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目的 分析新疆医科大学第一附属医院血液病中心制定的减低剂量预处理高剂量非体外Panobinostat去T细胞单倍体外周血造血干细胞移植术(RIC-haplo-HDPSCT)后早期细胞免疫及体液免疫的动态变化特点。方法 以行RIC-haplo-HDPSCT移植术的54例患者和20例健康者(对照组)为研究对象，通过流式细胞法检测患者移植术前、移植术后30 d、60 d、90 d及对照组外周血中CD3、CD4、CD8、CD19、CD56细胞的百分比，ELISA法检测移植后30 d、60 d、90 d患者免疫细胞(IgG、IgA、IgM)的百分比，观察RIC-haplo-HDPSCT术后上述免疫细胞的动态变化规律，并比较发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)与未发生aGVHD患者各免疫细胞百分比的变化情况。结果 (1)在此移植模式下，CD3~+T细胞在术后先下降后升高，至移植术后60 d可达对照组水平，60 d后缓慢降低，与对照组相比无差异；CD4~+ T细胞在移植术后30 d显著下降，随后逐渐恢复，但在术后90 d内均低于对照组；CD8~+T细胞在移植术后先降低后显著上升，在移植术后60 d上升至高于对照组水平，之后缓慢下降，与对照组相比无差异；CD19~+ B细胞在移植术后缓慢上升，但移植术后早期仍明显低于对照组。CD56~+NK细胞移植术后30 d时Medulla oblongata显著高于对照组，30 d后呈下降趋势，与对照组相比无差异。IgG在移植术后30 d升高，然后逐步下降，与对照组相比，差异无统计学意义。IgA及IgM移植术后早期低于对照组，但差异无统计学意义。(2)发生aGVHD患者的CD8~+T细胞数量在移植术后30 d时明显高于未发生aGVHD患者。CD56~+NK细胞数量在移植术后30 d明显低于未发生aGVHD患者。结论 本中心制定的RIC-haplo-HDPSCT获悉更多移植模式术后NK细胞恢复最快，其次为CD8~+T细胞及CD3~+T细胞；各体液免疫细胞在移植术后呈下降趋势，但降低并不明显，CD8~+T细胞数量增多及CD56~+NK细胞的减少可能与aGVHD的发生有关。

目的：观察骨髓增生异常综合征（MDS）患者铁过载的中医血瘀证证候，探讨MDS患者铁过载临床特征与血瘀证的相关性。方法：纳入MDS患者64例，根据铁过载诊断标准，将其分为MDS铁过载组（34例）和MDS非铁过载组（30例）。对纳入患者按中医血瘀证候评分表进行评分，整理分析患者临床资料包括输血量、预后危度分层、铁代谢指标（血清铁蛋白、血清铁、转铁蛋白、转铁蛋白饱和度、不饱和铁、总铁结合力），并与血瘀证进行相关性分析。结果：铁过载组血瘀证积分显著高于非铁过载组（P<0.05）；预后危度与血瘀证评分呈显著正相关（r=0.266,P<0.05）；输血量与血瘀证评分呈Biotoxicity reduction显著正相关（r=0.704,P<0.05）；血清ABT-263铁蛋白与血瘀证评分呈显著正相关（r=0.731,P<0.05）；转铁蛋白饱和度与血瘀证评分呈显著正相关（r=0.335,P<0.05）；转铁蛋白与血瘀证评分呈显著负VE-822生产商相关（r=-0.435,P<0.05）；不饱和铁与血瘀证评分呈显著负相关（r=-0.466,P<0.05）；总铁结合力与血瘀证评分呈显著负相关（r=-0.371,P<0.05）。结论：MDS铁过载的输血量、预后危度分层及铁代谢指标与血瘀证存在显著相关性，为进一步活血化瘀法论治MDS铁过载临床治疗研究提供参考。

目的 探讨铁死亡是否www.selleck.cn/products/PF-2341066参与高蛋氨酸饮食所致的ApoE~(-/-)小鼠肾脏损伤。方法 C57BL/6J普通饲料喂养小鼠作为正常对照组、将Apo E~(-/-)小鼠随机分为模型对照组(普通饲料喂养)和高蛋氨酸组(高蛋氨酸饲料喂养)，每组6只小鼠。PAS和Masson染色观察小鼠肾脏损伤以及纤维hyperimmune globulin化情况；免疫荧光染色检测肾组织纤维连接蛋白(fibronectin)含量；比色法检测肾组织二价铁离子含量；免疫荧光染色和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测肾组织丙二醛(malondialdehySTM2457 molecular weightde,MDA)含量；Western blotting和qRT-PCR检测p53、SLC7A11和GPX_4的蛋白以及mRNA表达水平，多组数据比较采用单因素方差分析，多重比较采用Tukey检验。结果 染色结果显示，载脂蛋白E(apolipoprotein E,Apo E)基因缺失引起肾脏细胞外基质沉积，出现肾损伤，而高蛋氨酸饮食则进一步加重了肾脏细胞外基质沉积，肾损伤加重；与正常对照组相比，模型对照组和高蛋氨酸组Fibronectin含量增加(F=87.330,P<0.001)，铁离子(F=111.200,P<0.001)和MDA(F=205.200,P<0.001)含量增加，p53的蛋白水平增加(F=32.380,P<0.001)、mRNA水平增加(F=24.840,P<0.001),SLC7A11和GPX_4的蛋白水平降低(F_(SLC7A11)=18.620,P<0.001;F_(GPX4)=20.830,P<0.001)、m RNA水平降低(F_(SLC7A11)=11.200,P<0.001;F_(GPX4)=23.530,P<0.001)；与模型对照组相比，以上指标在高蛋氨酸组变化更显著(P<0.05)。结论 铁死亡参与了高蛋氨酸饮食所致的Apo E~(-/-)小鼠肾脏损伤。

目的 探讨铁死亡是否www.selleck.cn/products/PF-2341066参与高蛋氨酸饮食所致的ApoE~(-/-)小鼠肾脏损伤。方法 C57BL/6J普通饲料喂养小鼠作为正常对照组、将Apo E~(-/-)小鼠随机分为模型对照组(普通饲料喂养)和高蛋氨酸组(高蛋氨酸饲料喂养)，每组6只小鼠。PAS和Masson染色观察小鼠肾脏损伤以及纤维hyperimmune globulin化情况；免疫荧光染色检测肾组织纤维连接蛋白(fibronectin)含量；比色法检测肾组织二价铁离子含量；免疫荧光染色和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测肾组织丙二醛(malondialdehySTM2457 molecular weightde,MDA)含量；Western blotting和qRT-PCR检测p53、SLC7A11和GPX_4的蛋白以及mRNA表达水平，多组数据比较采用单因素方差分析，多重比较采用Tukey检验。结果 染色结果显示，载脂蛋白E(apolipoprotein E,Apo E)基因缺失引起肾脏细胞外基质沉积，出现肾损伤，而高蛋氨酸饮食则进一步加重了肾脏细胞外基质沉积，肾损伤加重；与正常对照组相比，模型对照组和高蛋氨酸组Fibronectin含量增加(F=87.330,P<0.001)，铁离子(F=111.200,P<0.001)和MDA(F=205.200,P<0.001)含量增加，p53的蛋白水平增加(F=32.380,P<0.001)、mRNA水平增加(F=24.840,P<0.001),SLC7A11和GPX_4的蛋白水平降低(F_(SLC7A11)=18.620,P<0.001;F_(GPX4)=20.830,P<0.001)、m RNA水平降低(F_(SLC7A11)=11.200,P<0.001;F_(GPX4)=23.530,P<0.001)；与模型对照组相比，以上指标在高蛋氨酸组变化更显著(P<0.05)。结论 铁死亡参与了高蛋氨酸饮食所致的Apo E~(-/-)小鼠肾脏损伤。

目的 旨在比较序贯大剂量地塞米松、利妥昔单抗免疫抑制治疗后加用艾曲波帕与直接应用艾曲波帕治疗的儿童慢性免疫性血小板减少症(CITP)数据，证实免疫抑制基础上的促血小板生成治疗可提高儿童CITP疗效。方法 本研究为单中心非随机对照研究，将2018年1月—2021年8月入组的CITP患儿分为两组：(1)直接应用艾曲波帕(简称直接组);(2)经大剂量地塞米松、利妥昔单抗升阶梯治疗无效时加用艾曲治疗(简称序贯组)。评价两组疗效、安全性和药物经济学指标。结果 共入组48例患儿，男性23例，女性25例，中位发病年龄为5.0(3.6-7.5)岁，病程均超过一年，治疗前血小板(PLT)计数为10.0(4.0-15.0)×10~9/L。(1)基线数据：直接组男16例，女13例，序贯组男7例，女Etoposide生产商12例。两组的发病年龄、病程、PLT计数等基线无统计学差异(P>0Mechanistic toxicology.05)。(2)疗效：直接组的总体反应率为69%,完全反应率21%,无效率31%;序贯组分别为84%、26%和16%。直接组艾曲波帕平均治疗时长为8.2个月，停药率41%,62%的患儿PLT水平维持在50×10~9/L以上水平，平均治疗费用为7.38万元；序贯组艾曲波帕平均治疗时长为7.0个月，停药率58%,74%的患儿PLT维持在50×10~9/L以上，平均治疗费用为9.87万元；停药率及PLT维持在50×10~9/L以上的患儿比例，序贯组均更多高于直接组，但不存在统计学差异。(3)安全性：直接组药物相关不良事件3例(10%),序贯组8例(42%),无统计学差异(P>0.05)。结论 与直接应用艾曲波帕治疗儿童CITP相比，在免疫抑制剂治疗基础上应用艾曲波帕，疗效更好且不增加副作用和经济负担，可考虑作为儿童CITP二线治疗的优选策略。

研究背景及目的卵巢癌是全球妇科癌症死亡的主要原因之一,高级别浆液性癌是最常见的卵巢恶性上皮性肿瘤病理学亚型。卵巢癌患者传统治疗包括肿瘤细胞减灭术、以铂类和紫杉烷类为基础的化疗以及放疗,但是预后较差。新型药物聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly-ADP ribose polymerase,PARP)抑制剂用于晚期卵巢癌患者一线维持治疗的有效性已被证实。同源重组修复(homologous recombination repair,HRR)是细胞DNA双链断裂修复的高保真途径。构成HRR通路的分子出现遗传学或者表观遗传学异常均会导致同源重组修复缺陷(homologous recombination deficiency,HRD)。存在HRD的肿瘤细胞由于无法通过HRR途径修复受损的DNA双链,因此对PARP抑制剂治疗敏感,同时,HRR途径功能障碍使细胞依赖其他精确度较低的修复方式修复受损的DNA双链,从而产生特定的、Bioactive Cryptides可以被量化的基因组学改变,这也是目前HRD检测的理论基础。HRD检测产品采用二代测序(next generation sequencing,NGS)技术,检测的内容包括两项:乳腺癌易感基因(breast cancer susceptibility gene,BRCA)1/2突变检测及基因组不稳定性评分(genomic instability score,GIS),后者简称HRD评分。HRD检测结果包括HRD阳性(存在HRD)和HRD阴性(不存在HRD)。HRD对卵巢癌患者临床应用PARP抑制剂治疗方案选择、疗效预测以及预后评估有重要意义,因此对HRD卵巢癌临床病理学研究很有必要。高级别浆液性癌是恶性程度最高的卵巢癌病理学亚型,然而,目前尚无HRD卵巢高级别浆液性癌临床病理学特征与预后方面的研究。本研究通对36例卵巢高级别浆液性癌患者进行HRD检测,探讨卵巢高级别浆液性癌HRD与临床病理学特征及预后之间的关系,以期有助于筛选HRD检测的候选人群、指导PARP抑制剂治疗以及评估患者预后。材料与方法收集2021年1月-2022年6月吉林大学第二医院诊断为卵巢高级别浆液性癌的肿瘤组织石蜡包埋标本36例。收集所有病例的临床病理学资料并且通过电话随访获得患者的生存数据。应用免疫组织化学染色技术检测36例卵巢高级别浆液性癌免疫组织化学标记物ER、PR、Ki67、p53、WT1、PMS2、MLH1、MSH6、MSH2的表达情况。运用NGS技术对标本进行HRD检测。临床病理学评估参考2020年第5版世界卫生组织(World Health Organization,WHO)女性生殖系统肿瘤分类中卵巢高级别浆液性癌的诊断标准。评估指标包括卵巢高级别浆液性癌的实性、内膜样、移行细胞样(solid,endometrial-like,transitional,SET)形态和乳头样、微乳头样、裂隙样等经典形态学特征及免疫组织化学标记物表达情况。采用SPSS 29.0分析卵巢高级别浆液性癌不同HRD状态与临床病理学特征及预后的关系。对生存数据进行Kaplan-Meier法以及COX比例风险回归模型分析,探讨卵巢高级别浆液性癌不同HRD状态与临床病理学特征及预后之间的关系。结果1.本研究共纳入卵巢高级别浆液性癌患者36例,年龄42-74岁,平均年龄为55.64±7.37岁,发病年龄<55岁16例(44.4%),≥55岁20例(55.6%);10例(27.8%)绝经前发病,26例(72.2%)绝经后发病;妊娠次数<2次12例(33.3%),≥2次24例(66.7%);无流产史16例(44.4%),有流产史20例(55.6%)。首发症状:腹痛或腹胀14例(38.9%),腹部包块13例(36.1%),阴道流液或流血5例(13.9%),排尿困难、腹水或颈部淋巴结肿大4例(11.1%)。肿瘤直径2.5-20 cm,中位直径6.00(3.50,9.00)cm,直径<6 cm 17例(47.2%),≥6 cm 19例(52.8%);22例(61.1%)无淋巴结转移,14例(38.9%)有淋巴结转移。FIGO分期Ⅰ+Ⅱ期5例(13.9%)、Ⅲ+Ⅳ期31例(86.1%)。2.卵巢高级别浆液性癌经典形态13例(36.1%),SET形态23例(63.9%);无地图样/粉刺样坏死10例(27.8%),有地图样/粉刺样坏死26例(72.2%)。ER阳性肿瘤细胞比例<10%8例(22.2%),10%-20%12例(33.3%),20%-50%10例(27.8%),>50%6例(16.7%);PR阳性肿瘤细胞比例<10%12例(33.3%),10%-20%12例(33.3%),20%-50%7例(19.4%),>50%5例(13.9%)。Ki67阳性率<70%14例(38.9%),≥70%22例(61.1%);p53在36例(100%)肿瘤均为突变型表达,其中,p53突变型过表达30例(83.3%),p53突变型裸表达6例(16.7%);WT1阴性3例(8.3%),WT1阳性33例(91.7%);36例(100%)肿瘤均无PMS2、MLH1、MSH6、MSH2表达缺失。3.HRD阴性12例(33.3%),HRD阳性24例(66.7%)。HRD评分≥41伴BRCA1/2基因突变6例;HRD评分≥41不伴BRCA1/2基因突变18例;HRD评分<41伴BRCA1/2基因突变0例;HRD评分<41不伴BRCA1/2基因突变12例。在HRD评分的3个指标基因组杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)、端粒等位基因失衡(telomeric allelic imbalance,TAI)以及大片段迁移(large-scale state transitions,LST)中,LST对HRD评分贡献最高,共28例(77.8%),TAI值对HRD评分贡献值最高的有8例(22.2%),而LOH在全部病例对HRD评分贡献值都最低。BRCA1基因胚系突变、体细胞突变分别为2例(5.6%)、2例(5.6%)。BRCA2基因胚系突变2例(5.6%)。4.对HRD阳性组和阴性组患者临床病理学特征进行统计学分析结果显示SET形态在两组病例之间存在显著差异(P<0.05)。对HRD阳性组中BRCA1/2基因突变和无突变两亚组患者临床病理学特征进行统计学分析结果显示妊娠次数在两亚组之间存在显著差异(P<0.05)。5.本研究获取36例患者随访数据,随访时间5-41个月,中位随访时间17个月(13,22),复发或转移患者10例(27.8%),死亡1例(2.8%),FUT-175 molecular weight总计不良预后11例(30.6%)。6.单因素生存分析结果显示p53突变型裸表达与总生存期(overall survival,OS)缩短显著相关(P<0.05),与无进展生存期(progression-free survival,PFS)无关。7.多因素生存分析结果显示卵巢高级别浆液性癌HRD阴性与患者PFS缩短显著相关(P<0.05),HRD阴性可以作为预测卵巢高级别浆液性癌患者预后的独立危险因素。结论1.卵巢高级别浆液性癌HRD阳性率高达66.www.selleck.cn/products/diabzi-sting-agonist-compound-37%,BRCA1/2基因突变率16.7%,BRCA1/2基因胚系突变率较BRCA1/2基因体细胞突变率高。2.与HRD阴性卵巢高级别浆液性癌相比,HRD阳性卵巢高级别浆液性癌的组织形态学更倾向于具有SET形态。临床病理学诊断时,SET形态的判断有助于筛选HRD检测候选人群。3.卵巢高级别浆液性癌HRD阴性与PFS缩短显著相关,HRD阴性可以作为预测卵巢高级别浆液性癌患者预后的独立危险因素。

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是第二大神经退行性疾病,其主要临床症状表现为静止性震颤、肌僵直、运动迟缓和姿势不稳等。越来越多的研究证实,脑铁代谢异常导致的铁沉积是PD黑质区多巴胺能神经元退变的重要因素。溶酶体是细胞内重要的储铁细胞器,由于其酸性和还原性环境,溶酶体内的铁通常以还原型的二价铁形式存在。当溶酶体膜被破坏时,大量的二价铁释放至胞浆则会引发Fenton反应而造成细胞死亡。转录因子EB(transcription FactoSTM2457 molecular weightr EB,TFEB)是调节溶酶体再生和自噬的重要因子,已有研究证实,高表达TFEB能够改善溶酶体功能,从而在PD中发挥神经保护作用,是防治PD的有效策略之一。现有的研究主要集中在TFEB调节溶酶体再生和清除病理性蛋白积聚,而TFEB能否调节铁代谢相关蛋白进而影响铁死亡,尚不清楚。目的:本课题将探讨TFEB调节铁代谢相关蛋白以及抑制铁死亡的作用和可能机制。方法:采用脑立体定位技术将携带有tfeb的腺相关病毒(adeno-associated virus carried TFEB,AAV-TFEB)注射至C57BL/6小鼠黑质区,构建黑质区高表达TFEB的小鼠模型(Vehicle小鼠和AAV-TFEB小鼠)。采用旷场实验、爬杆试验和转棒实验评估模型小鼠的运动功能。采用冰冻切片、免疫荧光染色和免疫印迹等方法,检测溶酶体再生和铁代谢相关蛋白的变化。采用携带有tfeb的慢病毒转染PC12细胞,构建高表达TFEB的PC12细胞模型(Lv-GFP细胞和Lv-TFEB细胞)。在上述模型中,分别给予铁死亡诱导剂(Erastin)或枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate,FAC)处理,构建铁死亡细胞模型。采用2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate)探针结合荧光显微镜的方法检测细胞内活性氧水平变化。采用免疫印迹检测铁代谢和铁死亡相关蛋白的变化。铁超载条件下,采用细胞膜片钳技术检测高表达TFEB对细胞膜电位的影响。在PC12细胞上,采用si RNA和免疫印迹相结合的方法,检测敲低TFEB后铁死亡相关蛋白的变化。结果:1.小鼠黑质区高表达TFEB能够促进溶酶体再生。与Vehicle组小鼠相比,AAV-TFEB组小鼠黑质区溶酶体相关膜蛋白1(lysosome-associated membrane protein 1,LAMP1)和组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB)的蛋白水平显著升高,提示在小鼠黑质区高表达TFEB后能够促进溶酶体再生并且增强其降解能力。2.黑质区高表达TFEB可增强小鼠的运动能力。在旷场实验中,与Vehicle组小鼠相比,AAV-TFEB组小鼠的持续运动总距离显著增加,但是两组小鼠在中央区域停留的时间无明显差异,提示黑质区高表达TFEB可增强小鼠的持续运动能力,但不会出现焦虑样行为。在爬杆实验和转棒实验中,两组小鼠爬杆所需要的总时间以及在转棒上停留的时间均无明显差异,提示黑质区高表达TFEB对小鼠的运动协调能力无显著影响。3.黑质区高表达TFEB对铁代谢相关蛋白的影响。(1)与Vehicle组小鼠相比,AAV-TFEB组小鼠黑质区转铁蛋白受体1(transferrin receptor,TfR1)的蛋白水平显著升高,而二价金属离子转运体(divalent metal transporter1,DMT1)的蛋白水平无明显变化,提示黑质区高表达TFEB后可能增加了细胞和溶酶体的摄铁能力,但是不影响溶酶体内铁的转出。(2)与Vehicle组相比,AAV-TFEB组小鼠黑质区铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)和铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH)的蛋白水平显著升高,提示黑质区高表达TFEB可能增强了细胞的储铁能力。4.高表达TFEB不影响铁自噬选择性受体–核受体共激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)的蛋白水平。在小鼠黑质区高表达TFEB或者在PC12细胞上高表达TFEB后,铁自噬的选择性受体NCOA4的蛋白水平均无明显变化,提示高表达TFEB可能不影响NCOA4介导的铁自噬。5.TFEB在铁死亡中的作用及机制。(1)构建高表达TFEB的PC12细胞(无荧光),给予铁死亡诱导剂Erastin(10μM)处理24小时后,与Lv-Flag组细胞相比,Lv-TFEB组细胞的LDH水平显著降低,提示高表达TFEB可缓解Erastin诱发的细胞毒性。(2)在高表达TFEB的PC12细胞上,给予铁死亡诱导剂Erastin(10μM)处理24小时后,与Lv-GFP组细胞相比,Lv-TFEB组细胞的TfR1蛋白水平显著升高,而两组细胞的DMT1蛋白水平无显著变化,提示在Erastin诱发铁死亡的细胞模型中,高表达TFEB可能仍然具有增强溶酶体铁储存的能力。(3)在高表达TFEB的PC12细胞上,给予FAC(100μM)处理24小时后,Lv-GFP和Lv-TFEB细胞的TfR1蛋白水平均显著下降,但是,与Lv-GFP+FAC组细胞相比,Lv-TFEB+FAC组细胞的TfR1蛋白水平仍然显著增高Microscope Cameras,提示在铁超载环境下,高表达TFEB可减缓TfR1蛋白水平下降。(4)在高表达TFEB的PC12细胞上,分别给予Erastin和FAC处理24小时,铁自噬选择性受体NCOA4的蛋白水平均无显著变化,提示在上述两种细胞模型中,高表达TFEB可能不影响NCOA4介导的铁自噬。(5)在电流模式下,Lv-GFP和Lv-TFEB细胞均无自发和诱导放电,记录的5个细胞平均静息膜电位分别为-19.39 mV(Lv-GFP细胞)和-21.06 mV(Lv-TFEB细胞)。灌流液加入FAC(100μM)后,Lv-GFP细胞的膜电位显著降低到-28.53 mV,但是Lv-TFEB细胞的膜电位无显著变化,提示高表达TFEB可维持细胞的电活动不受铁超载影响。(6)在高表达TFEB的PC12细胞(无荧光),给予铁死亡诱导剂Erastin(10μM)处理24小时后,与Lv-TFEB组细胞相比,Lv-Flag组细胞的ROS水平显著升高,提示高表达TFEB可缓解Erastin诱发的ROS水平升高。(7)与Vehicle组小鼠相比,AAV-TFEB组小鼠黑质区xCT和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的蛋白水平均显著升高。同时,在PC12细胞中,高表达TFEB后GPX4的蛋白水平显著升高,而敲低TFEB后,GPX4的蛋白水平则显著下降。以上提示,TFEB可能通SB203580细胞培养过调节xCT-GPX4通路而抑制铁死亡。结论:综上所述,黑质区高表达TFEB可增强小鼠的持续运动能力,上调铁代谢相关蛋白TfR1、FTL和FTH的蛋白水平,但是不影响铁自噬选择性受体NCOA4的蛋白水平。在PC12细胞上,TFEB可能通过(1)调节TfR1而增加溶酶体的储铁能力,稳定细胞膜电位,(2)调节xCT-GPX4通路,降低细胞内ROS水平,从减少铁离子聚集和脂质过氧化物累积两方面而抑制铁死亡。本课题的研究为丰富TFEB功能提供了理论依据,为防治PD提供了新视角和新策略。

肝癌通常由慢性肝炎发展而来,2020年,原发性肝癌是全球第六大最常见癌症,也是死亡率第三的肿瘤,约有90.6万新发病例和83万死亡病例。临床使用的化疗药物的疗效并不乐观。早期肝癌可通过手术切除、消融或肝移植治愈,但由于肝源紧缺和肿瘤易复发,治疗效果并不理想。除此之外,早期只有不到20%的患者被诊断出来。大多数患者确诊时通常已到晚期,并伴有严重合并症,手术已不合适,化疗成为一种主要的治疗方式。然而,临床使用的化疗药物的疗效并不乐观。由于经典化疗药物的严重不良反应,中药已成为潜在的候选药物。隐丹参酮(Cryptotanshinone,CPT)是从中药丹参中提取的一种脂溶性活性化合物,具有抗纤维化、神经保护、抗炎、抗动脉粥样硬化,抗氧化活性和抗肿瘤等多种药理活性。对于抗肿瘤活性,目前研究证明CPT对多种类型的癌症具有抗癌作用,其抗癌活性主要体现在抑制肿瘤细胞增殖和侵袭并促进肿瘤细胞凋亡。在本研究中,探讨了CPT对肝癌细胞的抗肿瘤作用及其分子机制。通过实验证明了CPT能有效抑制A549,PC-9,EC109,CAES17,HepG2,Hu H7,SMMC-7721等细胞的增殖,并发现CPT对肝癌细胞具有较好的疗效。在HepG2,Hu H7,Hepa1-6,SMMC-7721细胞中,CPT对HepG2和SM购买ErastinMC-7721细胞的抑制作用最强,48h的IC50分别为3.9和4.8μM。10μM CPT显著抑制HepG2和SMMC-7721细胞的迁移并诱导其凋亡。基于以上实验数据,在体内建立裸鼠SMMC-7721肿瘤模型来评价CPT的体内抗肿瘤活性。结果显示CPT能够以浓度依赖的方式抑制SMMC-7721肿瘤(基于细胞筛选实验得出的CPT敏感细胞alcoholic steatohepatitis株)的生长,并且各组小鼠在给药期间体重未发生明显变化,这些结果说明CPT在体内对SMMG132MC-7721肿瘤细胞具有明显的生长抑制作用,并且毒性较低。此外,CPT还可以在体内诱导肿瘤细胞凋亡并抑制细胞周期相关蛋白Ki67的表达,这也进一步说明了CPT可以抑制肿瘤细胞的增殖。随后进行相关的细胞实验探索CPT的作用机制。基于前期细胞筛选实验结果,选取了CPT最敏感的两株细胞HepG2和SMMC-7721细胞作为细胞实验的载体。首先实验发现,经过CPT处理后的HepG2和SMMC-7721细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ的相对表达量显著增加;当CPT联合自噬抑制剂Spautin-1后,LC3B-Ⅱ的表达量相比与单独用CPT处理降低,更为重要的是,细胞毒性实验结果显示Spautin-1的加入可以逆转CPT的细胞毒性,同时阻止HepG2和SMMC-7721细胞的凋亡。这说明CPT可能是通过自噬促进这两种肿瘤细胞凋亡。研究结果表明CPT可能成为肝癌治疗的潜在药物。

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINSmoothened AgonistC00313促进肺癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法:Resultados oncológicos选用肺癌细胞株A549、H466、H1299、H522,通过实时荧光定量PCR检测LncRNA LINC00313在肺癌细胞中的表达。采用Transwell实验和划痕实验等表型实验检测肺癌细胞侵袭和迁移情况。敲除LINC00313,CCK-8实验及流式细胞仪检测过量GPX4对肺癌细胞增殖和细胞凋亡的影响。LINC00313基因敲除后，检测在Erastin或RSL-3处理的A549细胞内的铁水平及ROS含量，探讨LINC00313与肺癌细胞铁死亡的关系。结果:与正常细胞相比，肺癌细胞中LINC00313的表达明显升高(P<0.05);表型实验结果显示LINC00313促selleck RAD001进肺癌细胞增殖，同时抑制其凋亡。Transwell实验和划痕实验结果表明LINC00313可以促进肺癌细胞侵袭和迁移。GPX4过表达可以逆转LINC00313敲除导致肺癌细胞的增殖下降和凋亡增加。在Erastin或RSL3处理的A549细胞中，LINC00313基因敲除后细胞内的铁和Fe~(2+)水平下降，脂质过氧化ROS(Lipid ROS)含量产生显著减少。结论:肺癌细胞中LINC00313表达明显升高，过表达LINC00313可以促进肺癌细胞侵袭和迁移，作用机制可能与促进肺癌细胞铁死亡抵抗，从而导致肺癌的发生及转移有关。

为研发能降焦减害并散发特殊香气的多孔型材料，本研究先以魔芋葡甘聚糖(KGM)为原料，对制备工艺中的氨水用量和交联时间展开优化，并进一步与ZYFJ、WBTM香料复合，经流延成型制成复合多孔膜。通过FT-IR、SEM、等温N_2吸附以及压汞对材料的结构、形貌以及孔隙进行表征，考察了复合多孔膜的微萃取析出Toxicological activity成分。结果表明，多孔膜最优工艺为浓氨水1.6 ml及交联12 h,此时KGM通过脱乙酰基增加了分子链段彼此缠结，赋予多孔膜更高强度。与香料Gefitinib-based PROTAC 3复合后，多孔膜具有KGM片层与孔隙结合的典型形貌，与更多ZYFJ香料复合实现了KGM对其的完全包裹从而维持了KGM原有的三维网络结构；与WBTM复合赋予了更优的介孔和大孔结构。整体上，复合多孔膜具有平均孔径小于20 nm的介孔、大于40μm的大孔、超过90%的膜内孔隙率，能萃取到香料中的特殊香气成分，能对卷烟烟气中的多数有害物质实现有效吸附；使复合多孔膜在实现降焦减害目的的同时能丰富卷烟的烟气香韵。