银杏素在小鼠压力超负荷心肌肥厚中的作用研究

目的 探究银杏素(GK)对压力超负荷心肌肥厚小鼠的心脏保护作用。方法 C57BL/6J小鼠(8周龄)24只,通过主动脉弓缩窄(TAC)建立小鼠压力超负荷心肌肥厚,随机分为手术组(n=8)、手术+GK组(n=8)和假手术组(n=8)。手术组不做处理,手术+GK组于术后每日给予GK治疗,假手术组经历同样手术操作selleck化学,但不进行7-0线打结。通过小鼠心脏超声评估小鼠心脏收缩功能,通过心脏超声、心脏质量与胫骨长度比值、WGA染色和Myh7的转录水平等评估心肌肥厚程度,通过肺脏质量与体质量比值、血清脑钠肽(BNP)水平和Nppb的转录水平等评估术后心力衰竭程度,最后通过Masson染色及纤维化相关分子的转录水平评估心脏的纤维化程度。结果 GK显著改善了TAC手术引起的小鼠心脏射血分数下降(P<0.05)和短轴缩短率的下降(P<0.01);降低了TAC术后小鼠心脏室间隔厚度(P<0.05)和左心室后壁厚度(P<0.05);减小了心脏质量与Avian biodiversity胫骨长度比值(P<0.05);减小了TAC术后心肌细胞横截面积(P<0.01)及肥厚相关基因Myh7的转录水平(P<0.01)。GK显著减小了TAC术后小鼠肺脏质量与体质量的比值(P<0.05),降低了小鼠血清中BNP的含量(P<0.01),同时降低了左心室心肌组织中Nppb的转录水平(P<0.05)。最后,GK显著减轻了TAC术后小鼠心脏纤维化程度(P<0.01),降低了小鼠心脏组织中纤维化相关分子Tgfb1(P<0.01)、Col1a1(P<0.0CL13900纯度5)和Col3a1(P<0.05)的转录水平。结论 GK具有改善TAC术后小鼠心脏功能、减轻心肌肥厚和心力衰竭以及减轻心肌纤维化的作用。

COVID-19康复者中MERS-CoV交叉中和抗体的分离与鉴定

中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)是一种能引起人和动物急性呼吸道疾病的新型病原体,主要表现为发烧和咳嗽,有时还出现肺炎和包括腹泻在内的胃肠道症状,严重时可导致死亡。中东呼吸综合征(MERS)于203-MA12年首次在沙特阿拉伯发现,病死率为34.5%。迄今为止,没有专门的抗MERS-CoV病毒治疗策略,也无疫苗可用。在MERS蔓延的同时,2019年底,由SARS冠状病毒2型(SARS-CoV-2)引起的新冠肺炎(COVID-19)在全球传播。因COVID-19具有高传染性的特点,已造成上亿人感染,其中已导致上百万人死亡,给全球政治和经济造成巨大影响。在COVID-CH-223191体内实验剂量19大爆发期间,冠状病毒结构及抗病毒策略研究获得前所未有的进展。同时,人们也更加关注MERS-CoV疫苗及其中和抗体的研发。冠状病毒棘突蛋白(S)被宿主蛋白酶水解分为S1和S2两个亚基,S1介导细胞附着;S2亚基介导病毒-细胞膜融合,两者在介导病毒入侵和诱导机体产生中和抗体方面至关重要。S蛋白明显的暴露于病毒表面,是目前中和抗体研发的主要靶点,也是疫苗设计方向的重点对象。本实验室之前研究发现,健康人群中与MERS-CoV S蛋白反应的抗体占总抗体<8%,然而>60%的COVID-19康复者血清抗体对MERS-CoV S蛋白有反应性。这一发现表明,SARS-CoV-2感染促进了对MRES-CoV的抗体反应,提示有可能从新冠康复者血清中分离并鉴定出针对MERS-CoV、SARS-CoV-1和SARS-CoV-2病毒的交叉反应性抗体,甚至广谱中和抗体。在本研究中,采集了60份COVID-19康复者外周血,并用165份COVID-19流行前的健康者血做对照进行实验。首先,通过ELISAPolyhydroxybutyrate biopolymer分析这两组血清对MRES-CoV S1和S2的抗体结合反应阳性率及抗体滴度水平。结果显示COVID-19康复者血清中存在主要靶向MRES-CoV S2亚基的抗体,且抗体滴度水平较高(中位数,1:12800稀释;[log10=4.11;四分位数范围[IQR],3.81–4.71])。为了检测血清抗体是否能中和MERS-CoV,本研究构建了MRES-CoV假病毒,并进行抗体中和假病毒的实验,结果发现21.67%的COVID-19康复者血清Ig G抗体能中和MRES-CoV假病毒。随后,本研究通过单个B细胞分离和抗体基因克隆策略从COVID-19康复者外周血B细胞中构建并表达纯化了38个全人源化单克隆抗体,经ELISA实验证实11个单抗能与MRES-CoV S2结合,其中2个只结合MRES-CoV S2,属MERS-CoV特异性抗体,其他9个单抗能与另外六种感染人的冠状病毒(SARS-CoV、SARS-CoV-2、HCoV-OC43、HKU1-CoV、HCoV-229E和HCoV-NL63)有显著的交叉反应性;此外,假病毒中和实验表明,5个单抗对MERS假病毒具有弱中和作用。总之,本研究从COVID-19康复者中鉴定并构建人源化的MERS-CoV特异性的单克隆抗体,9个抗体对感染人类的7种冠状病毒具有广谱交叉反应性,提示从冠状病毒感染者中可分离到广谱反应性抗体以及潜在的广谱中和抗体,为研究多种冠状病毒的免疫以及开发冠状病毒通用疫苗提供科学参考。

阿帕替尼联合卡瑞利珠单抗治疗经治晚期小细胞肺癌的临床观察

目的 探讨阿帕替尼联合卡瑞利珠单抗在经治晚期小细胞肺癌患者中的安全性和有效性。方法 回顾性收集42例经治晚期小细胞肺癌患者的临床资料,治疗方案为阿帕替尼250 mg po Qd,卡瑞利珠单抗200 mg静脉滴注,3周1次,直至疾病PF-03084014小鼠进展或出现无法忍受的毒性。观察近期疗效、中位无进展生存期、中位生存期及不良反应。结果 42例患者评估疗效和安Cutimed® Sorbact®全性,CR 2例(4.76%),PR 15例(35.71%),SD 16例(38.10%),PD 9例(21.43%),ORR为40.48%,DCR为78.57%。中位PFS为6.24个月,中位OS为10.23个月。不良反应多为1~2级。非血液学毒性主要不良反应为高血压(45.23%)、蛋白尿(23.81%)、手足综合征(28.57%)、皮疹(19.05%)。全组患者未发FG-4592供应商生严重不良反应导致治疗中断或停止,未出现过敏反应。结论 阿帕替尼联合卡瑞利珠单抗用于治疗经治晚期小细胞肺癌有较好的协同抗肿瘤作用,有显著临床疗效,安全性高,不良反应少。

结核分枝杆菌MPT64单克隆抗体的制备及其初步应用

背景与目的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染引起的结核病(Tu购买Canagliflozinberculosis,TB)是广泛流行的慢性传染病。MPT64是Mtb的分泌抗原之一,也是Mtb毒力因子。MPT64可调控宿主的免疫应答,且可诱导抗Mtb感染的保护作用。因此,MPT64是TB诊断和疫苗研究候选抗原之一。本研究旨在制备抗MPT64单克隆抗体(mAb)并建immunoelectron microscopy立双抗体夹心ELISA检测体系;基于上述mAb,探究MPT64对宿主固有免疫的调控作用及其在宿主抗Mtb感染中的作用。本研究为MPT64用于TB快速诊断提供了工具,明确了MPT64在宿主抗Mtb感染中的作用机制。方法与结果1.结核分枝杆菌MPT64单克隆抗体的制备原核表达MPT64重组蛋白并亲和层析纯化,蛋白经皮下免疫小鼠,取脾细胞与杂Q-VD-Oph供应商交瘤细胞融合,经初筛、单克隆化获得14株mAb。ELISA和Western blot鉴定表明各株mAb均能特异性识别重组MPT64蛋白,亚型均为Ig G,效价为1:80~1:2560。叠加ELISA筛选获得C8H9、F5E2、H2F4分别与A5B2株mAb为配对抗体。成功制备了H2F4与A5B2株mAb腹水,亲和层析纯化mAb。间接ELISA检测纯化的H2F4、A5B2株mAb效价分别为1:102 400、1:51 200;SDS-PAGE和Western blot检测显示,2株mAb纯度高,且均能特异性识别Mtb菌体中天然MPT64,不与卡介苗(BCG)、耻垢分枝杆菌(Ms)和金黄色葡萄球菌(SA)非特异性结合。2.MPT64双抗体夹心ELISA的建立制备生物素(Biotin)标记的A5B2 mAb检测抗体,以H2F4 mAb为捕获抗体建立MPT64双抗体夹心ELISA,棋盘滴定法优化捕获抗体和检测抗体的浓度分别为1.25μg/m L、2.5μg/m L。以常规条件作为初始反应条件,依次优化各个环节的反应条件,获得该体系的最适条件为:CBS(p H 9.6)包被H2F4 mAb(1.25μg/m L)100μL,4℃静置过夜,洗涤;2%BSA于室温进行封闭1 h,洗涤;待测样品室温孵育2 h,洗涤;100μL Biotin-A5B2 mAb(2.5μg/m L)室温孵育2 h,洗涤;Avidin-HRP(0.5μg/m L)室温孵育1 h,洗涤;TMB显色,2 M H_2SO_4终止,酶标仪检测OD_(450)。分析所建立ELISA体系的关键参数,结果显示其对MPT64的检测下限为39ng/m L,线性范围为39~1 250 ng/m L(R~2=0.982 3),变异系数小于9.5%,回收率为89.177~104.390%。与MPT64反应的特异性良好,不与BCG、无关细菌及成分发生交叉反应。进一步检测Mtb H37Ra菌株不同生长阶段的培养上清,发现MPT64含量与Mtb活菌数成正比,最早在培养第12 d被检测为阳性,MPT64为4.09 ng/m L。3.MPT64对宿主固有免疫的调控及其在抗Mtb感染中的作用小鼠分别经尾静脉和腹腔注射高、低剂量的MPT64 mAb,再以Mtb H37Ra滴鼻感染,检测脏器荷菌数和小鼠体内的MPT64抗体含量。结果显示,静脉注射和腹腔高剂量注射的mAb至少可存在2 w,腹腔低剂量注射的mAb已被清除;脏器荷菌数结果显示,各处理组间荷菌数无统计学差异,低剂量静脉注射mAb组小鼠肺荷菌数小幅度增加,高剂量静脉注射mAb组肺荷菌数减少。抗MPT64 mAb预处理骨髓来源的巨噬细胞(BMDM),再以Mtb H37Ra感染,发现mAb提前6 h预处理并不影响Mtb胞内存活,mAb提前0 h预处理促进了Mtb的胞内存活。MPT64蛋白体外刺激BMDM和MH-S巨噬细胞,实时定量PCR检测结果显示促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α、i NOS和炎症小体关键蛋白NLRP3、ASC和Caspase-1转录水平上调。此外,BMDM细胞感染模型结果显示,MPT64诱导的炎症反应显著抑制Mtb感染早期(1~3 d)的胞内存活能力,该效应在NLRP3~(-/-)BMDM中消失,表明MPT64促进宿主对Mtb感染的清除与NLRP3激活有关。结论本研制备了14株抗MPT64 mAb,并获得配对抗体,建立了MPT64双抗体夹心ELISA检测体系,运用该检测体系定量分析Mtb培养液中MPT64辅助分析Mtb含量。初步证实MPT64可诱导NLRP3炎症小体活化,促进巨噬细胞对Mtb感染的清除效应,但该效应在小鼠体内并不明显。

肺动脉CT成像联合血清SDC4、LDLR水平对老年性心力衰竭患者的预后价值研究

目的 研究肺动脉CT成像联合血清SDC4、LDLR水平对老年性心力衰竭患者的预后价值。方法 本研究采取前瞻性研究,以2020年1月2022年2月诊断并治疗的心力衰竭患者120例作为研究对象,另选取同期进行健康体检的志愿者120例作为对照组,比较观察组以及对照组、不同预后患者的肺动脉CT成像、血清SDC4、LDLR水平之间的差异,研究肺动脉CT成像联合血Empagliflozin分子式清SDC4、LDLR水平对老年性心力衰竭患者的预后的诊断价值。结果 观察组以及对照组的MPAD、AA、PA之间的差异不存在统计学意义(P>0.05),观察组患者的LPAD、RPAD、IVST显著高于对照组(P<0.05);观察组的LDLR的显著低于对照组,SDC4显著高于对照组(P<0.05);不同预后患者的MPAD、AA、PA之间的差异不存在统计学意义(P>0.05),不良预后组患者的immune synapseLPAD、RPAD、 IVST显著高于预后良好组(P<0.05);不良预后组的LDLR的显著低于预后良好组,SDC4显著高于预后良好组(P<0.05);LPAD、RPAD、ISTV、SDC4、LDLR联合检测的灵敏度显著高于单独检测;通过ROC曲线分析,LPAD、RPAD、IVST、SDC4、LDLR联合检测对不良预后患者的诊断曲线下面积显著高于单独检测,针对不良预后而言,LPAD、RPAD、IVST、SDC4、LDLR的临界值为25.10mm,26.10mm,8.12mm,3.11g/L以及6.52ng/L。结论 肺动脉CT成像联合血清SDC4、LDLR水平对PD0325901化学结构老年性心力衰竭患者的不良预后具有积极的诊断意义,建议临床推广。

中药中新烟碱类杀虫剂高通量筛查、快速检测和脱除技术的研究和应用

中药是人们防病和治病的主要依赖产品之一,中药质量安全是保证中药消费者安全用药的基础保障。目前,中药中农药残留已引起国内外广泛Belumosudil的关注,农药残留不仅影响了中药质量安全,影响中药在全球的经济贸易,且对中药摄入人群的健康存在较大的威胁。新烟碱类杀虫剂是新型杀虫剂,自1991年第一个新烟碱类杀虫剂吡虫啉产品的推出,随后许多不同类型的新烟碱类杀虫剂被研发、登记并应用于农产品种植过程中害虫的防治。然而,目前关于中药中新烟碱类杀虫剂残留的报道非常有限,缺乏全面筛查和快速检测中药中新烟碱类杀虫剂残留的分析方法。为了填补该部分的数据空缺,本文通过建立适用于不同药用部位基质中药材中新烟碱类杀虫剂残留的广泛筛查和快速检测的分析方法,并将所建立的方法用于检测中药材和中药种植基地样本中新烟碱类杀虫剂的残留分析,为了解中药中新烟碱类杀虫剂残留情况提供基础数据。此外,本课题应用纳米酶和生物炭材料在中药农残检测、样品前处理和农残脱除中进行了尝试,为中药农残分析和脱除研究提供了新的研究思路。1.中药中新烟碱类杀虫剂LC-MS/MS检测方法的建立及残留分析应用QuEChERS样品前处理技术结合LC-MS/MS建立了筛查多种中药材(西洋参(Panacis quinquefoliiradix)、牛蒡(Arctii lappae radix)、红花(Carthami flos)、枸杞(Lycii fructus)和陈皮(Citri reticulataepericarpium))和菊花(Chrysanthemi flos)种植基地(菊花植株和LY-188011种植土壤)中20种新烟碱类杀虫剂及其代谢物的高通量绿色分析方法。结果显示,在牛蒡、红花、枸杞和陈皮中均检出了新烟碱类杀虫剂及其代谢物,阳性检出率高达82.57%,总新烟碱类杀虫剂残留浓度范围为0.26~139.28 μg kg-1;啶虫脒阳性检出率为77.06%,最高检出浓度为85.95 μg kg-1;吡虫啉阳性检出率为69.89%,最高检出浓度为32.49 μgkg-1;去甲基啶虫脒阳性检出率为44.04%,最高检出浓度为18.42 μg kg-1;去硝基吡虫啉阳性检出率为48.62%,最高检出浓度multiplex biological networks为16.55 μg kg-1。中药中残留的吡虫啉、啶虫脒和它们的代谢物存在显著的正相关性。另外,菊花植株和种植土壤中检测结果表明,吡虫啉、去硝基吡虫啉和吡虫啉脲的残留水平较高。土壤中高浓度吡虫啉残留存在较高的生态风险。菊花种植基地样本中残留的吡虫啉和其代谢物之间存在显著的正相关性。土壤吸附和降解实验证明了吡虫啉、啶虫脒和它们的代谢物在土壤中属于较难吸附,容易发生残留农药的迁移,土壤降解半衰期为20~36天。2.吡虫啉单克隆抗体的制备及快速检测方法的建立和应用设计合成了一种新的吡虫啉半抗原hapten 6,并制备和筛选获得可以高效免疫小鼠分泌吡虫啉抗体的免疫原hapten6-KLH。应用该免疫原获得能够特异性识别吡虫啉的单克隆抗体(IMIB7C3),该抗体亚型为IgG1,亲和常数为5.7×109L mol-1。在PBS缓冲液中该抗体对吡虫啉的IC50为1.3 ngmL-1,其与氯噻啉有30.9%的交叉反应,与吡虫啉代谢物羟基吡虫啉、烯烃吡虫啉分别有9.0%、5.8%的交叉反应。将吡虫啉单克隆抗体用于构建中药中(三七(Notoginseng radix et rhizoma)、大枣(Jujubae fructus)、金银花(Lonicerae japonicae flos)、黄芪(Astragali radix)、山药(Dioscoreae rhizoma))检测吡虫啉残留ic-ELISA的方法。结果显示,金银花中吡虫啉残留水平为30.6~1205.3 μg kg-1,且阳性检出率较高(88.57%)。LC-MS/MS法进行确证,确证结果与ic-ELISA结果进行相关性分析,其相关系数R2为0.9975,说明ic-ELISA法检测结果的准确性。此外,通过对食用金银花摄入吡虫啉进行了急性和慢性风险评估,结果表明急、慢性风险均较低。基于吡虫啉抗原抗体,研制了可实时、现场、快速检测吡虫啉残留的胶体金免疫层析试纸条。通过优化试纸条金标抗体偶联的条件、C、T线划线浓度和样品稀释液。将所制备的胶体金试纸条应用于快速筛查72种中药材中吡虫啉残留。最终,所制备的试纸条可适用于筛查60种不同药用部位中药材(包括26种根/茎类药材、20种种子/果实/果皮类药材、11种花/叶/全草类药材、3种皮类和地上部分类)中吡虫啉的残留,检测限为50μg kg-1。此外,应用所制备的试纸条考察了吡虫啉在薏苡仁(Coicis semen)、麦芽(Hordei fructus germinatus)、莲子(Nelumbinissemen)、干姜(Zingiberisrhizoma)和金银花(Lonicerae japonicae flos)中的检出限和重复性,并对实际样品进行了测定。结果均表明了所建立的胶体金试纸条可用于多种中药材中吡虫啉残留快速筛查和检测。3.基于MIL-100(Fe)@AuNCs纳米酶建立快速检测吡虫啉的ELISA方法合成了具有类过氧化物酶活性的MIL-100(Fe)@AuNCs纳米酶,其在宽温度范围内具有良好的稳定性和酶活性。通过稳态酶动力学和米氏方程获得了纳米酶对H2O2 的 Vmax和 Km 为 5.3×10-8 M s-1 和 0.20 mM,对 TMB 的 Vmax 和 Km 为11.3 × 1 0-8 Ms-1和1.50 mM。所制备的纳米酶可以用来检测过氧化氢(LOD=1 μM)、谷胱甘肽(LOD=5 μM)和胆固醇(LOD=3 μM)。将纳米酶和TMB固定在纸基上,结合RGB识别技术,建立了快速、现场检测H2O2的方法。此外,所制备的类过氧化物酶纳米酶具有杀死大肠杆菌的作用。最后,尝试了将纳米酶与吡虫啉抗体偶联构建直接竞争ELISA法,用于检测吡虫啉。4.生物炭作为植物色素净化剂在中药农残检测样品前处理中的应用研究基于稻草热解制备的生物炭材料具有较高的比表面积,且表面具有多种官能团。应用生物炭分别考察了其对孔雀石绿、吡虫啉和叶绿素的吸附动力学、吸附等温线和吸附热力学。结果表明,生物炭对三种吸附质均符合拟二级动力学,属于化学吸附;吸附等温线均符合Langmuir模型,说明吸附剂表面均匀,吸附过程主要为单分子层吸附,吸附能力较强;吸附热力学结果说明了生物炭对吸附质过程为吸热过程、不规则的可自发进行的吸附过程。生物炭对孔雀石绿、吡虫啉和叶绿素的最大吸附量qm分别为2615.32、178.57、400.00 mg g-1,GCB对叶绿素的最大吸附量qm为69.25 mgg-1。说明了生物炭对叶绿素的吸附效果远高于GCB,且可用于净化12种不同水相和有机溶液中的叶绿素。为了考察生物炭在中药农残检测中的实用性,将生物炭应用于已经建立的QuEChERS法中,结果显示生物炭不仅能有效净化植物色素还可以保证菊花样本中123种农残(包括吡虫啉)和金银花样本中吡虫啉的回收率。另一方面,将生物炭制备成静电纺丝膜作为试纸条检测在线净化样品垫,结果证明生物炭静电纺丝膜可以实现在线净化色素降低背景干扰,并提高吡虫啉检测灵敏度。5.Fe/Zn-KOH-BBC材料制备并应用于金银花水煎液中残留吡虫啉的脱除以蔗渣热解并应用KOH、ZnCl2和FeCl3进行改性,获得了对吡虫啉具有高吸附能力的改性生物炭材料Fe/Zn-KOH-BBC。通过吸附动力学、吸附热力学和吸附等温线实验,证明了 Fe/Zn-KOH-BBC对吡虫啉和绿原酸吸附属于拟二级动力学的化学吸附;吸附等温线属于Freundlich模型,说明吸附过程为表面不均匀的多层吸附;吸附热力学结果证明了吸附过程为可自发进行的不规则的吸热过程。将Fe/Zn-KOH-BBC 材料用于构建基于固相萃取的金银花(Loniceraejaponicae flos)水煎液脱除吡虫啉残留的装置。经LC-MS/MS检测结果表明,该装置可以脱除金银花水煎液中71.01%的吡虫啉、65.70%的啶虫脒和92.93%的去硝基吡虫啉且保留78.03%的绿原酸;HPLC分析金银花水煎液脱除前后特征图谱的相似度较高(≥ 0.991),且特征峰回收率均较高(绿原酸回收率为90.4%,当药苷回收率为92.5%,断氧马钱子苷回收率为100%,总酚酸(绿原酸、异绿原酸A和绿原酸C)的回收率为79.56%)。最后,细胞毒性实验证明了低浓度Fe/Zn-KOH-BBC材料对细胞活性影响较小。

吉非替尼联合培美曲塞靶向治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及预后

目的 探讨吉非替尼联合培美曲塞靶向治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及预后。方法 依据化疗方案的不同AY-22989将82例NSCLC患者分为观察KPT-330采购组(n=42)和对照组(n=40),对照组患者给予培美曲塞+顺铂化疗,观察者患者给予吉非替尼联合培美曲塞+顺铂治疗。比较两组患者的临床疗效、肿瘤标志物[血管内皮生长因子(VEGF)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)]水平、不良反应发生情况及生存情况。结果 观察组患者的客观缓解率为85.71%,高于对照组患者的65.00%(P﹤0.05);观察组患者的疾病控制率为95.24%,高于对照组患者的80.00%(P﹤0.05)。治疗后,两组患者CEA、VEGF、CYFRA2local and systemic biomolecule delivery1-1水平均低于本组治疗前,且观察组患者CEA、VEGF、CYFRA21-1水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。观察组患者的不良反应总发生率为16.67%,与对照组患者的22.50%比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。观察组患者的1年生存率为61.90%,与对照组患者的45.00%比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论 吉非替尼联合培美曲塞靶向治疗晚期NSCLC患者,能够有效提高临床疗效,控制疾病进展,降低肿瘤标志物水平,安全性较高。

AQP4在A型肝性脑病大鼠脑水肿中的作用

目的 探讨水通道蛋白4(AQP4)在硫代乙酰胺制备的A型肝性脑病大鼠模型脑水肿中的作用。方法 以Sprague Dawley大鼠为研究对象,随机分为正常对照组(对照组)(n=18)和肝性脑病模型组(模型组)(n=90)。模型组给予腹腔注射硫代乙酰胺建立A型肝性脑病模型,观察大鼠一般情况,并检测脑组织氨含量、血氨及肝功能指标变化以评价模型建立情况。X-liked severe combined immunodeficiency造模成功后分时间点处死大鼠,分别检测脑组织含水量、血脑屏障通透性,采用Western blot及实时定量PCR方法,检测脑组织AQP4蛋白及mRNA的表达,并分析比较AQP4的表达与脑水肿的相关性。结果 与对照组比较,模型组大鼠毛色蓬乱、黯淡、不光洁,活动减少,精神萎靡,嗜睡,食欲不振,对外界刺激反应迟钝,体重明显下降(P<0selleck产品.05),脑组织氨含量,血氨,血清ALT、AST含量明显升高,差异均有统计学意义(F=63.561、41.278、172.241、93.673,P均<0.01)。模型组大鼠血脑屏障通透性增强,脑组织含水量增加,Western blot及实时定量PCR方法检测显示,脑组织AQP4蛋白及mRNA表达量均显著升高(P<0.05),并呈动态变化过程。模型selleckchem Ipatasertib组大鼠大脑皮层AQP4蛋白和mRNA表达均与脑组织含水量成显著正相关(r=0.776、0.623,P均<0.01)。结论 A型肝性脑病大鼠脑组织中AQP4表达增加,并与脑水肿成正相关,提示AQP4可能参与肝性脑病脑水肿的发生及发展过程。

马蔺子甲素对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、迁移、侵袭的影响及其机制

目的 观察马蔺子甲素(IQ)对人胰腺导管腺癌(PDAC)细胞株PANC-1增殖、侵袭、迁移的影响,并探讨其作用机制。方法 取对数生长期的PANC-1细胞置于基础培养基中,将细胞分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、对照组,高剂量组、中剂量组、低剂量组分别加入25、20、15μmol/L的IQ,对照组加入等量0.9%NaCl溶液。采用MTT比色法检测细胞增殖能力(细胞OD值),划痕愈合实验检测细胞迁移能力(细胞迁移距离),Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力(穿膜细胞个数),qPCR法检测Nonsense mediated decay细胞Rho信号通路关键分子RhoA、Rac1、ROCK1、CDC42、ROCK2。结果 与对照组比较,中剂量组和高剂量组培养24、48、72 h的OD值减小(P均<0.05);与同组0 h比较,低剂量组及中剂确认细节量组和高剂量组培养24、48、72 h的OD值增加(P均<0.05)。与对照组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均此网站<0.05);与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均<0.05);与中剂量组比较,高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均<0.05)。与对照组比较,低剂量组及中剂量组和高剂量组RhoA、Rac1、ROCK1相对表达量减小(P均<0.05);与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组ROCK1相对表达量减小(P均<0.05)。结论 IQ可抑制PANC-1细胞增殖、侵袭及转移,其作用机制可能为抑制Rho信号通路介导的上皮间质转化进程,当药物浓度为25μmol/L时可达到最大抑瘤效应。

连花清瘟颗粒治疗流行性感冒的效果分析

目的 研究连花清瘟颗粒治疗流行性感冒的临床疗效。方法 370例流行selleckchem CB-839性感冒患者,按治疗方法不同分为对照组(182例)和Etoposide抑制剂观察组(188例)。对照组患者给予磷酸奥司他韦颗粒进行治疗,观察组患者给予连花清瘟颗粒进行治疗。比较两组患者的临床疗效、不良反应发生率及症状恢复时间。结果 观察组(90.43%)的临床总有效率明显高于对照组(80.77%),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组(6.38%)和对照组(5.49%)的preimplantation genetic diagnosis不良反应发生率差异不显著(P>0.05)。观察组的体温恢复正常时间(3.51±0.69)d、鼻塞消失时间(3.40±0.66)d、咳嗽消失时间(3.31±0.65)d、乏力恢复正常时间(3.47±0.68)d明显比对照组的(3.72±0.71)、(3.57±0.68)、(3.45±0.66)、(3.69±0.70)d短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 连花清瘟颗粒治疗流行性感冒患者效果显著,可明显缩短患者临床症状恢复时间,且用药安全,值得推荐。