金黄色葡萄球菌肠毒素B单克隆抗体的研制及双功能免疫层析试纸条产品开发

金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)由于具有超抗原性,且在SEs系列毒素中毒性最强、最为耐热,对肠胃道蛋白酶最有抵抗性,在食品加工过程中极难去除,故对人类健康具有严重的威胁。本研究首先以SEB为免疫原,通过免疫Balb/C小鼠,测定小鼠血清效价、细胞融合、筛选阳性杂交瘤细胞、亚克隆以及抗体配对等一系列操作,最终获得两株能稳定分泌抗SEB单克隆抗体的细胞株(分别命名为15H11和5D6),且两株抗体能够与SEB形成稳定的“三明治”夹心结构;两株抗SEB单克隆抗体均为Ig G_1亚型,亲和常数分别为2.08×10~9 M以及1.81×10~9 M;且与其它四种常见肠毒素SEA,SEC,SED以及SEE均无交叉反应。其次,以油氨修饰的金纳米粒子(Au NPs@OA)、红色聚集诱导发射荧光染料(AIEgens)为比色、荧光功能材料,1-十八烯马来酸酐聚合物(PMAO)为填充剂,通过微乳液法合成了具有Janus结构的比色-荧光双功能纳米微球(J-AIE@Au NBs)。由于Au NPs@OA和AIEgens在聚合物PMAO中溶解度存在极大差异,在氯仿蒸发过程中Au NPs@OA和AIEgens发生明显相分离,导致AIEgens自动聚集成核,PMAO形成壳层,而Au NPs@OA分布在PMAO层一侧,因而形成了具有Janus结构的比色-荧光双功能J-AIE@Au NBs。由于Au NPs与AIEgwww.selleck.cn/products/incb28060ens存在物理间隔,且Au NPs在AIEgens一侧,因此有效地消除了两者之间的能量转移,且降低了荧光内滤效应,从而极大地保留了AIEgens的荧光信号。随后将单克隆抗体15H11标记J-AIE@Au NBs获得免疫探针,在NC膜上喷涂抗体5D6制备获得比色定性以及荧光定量检测SEB的免疫层析试纸条J-AIE@Au-ICA。在最佳条件下,该试纸条检测全脂乳中SEB的定量线性范围为0.39 ng/m L~400 ng/m L,最低检测限(Limit of detection,LOD)为0.09 ng/m L,灵敏度较传统ELISA法提高了近70倍;同时,采用比色法裸眼定性检测SEB的最低检测限为1.56 ng/m L。该试纸条检测全脂乳中SEB的批内、批间bionic robotic fish加标回收率为86.0 2%至115%,变异系数介于4.97%至12.86%之间,且与其它4种常见肠毒素无交叉反应。此外,该试纸条检测生牛乳以及脱脂乳中SEB的LOD分别为0.19 ng/m L和0.19 ng/m L。随后,将试纸条分别用于检测人工污染SEB的全脂乳、生牛乳和脱脂乳样品,结果显示回收率介于91.04%至118.82%之间,变异系数介于3.91%至12.86%之间。以上结果表明,本研究建立的比色、荧selleckchem D-Lin-MC3-DMA光双功能试纸条能够实现对多种牛奶中的SEB快速且准确的定量分析。

血清中PD-L1水平与非小细胞癌患者免疫功能的相关性

目的 探究血清中程序性细胞死亡受体-配体-1(PD-L1)水平与非小细胞癌(NSCLC)患者免疫功能的相关性。方法 回顾性选取NSCLC患者共94例,另外选取48例健康体检人员作为对照组。根据细胞免疫功能对纳入研究的NSCLC患者进行分组,统计一般资料、病变部位、病理组织类型、体力状况分级(ECOG PS)、肺癌T分期、PD-Lenterocyte biology1表达等信息,采用单因素回归分析评估上述项目与免疫功能的关系;另外,分别统计PD-L1阳性、阴性患者的流式细胞检测结果,比较2组CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD56+以及CD19+水平。结果 单因素分析结果显示,患者年龄高于60周岁、腺癌、T3+T4且PD-L1水平呈阳性者,免疫重度损伤病例数占比存在统计学差异(P<0.05);PD-L1阳性、阴性2组的CD3+、CD3+CD4+、CD56+水ICI 46474化学结构平差异有统计学意义(P<0.05),然而CD3+CD8+、CD4+/CD8+以及CD19+水平差异无统计学意义(P>0.05)PF-07321332核磁。结论 NSCLC患者血清中的PD-L1存在显著异常表达,高水平PD-L1提示患者存在细胞免疫功能抑制,对于患者免疫功能的评估具有参考意义。

七氟醚和丙泊酚全身麻醉对肠梗阻合并感染性休克患者心功能及炎症反应的影响

目的 观察七氟醚和丙泊酚全身麻醉对肠梗阻合并感染性休克患者心功能及炎症反应的影响。方法 选取2020年3月至2022年12月在河南省濮阳市安阳地区医院Telaglenastat IC50行腹腔镜手术的肠梗阻合并感染性休克的患者84例,按照麻醉方式的不同分为七氟醚组和丙泊酚组,各42例,七氟醚组吸入2%的七氟醚,丙泊酚组静脉泵BMS-354825核磁注射丙泊酚4 mg·kg-1·h-1,分别比较两组患者不同时间段时血流动力学的变化,比较两组患者手术前后心功能指标变化,手术指标、氧化应激指标、炎症因子以及不良反应的变化。结果 在T1、T2、T3、T4、T5时,七氟醚组BDP、SBP、HR显著低于丙泊酚组(t=12.884、10.297、14.225、6.702、4.263、10.559、15.368、9.401、12.544、4.362、13.676、22.017、19.752、14.115、8.685,P均<0.001)。七氟醚组出血量、苏醒时间优于丙泊酚组,差异有统计学意义(t=2.875、2.331,P均<0.05)。术后七氟醚组NT-proBNP水平低于丙泊酚组,LVEF水平显著升高,七氟醚组高于丙泊酚组,差异有统计学意义(t=2.411、3.169,P均<0.05)。同一时间段(术后即刻、术后第1天、术后第3天、术后第5天)七氟醚组IL-6、IL-8、TNF-α水平低于丙泊酚组,差异有统计学意义(t=4.200、3.798、19.470、6.060、4.409、3.559、3.952、4.342、3.973、3.827、10.267、7streptococcus intermedius.205,P均<0.001)。结论 相对于丙泊酚组患者,吸入七氟醚对腹腔镜手术的肠梗阻合并感染性休克患者在改善心功能和减轻炎症反应方面效果更佳。

rSO_2-BIS目标导向麻醉管理对非急性期脆弱脑功能患者术后认知功能的影响研究

目的 观察局部脑氧饱和度(rSO_2)-脑电双频谱指数(BIS)Elexacaftor MW目标导向麻醉管理对非急性期脆弱脑功能患者术后认知功能的影响。方法 70例非急性期脆弱脑功能患者,按照麻醉管理方式不同分为对照组与实验组,各35例。对照组实施BIS目标导向麻醉管理,实验组实施rSO_2-BIS目标导向麻醉管理。比较两组不同时刻血流动力学参数、认知功能、进手术室时(T0)及术后2 d(T5)时的视觉模拟评分法(VAS)评分、并发症发生情况。结果 T0时,两点击此处组心率、平均动脉压比较,差异无统计学意义(P>0.05);与T0时比较,麻醉诱导后(T1)、插管后即刻(T2)、切皮时(T3)、手术结束时(T4)两组的心率、平均动脉压均降低,但实验组高于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组术后谵妄(POD)发生率5.71%低于对照组的22.86%, POD持续时间(16.5±0.7)h短于对照组的(20.5±1.4)h,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组术后认知功能障碍(POCD)Whole cell biosensor发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。T5时,两组VAS评分均高于T0时,但实验组VAS评分(3.43±0.08)分低于对照组的(5.13±0.11)分,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组并发症发生率5.71%低于对照组的22.86%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 非急性期脆弱脑功能患者采用rSO_2-BIS目标导向麻醉管理效果显著优于BIS目标导向麻醉管理。

中等强度和高强度间歇运动对非酒精性脂肪肝小鼠心肌线粒体自噬的影响

目的 探讨中等有氧运动和高强度间歇运动对非酒精性脂肪肝小鼠心肌线粒体自噬的影响及可能机制。方法 将40只3周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为普通饲养组(Chow组,n=10)和高脂饲养组(HFD组,n=30)。第18周,将HFD组体重超过普通饮食Acute respiratory infection组20%~30%(包含20%)者判定为肥胖小鼠(n=更多26),通过随机抽选2只小鼠做肝油红O染色,确定NAFLD小鼠模型建立成功。随机筛选出16只NAFLD小鼠分成中等强度有氧运动组(MICT组)和高强度间歇有氧运动组(HIIT组),每组8只,分别对两组进行8周的运动训练,干预结束后称重取材。Masson染色观察心肌纤维化情况;透射电镜观察心肌细胞超微结构;Western blot检测心肌中线粒体自噬和线粒体生物发生等相关蛋白表达。结果 (1)与Control组相比,Model组体重显著增加、心指数明显下降;与Model组相比,MICT组和HIIT组体重明显增加、MICT组心指数上升。(2)Masson结果显示,与Control组相比,Model组心肌内胶原纤维含量显著增加,且电镜下心肌肌纤维排列杂乱、断裂,心肌形态杂乱不堪,线粒体肿胀、嵴发生断裂且模糊不清并夹杂多个脂滴;与Model组相比,MICT组和HIIT组心肌内胶原纤维含量显著性减少,透射电镜下心肌肌纤维排列略有恢复,z线清晰可见,线粒体变性程度略有改善,且脂滴也略有减少,其中,MICT组对心脏组织结构改善效果优于HIIT组。(3)Western blot结果显示,与Control组相比,Model组心肌组织中PINK1和Beclin1表达水平无明显变化,Parkin、LAMP1和PGC-1α表达显著下降(P<0.01),蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高(P<0.05,P<0.01);与Model组相比,MICT组和HIIT组PINK1和Beclin1表达水平无明显变化,PGC-1α表达呈上调趋势,其中MICT组Parkin、LAMP1表达显著升高(P<0.05),p62蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显降低(P<0.05,P<0.01),HIIT组Parkin、LAMP1表达水平具有上调趋势,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和p62蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 不同方式有氧运动均能有效改善NAFLD小鼠心肌结构和功能损伤,其作selleckchem GW-572016用途径可能是通过刺激心肌细胞内线粒体自噬通量,激活自噬,恢复细胞正常自噬功能,从而改善心肌细胞损害,且中等连续有氧运动改善效果更佳。

miR-194-5p在肺腺癌组织中的表达及调控细胞增殖与侵袭的分子研究

目的:肺癌在全球的发病率及死亡率一直高居前列,是我国的第一大癌种,对于肺癌患者进行早期治疗以提高患者总体生存获益,具有十分重要的临床意义。但由于其生物学行为及发病机制复杂,缺乏早期诊断的特异分子标志物,多数病患在首诊时已经进展或发生转移,因此深入研究肺癌的发病机制,寻找相关诊治靶点具有重要意义,本研究主要通过探讨比较mi R-194-5p在肺腺癌组织及正常组织的表达情况,分析mi R-194-5p的表达对于肺腺癌的临床意义,进而分别从细胞和动物体内水平研究其对肺腺癌细胞各生物学功能的调控作用,进一步完善肺腺癌的分子机制研究,为寻找肺腺癌新的诊治靶点提供新的参考和方向。方法:(1)利用荧光定量PCR技术检测mi R-194-5p在肺癌组织及正常组织中的表达,分析mi R-194-5p表达与临床病理相关性。(2)利用荧光定量PCR技术检测mi R-194-5p在常见肺癌肿瘤细胞系(A549细胞、PC-9细胞、H1299细胞和H1795)中的表达hospital medicine,选取mi R-194-5p低表达的PC-9细胞进行该基因的功能研究。(3)合成mi R-194-5p的模拟物和空白对照物,然后转染PC-9细胞,构建过表达mi R-194-5p细胞系。(4)利用CCK8实验检测过表达mi R-194-5p对肺癌细胞增殖能力的影响,利用克隆形成实验检测过表达mi R-194-5p对肺癌细胞克隆形成能力的影响,利用Transwell实验和划痕实验检测过表达mi R-194-5p对肺癌细胞侵袭与迁移能力的影响,利用Western blot检测过表达mi R-194-5p对肺癌细胞侵袭与迁移相关蛋白表达的影响。(5)利用生物信息学预测mi R-194-5p下游靶基因,采用双荧光素酶报告基因、荧光定量PCR、Western blot、克隆形成实验、Transwell实验及体内裸鼠实验验证mi R-194-5p的靶向作用。结果:(1)mi R-194-5p在肺癌组织中相对表达水平为1.72±0.64,显著低于正常组织(3.84±0.95),差异有统计学意义(P<0.05),在30例肺腺癌样本中,在正常组织和肺癌组织中具有显著差异,有19例(63.3%)患者中的mi R-194-5p是低表达,11例(36.7%)患者中的mi R-194-5p是高表达,mi R-194-5p表达与肺癌患者的性别、年龄,Regorafenib抑制剂分化程度、吸烟史等不具有相关性,但与TNM分期(P=0.0024)和淋巴结相关转移(P=0.0086)具有显著相关性,绝大部分晚期以及发生淋巴结转移患者mi R-194-5p呈低表达。(2)荧光定量PCR检测结果显示,与空白对照物相比,转染mi R-194-5p的模拟物后能显著促进PC-9细胞内mi R-194-5p的表达水平。(3)CCK-8实验结果显示与空白对照物相比,转染mi R-194-5p的模拟物后能显著抑制PC-9细胞增殖能力。(4)克隆形成实验结果显示,与空白对照物相比,转染mi R-194-5p的模拟物后能显著抑制PC-9细胞克隆形成能力。(5)Transwell实验和划痕实验结果显示:与空白对照物相比,转染mi R-194-5p的模拟物后能显著抑制PC-9细胞的侵袭与迁移能力(6)Western blot结果显示,与空白对照物相比,转染mi R-194-5p的模拟物后能显著促进PC-9细胞内E-cadherin的表达,抑制N-cadherin和Vimentin的表达。(7)生物信息学及双荧光素酶报告基因预测发现mi R-194-5p能靶向结合并调控Ras相关蛋白Rad-38(RAB38)。(8)Western blot检测结果显示,与空白对照物相比,转染mi R-194-5p的模拟物后能显著抑制PC-9细胞内RAB38蛋白水平的表达。(9)克隆形成实验、Transwell实验及体内裸鼠实验验证发现mi R-194-5p通过负调控RAB38表达来抑制肺癌细胞增殖Bemcentinib与侵袭能力。结论:通过研究发现mi R-194-5p在肺腺癌组织中相对表达水平显著低于正常组织,mi R-194-5p表达与肺腺癌患者的性别、年龄,分化程度、吸烟史等不具有相关性,但与TNM分期和淋巴结相关转移具有显著相关性,绝大部分晚期以及发生淋巴结转移患者mi R-194-5p呈低表达,上调mi R-194-5p表达可显著抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能通过负调控RAB38蛋白的表达而实现,mi R-194-5p可以作为抑癌基因,成为肺腺癌诊断和治疗的潜在生物标志物。

超脉冲CO_2点阵激光联合低浓度5-氟尿嘧啶对烧伤后增生性瘢痕患者的影响

目的 探究超脉冲CO2点阵激光联合低浓度5-氟尿嘧啶对烧伤后增生性瘢痕患者的影响。方法 回顾性分析自2019年1月至2021年9月,川北医学院附属医院整形美容烧伤外科收治118例烧伤后增生性瘢痕患者,按治疗方法分为两组,A组采用低浓度5-氟尿嘧啶单独治疗;B组采用超脉冲CO2点阵激光联合低浓度5-氟尿PF-07321332体内实验剂量嘧啶治疗。治疗3个月后比较两组患者的临床总有效率、温哥华瘢痕量表(vancouver scar scale, VSS)、双向瘢痕评估量表(patient and observer scar assessment scale, POSAS)评分、视觉模拟评分法(visual analogue scale, VAS)、数字评分法(numeric rating scale, NRS)及不良反应发生情况。结果 两组患者均有治疗效果,B组总有效率大于A组(P<0.05)。治疗后患者瘢痕的厚度、颜色、柔软CWD infectivity度、血管分布情况都有明显的好转,且B组的VSS总评分明显低于A组(P<0.05)。B组POSAS、VAS、NRS评分均低于A组(P<0.05)。治疗过程中两组患者不良反应发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 采用超脉冲CO2点阵激光联合低浓度5-氟尿嘧啶治疗烧伤后增生性瘢痕可以减轻患www.selleck.cn/products/PD-0325901者疼痛、瘙痒症状,改善瘢痕状态,提高皮肤美观度,且该治疗方案安全性较高。

牙龈卟啉单胞菌在消化系统恶性肿瘤中的作用机制的循证评价

目的 口腔菌群与人类健康之间的关系已被学界广泛认识,本研究采用系统评https://www.selleck.cn/products/LBH-589.html价的方法总结分析牙龈卟啉单胞菌在消化系统恶性肿瘤中的作用。方法 检索PubMed、Embase、MEDLINE、Cochrane图书馆、Scopus和Web of Science数据库,检索时限均从建库购买Liraglutide至2023年8月25日。由2位评价员独立筛选文献、提取资料并评价纳入文献的偏倚风险。遵循系统评价和荟萃分析的首选报告项目(preferred reporting items for systematic reviews and Meta-analyses,PRISMA)方法对纳入文献进行系统评价,分析牙龈卟啉单胞菌在各消化道恶性肿瘤中的致癌机制。结果 共计28篇文献(包括2项前瞻性队列研究,26项病例对照研究)被纳入本次系统评价,包括胃癌、食管癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌等多种类型。其中研究食管癌的文献有5篇,胃癌有5篇,结直肠癌有9篇(其中1篇同时研究胃癌),胰腺癌有7篇,肝癌有2篇。全部的纳入文献均报道了口腔菌群postprandial tissue biopsies失调(包括牙龈卟啉单胞菌)与消化系统恶性肿瘤之间的风险关联。结论 本研究系统阐述了牙龈卟啉单胞菌在消化系统恶性肿瘤中的作用,对其可能的致病机制进行分析评价。

高选择保护性迷走神经切断术在腹腔镜胃底折叠手术中的应用

目的 探讨高选择保护性迷走神经切断术在腹腔镜胃底折叠手术(短松Nissen术式)中应用的安全性、可行性及有效性。方法 回顾分析我院2014年1月~2019年12月78例胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease, GERD)合并食管裂孔疝行腹腔镜食道裂孔疝修补+胃底折叠术(短松Nissen术式)的临床资料,分为传统手术组和迷走神经保护组,比较2组手术时间、术中出血量、术后住院时间、术后并发症发生率和术后6个月胃食管反流病调查问卷(GERD Q量表)评分、DeMeester评分、食管下括约肌静息压力(lower esophageal sphinctElexacaftor小鼠er pressure, LESP)、反流症状控制情况。结果PD0325901供应商 2组手术均顺利完成,均无术中脏器损伤发生。2组手术时间差异无显著性[(85.5±13.9)min vs.(88.3±18.6)min,t=0.729,P=0.468];术中出血量差异无显著性[(18.6±8.6)ml vs.(18.1±8.5)ml,t=-0.221,P=0.825];术后排气时间差异无显著性(2.0±0.7)d vs.(1.8±1.0)d,t=-1.227,P=0.224]。传统手术组术后住院时间明显长于迷走神经保护组[(9.4±3.0)d vs.(8.2±2.1)d,t=-2.172,P=0.033]。传统手术组术后30 d内手术并发症发生率36.8%(14/38),明显高于迷走神经保护组12.5%(5/40)(χ~2=6.267,P=0.012)。传统手术组术后6个月治愈率86.8%(33/48),迷走神经保护组85.0%(34/40),2组疗效比较差异无显著性(Z=-0.232,P=0.816)。传统手术组与迷走神经保护组术后6个月GERD Q量表评分、DeMeester评分、LESP差异均无显著性[(5.6±0.9)分vs.(5.8±0.8)分,t=1.red cell allo-immunization232,P=0.222;(4.1±2.2)分vs.(4.2±2.2)分,t=0.261,P=0.795;(23.2±3.5)mm Hg vs.(23.5±3.8)mm Hg,t=0.412,P=0.681]。结论 高选择保护性迷走神经切断术应用于腹腔镜胃底折叠术(短松Nissen术式)中,保护迷走神经安全、可行、有效。

综合控制策略下的登革热传播模型建立与分析

将感染沃尔巴克氏菌的蚊子释放到野生蚊子种群中是一种极好的生物控制策略,可以有效地对抗登革热GSK J4浓度等蚊媒传播疾病.本文主要关注沃尔巴克氏菌在蚊子种群中的传播以及对登革热传播的影响,并研究疫苗和蚊子的外潜伏期对登革热传播的影响.因此,本文研究了两类登革热传播模型及其动力学行为,利用最优控制理论寻找最有效和最具成本效益的综合控制策略,为制定控制登革热传播的策略提供了理论依据和指导.本文共分为四个章节,主要内容如下:第一章主要介绍了登革热传播模型的研究背景及意义,以及本文所用到的一些重要结论.第二章研究了一类考虑沃尔巴克氏菌和疫苗的登革热传播模型的动力学行为及最优控制策略.首先,考虑了沃尔巴克氏菌占优种群入侵成功与否的两种极端情况,分析得到了系统的阈值动力学性态.其次,对基本再生数进行了局部和全局敏感性分析.进一步地,提出了四种控制策略,证明了最优控制的存在性并使用庞特里亚金极大值原理求出最优控制的表达式.最后,通过数值模拟和成本效益分析讨论了Dinaciclib最有效与最具成本效益的策略.结果表明,最具成本效益的综合策略是接种疫苗、使用蚊帐和喷洒杀虫剂.第三章建立了一类登革热传播模型,该模型考虑了感染沃尔巴克氏菌种群以及蚊子的外潜伏期.首先,分别研究了沃尔巴克氏菌入侵成功系统和沃尔巴克氏菌入侵失败系统的动力学行为,包括基本再生数,正稳态的存在性和全局稳定性.进一步地,以分段函数作为分布时滞,并通过数值模拟表明了引入沃尔巴克氏菌可以有效降低最终感染人数,且忽略蚊子的外潜伏期会高估Ayurvedic medicine登革热暴发的风险.最后,研究了离散系统的最优控制策略,并得出结论:从控制效果来看,仅接种疫苗能够最有效地控制登革热的传播;从控制成本效益的角度来看,仅使用蚊帐才最具成本效益.第四章总结本文所做的工作,并分析了登革热模型需要进一步研究的问题和工作.