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三七[Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen]是我国的名贵中药材,具有活血化瘀、解毒散热等多种功效。三七种植条件要求较高,存在连作障碍,以根腐病为主的多种病害频发。目前对于三七根腐病的防治主要是喷洒各类化学农药,虽然能在一定程度上减少病害的发生,Y-27632研究购买但大量农药的使用导致致病菌产生耐药性、抗药性,还会对环境造成污染以及三七药材中的农残超标。可见三七根腐病的防治迫切需要更安全有效的手段。生物防治手段近年来发展迅速,对环境无害,且安全有效,在多种病害防治中取得了大量成果。本研究旨在筛选获得三七根腐病的拮抗细菌,并探究其抑菌机理。本论文实验工作及结果如下:1、以三七根腐病主要致病菌茄腐镰刀菌为靶标,对其拮抗菌进行筛选,得到一株具有良好抑菌效果的拮抗细菌Pn1,对尖孢镰刀菌、交链格孢等8种病原菌的菌丝生长均具有抑制效果;通过形态观察、分子生物学检测确定Pn1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);酶活检测分析表明Pn1能产生蛋白酶、β-1,3-葡聚糖酶、铁载体、纤维素酶;Pn1的无细胞滤液具有抑菌活性;q RT-PCR分析表明Pn1能够下调茄腐镰刀菌、尖孢镰刀菌、交链格孢三种病原菌中参与发育与致病过程的关键基因表达;通过促生防病实验发现Pn1灌根处理后的三七生长状况良好,能够减轻三七根腐病症状;Pn1处理后三七根部POD活性升高;HPLC检测分析表明Pn1处理后在一定程度上促进了三七根中皂苷的合成。2、采用硫酸铵沉淀法提取Pn1无细胞滤液中的胞外蛋白,抑菌试验表明Pn1胞外蛋白能够抑制茄腐镰刀菌、交链格孢的菌丝生长及孢子萌发;通过酸沉淀、甲醇萃取方法提取Pn1无细胞滤液中的脂肽类物质,抑菌试验表明脂肽粗提物对茄腐镰刀菌、尖孢镰刀菌、交链格孢的生长具有抑制效果;通过纳升超高效液相色谱-四级杆轨道阱质谱对Pn1菌株产生的胞外蛋白进行分析鉴定,分析表明Pn1能产生多种与抗生素产生相关的蛋白质,如普立伐他汀合成酶、活性素合成酶、聚酮合成酶,此外还检测到可能的蛋白类抗毒素和水解酶。3、采用非BI 10773体内实验剂量靶向代谢组学方法,对Pn1胞外小分子代谢物进行分析,结果表明包括有机酸及其衍生物、脂类和类脂分子、有机杂环化合物、有机氧化合物、苯丙素与聚酮类物质、苯类物质积累最多,检测到植物激素赤霉素、3-吲哚丙烯酸、乙烯利,甜菜碱、根皮素、次黄嘌呤、诺哈曼等多种抗菌物质;KEGG富集分析显示小分子代谢物主要聚集在生物碱生物合成、苯丙烷类生物合成等通路中。4、采用转录组学分析Pn1拮抗三七根腐病菌的分子机制,RNA测序分析表明,Pn1处理组与对照组三七相比总共检测到1258个上调和1831个下调的差异表达基因(DEGs),KEGG富集分析表明Pn1处理后三七中淀粉和蔗糖代谢、植物信号转导、植物病Agricultural biomass原体互作、苯丙烷生物合成途径上的DEGs表达上调,其中包括催化糖类水解的β-淀粉酶、果糖激酶基因,植物激素相关的生长素反应蛋白、赤霉素受体GID1,WRKY转录因子、病程相关蛋白基因、苯丙氨酸解氨酶基因,表明Pn1对三七的生长发育、碳水化合物代谢、抗病防卫反应具有正向调控作用;与只接种茄腐镰刀菌相比,Pn1处理后再接种茄腐镰刀菌的三七体内MAPK信号通路、植物-病原体互作、JA/SA信号通路、类黄酮生物合成途径上的相关抗病基因表达量相对降低,表明Pn1处理抑制茄腐镰刀菌的侵染,并减轻了三七的发病程度;通过q RT-PCR验证了8个抗病相关的DEGs,与转录组测序结果相符。综上所述,枯草芽孢杆菌Pn1是一株具有明显抑菌效果的拮抗细菌,能产生多种抑菌活性物质,对三七具有促生能力,还能提高三七的抗病性。

目的 探serum biochemical changes讨泽泻醇A(alisol A, AA)通过抑制基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)改善皮层血脑屏障(blood brain bTofacitinib体内arrier, BBB)障碍介导的脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury, CIRI)。方法 构建小鼠全脑缺血/再灌注(global cerebral ischemia-reperfusion, GCI/R)体内动物模型，AA灌胃干预7 d(30 mg·kg~(-1)),改良神经功能缺损评分(modified neurological severity score, mNSS)、旷场和Y迷宫实验检测神经功能，磁共振波谱(magnetic resonance spectroscopy, MRS)检测皮层相关代谢物质水平，透射电镜(transmission electron microscope, TEM)观察皮层BBB超微结构，蛋白免疫印迹法和免疫组织化学检测皮层MMP-9蛋白表达，分子对接分析AA与MMP-9结合的可能性。结果 相较于假手术组(Sham), GCI/R组小鼠mNSS评分升高、旷场总路程和中心路程占总路程比值均减少、Y迷宫交替率降低(P<0.01),而AA干预组(GCI/R+AA)较GCI/R组小鼠mNSS评分降低、旷场总路程和中心路程占总路程比值增加、Y迷宫交替率增加(P<0.01)。MRS检测发现GCI/R组小鼠大脑皮层γ-氨基丁酸、N-乙酰天门冬氨酸表达降低，胆PD-0332991生产商碱、肌醇和牛磺酸表达升高(P<0.01);GCI/R+AA组小鼠γ-氨基丁酸、N-乙酰天门冬氨酸表达升高，胆碱、肌醇和牛磺酸表达降低(P<0.01)。TEM发现GCI/R组小鼠脑微血管基膜塌陷、管腔变窄；内皮细胞被激活、质膜褶皱且间隙变大，紧密连接破坏；星形胶质细胞终足肿胀。GCI/R+AA组小鼠血管管腔充盈；内皮细胞质膜平整，紧密连接完好；星形胶质细胞终足相对正常。蛋白免疫印迹和免疫组织化学检测发现GCI/R组小鼠皮层MMP-9表达水平明显升高(P<0.01),GCI/R+AA组明显降低(P<0.05)。分子对接发现AA与MMP-9可通过TYR-50和ARG-106两个基团结合，结合能为-6.24 kcal·mol~(-1)。结论 AA治疗可改善GCI/R小鼠皮层CIRI,其机制可能是通过抑制MMP-9升高造成BBB损伤。

目的：分析4C理念下的院内-院外指导护理应用于原发性肾病综合征患者的护理效果。方法：选取2018年4月—2019年12月平顶山市第一人民医院肾病风混免疫科收治的88例原发性肾病综合征患者为研究对象，随机分为研究组（n=44）和对照组（n=44）。其中对照组落实常规性护理方案，研究组落实4C理念下的院内-院外指导护理方案。在干预前与干预后第3个月末，检测超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6 (IL-6)；以焦虑自评量表（SAS）及抑郁症自评量表（SDS）对其消极情感状况展开评价；以生活LGX818溶解度质量量表（SF-36）对其生活质量展开评价。结果：干预后，研究组患者的hs-CRP、IL-6值均低于对照组，差异有统计学意义（t=12.147、Mediating effect15.587,P<0.05）；研究组患者SAS、SDS评分均低于对照组，差异有统计学意义（t=14.857、12.147,P<0.05）；研究组患者SF-36评分高于对照组，差异有统计学意义（t=10.743、9.987、8.527、9.879、11.368、13.258、14.789、13.25selleck产品4,P<0.05）。结论：4C理念下的院内-院外指导护理应用于原发性肾病综合征患者，能改善机体的炎性反应，且能缓解其内心的焦虑与抑郁情感，进而提高个体的生活质量。

目的 探讨microRNAs(miRNAs)对儿童原发性肾病综合征（PNS）辅助性T2细胞（Th2）/调节性T细胞（Treg）失衡的影响。方法 收集2015年10月-2016年10月MK-1775生产商在深圳市儿童医院肾脏科就诊的PNS患儿40例，分为激素治疗前的初发组和激素治疗后缓解组，各20例，选取同年龄段健康儿童20名作为正常对照组。应用流式细胞术分析外周血循环中Th2和Treg细胞的比例；Real-time PCR分析Foxp3、GATA3、miR-24、miR-27、miR-155、miR-21及miR-31基因表达；ELISA分析血浆白细胞介素（IL）-4的浓度。结果 与正常对照组相比，初发组PNhematology oncologyS患儿外周血Th2比例、Th2/Treg细胞比值、相关因子GATA3mRNA的表达及血浆IL-4的浓度，GATA3/Foxp3mRNA表达比值均明显升高，而Treg比例、核心转录因子Foxp3mRNA的表达明显降低，差异均有统计学意义（t=5.64、6.15、10.22、4.37、8.52、9.93、11.01,P均<0.05）；糖皮质激素治疗后的缓解组上述指标均出现逆转，差异均有统计学意义（t=5.58、5.93、10.81、3.40、8.24、9.61、8.80,P均<0.05）。与正常对照组相比，初发组miR-24、miR-27、miR-155和miR-21的表达显著降低，而miR-31的表达显著增高，差异均有统计学意义（t=9.08、9.37、5.88RepSox molecular weight、7.25、6.28,P均<0.05）；而糖皮质激素治疗后缓解组，上述miRNAs已趋于正常，差异均有统计学意义（t=6.02、6.24、5.71、6.62、5.79,P均<0.05）。结论急性期PNS患儿存在Th2/Treg细胞失衡，可能与miR-24、miR-27低表达所致Th2细胞过度活化及miR-155、miR-21低表达和miR-31高表达所致Treg细胞下调有关，其具体作用机制有待进一步探讨。

目的 探究高危型人乳头瘤病毒（HPV）分型检测及LEEP术联合在宫颈病变诊治中的应用价值。方法 选取2021年1月至2022年12月广东医科大学附属第二医院妇科的宫颈病变患者200例为研究对象。所有患者均进行组织病理学检测、高危型HPV分型检测及宫颈环形电切术（LEEP），比较组织病理学检测、高危型HPV分型检测及LEEP术后病理结果之间的差异。结果 高危型HPV分型检测：200例患者中HPV阴性58例，阳性142例，阳性检出率为71.0%(142/200)。其中高危HPV感染108例，混合型HPV感染34例。病理学检查结果：宫颈炎13例，CINⅠ44例，CINⅡ65例，CINⅢ78例，HPV阳性病例中CIN检出率为95.1%(135/142),HPV阴性病例中CIN检出率为89.66%(52/58)。组织病理学检查检出率明显高于高危型HPV检出率，差异有统计学意义viral hepatic inflammation（χ~2=34.676,P<0.001）。LEEP术后病理检查：200例患者中宫颈炎13Dolutegravir采购例，CINⅠ44例，CIselleck HPLCNⅡ65例，CINⅢ78例，CIN检出率为93.5%(187/200)。病理学检查结果：宫颈炎11例，CINⅠ43例，CINⅡ67例，CINⅢ79例，CIN检出率为94.5%(189/200)。组织病理学检查与LEEP术后病理检出率比较，差异无统计学意义（χ~2=0.177,P=0.674）。高危型HPV分型联合LEEP术后病理检查对宫颈病变评估的灵敏度为96.84%，特异度为76.19%，高于HPV分型或者LEEP术后的单独检测，其性能表现更优。结论 高危型HPV分型检测及LEEP术对宫颈疾病患者病变评估具有积极意义，二者联合实施可提高宫颈病变类型的诊断准确率。

目的 观察香砂六君子汤治疗脾虚湿盛型宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染的疗效及对免疫功能的影响。方法 选择2019年1月-2022年3月医院收治的92例脾虚湿盛型宫颈HPV感染患者，以随机数字表法将其分为研究组（n=46）与对照组（n=46）。对照组接受常规重组人干扰素α-2b治疗，研究组在对照组的基础上cognitive biomarkers联合香砂六君子汤治疗。对比2组中医证候评分、临床疗效、HPV病毒载量、HPV转阴率、白细胞介素-17(IL-17),IL-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、免疫功能及不良反应。结果 治疗后，2组主症评分、次症评分、总评分均降低（P <0.05），且研究组更低（P <0.05）。研究组总有效率（93.48%）比对照组（78.26%）高（P <0.05）。治疗后，2组HPV病毒载量均降低（P <0.05），且研究组更低（P <0.05）；研究组HPV转阴率（91.30%）比对照组（76.09%）高（P <0.05）。治疗后，2组血清IL-17、IL-2、TNF-α水平均降低（P <0.05），且Protein Tyrosine Kinase抑制剂研究组更低（P <0.05）。治疗后，2组CD3+、CD4+水平均升高（P <0.05），且研究组更高（P <0.05）；治疗后，2组CD8+水平均降低（P <0.05），且研究组更低（P <0.05）。2组不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 香砂六君子汤治疗脾虚湿盛型宫颈HPV更多感染疗效确切，可提高HPV转阴率，减轻患者炎症反应，改善免疫功能，且安全可靠。

目的 探讨肾消解毒通络方对糖尿病肾病金黄地鼠肾脏AIM2介导细胞焦亡的影响及其作用机制。方法 50只SPF级雄性金黄地鼠随机分为对照组和造模组，造模组采用高糖高脂喂养联合腹腔注射STZ构建糖尿病肾病模型，建模成功后随机分为模型组，肾消解毒通络方低、高剂量组（1.28、25.6g/kg），恩格列净组（10mg/kg），灌胃给药8周。Pine tree derived biomass全自动生化分析仪检测空腹血糖、24h-UTP和血清TC、LDL-C、Scr、Sur水平，生化法检测血清SOD活性和MDA水平，ELISA法检测血清IL-1β、IL-18、TNF-α水平，HE和PAS染色观察金黄地鼠肾组织病理形态学变化，免疫荧光或免疫组化法检测肾组织ROS、γH2AX表LGK-974化学结构达，Westernblot法及免疫组化法检测肾组织AIM2、caspase-1、GSDMD蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组金黄地鼠肾小球出现萎缩，肾小球囊腔增大、系膜区增宽，肾小管扩张、水肿伴有坏死，空腹血糖、24 h-UTP、血清TC、LDL-C、Scr、Sur、IL-1β、IL-18、TNF-α、MDA水平和肾组织ROS、γH2AX、AIM2、caspase-1、GSDMD表达升高（P<0.01），血清Sselleck产品OD活性降低（P<0.01）；与模型组比较，肾消解毒通络方高剂量组和恩格列净组肾组织病理学得到改善，空腹血糖、24 h-UTP、血清TC、LDL-C、Scr、Sur、IL-1β、IL-18、TNF-α、MDA水平和肾组织ROS、γH2AX、AIM2、caspase-1、GSDMD表达降低（P<0.05，P<0.01），血清SOD活性升高（P<0.01）。结论 肾消解毒通络方可通过抑制金黄地鼠ROS-dsDNA-AIM2信号通路表达，降低肾组织ROS水平，减少肾脏固有细胞DNA损伤，减少AIM2炎症小体合成，从而抑制AIM2介导的细胞焦亡，减轻肾脏炎症损伤。

目的:采用网络药理学方法预测济生肾气丸治疗糖尿病肾病(DN)的活性成分和作用机制。方法:利用TCMSP平台获得济生肾气丸药物活性成分及基因靶点，利用GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD和DrugBank等数据库获取DN相关的基因靶点，利用Venny 2.1绘制共同靶点韦恩图；采用Cytoscape 3.9软件构建“药物-成分-靶点”相互作用网络；利用STRING构建PPI网络并进行拓扑分析；通过R/BioCadolescent medication nonadherenceonductor对共同靶点进行GO及KEGG富集分析。结果EPZ-6438说明书:共获得济生肾气丸生物活性成分72个，筛选到济购买Rapamycin生肾气丸治疗DN的潜在靶点167个，核心靶点为AKT1、INS、PTGS2、IL6、CASP3等，主要富集在脂质与动脉粥样硬化、AGE-RAGE、流体剪切应力、HIF-1等信号通路。结论:济生肾气丸通过抗氧化应激、抗炎、抗凋亡、抗增殖等作用修复DN受损的肾脏微血管系统，保护肾功能。

目的:筛选卵巢上皮性癌(卵巢癌)转移的关键基因，并基于卵巢癌细胞株SKOV3,探索其对卵巢癌细胞迁移侵袭biomechanical analysis的影响。方法:基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库、基因表达综合(GEO)数据库及人类基因数据库(GeneCards),通过limma差异表达分析及Kaplan-Meier生存分析挖掘在卵巢癌中高表达且与患者不良预后相关的迁移侵袭相关基因，并通过基因本体(GO)功能富集分析预测基因参与的生物学过程。利用PXN敲减慢病毒感染SKOV3细胞后，通过细胞划痕实验和Transwell迁移侵袭实验探讨PXN敲减对卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的影Wnt-C59抑制剂响。利用癌症药物敏感性基因组学(GDSC)数据库对样本的化疗反应进行预测，评估PXN基因的卵巢癌细胞化疗敏感性的影响。结果:共筛选到36个迁移侵袭相关基因在卵巢癌组织中高表达，其中PXN基因高表达与卵巢癌患者不良预后相关(P<0.05)。PXN的功能与组蛋白修饰、染色质共价修饰、赖氨酸肽基修饰、蛋白质去泛素化、通过去除小蛋白进行蛋白质修饰、组蛋白去泛素化以及组蛋白H3-K4三甲基化等相关。荧光显微镜、Western blot结合RT-qPCR结果显示，在SKOV3细胞中成功敲减PXN基因。细胞功能学实验表购买Tamoxifen明，PXN敲减组相对于空白对照组和阴性对照组，划痕愈合面积更小，穿膜细胞数更少。PXN高表达组中的顺铂及紫杉醇IC_(50)明显高于PXN低表达组(P<0.001),而其吉西他滨及多柔比星的IC_(50)明显低于PXN低表达组(P<0.0001)。肿瘤细胞中紫杉醇的IC_(50)明显低于正常卵巢细胞(P<0.0001),其西他滨及多柔比星的IC_(50)值高于正常卵巢细胞(P<0.0001)。结论:迁移侵袭相关基因PXN在卵巢癌中高表达，且与患者不良预后相关。PXN表达水平降低能抑制卵巢癌细胞SKOV3的迁移和侵袭。PXN基因表达水平与卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性相关。

目的 观察补阳还五汤合参芪地黄汤化裁治疗气阴两虚、络脉瘀阻证糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）Ⅲ-Ⅳ期患者临床疗效及对肾小管损伤的保护作用。方法 将132例符合纳入标准的DKD患者分为对照组和中药组，各66例。对照组给予西医基础治疗并联合恩格列净片，中药组在对照组基础上联合补阳还五汤合参芪地黄汤化裁方，两组患者连续用药12周。观察两组患者临床疗效，比较两组患者治疗前后中医证候积分、糖尿病生存质量特异性量表（diabetes specific quality of life Modern biotechnologyscale,DSQL）评分、糖脂代谢指标、肾功能指标、肾小管损伤指标、炎症因子的表达及不良反应的发生Pevonedistat配制率。结果 中药组的总有效率（87.93%）明显高于对照组（75.00%）(P<0.05)。治疗后，两组患者的中医证候积分、DSQL评分、糖脂代谢指标、肾小管损伤指标、炎症因子的表达显著降低，血白蛋白（albumin,ALB）明显升高（P<0.05），以中药组的中医证候积分、DSQL评分、肾小管损伤指标、炎症因子的表达降低更明显（P<0.05）。此外，与治疗前相比，治疗后对照组血尿素氮（urea nitrogen,BUN）、血肌酐（creatinine,Scr）无明显差异（P>0.05），而中药组BUN、Scr明显降低（P<0.05）；治疗后两组比较，BUN、Scr差异有统计学意义（P<0.05）。两组不良反应发生率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 补阳还五汤合参芪地黄汤化裁治疗DKD的疗效确切，可有效地降低患者尿蛋白排泄，调节糖脂代谢紊乱，抑PI3K/Akt/mTOR抑制剂制炎症因子表达，改善肾脏损伤，延缓DKD进展，且安全性良好。