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目的 探讨胸腔积液长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(lncRNA BLACAT1)及长链非编码RNA癌症易感性候选物9(lncRNA CASC9)表达对肺腺癌的诊断价值。方法 选择2021年1月至2022年12月该院收治的96例肺腺癌合并胸腔积液患者作为肺腺癌组，并选择同期收治PEG300体外的肺部良性病变合并胸腔积液患者82例作为对照组，采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测两组患者胸腔积液lncRNA BLACAT1及lncRNA CASC9的表达，建立受试者工作特征(ROC)曲线分析其对肺腺癌的诊断价值。结果 肺腺癌组胸腔积液lncRNA BLACAT1、lncRNA CASC9相对表达水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。lncRNA BLACAT1表达与肺腺癌患者临床分期、淋巴结转移、分化程度有关，lncRNACASC9表达与患者临床分期、分化程度有关(P<0.05);胸腔积液lncRNA BLACAT1、lncRNA CASC9联合鉴别诊断肺腺癌模型：Logit(P)=1.933×lncRNA BLACAT1+0.448×lncRNA CASC9-3.987。胸腔积液中lAdezmapimod使用方法ncRNA BLACAT1、lncRNA CASC9诊断肺腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.782、0.789,联合检测的AUC为0.878Biolistic-mediated transformation,高于单项指标检测(P<0.05)。结论 lncRNA BLACAT1、lncRNA CASC9在肺腺癌患者胸腔积液中表达上调，且与临床病理有关，二者联合对肺腺癌具有较好的临床诊断价值。

目的 了解2013—2018年山东省肿瘤登记地区肺癌发病和死亡现状，为后期肺癌防治提供参考依据。方法 数据来源于山东省肿瘤登记数据库，提取2013—2018年肺癌发病和死亡数据进行分析。用Excel 2010和SAS 9.4软件计算发病（死亡）率、标化率和0～74岁累积率等，不同性别、城乡间比较采用Z检验。采用Joinpoint 4.8.0.1软件进行发病率和死亡率的变化趋势分析，计算年度变化百分比（APC）。结果 2018年山东省肿瘤登记地区肺癌粗发病率为78.15/10万，中标发病率为42.56/10万，肺癌粗死亡率为57.04/10万，中ABT-263研究购买标死亡率为29.77/10万。2018年山东省肺癌年龄别发病率和死亡率随着年龄增长而上升，分别在80～84岁Bcl-2抑制剂和85岁及以上年龄integrated bio-behavioral surveillance组达到最高峰。2018年山东省肿瘤登记地区肺癌发病死亡均存在性别差异，男性中标发病率为女性的1.79倍，中标死亡率为女性的2.37倍。2013—2018年山东省肿瘤登记地区肺癌粗发病率呈上升趋势，有统计学意义（APC=2.53%,P<0.05），而中标发病率的变化趋势无统计学意义（P>0.05）；肺癌粗死亡率的变化趋势无统计学意义（P>0.05），死亡中标率呈下降趋势（APC=-3.09%,P<0.05）。结论 山东省肿瘤登记地区肺癌总体发病呈现上升趋势，男性与老年人仍为主要高危人群，山东省肺癌防控形势严峻，应采取相应防控措施，降低肺癌疾病负担。

研究背景:癌症依然是当今人类健康面临的重大难题,目前的治疗手段主要包括放射治疗、免疫治疗、手术切除和化学治疗等。其中化疗对处于早中晚期的癌症患者均有一定疗效,常与其他手段联合治疗,是一种癌症治疗的常用策略,然而化疗药物的毒性也是有目共睹,因此寻找抗肿瘤效果更好且毒性更低的化疗药物成为关键。天然植物被认为是具有生物活性化合物来源的丰富储库。据研究显示,红豆杉具有多种药理活性,其中以抗肿瘤效果最为明显。红豆杉的种子具有丰富的资源和良好的抗肿瘤活性。因此,聚焦红豆杉种子筛选理想的抗癌活性物质是一条有效途径。聚合物胶束在抗癌药物发展中展现出多种优越性能,如增溶、提高靶向性、降低毒性、提高生物利用度,增强抗肿瘤效果等,将天然产物经聚合物胶束递送至体内能极大地发挥抗癌药物的疗效。因此本研究以红豆杉种子为原材料,从中筛选出抗肿瘤效果好且毒性相对低的抗癌活性成分,并通过聚合物胶束将其进行递送,以期望能提高抗肿瘤效果并降低毒性。方法及结果:1.利用有机溶剂萃取,硅胶柱层析、薄层层析等分离纯化手段,结合MTT法从红豆杉种子乙醇提取物中筛选得到抗肿瘤活性单体化合物和部位。采用多种分析技术鉴定该化合物为蜕皮激素(EC)。采用MTT法评估EC及EC含量较高部位(BE)的抗肿瘤活性,结果表明,EC对A549和U251表现出较弱的抗肿瘤作用,对Hep G2表现出良好的抗肿瘤效果,其半抑制浓度(IC_(50))为68.88μg/m L。BE对Hep G2、A549和U251均具有良好的抗肿瘤效果,IC_(50)值分别为34.34μg/m L、35.25μg/m L、61.56μg/m L。2.采用HPLC建立EC的体外分析方法。结果表明,EC的体外HPLC分析方法符合方法学要求,可用于红豆杉种子提取液中EC的含量检测,利用该分析方法检测BE中EC的含量为(62.00±0.21)%。以EC的提取率为指标采用单因素和中心复合响应面优化BE的提取工艺。单因素结果表明最佳提取温度60℃、乙醇浓度50%、提取时间9 h、料液比1:10、提取次数1次。中心复合响应面拟合模型的P值和R~2分别为0.0003和0.9147,表明该回归模型显著,能正确反映实验结果。优化后最佳提取温度70℃、乙醇浓度75%、提取时间为6 h、EC提取率为(607.74±15.18)μg/g。3.利用HPLC成功构建BE的分析方法。结果表明,BE的HPLC分析方法符合方法学要求,可用于BE的体外定量分析。采用溶剂注入法构建BE胶束(BE-M)体系,并通过单因素实验进行优化。对最优处方进行粒径,多分散指数(PDI)、包封率、载药量、透射电镜(TEM)、临界胶束浓度(CMC),X-射线衍射分析(XRD)和傅里叶变换红外分析(FT-IR)等体外评价并在室温环境下考察其稳定性。最后用透析法考察其在盐酸水溶液(p H 1.2),磷酸盐缓冲溶液(p H 6.8)和磷酸盐缓冲溶液(p H 7.4)的累积释放率。单因素结果显示最佳温度selleck合成50℃,转速1600 rpm/min,BE:m PEG-PCL:TPGS=10 mg:20 mg:10 mg。体外表征显示BE-M为均匀分散的球形颗粒,粒径34.37±0.11 nm,PDI为0.152±0.003,包封率86.53±1.54%,载药量21.63±0.87%。BE-M较低的CMC值(0.881μg/m L)表明具有较好的抗稀释能力。XRD和FT-IR结果表明BE被成功封装在BE-M中,即BE-M制备成功。BE-M的稳定性结果表明在室温环境下BE-M至少能保持7 d的稳定性。体外释放结果表明,BE-M在三种释放介质中释放良好,且BE-M对BE起到了一定缓释的作用。4.构建小鼠各组织中BE的体内HPLC检测方法并对其进行专属性评估。考察BE和BE-M在小鼠各脏器中的分布情况。采用Hep G2、A549和U251肿瘤细胞评估了BE-M的抗肿瘤活性。以斑马鱼为对象考察了BE-M的安全性。结果表明小鼠各组织匀浆液中BE的体内HPLC检测方法专属性良好,可用于各组织中BE的分析检测。BE-M在小鼠各组织中的分布情况表明,BE-M能增加BE在各组织中的积累,以肝脏和脑部最显著。表明BE-M具有一定的肝脏靶向和脑部靶向作用。除此之外BE-M还具有延长BE在各组织中滞留时间的作用。MTT法检测抗肿瘤结果显示,BE-M对Hep G2,A549,U251的IC_(50)值分别为25.87μg/m L、28Biorefinery approach.04μg/m L、48.54μg/m L,而BE对Hep G2,A549,U251的IC_(50)值分别为34.2μg/m L、34.98μg/m L、62.75μg/m L。表明BE-M提高了BE的体外抗肿瘤效果,体现BE-M的优越性。斑马鱼的安全性评估结果显GSK126示BE-M在第3 d对斑马鱼的半数致死浓度(LC_(50)=219.45μg/m L)值大于BE(LC_(50)=138.06μg/m L),表明BE-M降低了BE的毒性,安全性好。

种公羊的精液质量是影响母羊受孕率和繁殖率的重要因素之一,睾丸特殊的免疫耐受微环境为精子发生和雄激素睾酮的合成提供了强有力的保障。睾丸间质细胞(Leydig Cells,LCs)是睾丸组织内特异性的细胞之一,LCs睾酮合成能力的强弱可直接影响雄性的繁殖性能,此外LCs还可分泌多种免疫调节因子维持睾丸局部免疫防御和耐受微环境的稳态。尽管如此,睾丸在受到血液和下游生殖道的多种病原微生物入侵时,易造成炎性损伤,最终影响睾酮合成和精子发生而致雄性不育。中草药淫羊藿苷(Icariin,ICA)具有抗炎、抗氧化应激、促进免疫调节、促进生殖内分泌等多种药理学作用,但ICA的研究大多集中于人医上,有关ICA在家畜生殖内分泌和免疫方面的研究资料相对缺乏。因此,本研究中以奶山羊LCs为研究材料,利用脂多糖(Lipopolysa确认细节ccharide,LPS)对奶山羊LCs造成炎性损伤。在此基础上,体内外添加ICA再进行炎性刺激,分析ICA的抗炎、促生殖内分泌调控作用。主要实验及研究结果如下:(1)不同发育阶段奶山羊LCs的细胞学特性H&E染色发现,幼龄期奶山羊睾丸曲细精管(Seminiferous tubule,ST)的管腔较小,生精上皮仅由精原细胞和支持细胞构成。青春期和成年期ST管腔显著增加,生精上皮由各级生精细胞和支持细胞构成,管腔内含有大量的精子。LCs常成群分布于ST之间,胞体较大,呈圆形,胞核常位于细胞中央。免疫组织化学检测其标记蛋白3β-HSD的表达,结果发现:3β-HSD主要分布于胞质中,幼龄期表达较弱,而到成年期呈强阳性表达。ELISA检测发现奶山羊血清中促黄体生成素和睾酮的含量在青春期和成年期显著高于幼龄期。此外RT-q PCR检测发现睾酮合成关键酶St AR、P450scc、3β-HSD和17β-HSD的基因水平随着性成熟显著升高。透射电镜观察发现:幼年期LCs胞核呈圆形,核仁明显,胞质中散布滑面内质网和线粒体等细胞器。而青春期和成年期胞核呈椭圆形,膜不规则,胞质中富含滑面内质网、线粒体和脂滴等细胞器。(2)脂多糖诱导奶山羊LCs炎性损伤的研究细菌LPS可导致睾丸炎性损伤影响精子发生及睾酮的合成。本试验通过睾丸内注射0.5 mg的LPS(大肠杆菌055:B5)诱导奶山羊睾丸发生炎性损伤,对照组注射等量生理盐水。与对照组相比,LPS处理组睾丸肿大、充血。光镜发现,LPS处理组睾丸ST生精细胞数量显著减少,生精上皮细胞排列紊乱,部分脱落至管腔内。ELISA检测发现,LPS处理后奶山羊血清睾酮含量显著低于对照组。将奶山羊LCs进行分离培养,利用梯度浓度LPS对培养的LCs进行炎性刺激。体外Bucladesine体外结果发现:1.25μg/m L的LPS可显著抑制细胞的活力及睾酮合成水平。RT-q PCR和Western blot分析发现,LPS处理后可显著下调睾酮合成关键酶St AR、P450scc、3β-HSD和17β-HSD的基因水平和蛋白水平。进一步检测分析发现:LPS处理后可显著上调IL-1β、IL-18、TNF-α、TGF-β、PROS1、GAS6等细胞因子的基因水平。(3)ICA保护LPS诱导LCs炎性损伤的研究传统中草BSIs (bloodstream infections)药ICA具有抗炎、抗氧化应激、促进生殖内分泌等多种药理学作用。本试验中用含0.1%的ICA草料饲喂奶山羊60 d(约一个生精周期),再进行LPS炎性刺激。ELISA检测发现,饲喂30 d后ICA组血清中睾酮含量显著高于对照组。H&E染色结果发现,ICA饲喂组可显著缓解LPS诱导的睾丸炎性损伤。通过体外实验发现,LPS处理组显著抑制细胞增殖水平,而ICA预处理可缓解抑制作用。RT-q PCR检测发现ICA预处理组的LCs可显著抑制炎性细胞因子IL-1β、IL-18、TNF-α、TGF-β、PROS1、GAS6的基因表达水平。进一步发现,ICA预处理可通过抑制TLR4/NF-κB通路保护LPS诱导的炎性损伤,维持奶山羊LCs睾酮合成及免疫调节因子的动态平衡。综上所述,本研究发现奶山羊LCs随着性成熟其睾酮合成能力显著提高,胞质内与睾酮合成相关细胞器的数量逐渐增加。细菌LPS可诱导LCs发生炎性损伤并导致睾酮合成水平显著下降和免疫调节因子分泌紊乱。而用中草药ICA可明显缓解LPS诱导的炎性损伤,并维持其正常的生理功能。本研究结果将为ICA作为新型饲料添加剂的开发利用和畜牧生产中预防睾丸炎性损伤提供参考依据。

目的 探讨八珍汤联合体外高频治疗对恶性肿瘤增效减毒作用。方法 按照随机数字表法将100例恶性肿瘤患者分成对照组和观察组。对照组采用化疗治疗+体外高频治疗，观察组在对照组治疗基础上联合八珍汤内服治疗。观察2组治疗前后中医证候积分、免疫功能指标、mesoporous bioactive glass生活质量评分、无进展生存期与MK-4827体外总生存期、药物不良反应变化，并比较2组治疗总获益率。结果 观察组治疗后各项中医证候积分、CD8+指标水平、药物反应总获益率均低于对照PLX5622体内组（P <0.05）,CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平、SF-36评分、无进展生存期与总生存期及治疗总获益率均高于对照组（P <0.05）。结论 八珍汤内服联合体外高频治疗在抑制肿瘤发展进程中能起到增效减毒作用，可减轻化疗药物引起的不良反应，提高机体的免疫能力，改善患者的生存质量。

目的：观察分析度普利尤单抗治疗成人特应性皮炎的疗效及安全性。方法：选择2021年1月至2023年1月就诊于医院的80例成人特应性皮炎患者，在患者接受局部和/或全身性用药后，给予其度普利尤单抗治疗，持续治疗16周。分别在治疗前、治疗8周和16周后，通过酶联免疫吸Regorafenib IC50附测定法（ELISA）测定血清总免疫球蛋白E(Ig E)水平、血清细胞因子[白介素-4(IL-4)、白介素-13(IL-13)]水平。评价治疗前、治疗8周和16周后患者的湿疹面积和严重程度指数（EASI）评分、瘙痒数值评价标准（NRS）评分、血清总Ig E、IL-4、IL-13水平、生活质量评分（GQOLI-74），并记录治疗期间患者的药物不良反应发生情况。结果：治疗8周、16周后，患者EASI评分、NRS评分、血清总Ig E、IL-4、IL-13均低于治疗前，且治疗16周后患者EASI评分、NRS评分、血清总Ig E、IL-4、IL-13水平均低于治疗8周后（P<0.05）；相比治疗前，两组治疗8周后、治疗16周后的GQOLI-74评分均升高，且治疗16周后的GQOLI-74评分比治疗8周后高（P<0.05）；治疗期间，患者发生不良反应3例，不良反应发生率为3.75%(3/80)。结论：针对成人特应性皮炎患者，及时采取度普利尤单抗治疗能够取得显著疗效，其可改善患者的炎症反应，CH-223191化学结构减轻湿疹、瘙痒等rheumatic autoimmune diseases症状，且治疗期间药物不良反应少，安全性良好。

目的：探索基于DAP12共刺激信号和靶向前列腺干细胞抗原(PSCA)的嵌合抗原受体NK细胞(CAR-NK)对前列腺肿瘤细胞的杀伤作用。方法：使用慢病毒转染系统构建CAR-NK细胞，使用流式细胞术检测前列腺癌细胞DU145 PSCA的表达水平和CAR-NK细胞的阳性率，并经细胞和动物模型GW-572016价格评价CAR-NK细胞的抗肿瘤活性Search Inhibitors。结果：前列腺癌细胞DU145高表达PSCA,阳性率约为98.50%。流式细胞术检测显示CAR-NK细胞CAR分子表达阳性率为(64.07±3.01)%。细胞毒性实验发现，与对照NK细胞相比，携带DAP12共刺激信号的CAR-NK细胞具有较强抗前列腺肿瘤作用，杀伤率提升了约1.5倍。ELISA结果显示，与对照NK细胞Glucagon Receptor抑制剂相比，CAR-NK细胞杀伤DU145细胞时释放的TNF-α、IFN-γ、CD107α、Granzyme B和Perforin-1等因子水平显著提高。动物实验表明，CAR-NK细胞相对于对照NK细胞，更能有效抑制肿瘤增殖，两者之间有显著性统计学差异(P<0.000 1)。结论：靶向PSCA并提供DAP12共刺激信号的CAR-NK细胞具有较强杀伤前列腺肿瘤的作用，为前列腺癌治疗提供了潜在的细胞药物。

枯草芽孢杆菌(B.subtilis)是一种广泛应用于豆酱、腐乳、豆豉和纳豆等传统发酵豆制品的益生菌,具有较强产酶能力。观察发现豆酱发酵后出现黏稠、腐乳出现凝固状态、纳豆表面出现拉丝的现象,这些黏稠凝固现象的出现增强了食品的口感,而目前对于枯草芽孢发酵产生的凝固现象研究较少。本试验对枯草芽孢杆菌发酵制备的凝胶和乳液凝胶的性质、蛋白质二级结构变化以及替代脂肪能力进行研究,为工业上制备脂肪含量较低而口感无损失的食品提供新途径。本研究从菌库中保藏的50株枯草芽孢杆菌中筛选出1株具有高产蛋白酶能力的菌株,确定大豆分离蛋白浓度和最适乳液条件后,以大豆分离蛋白溶液和乳液分别作为发酵基质,对发酵制备凝胶及乳液凝胶的色度、浊度、持水力、分子间作用力、流变特性等指标进行测定。通过SDS-PAGE电泳、傅里叶红外光谱、圆二色谱和荧光光谱对二级结构进行测定,并对替代脂肪后肉丸的质构、持水力、蒸煮损失、色度和p H值等指标进行了初步测定,主要结论如下:1.自50株枯草芽孢杆菌中筛选出产酶能力最强的菌株,通过水解圈和蛋白酶活的跟踪测定发现Bacillus subtilis S1-2具有较强的产酶能力,对其生长特性测定发现,菌株产酸能力较弱,可排除发酵产酸对凝胶形成的影响。Bacillus subtilis S1-2发酵制备凝胶与低蛋白酶活菌株发酵制备凝胶相比硬度更大、弹力更佳。灭酶前后发酵上清液分别制备大豆分离蛋白凝胶发现,灭酶后发酵上清液制备凝胶倒置脱落,持水力降低。利用灭酶前后粗酶液制备大豆分离蛋白凝Two-stage bioprocess胶时发现相同现象。通过SDS-PAGE方法测定发现,发酵后蛋白出现降解现象,推测枯草芽孢杆菌发酵大豆分离蛋白形成凝胶与蛋白酶作用有关。通过Bacillus subtilis S1-2全基因组测序分析发现,菌株Bacillus subtilis S1-2具有产丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶及蛋白酶Epr等多种蛋白酶基因,表明Bacillus subtilis S1-2具有较强产酶能力。2.通过最小凝胶蛋白浓度筛选确定大豆分离蛋白最小凝胶浓度为8%。发酵12 h浊度、持水力都达到最大,分子间作用力是以二硫键和疏水相互作用为主。通过流变测定发现凝胶表观黏度具有剪切细化和频率依赖性。扫描电镜(SEM)测定微观结构发现,发酵凝胶结构表面呈现聚集状态。傅里叶红外光谱和圆二色谱测定发现蛋白质的α-螺旋含量显著降低而β-折叠的含量升高,发酵作用使得大豆分离蛋白的α-螺旋转换为β-折叠,β-折叠结构促进凝胶网络结构形成。荧光光谱测定发现荧光强度降低,色氨酸残基被包裹在分子内部更疏水的环境中。3.经过正交试验确定乳液最适制备参数为:含油量10%,均质时间4 min和加热时间20 min。发酵12 h时发酵乳液凝胶浊度,持水力都达到最大,分子间作用力是以疏水相互作用和氢键为主。通过流变测定发现凝胶的表观黏度具有剪切稀化和频Blebbistatin作用率依赖性。通过傅里叶红外光谱和圆二色谱分析发现,经过枯草芽孢杆菌发酵α-螺旋结构转化为β-折叠,无规卷曲和β转角含量都降低,较发酵凝NSC 119875体内实验剂量胶相比β-折叠增长幅度更大、α-螺旋降低更多,表明发酵大豆分离蛋白呈现有序凝胶网络。荧光光谱测定发现荧光强度降低更为明显,色氨酸残基被包裹在分子内部更疏水的环境中。4.不同含量乳液凝胶替代脂肪,通过蒸煮损失测定发现添加量为15%时蒸煮损失显著降低,肉丸的持水力在15%乳液凝胶添加量条件下达到最大,表面疏水性增大,蒸煮损失显著降低,汁水保留最为充分。经p H计和电子舌测定发现添加乳液凝胶的肉丸无异味,具备在保证质构和滋味条件下替代脂肪的能力。

富脯氨酸抗菌肽(proline-rich antimicrobial peptides, PrAMPs)是Tamoxifen试剂最早分离自动物的线性多肽，具有较高的抗菌活性且细胞毒性较低，在天然免疫中具有重要的作用，是对抗多种耐药病原体的理想药物.富脯氨酸抗菌肽主要有3种来源：昆虫、哺乳动物和植物，其中，Tezacaftor采购绝大多数PrAMPs来自前两种动物，只有少部分来自植物.这些PrAMPs的最大特点就是都富含脯氨酸，对革兰氏阴性菌和少部分革兰氏阳性菌、真菌均具有抑制作用.PrAMPs的作用机制不同于其他抗菌肽(antimicrobial peptides, AMPs)的膜破坏作用模式，其是通过进入细菌细胞质后与其内部靶点(DnaK蛋白)结合的模式对Dnahepatic lipid metabolismK的生物学功能进行抑制，从而最终导致细菌死亡.这一作用机制对于抗菌新药的开发很有意义.除了抗菌作用外，PrAMPs还具有其他重要的生物学功能，其在抑制炎症反应、刺激血管生成以及对NF-κB信号的影响等方面都具有重要作用.这些发现表明PrAMPs在伤口修复、炎症、缺血-再灌注损伤以及诱导血管生成等方面具有很好的应用前景.

该研究探讨了一种新型仿生纳米药物(PDT@DNPs)的制备方式,并评价了其对卵巢癌细胞ID8的杀伤及对耗竭T细胞的逆转效果。将高表达PD-1的肿瘤细胞膜修饰于DSPE-PEG-MAL与顺铂(DDP)自组装形成的颗粒骨架外,进而构建仿生纳米递送载体PDT@DNPs。采用透射电镜、纳米粒度及电位分析仪等对其形貌特征及粒径、电位等性能进行表征和测定。diversity in medical practice以ID8细胞为研究对象,通过流式细胞术、激光共聚焦成像、CCK-8(cell counting kit-8)细胞毒性实验、钙黄绿素-AM(Calcein-AM)和碘化丙啶(PI)染Mirdametinib供应商色等评价PDT@DNPs的靶向性和杀伤能力;此外,检Cobimetinib浓度测T细胞和ID8细胞共孵育体系中乳酸脱氢酶(LDH)的释放水平及细胞因子分泌水平,分析PDT@DNPs对T细胞抗肿瘤免疫的调节能力。上述结果表明,该研究所构建的新型仿生纳米药物PDT@DNPs具有良好的ID8细胞靶向性及杀伤能力,可增强共孵育体系中T细胞的肿瘤细胞杀伤能力。