系数无统计学差异(p>0.05)。由此可知本实验造模成功。与OVX组比较,EV组、ZGW组、ZH组大鼠BMD、BV/TV 明显提高(p<0.01);Tb.N 显著增加,Tb.Sp 显著降低(p<0.01;p<0.05)。HE染色显示OVX组大鼠骨组织骨小梁结构排列稀疏,结构紊乱,连接性差,且TRAP染色表现为酒红色染色分布较多且明显;EV组、ZGW组、ZH组大鼠骨微结构破损状况均有所改善。2.各组大鼠血清骨转换标志物及骨吸收相关指标的表达情况。ELISA检测结果显示,与OVX组比较,ZH组明显降低TRAP、BALP和BGP水平(p<0.01;p<0.05)。qRT-PCR检测结果显示,与OVX组比较,EV组、ZH组OPG mRNA表达显著上调(p<0.01),RANKL、CTSK、TRAP 和 RANKL/OPG mRNA 表达明显下调(p<0.01;p<0.05)。IHC检测结果显示,与OVX组比较,EV组、ZH组c-FOS、CTSK、TRAP蛋白表达显著下调(p<0.01;p<0.05)。WB检测结果显示,与OVX组比较,EV组、ZH组c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP蛋白表达明显下调(p<0.01;p<0.05)。3.各组大鼠肠道菌群多样性的变化。由肠道菌群OTU分析、Alpha和Beta多样性分析可知去卵巢后大鼠肠道菌群多样性发生显著变化,以门水平和属水平肠道菌群变化为例,左归丸加红曲方逆转拟杆菌门(Bacteroides)、厚壁菌门(Firmicutes)、Gemmatimonadota、酸杆菌门(Acidobacteriota)、粘球菌门(Myxococcota)5种菌门变化,以及Muribaculaceae、普雷沃菌属(Prevotella)、普雷沃氏菌科 Ga6A1_group 属(Prevotellaceae_Ga6A1_group)、UCG-005、鞘脂单胞菌属(Sphingomonas)5种菌属的变化;由各组大鼠肠道菌群相对丰度变化可知,拟杆菌门和厚壁菌门是门水平的优势菌群,普雷沃氏菌属、拟杆菌属等是属水平的优势菌群,其在各组的相对丰度发生改变。4.各组大鼠肠道菌群代谢物SCFAs含量的变化。与OVX组比较,EV组、ZH组大鼠血清SCFAs总量明显升高(p<0.01)。与OVX组比较,EV组、ZH组戊酸、异戊酸、己酸含量明显升高(p<0.01;p<0.05),其余的乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸表现为相同的表达。结合PLS-DA分析、单变量分析和支持向量机分析结果,己酸和异戊酸可能是SCFAs介导的左归丸加红曲方发挥抗骨质疏松作用的关键代谢物。5.SCFAs-GPR41-p38MAPK信号通路确认细节关键因子的表达情况。ZH可激活SCFAs-GPR41-p38MAPK信号通路,显著下调信号通路上p38基因和蛋白表达(p<0.01);提高GPR41蛋白表达、降低磷酸化p38蛋白表达(p<0.05)。第二部分:左归丸加红曲方血清和短链脂肪酸对破骨细胞和SCFAs-GPR41-p38MAPK信号通路的影响实验一:左归丸加红曲方血清用药浓度的筛选实验方法1.制备血清:空白血清组(Serum-NC)、模型血清组(Serum-OVX)、左归丸加红曲方血清组(Serum-ZH)。2.将小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞经RANKL诱导为OC,用TRAP染色进行鉴定。采用CCK-8法筛选左归丸加红曲方血清的安全用药范围。3.采用TRAP染色,观察并计算各组TRAP+破骨细胞个数(细胞核≥3个);对骨片进行骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色,计算骨吸收陷窝面积,确定左归丸加红曲方血清的最佳用药浓度。实验结果1.成功诱导OC。加入RANKL后,镜下观察RAW264.7细胞逐渐融合汇聚,体积增大,并伴有大小不等的囊泡状结构出现。经TRAP染色后,颜色为紫红色、形态多核(细胞核≥3个)者鉴定为成熟OC。2.不同浓度左归丸加红曲方血清对细胞活性的影响。采用CCK-8检测法,确定0%-5%浓度范围的左归丸加红曲方血清对RAW264.7细胞未产生毒性,是安全用药范围。3.不同浓度左归丸加红曲方血清对OC分化的影响。TRAP染色结果显示,与模型血清组比较,不同浓度(2.5%、5%)左归丸加红曲方血清组TRAP+破骨细胞数量均有不同程度的减少(P<0.01),但5%浓度的左归丸加红曲方血清组TRAP+破骨细胞数量减少更明显(P<0.01)。4.不同浓度左归丸加红曲方血清对OC骨吸收功能的影响。与模型血清组比较,不同浓度(2.5%、5%)左归丸加红曲方血清组骨吸收陷窝面积均明显减少(P<0.01),但5%左归丸加红曲方血清组骨吸收陷窝面积减少程度更大。实验二:左归丸加红曲方血清和短链脂肪酸对破骨细胞的影响实验方法1.按照在体实验不同组别外周血中SCFAs含量和比例,采用体外模拟的方法,制备对应组外周血浓度(1×)和骨髓浓度(10×)的SCFAs。实验分组如下:1 × SCFAs-NC、1 × SCFAs-OVX、1×SCFAs-ZH、10×SCFAs-NC、10×SCFAs-OVX、10×SCFAs-ZH。大鼠血清分组:Serum-NC、Serum-OVX、Serum-ZH。2.采用TRAP染色,观察并计算各组TRAP+破骨细胞个数(细胞核≥3个);对骨片进行骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色,计算骨吸收陷窝面积,观察各组大鼠血清和SCFAs对OC分化和骨吸收功能的影响。3.采用qRT-PCR法和WB法检测信号通路关键因子GPR41、p38及OC相关指标基因和蛋白的表达情况。实验结果1.各组大鼠血清和不同浓度SCFAs对OC分化和骨吸收功能的影响1.1对应组大鼠血清和外周血浓度SCFAs对OC分化和骨吸收功能的影响与Serum-OVX组比较,Serum-ZH组明显减少TRAP+破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积(p<0.01),而1 ×SCFAs-OVX组减少TRAP+破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积效果不及Serum-OVX组(p<0.01);与Serum-ZH组比较,1 ×SCFAs-ZH组减少TRAP+破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积效果不及Serum-ZH组(p<0.01)。1.2对应组外周血浓度SCFAs和骨髓浓度SCFAs对OC分化和骨吸收功能的影响与1 × SCFAs-OVX组比较,1 × SCFAs-ZH组明显减少TRAP+破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积(p<0.01),10×SCFAs-OVX组减少TRAP+破骨细胞数量(p<0.01)和骨吸收陷窝面积(p<0.05)的程度更明显;与1 ×SCFAs-ZH组比较,10×SCFAs-ZH组减少TRAP+破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积(p<0.05)效果更优。2.各组大鼠血清和不同浓度SCFAs对OC相关基因表达的影响2.1对应组大鼠血清和外周血浓度SCFAs对破骨细胞NFATc1、CTSK、TRAP mRNA表达的影响与 Serum-OVX 组比较,Serum-ZH 组 NFATc1、CTSK、TRAP mRNA 表达明显下调(p<0.01;p<0.05),而 1 ×SCFAs-OVX 组 NFATc1、CTSK、TRAP mRNA表达明显上调(p<0.01)。与 Serum-ZH组比较,1 ×SCFAs-ZH 组NFATc1、CTSK、TRAP mRNA表达明显上调(p<0.01)。2.2对应组外周血浓度SCFAs和骨髓浓度SCFAs对破骨细胞NFATc1、CTSK、TRAP mRNA表达的影响与 1 ×SCFAs-OVX 组比较,1 ×SCFAs-ZH 组 NFATc1、CTSK、TRAP mRNA 表达明显下调(p<0.01),10×SCFAs-OVX 组 NFATc1、CTSK、TRAP mRNA 表达也明显下调(p<0.01;p<0.05);与 1 × SCFAs-ZH 组比较,10×SCFAs-ZH 组显著下调 NFATc1、CTSK、TRAP mRNA 表达(p<0.01)。3.各组大鼠血清和不同浓度SCFAs对OC相关蛋白表达的影响3.1对应组大鼠血清和外周血浓度SCFAs对破骨细胞c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP蛋白表达的影响与 Serum-OVX 组比较,Serum-ZH 组 c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP 蛋白表达明显下调(p<0.01;p<0.05);1×SCFAs-OVX 组 c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP蛋白表达明显上调(p<0.01)。与Serum-ZH组比较,1 × SCFAs-ZH组c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP 蛋白表达明显上调(p<0.01)。3.2对应组外周血浓度SCFAs和骨髓浓度SCFAs对破骨细胞c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP蛋白表达的影响与 1 × SCFAs-OVX 组比较,1 × SCFAs-ZH 组 c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP 蛋白表达明显下调(p<0.01);10×SCFAs-OVX 组 c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP蛋白表达明显下调(pDNA Purification<0.01;p<0.05)。与 1 × SCFAs-ZH组比较,10×SCFAs-ZH 组 c-FOS、NFATc1、CTSK、TRAP 蛋白表达明显下调(p<0.01;p<0.05)。4.各组大鼠血清和不同浓度SCFAs对通路关键因子基因和蛋白表达的影响4.1对应组大鼠血清和外周血浓度SCFAs对通路关键因子p38mRNA和GPR41、P-p38蛋白表达的影响与Serum-OVX组比较,Serum-ZH组p38 mRNA表达明显下调(p<0.01),而1 × SCFAs-OVX组p38 mRNA表达明显上调(p<0.01)。与Serum-ZH组比较,1 × SCFAs-ZH 组 p38 mRNA 表达明显上调(p<0.01)。与Serum-OVX组比较,Serum-ZH组GPR41蛋白表达明显上调(p<0.01),P-p38蛋白表达明显下调(p<0.01);1 ×SCFAs-OVX组GPR41蛋白表达明显下调(p<0.01),P-p38蛋白表达明显上调(p<0.01)。与Serum-ZH组比较,1×SCFAs-ZH组GPR41蛋白表达明显下调(p<0.05),P-p38蛋白表达明显上调(p<0.01)。4.2对应组外周血浓度SCFAs和骨髓浓度SCFAs对通路关键因子p38mRNA和GPR41、P-p38蛋白表达的影响与1 × SCFAs-OVX组比较,1 × SCFAs-ZH组p38 mRNA表达明显下调(p<0.01),10×SCFAs-OVX 组 p38 mRNA 表达也明显下调(p<0.01);与 1 ×SCFAs-ZH组比较,10×SCFAs-ZH组显著下调 p38 mRNA表达(p<0.01)。与1 × SCFAs-OVX组比较,1 ×SCFAs-ZH组GPR41蛋白表达明显上调(p<0.05),P-p38 蛋白表达明显下调(p<0.01);10×SCFAs-OVX 组 GPR41 蛋白表达明显上调(p<0.01),P-p38蛋白表达明显下调(p<0.05)。与1 ×SCFAs-ZH组比较,10×SCFAs-ZH组GPR41蛋白表达明显上调(p<0.05),P-p38蛋白表达明显下调(p<0.05)。实验结论1.左归丸加红曲方可有效改善OP,该效应的发挥与肠道菌群结构的改善,SCFAs含量的提高,SCFAs-GPR41-p38MAPK信号通路关键因子的上调有关。2.左归丸加红曲方干预所致的SCFAs变化可有效抑制破骨细胞分化,该抑制效应是左归丸加红曲方抗骨质疏松效应的一部分。综上,左归丸加红曲方对SCFAs-GPR41-p38MAPK信号通路的调控作用可能是改善去卵巢模型大鼠骨质疏松症的机制之一,验证了“肠-骨”轴的关键中介作用。

目的淫羊藿(Epimedii Folium,EF)具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效,临床上广泛运用于骨科疾病。由于其相关复方制剂壮骨关节丸、仙灵骨葆胶囊所引起的肝损伤不良反应频发,淫羊藿的临床应用受到一定的限制。本研究通过构建淫羊藿指纹图谱与细胞肝毒性的”谱gamma-alumina intermediate layers-毒”关系,并利用网络毒理学构建淫羊藿的”成分-靶点”毒性作用网络,整合两种分析手段预测并发现淫羊藿致肝损伤的潜在毒性物质基础。材料和方法采用HPLC法建立11批不同基原的淫羊藿提取物的指纹图谱;通过CCK8法测定各批次淫羊藿提取物对小鼠正常肝细胞AML12的细胞毒性并得出IC50值;采用灰色关联分析法建立”谱-毒”关系,发现淫羊藿中候选肝毒性成分;建立Crizotinib化学结构“淫羊藿成分-成分靶点-肝毒性靶点”的毒性作用网络,筛选出淫羊藿中与肝毒性靶点关联较强的物质;整合两种结果后,发现淫羊藿selleck Fer-1致肝损伤的毒性成分。结果建立淫羊藿提取物指纹图谱,共标定16个共有峰;经Q-TOF/MS鉴定及对照品比对解析了部分共有峰的成分信息,再根据灰色关联度大小排序,发现16(未知)、6(朝藿定A)、15(淫羊藿次苷Ⅱ)、8(朝藿定B)、14(2″-O-rhamnosyl ikarisideⅡ)、10(朝藿定C)和13(2″-O-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ)号共有峰均与AML12细胞毒性的IC50值具有较强的相关性;经类药性筛选得到92个淫羊藿的化学成分,经OMIM等数据库发现肝损伤的疾病靶点共2483个;构建毒性作用网络,推测出淫羊藿中致肝毒性的候选成分为槲皮素、大黄素、脱水淫羊藿素、朝藿定B、箭藿苷A等24个,潜在致毒靶点132个,核心靶点20个,主要包括CCND1、CDK1、TP53、MYC、HSP90AA1;对靶点功能进行GO富集,涉及核受体活性、配体激活转录因子活性、蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶活性、细胞周期蛋白等分子条目,KEGG分析涉及脂质代谢、PI3K-AKT、P53、化学致癌受体激活、细胞等信号通路;整合分析得到淫羊藿致肝毒性的成分可能为朝藿定B、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿素等。结论淫羊藿致肝损伤的物质基础成分复杂,多集中于异戊烯基类黄酮化合物,本研究为淫羊藿中具固有性肝毒性的成分发现及致肝损伤的毒性机制提供了一定的参考依据。

目的：探究磁共振弥散加权成像（magnetic resonance-diffusion weighted imaging,MR-DWI）在前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）和前列腺癌（prostaBiomass conversiontecancer,PCa）鉴别诊断中的价值。方法确认细节：选取张家港市人民医院2020年7月—2022年12月接收的66例前列腺病变患者。根据手术病理检查结果分为BPH组（38例）及PCa组（28例）。对所有受试者均开展MRI平扫以及MR-DWI扫描。对比不同前列腺病变患者的MRI平扫影像特征（涵盖部位、边界、信号类型以及体积大小等）以及DWI信号强度、表观弥散系数（apparent diffusion coefficient,ADC）值等方面的差异。结果：MRI平扫影像学特征表现方面对比显示PCa组病灶部位处于外周带、边界模糊、信号类型为低信号人数占比均显著高于BPH组（P <0.01）。PCa组b值=5Tamoxifen体内实验剂量0、800 s/mm2时的DWI信号强度均低于BPH组，且ADC值亦低于BPH组，差异均有统计学意义（P <0.05）。结论：MR-DWI序列诊断鉴别BPH和PCa具有一定价值，可为医务人员提供两者病理差异，且能通过ADC值为临床诊断提供辅助依据，有助于诊断准确性的提升。

背景与目的:桥本甲状腺炎(Hashimoto’s Thyroiditis,HT)以甲状腺特异性自身抗体为特征,是最常见的自身免疫性疾病之一。桥本甲状腺炎与遗传因素、环境因素、自身免疫相互作用有关,但是其确切的病因尚未完全阐明。据报道,铁介导的一种新的细胞死亡(铁死亡)也与炎症启动和免疫浸润增加相关。最近的研究发现铁死亡和氧化作用有几个共同的特征,例如脂氧合酶的作用、ROS的产生和基因表达.铁死亡在形态和生理特征上不同于细胞凋亡、坏死和细胞焦亡。在铁死亡过程中,细胞核保持完整.染色质不聚集,且质膜不破裂或起泡。收缩的线粒体显示出更大的内膜密度,而外膜破裂。铁死亡最重要的生化特征是脂质氢过氧化物(LOOH)和亚铁离子(Fe~(2+))浓度升高,因为铁死亡细胞会产生过量的活性氧,从而引发脂质过氧化。谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)是一种特异性将脂质过氧化物还原为相应酒精的酶,是铁死亡的另一种中枢调节因子。此外,谷胱甘肽(GSH)作为GPX4的辅助因子,通过逆向转运系统交换谷氨酸和胱氨酸来维持GPX4的水平。控制铁死亡的基因也不同于控制其他形式细胞死亡的基因。使用sh RNA文库靶向编码预测线粒体蛋白的基因,包括编码核糖体蛋白L8(RPL8)、铁反应元件结合蛋白2(IREB2)、ATP合酶F0的基因,在HT1080和Ca LU-1细胞中筛选了铁死亡所需的六个蛋白质编码基因复合亚基C3(ATP5G3)、柠檬酸合酶(CS)、四肽重复结构域35(TTC35)和酰基辅酶A合成酶家族成员2(Ahepatic endotheliumCSF2)蛋白。此外,TFRC、ISCU、FTH1和FTL是铁死亡的Hub基因,通过影响Fe~(2+)水平来控制铁的摄取、代谢和储存。这些基因不同于控制细胞凋亡的基因,例如BH3相互作用结构域死亡激动剂(BID)PD0325901说明书、BCL2拮抗剂1(BAK1)、BCL2相关X(BAX)、细胞凋亡诱导因子线粒体相关1(AIFM1)或控制其他细胞死亡模式,例如参与MPT驱动的坏死的基因肽基脯氨酰异构酶F(PPIF)。本研究探讨铁死亡相关基因在桥本甲状腺炎中的表达及其在桥本甲状腺炎免疫浸润中的作用和潜在治疗靶点。方法:下载数据集GSE138198,筛选并分析桥本甲状腺炎患者和健康对照样本之间的差异表达基因(DEGs)。采用GO和KEGG富集分析对差异表达基因进行功能分析。将DEGs与铁死亡相关基因(FRGs)取交集,得到差异表达的FRGs(DEFRGs)。利用Cytoscape软件构建蛋白-蛋白相互作用网络(PPI),筛选Hub基因。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)对Hub基因进行验证。对每个Hub基因进行基因集富集分析(GSEA)。采用CIBERSORT分析免疫浸润特征。此外,利用连接图(Connectivity Map,CMAP)数据库鉴定潜在的治疗药物,并通过RT-PCR进行验证。结果:桥本甲状腺炎患者与健康对照者之间存在75个铁死亡相关基因的差异表达,其中上调基因24个,下调基因51个。基于PPI网络筛选出9个Hub基因。RT-PCR验证结果与DEFRGs数据一致。桥本甲状腺炎样本的免疫学特征为记忆性B细胞和M1型巨噬细胞增加,M0型巨噬细胞、单核细胞、活化的树突状细胞、活化的NK细胞和中性粒细胞减少。同时,上述表现与Hub基因的差异表达有关。收集桥本甲状腺炎患者和健康对照者的临床样本,通过q PCR对hub基因进行验证。通ABT-199过CMAP数据库,我们发现化合物MLN4924可能是桥本甲状腺炎的潜在治疗药物。最后在TNF-α和IFN-γ刺激的桥本甲状腺炎细胞模型中验证MLN4924对Hub基因的影响。结论:本研究对桥本甲状腺炎的分子发病机制有了更深入的认识。铁死亡通过影响免疫浸润在桥本甲状腺炎中发挥重要作用。铁死亡相关基因可能是桥本甲状腺炎潜在的治疗靶点。提示化合物MLN4924可作为桥本甲状腺炎的潜在药物进行进一步探索。

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素（RANK/https://www.selleck.cn/products/wnt-c59-c59.htmlRANKL/OPG）信号通路、核因子κB受体活化因子（NF-κB）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶（MAPK /ERK）信号通路、巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）信号通路、钙离子（Ca~(2+)）信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B（Src、Akt）信号通路、蛋白激酶C（PKC）信号通路等骨代谢重要通路，维生素D受体（VDR）基因、低密度脂蛋白相关蛋白5（LRP5）基因、亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因、雌激素受体（ER）基因等易感基因，载脂蛋白E（Apo E）、Klotho 蛋白（Klotho）、骨形态发生蛋白（BMP）、骨涎蛋白（BSP）等相关蛋白，以直接或间接的方式参与调控骨代谢，作用重叠相互联系，互为结insect toxicology果，已在本专业领域Ipatasertib配制达成共识。