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【目的】克隆小鼠Eif4A1基因，探讨真核翻译起始因子Eif4A1蛋白的结构和生物学特性。【方法】以小鼠脑总RNA为扩增模板，利用RT-PCR扩增获得小鼠Eif4A1基因的CDS区，构建原核表达载体pGEX-4T-Eif4A1~(-Flag)和真核表达载体pcDNA3.0-Eif4A1~(-Flag)；利用大肠杆菌表达系统对原核质粒进行诱导表达、纯化及鉴定；在HEK-293T细胞中转染真核表达载体，用免疫印迹技术和免疫荧光技术检测Eif4A1蛋白在HEK-2ICI 46474体内实验剂量93T细胞内表达及分布情况；利用多种生物学信息软件分析该蛋白的理化性质、信号肽及其结构特点。【结果】鼠源Eif4A1基因CDS区长1221 bp，编码407个氨基酸残基，通medical protection过原核诱导表达，Eif4A1蛋白主要以包涵体的形式存在，约72 kD。将真核表达载体pcDNA3.0-Eif4A1~(-Flag)转染HEK-293T细胞，用免疫印迹技术检测到Eif4A1蛋白和FLAG标签蛋白，显示Eif4A1蛋白在HEK-293T中成Ceralasertib生产商功表达，通过间接免疫荧光证明该蛋白主要定位在HEK-293T细胞质中。生物信息学分析表明，Eif4A1蛋白理化性质不稳定，属亲水性蛋白，无跨膜结构域，不含有信号肽，α-螺旋是其主要的二级结构。【结论】作为真核细胞翻译起始的重要蛋白，通过原核表达载体和真核表达载体的构建和表达，可对其生物学功能和结构进行深入研究，特别是在体外和细胞内的表达系统中鉴定Eif4A1的互作蛋白，对其作用网络进行探索。

目的：探讨不同国际妇产科学联合会（FIGO）分期子宫内膜癌患者外周血红细胞分布宽度（RDW）、血清对氧磷酶-1(PON-1)表达水平差异及其诊association studies in genetics断价值。方法：选取我院2018年1月到2020年1月收治的80例子宫内膜癌患者作为研究对象，根据FIGO分期对所有患者进行分组，分为Ⅰ期组23例，Ⅱ期组22例，Ⅲ期组18例，Ⅳ期组17例。另选取同期来我院体检的30名健康志愿者作为对照组，对比所有受检者RDW、PON-1表达水平，并应用ROC曲线分析外周血红细胞分布宽度、血清对氧磷酶-1表达水平对不同FIGO分期子宫内膜癌的诊断价值。对80例子宫内膜癌患者进行2年随访，将2年内死亡的25例患者分为死亡组，将其余55例患者分为存活组，对比死亡组与存活组临床一般情况与RDW、PON-1表达水平，并应用logistic回归分析分析RDW、PON-1对子宫内膜癌的预后预测价值。结果：五组受检者RDW、PON-1水平对比差异显著，Ⅳ期组RDW水平高于Ⅲ期组、Ⅱ期组、Ⅰ期组和对照组，Ⅳ期组PON-1水平低于Ⅲ期组、Ⅱ期组、Ⅰ期组和对照组（P<0.05）;RDW结合PON-1联合诊断的准确度、敏感度、阳性预测值高于RDW单一诊断和PON-1单一诊断（P<0.05）。RDW诊断子宫内膜癌不同分期价值曲线下面积为89.63，最佳诊断着色界限值为75.73%,PON-1的LEE011研究购买曲线下面积为78.89，最佳诊断着色界限值为82.53%，两者联合的曲线下面积为84.26，最佳诊断着色界限值为87.57%；存活组与死亡组患者性别、年龄、病理类型对比无明显差异（P>0.05），两组患者FIGO分期、基层浸润、组织分化程度、血清RDW与PON-1表达水平对比差异显著（P<0.05）;logistic回归分析结果表明：基层浸润、RDW与PON-1为子宫内膜癌患者预后的独立影响因素（P<0.05）。结论：RDW、PON-1联合对子宫内膜癌FIGO分期的诊断价值较高，且基层浸润、RDW与PON-1为子宫内膜癌患者预后的独立影响因素。临床上需针对基层浸润、RDW升高与PON-1水平降低的患购买Taurine者采取相关措施，改善治疗方案，降低患者死亡率情况。

目的：观察重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗手足口病口腔溃疡患儿的效果。方法：回顾性分析2021年9月至2022年10月该院收治的85例手足口病口腔溃疡患儿的临床资料，根据不同治疗方式将其分为对照组（n=43）和研究组（n=42）。对照组给予常规治疗，研究组在对照组基础上增加重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗，比较两组临床疗效、治疗前后疼痛程度[修订版WongBaker面部表情疼痛评估法（FPS-R）]评分、口腔溃疡愈合时间、平均止痛时间、住院时间、治疗前后血常规指标水平（白细胞计数、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比）和治疗1周内不良反应发生率。结果：研究组治疗总有效率为95.24%(40/42)，高于对照组的79.07%(34/43)，差异有统计学意Baricitinib小鼠义（P<0.05）；治疗2 h、1 d、3 d、5 d及1周后，两组FPS-R评分均低于治疗前，且研究组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；研究组愈合时间、平均止痛时间和住院时间均短于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；两组治疗前后白细胞计数更多、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：在常规治疗Institutes of Medicine基础上采用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗手足口病口腔溃疡患儿可提高治疗总有效率，缩短愈合时间、平均止痛时间和住院时间，降低疼痛程度评分，效果优于单纯常规治疗。

目的 分析动态增强磁共振成像(DCE-MRI)联合糖类抗原CA15-3(CA15-3)和血小板衍生生长因子(PDGF)对乳腺癌的诊断价值，并分析其与乳腺癌发生的相关性。方法 选取2021年12月—2022年INCB018424采购12月在台州市中心医院治疗的48例乳腺癌患者为乳腺癌组，另选取同期在该院进行健康检查的48例健康女性为健康组。比较两组女性的DCE-MRI影像表现、CA15-3水平及PDGF水平；分析DCE-MRI、CA15-3、PDGF与乳腺癌发生的相关性；分析DCE-MRI、CA15-3、PDGF三者单独检测和联合检测对乳腺癌的诊断价值。结果 乳腺癌组患者的各DCE-MRI影像表现均明显高于健康组女性，差异均有统计学意义(均P<0.05)。乳腺癌组患者的CA15-3、PDGF水平[(43.65±10.31)U/ml、(601.21±88.63)pg/ml]均显著高于健康组[(16.99±3.21)U/ml、(185.01±98.26)pg/ml],差异均有统计学意义(t=17.105、21.791,均P<0.05)。各DCE-MRI参数(病灶短径、长径、边缘毛刺、ADC值及TIC分型)、CA15-3及PDGF表达水平均与乳腺癌发生呈显著正相关关系(r=0.Blebbistatin溶解度564、0.661、0.618、0.631、0.603、0.596及0.616,均P<0.05)。ROC曲线显示，DCE-MRI联合CA15-3、PDGF诊断乳腺癌的曲线下面积为0.825,灵敏度为81.61%,特异度为83.27%,曲线下面积明显高于任意一项单独检测，具有良好的诊断效能。结论 DCE-MRI参数、CA15-3、PDGF表达水平均与乳腺癌发生呈正相关关系，且DCE-MRI联合CA15-3、PDGF诊断乳腺癌具有突出价值，可显著提高乳腺癌诊断准确性Physiology based biokinetic model，临床应用价值较高。

针对微柱凝胶卡血型分析仪判读准确率较低的检测问题，设计一种基于机器视觉的全自动血型检测系统。该系统通过相关的特征提取算法和图像识别算法来提高系统的判读准确性。在特征提取算法中，采用颜色通道分离合并和熵处理结合的图像处理算法，提取血型图像中的颜色特征和灰度特征，从而提高图像分析的能力。在图像识别算法中，以AlexNet网络模型为基础，设计一种改进的分类神经网PLX-4720配制络模型进行训练预测，在网络结构中加入一个通道注意力机制，赋予权重，扩大特征对结果的影响，在训练参数中采用Adam优化器，并优化多分类交叉熵损失函数，ImmunoCAP inhibition调整AG-221临床试验学习率固定步长衰减策略的参数，有利于加快模型收敛速度，提高模型的准确率。之后设计判读界面进行系统调试。实验结果表明：使用所设计的全自动血型检测系统，绝大多数的血型图像都可准确检测出结果，相较于原来的93.789%，准确率提高，可达到97.516%；并且结合所做的血型检测试验，可以有效地判读出凝胶卡的最终试验结果。所采用的血型判读技术对微柱凝胶卡检测是行之有效的，可大大提高检测系统的判读准确性。

研究背景:急性肾损伤(Acute Kidney Injury,AKI),表现为肾功能短期内的快速损伤,并伴随着很高的住院率和死亡率。其中,约有29%的AKI患者发展为慢性肾脏病慢性肾脏疾病(Chronic kidney disease,CKD)和终末期肾脏病。目前,寻找防治AKI发展为CKD的治疗策略已成为当务之急。肾脏进行纤维化是AKI发展为CKD的主要原因,主要表现为肌成纤维细胞的增多,细胞外基质的大量积累。因此,如何有效抑制肾脏纤维化对于防止AKI-CKD至关重要。研究表明,肾纤维化过程中,周细胞是肌成纤维细胞的主要来源。周细胞,是间充质来源的细胞,主要表达血小板来源的生长因子(Platelet-Derived Growth Factor Receptor-β,PDGFR-β)、硫酸软骨素蛋白聚糖Chondroitin Sulfate Proteoglycan 4,NG2)和细胞表面糖蛋白(Melanoma Cell Adhesion Molecule,CD146)。周细胞主要黏附于毛细血管内皮上,调控血流,维持血管的功能。Kramann等人表明,AKI后,周细胞的丢失,肾脏纤维化变轻,这可能也和周细胞是肌成纤维细胞的祖细胞有着密不可分的关系。因此,如何有效防止周细胞转分化为肌成纤维细胞是延缓肾纤维化的有效方法。代谢重编程,是指生理或者病理状态下,机体为了满足能量供应需求,其能量来源发生了改变。细胞分化过程中,往往伴随着能量代谢的改变。Zhao等人发现脂肪酸氧化(Fatty acid oxidation,FAO)和糖酵解之间稳态变化决定着皮肤成纤维细胞往肌成纤维细胞转分化,激活FAO或者抑制糖酵解可减少成纤维细胞转分化。目前AKI进展中CKD中,周细胞中代谢变化尚无研究报道。因此,本文首先观察了AKI进展至CKD中,周细胞转分化和代谢变化,接下来通过药物调控周细胞的代谢重编程,观察其对周细胞转分化的影响,并进一步探明调控周细胞代谢重编程的具体分子机制。研究目的:1.明确AKI进展至CKD中,周细胞转分化和代谢变化。2.明确调控代谢重编程是否减少周细胞转分化,延缓AKI进展至CKD。3.进一步明确调控周细胞代谢重编程的分子机制。研究方法:一、动物试验1.构建单侧缺血再灌注(Unilateral renal ischemia reperfusion injury,u IRI)模型:6-8周龄雄性C57BL/6小鼠随机做好编号。采用单侧夹闭肾脏血管30min,取材前一天切除对侧肾脏的方法构建u IRI模型,模拟人类AKI至CKD的进程,并在术后2天、7天和14天处死小鼠,收集血液和肾脏。试剂盒检测肾功能,PAS观察肾脏损伤,Masson染色和天狼星红染色观察肾脏胶原纤维的沉积,免疫荧光观察肾脏纤维化基因α-SMA,Fibronectin和Collagen I的表达。2.观察周细胞转分化和代谢变化:免疫荧光共定位观察u IRI不同时间点PDGFR-β~+周细胞、CD146~+周细胞和NG2~+周细胞是否分别转分化为α-SMA~+肌成纤维细胞。为探明转分化机制,利用PDGFR-β磁珠分选u IRI不同时间点周细胞,转录组测序分析周细胞中FAO相关基因(过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂-1α(Peroxisome proliferator-activated receptor gammacoactivator-1α,PGC1α)和肉毒碱棕榈酰转移酶(Carnitine palmitoyltransferase1A,CPT1A),糖酵解相关基因(己糖激酶(Hexokinase 2,HK2),丙酮酸激酶(Pyruvate Kinase M 2,PKM2),乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase A,LDHA)的表达情况,实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q PCR)和免疫荧光共定位进一步验证周细胞中的FAO和糖酵解相关基因的表达情况,3.给与药物调控周细胞的代谢变化:分别给与PGC1α的激活剂以激活FAO或者HK2的抑制剂以抑制糖酵解,并检测周细胞转分化和肾脏纤维化相关指标。4.给与AMPK信号通路激活剂,检测周细胞FAO和糖酵解的变化、周细胞转分化和肾脏纤维化的相关指标。二、细胞试验由于肾脏中周细胞缺乏细胞系,目前常用C3H/10T1/2来研究肾周细胞的生物学功能,也被称为类周细胞。研究表明,TGF-β参与调控代谢重编程,此外u IRI模型中,TGF-β的分泌和表达明显升高,明显促进肾纤维化~([1]),因此本研究中选用TGF-β模拟体内环境。1.TGF-β刺激周细胞转分化:Western blot和免疫荧光检测纤维化相关基因表达情况。2.TGF-β诱导周细胞发生代谢重编程:q PCR和WB检测类周细胞中FAO和糖酵解相关基因表达水平,Seahorse 96XFe检测类周细胞的细胞耗氧率和细胞外酸化率,试剂盒检测相关代谢酶的活性和代谢产物。3.给与药物调控周细胞的代谢变化:分别给与PGC1α的激活剂以激活FAO或者HK2的抑制剂以抑制糖酵解,观察周细胞转分化。4.给与AMPK信号通路激活剂/抑制剂观察周细胞的FAO和糖酵解变化,以及周细胞转分化。研究结果:一、动物试验1.u IRI小鼠中,PDGFR-β~+α-SMA~+,NG2~+α-SMA~+和CD146~+α-SMA~+细胞明显增加,表明周细胞转分化为肌成chromatin immunoprecipitation纤维细胞。2.GSEA分析结果显示u IRI不同时间点周细胞中FAO相关通路均明显下调,q PCR和免疫荧光共定位结果进一步显示调控FAO的关键转录因子PGC1α和它的下游靶基因CPT1A表达降低,周细胞的FAO受损;与之相反的是,热图分析显示u IRI不同时间点周细胞糖酵解相关基因(HK2,PKM2,LDHA)表达升高,q PCR和免疫荧光共定位结果进一步显示糖酵解关键酶HK2的表达明显升高,糖酵解终产物乳酸升高,周细胞的糖酵解明显增强。3.u IRI小鼠中,PGC1α的激活剂ZLN-005明显激活周细胞中PGC1α和CPT1A的表达,增强周细胞的FAO,减少肾脏脂质沉积;HK2确认细节的抑制剂2-DG明显抑制HK2的表达,抑制周细胞糖酵解,减少周细胞中乳酸的生成;此外,激活FAO或者抑制糖酵解可以抑制PDGFR-β~+α-SMA~+,NG2~+α-SMA~+的表达,抑制周细胞转分化为肌成纤维细胞,减少肾脏纤维化,延缓AKI进展至CKD。4.从分子机制上来说,AMPK的激活剂AICAR增强周细胞的PGC1α/CPT1A信号通路,增强FAO,减少肾脏脂质沉积;同时抑制周细胞的HIF1α/HK2信号通路,抑制乳酸生成,减少糖酵解,促进周细胞糖酵解往FAO的转换;此外,AMPK的激活剂AICAR抑制周细胞转分化为肌成纤维细胞,延缓肾脏纤维化。二、细胞实验1.TGF-β诱导类周细胞α-SMA和Fibronectin的表达,促进类周细胞转分化。2.TGF-β下调类周细胞PGC1α和其下游靶基因CPT1A的表达,减少细胞耗氧量和ATP产生,降低周细胞的FAO水平;与之相反的是,TGF-β促进糖酵解关键酶HK2,PKM2和LDHA的表达,增加细胞外酸化率,促进周细胞糖酵解水平的升高。3.PGC1α的激活剂ZLN-005可以明显逆转TGF-β诱导的PGC1α和CPT1A的降低,增加细胞耗氧量和ATP的生成,增强类周细胞的FAO,减少周细胞的脂质沉积;HK2的抑制剂2-DG可以明显逆转TGF-β诱导HK2的升高,降低细胞外酸化率,减少乳酸生成,降低糖酵解水平。ZCCRG 81045体内LN-005和2-DG均可以抑制周细胞转分化。4.AMPK的激活剂AICAR增强类周细胞PGC1α/CPT1A信号通路,促进细胞外耗氧率和ATP的生成,减少类周细胞脂质沉积;同时抑制类周细胞HIF1α/HK2信号通路,减低乳酸生成,抑制糖酵解,促进类周细胞糖酵解往FAO的转换。此外,AMPK的抑制剂Compound C抑制类周细胞PGC1α/CPT1A的表达,促进HIF1α/HK2的表达,抑制糖酵解往FAO的转换。研究结论:1.AKI-CKD中,周细胞转分化为肌成纤维细胞。2.AKI-CKD中,周细胞发生代谢重编程,表现为FAO的降低,糖酵解水平的升高。3.增强FAO,抑制糖酵解有效抑制周细胞转分化,延缓AKI进展至CKD。4.AMPK是促进周细胞糖酵解往FAO转换的上游分子,具体来说,AMPK通过激活PGC1α/CPT1A信号通路进而增强FAO,同时抑制HIF1α/HK2信号通路进而抑制糖酵解。

目的 总结三阴性Carcinoma hepatocelular乳腺癌（TNBC）超声造影（CEUS）和声触诊组织成像（VTI）VP-16抑制剂特征，并分析其影响因素。方法 选取我院经病理证实的310例乳腺癌患者，其中TNBC 46例（TNBC组），非TNBC 264例（非TNBC组），均行CEUS和VTI检查，比较两组CEUS增强强度、增强后形态、增强后边界、内部充盈缺损、增强模式、增强后范围是否扩大、造影剂进入病灶顺序、造影剂分布及剪切波速度（SWV）最大值、平均值、最小值。应用多因素Logistic回归分析TNBC的独立Emricasan分子量影响因素。结果 CEUS检查结果显示，两组增强后边界、内部充盈缺损、增强后范围是否扩大、造影剂分布情况比较差异均有统计学意义（均P<0.05）。VTI检查结果显示，TNBC组SWV最大值、平均值、最小值均低于非TNBC组，差异均有统计学意义（均P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示，增强后边界、内部充盈缺损、SWV最小值均为TNBC的独立影响因素（OR=3.087、2.119、1.682，均P<0.05）。结论 TNBC的CEUS与VTI表现具有一定特征性，增强后边界、内部充盈缺损、SWV最小值均为TNBC的独立影响因素。

目的 探讨奥密克戎(Omicron)变异株流行期间，Omicron感染所致新型冠状病毒感染疾病(COVID-19)新生儿的临床特征。方法 选择2022年12月20日至2023年1月16日四川大学华西第二医院新生儿隔离病房收治的63例Omicron变异株感染所致COVID-19新生儿的临床资料为研究对象。回顾性分析其流行病学史、临床表现、实验室检查、影像学表现、治疗及转归等临床特征。本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院伦理委员会规定，通过该医Imidazole ketone erastin院伦理委员会的审批与同意(审寻找更多批文号：2022-069)。结果 对本组63例Omicron变异株感染所致COVID-19新生儿的临床分析结果如下。(1)一般临床资料：男性患儿为30例，女性为33例；84.1%(53/63)患儿有与Omicron变异株确诊或疑似患者的密切接触史；COVID-19新生儿的临床分型为轻/中型者占比为76.2%(48/63),4.8%(3/63)为重型，19.0%(12/63)为无症状感染者；主要表现为发热(65.1%,41/63),呼吸系统症状(63.5%,40/63),消化系统症状(46.0%,29/63)。(2)实验室检查：外周血白细胞计数、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)正常占比分别为79.4%(50/63)、88.9%(56/63)和91.1%(41/45)。(3)影像学检查：36例(75%,36/48)患儿X射线胸片及8例患儿胸部CT检查，均提示有肺炎征象。(4)治疗及转归：对63例患儿均采取对症支持治疗，5例患儿采取呼吸支持治疗后，所有患儿均治愈出院。结论 本组Omicron变异株感染所致COVID-19新生儿以轻至中型为主，最常见的临床表现为发arsenic biogeochemical cycle热，实验室检查结果无特异性，预后良好。Omicron变异株感染以水平传播途径为主，有效隔离措施可保护新生儿免受Omicron变异株感染。

目的：基于Meta分析方法，系统评价达格列净联合肾素-血管紧张素系统抑制剂(RASI)治疗糖尿病肾病(DN)的有效性和安全性。方法：检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献数据库、Embase、PubMed和the Cochrane library等数据库自建库起至2022年7月2日的GNE-140采购有关达格列净联合RASI治疗DN的临床随机对照研究。按照Cochrane系统评价手册所提供的方法进行文献筛选、数据信息获取和效果评价；通过RevMan 5.4软件对所纳入的文献进行Meta分析。结果：共纳入25篇文献，包含3 008例DN患者，其中研究组(达格列净联合RASI)1 460例，对照组(单用RASI)1 548例。Meta分析结果显示，研究组方案在改善DN患者的24 h尿蛋白定量、其他肾功能指标、炎症因子水平等方面的效果均优于对照组方案，差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率的差异无统计学clinicopathologic feature意义(P=0.10)。结论：达格列净联合RASI治疗可明显改善DN患者的肾功能，降低24 h尿蛋白定量和炎症因子等指标selleckchem水平，且安全性良好。

目的:探讨茯苓四逆汤对慢性心衰大鼠心功能的影响以及可能的分子机制。方法:采用腹腔注射阿霉素法复制慢性心衰大鼠模型，造模成功大鼠随机分为模型组、茯苓四逆汤低、中、高剂量组(6g/kg、12g/kg、18g/kg)、卡托普利组(2.25mg/kg)。腹腔注射生理盐水的12只大鼠作为对照组。超声心电图检测心功能指标；ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6水平；HE染色观察心肌组织病理学改变；TUNEL染色观察心肌细胞凋亡率；Western blot检测大鼠心肌组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)、p-NF-κB、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、p-IκBα蛋白表达。结果:与对照组比较，模型组大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)升高(P<0.05),左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平升selleck抑制剂高，心肌组织病理损伤程度加重，心肌细胞凋亡率以及心肌组织中TLR4、p-NF-κB/NF-κB、p-IκBα/IκBα蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较，茯苓四逆汤低、中、高剂量组和卡托普利组大鼠LVEF、LVFS升高(P<0.05),LVESD、LVEDD、血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平SB203580试剂降低，心肌组织病理损伤程度减轻，心肌细胞凋亡率以及心肌组织中TLR4、p-NF-κB/NF-κB、p-IκBα/IκBα蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:茯苓四逆汤能够抑HBeAg-negative chronic infection制TLR4/NF-κB通路激活，减轻慢性心衰大鼠心肌损伤，改善心功能。