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第一部分 HER2-TKI对胃癌细胞HER2蛋白表达的影响目的:探讨HER2酪氨酸激酶抑制剂(HER2-TKI)对HER2阳性胃癌细胞HER2蛋白表达的影响。方法:本研究使用了两株表达HER2的胃癌细胞株SNU216和NCI-N87。采用:1.Western blot验证所用两株细胞HER2蛋白的表达水平;2www.selleck.cn/products/AZD1152-HQPA.Western blot检测不可逆TKI吡咯替尼和波齐替尼、可逆TKI拉帕替尼和图卡替尼分别处理后各细胞HER2蛋白表达的变化。结果:1.Western blot验证结果:SNU216和NCI-N87细胞均显示Hospital infectionH ER2蛋白过表达,NCI-87表达水平明显高于SNU216(P<0.001);2.We stern blot实验结果显示:不同浓度的吡咯替尼和波齐替尼干预24h,各细胞中HER2蛋白表达水平随药物浓度增大而降低(P<0.01);不同浓度的拉帕替尼和图卡替尼干预24h,各细胞中HER2蛋白表达水平随药物浓度增大而升高(P<0.05);同浓度的吡咯替尼和波齐替尼在不同时间进行干预,各细胞中HER2蛋白表达水平随时间延长而降低(P<0.05);同浓度的拉帕替尼和图卡替尼在不同时间进行干预,各细胞中HER2蛋白表达水平随时间延长而升高(P<0.001)。第二部分 HER2-TKI调控HER2蛋白表达的机制探讨目的:探讨HER2-TKI引起HER2蛋白降解的机制。方法:1.RT-qPCR检测经拉帕替尼(可逆HER2-TKI)和吡咯替尼(不可逆HER2-TKI)分别在不同时间点处理各细胞后HER2 mRNA的表达水平;2.Western blot检测吡咯替尼分别联合蛋白酶体抑制剂Velcade、M G-132和溶酶体抑制剂Baf-A1处理各细胞后HER2蛋白表达水平;3.免疫共沉淀检测吡咯替尼联合MG-132处理各细胞后HER2泛素化水平、HSP 90蛋白表达水平。结果:1.RT-qPCR结果显示:SNU216和NCI-N87细胞分别经拉帕替尼和吡咯替尼处理后HER2 mRNA表达水平随时间延长而增多(P<0.05);2.Western blot结果显示:与单药吡咯替尼相比,吡咯替尼联合蛋白酶抑制剂Velcade、MG-132可明显抑制HER2蛋白的降解(P<0.05),而联合溶酶体抑制剂Baf-A1对HER2蛋白表达无明显影响;3.免疫共沉淀结果显示:与单药吡咯替尼组比,吡咯替尼联合蛋白酶体抑制剂MG-132后HER2泛素化随时间延长而增多、与HER2结合的HSP90蛋白随时间延长而减少。第三部分 HER2-TKI对T-Dxd抗HER2阳性胃癌作用的影响目的:探讨HER2-TKI体外促进T-Dxd抗HER2阳性胃癌细胞的作用及体内抗肿瘤疗效。方法:1.激光共聚焦显微镜观察经吡咯替尼处理后HER2在细胞内的定位变化;2.荧光标记T-Dxd,激光共聚焦显微镜观察吡咯替尼处理后,T-Dxd内吞的变化;3.CCK-8检测吡咯替尼、T-Dxd联合吡咯替尼对HE R2阳性胃癌细胞的增殖活性;4.建立胃癌移植裸鼠模型,分为四组:对照组、吡咯替尼组、T-Dxd组和联合组(吡咯替尼联合T-Dxd),观察各组肿瘤的生长变化及裸鼠体重变化。待实验结束后处死裸鼠,剥取瘤组织,取部分组织做免疫组织化学和Western blot观察各组HER2蛋白的表达情况。结果:1.免疫荧光结果显示:在未经处理的SNU216和NCI-N87细胞中,HER2染色表明受体主要定位于细胞膜上。而在吡咯替尼处理后,H ER2聚集成颗粒状或簇状分布在细胞膜下或胞浆内;2.激光共聚焦显微镜观察结果显示:与单药T-Dxd相比,T-Dxd联合吡咯替尼细胞内荧光强度随时间延长而增强;3.CCK-8结果显示:各单药对各细胞的生长抑制率随药物浓度增加而增加,呈剂量依赖性。吡咯替尼联合T-Dxd可提高低剂量T-Dxd的抑制率;4.体内实验:吡咯替尼组及T-Dxd组的裸鼠移植瘤体积及肿瘤重量均小于对照组,尚未达到统计学意义。联合组的裸鼠移植瘤体积及肿瘤重量明显小于对照组(P<0.001)。裸鼠移植瘤组织免疫组化结果显示:吡咯替尼组、T-Dxd组和联合组中HER2染色程度均低于对照组,联合组染色程度最浅;裸鼠移植瘤组织Western blot结果显示吡咯替尼组、T-Dxd组和联合组中HER2蛋白表达水平均低于对照组,联合组明显降低(P<0.001)。结论:1.可逆HER2-TKI可引起HER2阳性胃癌细胞HER2蛋白表达水平升高,不可逆HER2-TKI可引起HER2阳性胃癌细胞HER2蛋白表达水平降低。2.不可逆HER2-TKI通过诱导HSP90与HER2解离,增强了 HER2泛素化和随后在蛋白酶体的降解。3.不可逆HER2-TKI在体外可增JNJ-42756493配制强HER2内化及T-Dxd的内吞,促进了 T-Dxd对胃癌细胞增殖的抑制效应。4.不可逆HER2-TKI在体内可有效提高T-Dxd对HER2阳性胃癌的抗肿瘤活性。

目的 探讨血清趋化因子C-X3-C-基元配体1(CX3CL1)、CC趋化因子配体11(CCL11)与绝经后骨质疏松症(PMOP)患者骨密度(Model-informed drug dosingBMD)、炎症指标和骨代谢指标的相关性，并分析其诊断价值。方法 收集2020年6月至2021年12月于襄阳市中心医院就诊的90例PMOP患者为研究组，同时选取同期体检的90例绝经后无骨质疏松症的健康女性为对照组。收集并比较两组的一般资料、炎症指标、骨代谢指标、BMD、血清CX3CL1、血清CCL11水平；采用多元回归分析影响CX3CL1及CCL11水平的独立预测因素；采用Pearson相关性检验分析血清CX3CL1及CCL11与各个指标之间的关系；采用受试者工作特征(ROC)曲线分析CX3CL1及CCL1更多1对PMOP的诊断价值。结果 相对于对照组，研究组血清CX3CL1、CCL11、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、Ⅰ型胶原C-末端肽交联(S-CTX)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OC)、Ⅰ型原胶原C-端前肽(PⅠCP)、Ⅰ型原胶原N-端前肽(PⅠNP)明显升高(P<0.05),各部位BMD明显降低(P<0.05)。研究组中，IL-6、TRACP、S-CTX、腰椎BMD及股骨颈BMD是血清CX3CL1水平的独立预测因子(P<0.05),TNF-α、TRACP、S-CTX、腰椎BMD及股骨颈BMD是血清CCL11水平的独立预测因子(P<0.05)。研究组中，血清CX3CL1与IL-6、TRACP、S-CTX、腰椎BMD及股骨颈BMD具有相关性(P<0.05);血清CCL11与TNF-α、TRACP、S-CTX、腰椎BMD、股骨颈BMD具有相关性(P<0.05),CX3CL1和CCL11之间呈正相关性(P<0.05)。血清CX3CL1及CCL11对PMOP均具有较好的诊断价值，ROC曲线下面积(AUC)分别为0.751、0.750,联合诊断的AUC为0.824。结论 血清CX3CL1、CCL11与机体炎症反应及PMOP的发生密切相关，二者可能参与到骨吸收的代谢过程中，联合检测CX3CL1、CCL11对PMOP的发生具有一定的诊断LBH589临床试验价值。

研究目的本研究通过在体对肥胖小鼠施加运动、70%饮食控制、饮食控制联合运动和离体对骨髓间充值干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)施加机械牵拉、鸢尾素(Irisin)和整合素αVβ5(Integrin-alpha V-beta 5,IntegrinαVβ5)沉默/过表达等干预,探究Irisin/IntegrinαVβ5信号通路在调控BMSCs成骨/脂分化中的作用,为揭示肥胖性骨质疏松症的分子机制提供实验依据,也为寻找有效的防治方法提供可靠的理论依据。研究方法和材料第一部分饮食控制/有氧运动对肥胖小鼠骨质量及Irisin/IntegrinαVβ5信号通路的影响1.实验动物与分组:60只刚断乳的雄性C57BL/6小鼠,随机分为标准饲料组(Normal diet group,ND组,喂养标准饲料,10只)和高脂饲料组(High fat diet group,HFD组,喂养高脂饲料,50只)。喂养高脂饲料10周后,将肥胖造模成功小鼠随机分成四组:肥胖对照组(Obesity control group,OC,n=10)、肥胖饮食控制组(Obesity calorie restriction group,OR,n=10)、肥胖有氧运动组(Obesity exercise group,OE,n=12)、肥胖饮食控制联合有氧运动组(Obesity calorie restriction combined with exercise group,ORE,n=12)。同时将标准饲料组小鼠设为正常对照组(Normal control group,NC,n=10)。OR和ORE组小鼠自第11周开始逐渐减少进食量,第13周后开始控制进食量为OC组的70%,直到第18周干预结束。OE和ORE组小鼠从第11周开始通过递增运动时间和运动速度的方式增加跑台运动负荷,第12周后运动负荷固定在20m/min,60min/d,坡度0度,直到第18周干预结束。2.检测方法:采用Micro-CT扫描方法获得小鼠股骨骨体积(Bone volume,BV)、组织体积(Tissue volume,TV)、骨小梁体积分数(Percent bone volume,BV/TV)、骨小梁数量(Trabecular number,Tb.N)、骨小梁厚度(Trabecular Thickness,Tb.Th)、骨小梁分离度(Trabecular separation,Tb.Sp)、连接密度(Connection density,Conn.Dn)和结构模型指数(Structure model index,SMI)参数,并进行3D松质骨结构重建;通过三点弯曲实验法检测股骨最大载荷、破坏载荷、弯曲强度和弹性模量材料力学性能指标;采用酶联免疫法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)方法检测小鼠血清中鸢尾素(Irisin)、骨钙素(Osteocalcin,OCN)、骨碱性磷酸酶(Bone alkaline phosphatase,BALP)和抗石酒酸酸性磷酸酶-5b(Tartrate resistant acid phosphatase-5b,TRACP-5b)浓度;采用H&E染色法观察小鼠股骨骨髓脂肪细胞形态,并统计骨髓脂肪细胞数量和体积;采用PCR和Western-blot方法检测分别检测小鼠胫骨Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5(Fibronectin type Ⅲ domain cotaining protein 5,FNDC5)、Irisin、IntegrinαVβ5、转化生长因子β1(Transforming growth factorβ1,TGFβ1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 map kinase,p38MAPK)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、PR结构域蛋白16(PR domain containing 16,PRDM16)、诱导细胞死亡DFFA样效应子α(Cell death inducing DFFA like effectorα,CIDEα)和解偶联蛋白1(Uncoupling protein 1,UCP1)的mRNA、蛋白水平。第二部分Irisin和牵张应力调控BMSCs成骨/脂分化的作用及机制1.BMSCs中IntegrinαVβ5的检测:使用完全培养基、成骨和成脂培养基分别培养C57BL/6小鼠BMSCs7天后,再采用Western-blot和PCR技术检测BMSCs是否存在IntegrinαVβ5的表达。2.筛选Irisin剂量:分别使用不同浓度Irisin(0、50、100和500ng/ml)干预BMSCs细胞,通过CCK-8实验检测细胞增殖,并通过PCR技术检测成骨(TGFβ1/p38MAPK/Runx2)和棕色脂肪因子(PRDM16/CIDEα/UCP1),以筛选Irisin最佳剂量,并采用该剂量对BMSCs进行干预。3.筛选机械牵张强度:在FX-5000 Tension System设置0%、2%、4%和8%强度机械牵张刺激,对BMSCs进行每天1次的机械牵张刺激(Stretch)。实验结束后,通过CCK-8实验检测细胞增殖,使用PCR技术检测上述成骨/棕色脂肪因子mRNA,以筛选牵张应力最佳强度,并采用该强度对BMSCs进行干预。4.Irisin和stretch干预BMSCs分化:对BMSCs分别进行Irisin、stretch和Irisin+stretch刺激,干预结束后成骨分化组进行碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色,并采用PCR技术检测上述成骨因子mRNA水平。成脂分化组进行油红O染色,并采用PCR技术检测上述棕色脂肪以及白色脂肪因子ASC型氨基酸转运体1(Asc-type amino acid transporter 1,ASC-1)、同源框C8(Homeobox C8,HOXC8)和同源框C9(Homeobox C9,HOXC9)mRNA水平。5.Integrinβ5基因干扰:对BMSCs Integrinβ5基因过表达/沉默后,分别设置pEx-BLANK、pEx-Integrinβ5、pEx-Integrinβ5+Irisin、pEx-Integrinβ5+stretch和pEx-Integrinβ5+Irisin+stretch组,以及scr-siRNA、si-Integrinβ5、si-Integrinβ5+Irisin、si-Integrinβ5+stretch和si-Integrinβ5+Irisin+stretch组。干预结束后,分别通过PCR和Western-blot方法检测相关成骨/棕色脂肪因子mRNA和蛋白水平。研究结果第一部分:饮食控制/有氧运动对肥胖小鼠骨质量及Irisin/IntegrinαVβ5信号通路的影响1.肥胖组:(1)与NC组相比,OC组小鼠BV/TV、Tb.N和Conn.Dn(P<0.05)明显降低,Tb.Sp明显增加(P<0.05)。3D重建图片显示,OC组小鼠骨微结构受到严重的破坏。(2)与NC组相比,OC组小鼠血清Irisin、OCN和BALP浓度均明显降低(P<0.05),血清TRACP-5b浓度则明显升高(P<0.05)。(3)与NC组相比,OC组小鼠最大载荷、破坏载荷和弯曲强度明显降低(P<0.05)。(4)与NC组相比,OC组小鼠骨髓脂肪细胞数量和体积明显增加(P<0.05)。(5)与NC组相比,OC组小鼠骨组织FNDC5 mRNA和Irisin蛋白明显下降(P<0.05),同时成骨(TGFβ1/p38MAPK/Runx2)和棕色脂肪因子(PRDM16/CIDEα/UCP1)也明显降低,IntegrinαV和Integrinβ5的mRNA和蛋白水平无显著性差异(P>0.05)。2.饮食控制/有氧运动干预组:(1)与OC组相比,OR组BV/TV、Tb.N和Conn.Dn明显增加(P<0.05),OE和ORE组BV、BV/TV、Tb.N和Conn.Dn明显增加(P<0.05),OR组的Tb.Sp明显降低(P<0.05),OE和ORE组的Tb.Sp和SMI明显降低(P<0.05);与OR相比,ORE组小鼠BV/TV、Tb.N和Conn.Dn升高更明显(P<0.05)。3D重建图片显示,OR、OE和ORE组小鼠骨微结构破坏明显缓解(P<0.05)。(2)与OC组相比,OR组最大载荷和弯曲强度明显升高(P<0.05),OE和ORE组最大载荷、破坏载荷、弯曲强度和弹性模量明显升高(P<0.05)。(3)与OC组相比,OR、OE和ORE组血清中Irisin和OCN浓度均明显升高(P<0.05),ORE组血清中BALP水平也明显升高(P<0.05),OE和ORE组血清中TRACP-5b浓度均明显降低(P<0.05);与OR和OE组相比,ORE组小鼠血清Irisin、BALP和OCN浓度明显更高(P<0.05);且与OR组相比,ORE组小鼠血清TRACP-5b水平明显降低(P<0.05)。(4)与OC组相比,OR、OE和ORE组小鼠骨髓脂肪细胞AV和AN参数明显降低(P<0.05);与OR和OE组相比,ORE组小鼠骨髓脂肪细胞AV和AN参数明显更低(P<0.05)。(5)与OC组相比,OR、OE和ORE组小鼠骨组织中FNDC5 mRNA和Irisin蛋白明显升高(P<0.05),上述成骨/棕色脂肪因子水平也明显升高,但IntegrinαV和Integrinβ5 mRNA和蛋白水平无显著性差异(P>0.05);与OR和OE组相比,ORE组FNDC5/Irisin、这些成骨/棕色脂肪因子水平更高(P<0.05)。第二部分:Irisin和牵张应力调控BMSCs成骨/脂分化的作用及机制1.BMSCs细胞存在IntegrinαVβ5的表达,Irisin最佳剂量为100ng/ml,牵张应力最佳强度为4%stretch。2.成骨分化条件下:(1)与control组相比,Irisin、stretch和Irisin+stretch组ALP酶活性、钙结节数量和OD_(570)值明显升高(P<0.05)。与Irisin和stretch组相比,Irisin+stretch组ALP酶活性、钙结节数量和OD_(570)值更高(P<0.05)。(2)与control组相比,Irisin、stretch和Irisin+stretch FNDC5、TGFβ1、p38MAPK和RUNX2的mRNA水平明显升高(P<0.05),但各干预组IntegrinαV和Integrinβ5的mRNA无显著变化(P>0.05);与Irisin和stretch组相比,Irisin+stretch组TGFβ1、p38MAPK和RUNX2的mRNA水平更高(P<0.05)。3.成脂分化条件下:(1)与control组相比,Irisin、stretch和Irisin+stretch组脂滴形成明显减少,OD_(520)值明显降低(P<0.05);与Irisin和stretch组相比,Irisin+stretch组脂滴形成最少(P<0.05),OD_(520)值最低(P<0.05)。(2)与control组相比,Irisin、stretch和Irisin+stretch组FNDC5、PRDM16、CIDEα和UCP1的mRNA水平明显升高(P<0.05),白色脂肪因子ASC-1、HOXC8和HOXC9的mRNA水平明显下降(P<0.05),但各干预组IntegrinαV和Integrinβ5的mRNA无显著变化(P>0.05);与Irisin和stretch组相比,Irisin+stretch组棕色脂肪因子mRNA水平明显更高,白色脂肪因子mRNA水平明显更低(P<0.05)。4.BMSCs过表达Integrinβ5基因,同时进行Irisin和stretch干预。结果显示与pEx-BLANK组相比,pEx-Integrinβ5组IntegrinαV、Integrinβ5、TGFβ1、p38MAPK、Runx2、PRDM16、CIDEα和UCP1的因子水平明显升高(P<0.05);与pEx-Integrinβ5组相比,pEx-Integrinβ5+Irisin、pEx-Integrinβ5+stretch和pEx-Integrinβ5+Irisin+stretch组的TGFβ1、p38MAPK、Runx2、PRDM16、CIDEα和UCP1的因子水平明显更高(P<0.05),stretch和Irisin+stretch组FNDC5 mRNA和Irisin蛋白水平也明显升高(P<0.05),IntegrinαV和Integrinβ5的mRNA、蛋白水平无显著性差异(P>0.05);与pEx-Integrinβ5+Irisin和pEx-Integrinβ5+stretch组相比,pEx-Integrinβ5+Irisin+stretch组这些成骨/棕色脂肪因子的水平更高(P<0.05)。5.沉默Integrinβ5基因,同时进行Irisin和stretch干预。结果显示,与scr-siRAG-221 IC50NA组相比,si-Integrinβ5组IntegrinαV、Integrinβ5、TGFβ1、p38MAPK、Runx2、PRDM16、CIDEα和UCP1的因子水平明显降低(P<0.05);与si-Integrinβ5组相比,si-Integrinβ5+Irisin、si-Integrinβ5+stretch和si-Integrinβ5+Irisin+stretch组IntegrinαV、Integrinβ5、TGFβ1、p38MAPK、Runx2、PRDM16、CIDEα和UCP1的因子表达无显著性差异(P>0.05),但stretch和Irisin+stretch组的FNDC5mRNA和Irisin蛋白水平明显升高embryonic stem cell conditioned medium(P<0.05)。结论1.肥胖引起Irisin/IntegrinαVβ5信号通路损伤,BMSCs成骨/脂分化失衡,骨微结构破坏,力学性能下降,可能是诱发肥胖性骨质疏松的原因之一。2.饮食控制、有氧运动和联合干预可能通过改善骨中Irisin/IntegrinαVβ5AZD2281信号通路信号损伤,缓解BMSCs成骨/脂分化失衡,改善骨髓脂肪异常增多和骨微结构破坏,提高骨形成和骨强度,逆转肥胖性骨质疏松,且联合干预效果好于单一干预。3.牵张应力可以通过Irisin/IntegrinαVβ5上调成骨因子TGFβ1/p38MAPK/Runx2表达和棕色脂肪因子PRDM16/Cideα/UCP1的表达,调控BMSCs分化。

为了检测溴莫尼定与水合氯醛联合麻醉大鼠和小鼠的效果，探索一种麻醉充分并有颉颃剂的大鼠和小鼠麻醉方法。本试验采用溴莫尼定与水合氯醛联合腹腔注射，分别观察其对大鼠和小鼠的麻醉反应，监测麻醉过程中大鼠的心率、血压和体温变化；对麻醉后大鼠肌肉注射颉颃剂阿替美唑，观察其催醒作用和对心血管动力学的影响；对麻醉后小鼠肌肉注射阿替美唑，观察其催醒作用及对体温和膀胱充盈情况的影响。结果显示：9 mg/(kg·bw)溴莫尼定和100 mg/(kg·bw)水合氯醛联合麻醉大鼠的麻醉诱导时间为(4.0±1.4)min点击此处,麻醉维持时间为(27.8±13.3)min,麻醉过程中体温和血压稳定，但心率在给药后30和45 min时下降。0.1 mg/(kg·bw)阿替美唑能快速催醒大鼠，并使心率回升。12 mg/(kg·bw)溴莫尼定和250 mg/(kg·bw)水合氯醛联合麻醉小鼠的麻醉诱导时间为(6.4±1.9)min,麻醉维持时间为(9.4±2selleck MS-275.7)min。1.6 mg/(kg·bw)阿替美唑能快速催Biomass production醒麻醉小鼠并避免体温过低和尿潴留。结果表明，溴莫尼定和水合氯醛联合麻醉大鼠和小鼠，起效较快、效果稳定，且有合适的颉颃剂，是一种简便有效的麻醉方法。

目的 老年患者出现术后认知功能障碍(POCD)风险较高,本研究探讨超声引导下星EPZ-6438细胞培养状神经节阻滞(SGB)对老年髋部骨折手术后认知功能的改善作用,以提高患者预后。方法 选取2019年5月—2023年5月绍兴文理学院附属新昌医院收治的170例老年髋部骨折手术患者,采用随机数表法分为对照组(85例)和研究组(85例),对照组实施全麻条件下全髋关节置换术,研究组于麻醉诱导前增加超声引导下SGB。记录手术及麻醉恢复指标,监测麻醉过程中血流动力学指标变化,分析脑氧代谢和脑损伤生化指标,统计术后3 d的POCD发生情况。结果 2组术中出血量、手术时长、术后苏醒时间和拔管时间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。2组切皮时和手术进行60 min时心率、平均动脉压均低于入室后(均P<0.001)。研究组术毕即刻脑氧摄取率[(28.93±2.79)%]低于对照组[(31.29±recyclable immunoassay2.56)%],而脑静脉氧含量、脑氧饱和度和脑血流量/脑氧代谢率[(110.78±5.66)mL/L,(61.94±3.78)min,16.22±1.16]均高于对Barasertib半抑制浓度照组[(104.39±5.92)mL/L,(57.62±3.64)min,15.09±1.03,均P<0.001]。研究组术后3 d血浆S-100β蛋白和神经元特异性烯醇化酶均低于对照组(均P<0.001)。研究组术后3 d的POCD发生率(8.24%,7/85)低于对照组(22.35%,19/85,χ2=6.538,P=0.011)。结论 超声引导下SGB可改善老年髋部骨折手术患者脑组织血氧供给及代谢功能,缓解脑损伤,降低POCD的发生风险。

血管性痴呆（vascular dementia,VaD）是指由脑血管疾病所引起的临床（或亚临床）脑血管损伤，继而致使大脑的认知、记忆等功能损害为主要表现的临床综合征。近年来，随着我国社会生活水平的提高以及人口老龄化的加剧，VaD发病率呈明显逐年上升的趋势，其病症严重In Vivo Imaging地影响了患者日常生活，同时也给家庭、社会带来了沉重的负担。由此，VaD的治疗日益成为神经科学和老年医学的重要课题，开展了更多更广泛的研究。目前，VaD的西医治疗中以药物干预为主，包括病因治疗、症状治疗等，同时也更加注重对危险致病因素的控制；中医治Lapatinib核磁疗中则以辨证施Empagliflozin作用治为核心，借助其本身具有的治疗手段丰富、副作用小等特点，既侧重于局部的病情变化，又着眼于整体，从而达到辨证合一的目的。文章对此病的治疗进行综述，希望为中西医结合治疗血管性痴呆提供参考借鉴。

目的 探讨胃泌素释放肽前体（ProGRP）、鳞状细胞癌抗原（SCCA）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法 选取122例NSCLC患者和93例健康体检者，分别作为观察组和对照组。采用化学发光法检测两组受试者血清ProGRP、SCCA水平，比较不同组织学类型NSCLC患者ProGRP、SCCA的水平和阳性表达率，比较两组受试者和不同临床特征NSCLC患者的ProGRP、SCCA阳性表达率。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，计算曲线下面积（AUC），分析ProGRP、SCCA单独及联合检测对NSCLC的诊断价值。结果 鳞状细胞癌患者的血清SCCA水平高于腺癌及大细胞癌患者，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。鳞状细胞癌患获悉更多者SCCA的阳性表达率高于腺癌患者，差异有统计学意义（P﹤0.05）。观察组患者ProGRP、SCCA的阳性表达率分别为90.98%、78.69%，分别明显高于对照组的8.60%、6.45%，差异均有统计学意义（P﹤购买D-Lin-MC3-DMA0.precision and translational medicine01）。有淋巴结转移NSCLC患者ProGRP、SCCA的阳性表达率均明显高于无淋巴结转移患者（P﹤0.01）。ROC曲线显示，ProGRP联合SCCA检测诊断NSCLC的AUC为0.797(95%CI:0.714～0.880)，灵敏度为90.59%，特异度为89.25%，均高于二者单独检测。结论 ProGRP、SCCA在NSCLC患者中阳性表达率均较高，且其表达与淋巴结转移有关，二者联合检测对NSCLC具有较高的诊断价值。

目的:明确Ezrin是否通过调节Yes相关蛋白(YAP)和程序化细胞死亡配体-1(PD-L1),参与非小细胞肺癌(NSCLC)的侵袭和迁移。方法:1.使用敲低和过表达Ezrin基因的慢病毒载体(lentivirus,LV)分别感染H1299和A549细胞株,嘌呤霉素筛选出Ezrin敲低的H1299稳定转染细胞株和Ezrin过表达的A549稳定转染细胞株。在H1299细胞中敲低Ezrin,分组为H1299空白对照组(Ezrin WT)、H1299阴性对照组(LV-NC)、Ezrin敲低组(Ezrin KD);在A549细胞中过表达EzrinPanobinostat供应商,分组为A549空白对照组(Control)、A549阴性对照组(Vector)、Ezrin过表达组(Ezrin OV)。2.采用集落形成、CCK8、Trans-well和细胞划痕实验评估H1299和A549各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。3.采用RT-q PCR和Western blotting对各组细胞中Ezrin、PD-L1和YAP的表达进行定量分析。4.将Ezrin WT组、LV-NC组和Ezrin KD组的细胞接种到裸鼠皮下腋窝处,每七天测量一次肿瘤体积,检测Ezrin对肿瘤生长的作用。5.采用免疫组化、Western blotting和RT-q PCR检测移植瘤样本中Ezrin、PD-L1和YAP表达的变化。结果：1.在H1299细胞中敲低Ezrin后,通过与对照组比较,发现抑制Ezrin可以减少细胞的增殖、迁移、侵袭能力。2.在A549细胞中过表达Ezrin后,通过与对照组相比,发现过表达Ezrin可以促进细胞的的增殖、迁移和侵袭能力。3.敲低H1299细胞中的Ezrin,与Ezrin WT和LV-NC两个对照组相比,YAP和PD-L1的表达也随之降JNJ-42756493 IC50低。4.过表达A549细胞中的Ezrin,与control和vector两个对照组相比,YAP和PD-L1的表达增高。5.与裸鼠Ezrin WT和LV-NC两个组相比,Ezrin敲低组(Ezrin KD)裸鼠皮下的肿瘤体积明显减少。6.免疫组化和western blotting结果显示,与Ezrin WT组和LV-NC组两组相比,Ezrin敲低组(Ezrin KD)裸鼠的移植In Vitro Transcription Kits瘤样本中Ezrin、PD-L1和YAP的蛋白表达降低;RT-q PCR的结果表明Ezrin KD组移植瘤样本中,Ezrin、PD-L1和YAP的m RNA表达也降低。结论:Ezrin可通过调控YAP和PD-L1的表达参与非小细胞肺癌(NSCLC)的侵袭和迁移。

建立寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）、登革病毒（Dengue virus,DENV）和黄热病毒（Yellow fever virus,YFV）3种蚊媒传染病核酸快速实时荧光定量检测方法。以寨卡病毒polyprotein gene基因，登革病毒NS5基因，黄热病毒3’UTR基因Z-IETD-FMK生产商作为靶区域设计相应的引物探针，探针的5’端分别标记不同的荧光基团，3’端标记相应的淬灭基团，对扩增体系中引物探针浓度、热启动Taq酶浓度、逆转录酶浓度、RNA酶抑制剂浓度分别进行优化。构建了一种可同时用于寨卡病毒、登革病毒和黄热病毒三重快速荧光PCR检测体系，25μL扩增体系中ZIKV、DENV和YFV的引物浓度分别为200 nmol/L、240 nmol/L和240 nmol/L；探针浓度分别为200 nmoABT-263化学结构l/L、240 nmol/L和80 nmol/L；热启动Taq酶、逆转录酶和RNA酶抑制剂的终浓度为分别为2.5U/反应、60U/反应和80U/反应。该检infection marker测体系对3种病原体的最低检测限均为1.0×103拷贝/mL，在MIC IAT C2-48和ABI7500两种不同型号的实时荧光定量PCR仪上检测结果一致，对登革热、寨卡和黄热病毒血清样本检测均为阳性扩增，与丙型肝炎病毒、乙型脑炎病毒、副流感病毒、腺病毒等无交叉反应。因此，本研究建立的寨卡病毒、登革病毒和黄热病毒的三重快速荧光PCR检测体系可用于对上述3种病毒的定性或定量检测。

目的 分析奥卡西平联合丙戊酸钠对脑梗死后继发癫痫患者疗效及血液流变学的影响。方法 选取2019年1月至2021年12月湖北省丹江口市第一医院收治的脑梗死继发癫痫的患者100例作为研究对象，按照随机数字表法分为观察组（50例）和对照组（50例）。对照组采用常规抗癫痫药物丙戊酸钠进行治疗，观察组采用奥卡西平联合丙戊酸钠进行治疗，比较分析两组患者治疗后的效果、治疗前后脑电图指标、血液流变学指标和不良反应。结果 观察组治疗6个月selleck NVP-TNKS656后，治疗效果高于对照组，不良insects infection model反应总发生率低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组治疗6个月后，α波低于对照组，δ波、θ波均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗6个月后观察组全血高切黏度、低切黏度和纤维蛋白原水平低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 奥卡西平联合丙戊酸钠对脑梗死继发癫痫患者疗效确切，而且可以有效地获悉更多改变血液流变学水平，降低不良反应发生率，值得临床推广。