Author: admin

目的 探究白皮杉醇(Pic)对糖尿病肾病(DN)肾小管间质纤维化、肾小管凋亡的影响及潜在机制。方法 选择雄性C57BL/6小鼠40只，随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、Pic低剂量(Low-Pic)组、Pic中剂量(Mid-Pic)组及Pic高剂量(High-Pic)组各8只。除Control组外，其他组进行高糖高脂饮食，并配合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导构建DN小鼠模型。Low-Pic、Mid-Pic及High-Pic组DN造模成功后，分别给予Pic 10、20及40 mg/kg灌胃2 w, Control组及Model组给予等量生理盐水灌胃。留取血清及肾脏组织，检测小鼠空腹血糖、血清肌酐、尿素氮及24 h尿总蛋白；采用Western印迹测定肾脏组织蛋白表达。体外培养人肾小管上皮细胞株(HK)-2,随机分为Control组、Model组、Low-Pic组、Mid-Pic组及High-Pic组。除Control组外，使用30 mmol/L D-葡萄糖对其他组处理72 h,对Low-Pic组、Mid-Pic组及selleck抑制剂High-Pic组分别给予Pic 10、20及40μmol/L处理24 h,采用Western印迹测定细胞蛋白表达。结果 Model组空腹血糖、血清肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白总量显著高于Control组，Low-Pic、Mid-Pic、High-PiCrizotinib研究购买c组可呈显著剂量依赖性逆转(均P<0.05)。在HK-2细胞系中，与Control组相比，Model组细胞纤维化相关蛋白E-钙黏附蛋白(cadherin)表达降低，α-SMA表达升高，促凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3及Bax表达升高，差异均有统计学意义(P<0.05),而Low-Pic、Mid-Pic、High-Pic组可逆转上述变化，且呈显著剂量依赖性(均P<0.05)。此外，Pic各组沉默调节蛋白(Sirt)1和磷酸化叉头框蛋白(Fox)O1蛋白表达水平均显著高于Model组，且随着Pic浓度升高，效果越明显(均P<0.05)。结论 Pic可减轻DN引起的肾功能损伤，并抑制肾小管纤维化及凋亡，其发挥TBI biomarker保护性作用可能是通过调节Sirt1/FoxO1活化实现。

抗生素滥用导致的细菌耐药性已成为威胁全球人类健康的新危害。解决这一问题的关键之一在于开发出快速、准确且廉价的细菌检测技术。以尿路感染(Urinary tracOptogenetic stimulationt infections,UTIs)为例,及时、准确地鉴定细菌及其对抗生素的敏感性是UTIs管理的核心。近年来,基于分子识别与纳米材料相结合的可视化生物传感器具备高选择性以及定点诊断的便携性,在改善传统UTIs诊断INCB28060临床试验的耗时费力等缺点方面展现出极大的潜力。本研究设计了一种基于凝集素和抗生素识别细菌的纳米比色分析策略,可以实现快速、可视化的细菌检测、鉴定与药敏性评估,有望加快临床UTIs的诊断流程。主要研究内容及结果如下:1、细菌的快速检测。基于刀豆球蛋白修饰的金纳米颗粒(Con A-AuNPs)快速识别细菌细胞壁的糖单元,金纳米的颜色随聚集程度的不同而变化,可在30分钟内实现最低10~2 CFU m L~(-1)浓度的细菌检测。2、革兰氏阳、阴性菌的鉴别。由于万此网站古霉素和多粘菌素B对革兰氏阳、阴性菌的亲和力不同,所制备的万古霉素修饰的金纳米颗粒(Van-AuNPs)和多粘菌素B修饰的普鲁士蓝纳米颗粒(PMB-PBNPs)可以在2–6小时内鉴别不同革兰氏属性细菌,检测限低至10~3 CFU m L~(-1)。3、快速药敏性评估。将传统微量肉汤稀释法和上述三种纳米材料中的一种结合,根据材料颜色变化的转折点来确定抗生素的最低抑菌浓度。

目的 探讨IgA肾病（IgAN）患者中医证候分型及与黏膜免疫的相关性。方法 采用横断面研究方法，纳入IgAN患者410例，收集患者中医证候资料，运用因子分析及聚类分析方法，总结中医证候分类。对其中118例患者血清低半乳糖基化IgA1(Gd-IgA1)及黏膜免疫相关标志物：B细胞活化因子（BAFF）、增殖诱导配体（APRIL）、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)进行检测，分析不同中医证候患者血清Gd-ITaurinegA1含量及其与上述黏膜免疫相关标志物的相关性。结果 共采集51个与IgAN证候紧密相关的症状、舌象及脉象，提取13个特征根>1的公因子，聚类为biolubrication system4类。将IgAN患者的中医证候归类为肺脾气虚证186例（45.36%），肝肾阴虚证102例（24.88%），脾肾阳虚证79例（19.27%），肝气郁滞证43例（10.49%）。肺脾气虚证患者Gd-IgA1含量为6.09(4.44,7.00)μg/mL，高于其他中医证型患者（P<0.01）。伴有不同部位黏膜炎症的IgAN患者Gd-IgA1含量较不伴有黏膜炎症的患者升高（P<0.01）。IgAN患者Gd-IgA1含量与黏膜免疫相关标志物APRIL、IL-6、TNF-α具有相关性（P<0.05）。结论GW4869溶解度 IgAN患者临床常见证型为肺脾气虚证、肝肾阴虚证、脾肾阳虚证、肝气郁滞证，肺脾气虚证与黏膜免疫异常关系最密切。

癌症作为现代社会人类生命健康的重要威胁之一,解决和治疗癌症是现如今的社会共识。但针对癌症的传统治疗手段仅对早期患者具有一定效果,对于中后期患者往往只能束手无措。因此迫切需要开发新的治疗方法与传统治疗手段结合来解决这一问题。肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)存在谷胱甘肽(GSH)过表达、过氧化氢(H_2O_2)含量高、乏氧及环境呈弱酸性等特点。这种复杂的环境特点导致肿瘤细胞的耐药性产生以及生长过程中不断的侵袭转移。因此调节和改善TME是抑制和杀死癌细胞的关键。通过调节氧化应激来治疗肿瘤的点击此处化学动力学疗法(CDT)正是通过调节和改善TME来实现疗效的。而在弱酸环境下拥有更高反应速率的铜基类芬顿反应则可进一步提高了化学动力学治疗的效果。因此,本文以铜基MOF为基础,构建出两种酸敏载药体系,结合CDT用于联合治疗肿瘤,主要研究内容如下:(1)本文合成了一种基于Cu/ZIF-8纳米载体的新型纳米催化平台Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8,用于联合化疗和化学动力学治疗。阿霉素(DOX)被加载到过氧化钙(Ca O_2)纳米颗粒上形成Ca O_2@DOX,然后被封装在Cu/ZIF-8中,形成Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8 NPs。selleck化学在轻度酸性的肿瘤微环境中,Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8 NPs迅速解体,释放出Ca O_2,它与水反应,在肿瘤微环境中产生H_2O_2和O_2。解体的Cu/ZIF-8释放出Cu~(2+)再与H_2O_2反应产生高毒性的利用~·OH。DOX和Cu~(2+)在肿瘤中的高效积累和特异性释放,使得Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8纳米颗粒可通过协同作用有效抑制肿瘤生长。采用SEM、能谱、电位粒径分析仪、UV-vis和傅里叶红外光谱仪等方法进行表征。结果表明,成功合成平均粒径为196 nm,DOX载药率为5.0 wt%的Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8 NPs。Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8 NPs在p H为5.5的水溶液下的释放率达到85%。在体外细胞毒性实验中,当Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8 NPs浓度为200μg/m L时,对HGC细胞的抑制率达到87%。在小鼠体内实验中,当荷瘤小鼠经过14天的注射治疗后,经Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8处理的小鼠肿瘤相对PBS、DOX、Ca O_2@Cu/ZIF-8的小鼠肿瘤的重量和体积变化最小,说明Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8 NPs可有效抑制小鼠的肿瘤生长。Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8 NPs在联合化疗和CDT治疗肿瘤上表现出优异的效果,为设计铜基纳米载药体系用于联合治疗肿瘤提供了新思路。(2)此外,本文还基于铜基MOF(PCN-224(Cu))设计了新型纳米载药平台PCN-224(Cu)@Ca O_2@DOX@ZIF-8(PCDZ)。以PCN-224(Cu)为基础,通过DOX与金属离子的配位作用将Ca O_2@DOX吸附在PCN-224(Cu)表面,然后通过静电吸附作用将ZIF-8包裹在PCN-224(Cu)@Ca O_2@DOX最外层,制备出PCDZ。通过SEM电位粒径分析仪、UV-vis和傅里叶红外光谱仪等方法进行表征。结果表明,成功合成平均粒径为228 nm的PCDZ NPs,对DOX的载药率为为4.6 wt%。在体外抗肿瘤活性研究中,当PCDZ NPs浓度为200μg/m L时,PCDZ+NIR对Hep G2细胞的抑制率达到90%,从而在细胞水平上表明,在为纳米催化平台引入光动力治疗方ARV-associated hepatotoxicity法(PDT)后,CDT,PDT与化疗的三重联合治疗进一步提升了对肿瘤细胞的杀伤作用。综上所述,本工作设计了两种铜基纳米载药体系(Ca O_2@DOX@Cu/ZIF-8纳米颗粒和PCDZ纳米颗粒),通过表征及相关实验证明,铜基纳米载药体系具有优秀抗肿瘤能力,从而为相关设计提供了新思路。

目的铁死亡是近年来备受重视的肿瘤治疗途径。通过铁Wnt-C59细胞培养死亡抑制肿瘤的纳米药物多数结构较为复杂,在规模化生产和提高批次间产品的一致性方面存在较大的困难。本研究通过简单的合成工艺制备纳米炭铁混悬注射液,诱导肿瘤铁死亡,实现肿瘤的高效抑制,并对产品进行安全性评价。方法将纳米炭与硫酸亚铁混合配伍制备纳米炭铁混悬注射液。用细胞模型测定纳米炭铁对细胞活力、羟基自由基、超微结构的变化。瘤内注射后测量肿瘤体积和质量、小鼠生存期、纳米炭铁的生物分布与瘤内铁含量、肿瘤羟基自由基水平、凋亡水平、氧化应激、基因差AY-22989异分析等。静transformed high-grade lymphoma脉注射和瘤内注射后测量小鼠体重、血生化、血常规、组织病理切片等。结果纳米炭铁混悬注射液水合粒径为190 nm,分散液稳定性高,铁以二价形式存在。纳米炭铁对肿瘤细胞活力的抑制具有明显的剂量效应,引起细胞羟基自由基水平升高。纳米炭铁可以进入细胞。瘤内注射后,纳米炭铁主要富集在肿瘤内,滞留时间超过14天,不引起其他组织器官铁含量显著升高。纳米炭铁显著抑制肝癌模型、结肠癌模型等肿瘤的生长,荷瘤小鼠的生存期有明显延长。纳米炭铁导致肿瘤羟基自由基水平上升、凋亡显著、谷胱甘肽消耗和脂质过氧化,证明产生了严重的铁死亡。纳米炭铁导致铁死亡相关基因变化,同时引起炎症相关基因变化。纳米炭铁在较低剂量下具有良好的生物安全性,对小鼠体重增加的影响小。血生化和血常规制备变化较小,主要为AST下降、ALP上升等。主要脏器的组织病理学特征无明显变化。结论纳米炭铁诱导肿瘤铁死亡,对多种肿瘤具有抑制作用,安全性较高。纳米炭铁已经获批开展临床试验研究,有望为肿瘤患者提供新的治疗药物。

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类具有自我更新和多谱系分化能力的未分化细胞。骨髓MSCs与骨质疏松症(osteoporosis,OP)的发生发展密切相关。OP是一种衰老相关疾病,其主要特征是成骨细胞的数量减少。成骨细胞来源于骨髓MSCs,故OP主要是由于骨髓MSCs成骨分化能力下降所致。有研究表明,诱导MSCs分化为成骨细胞能够提高骨矿物质的密度,从而防止OP恶化。然而,体外连续培养过程中会导致MSCs逐渐发生衰老,其成骨分化潜能也逐渐减弱,严重制约其在基础研究和临床疾病治疗中应用。因此,阐明调控干细胞衰老和成骨分化的分子机制,对于改善干细胞功能和治疗骨质疏松症具有重要意义。端粒磨损和线粒体功能障碍是衰老的重要标志,两者之间存在“Crosstalk”调控。端粒缩短不仅能引起细胞衰老和线粒体功能障碍,还与干细胞分化能力降低有关。反之,抑制线粒体ROS的产生也能减轻细胞衰老所致的端粒磨损和端粒DNA损伤。此外,线粒体是干细胞成骨分化的主要能量来源,线粒体ATP合成增加有利于骨折的愈合。在前期工作中我们发现,衰老MSCs的成骨分化能力明显降低,转录组测序结果揭示衰老MSCs中端粒相关基因显著下调,其中端粒shelterin复合物的核心成分TINF2 下调尤为显著。由此我们提出问题,衰老MSCs成骨分化能力减弱是否与TINF2表达下调有关?结合KEGG Pathway富集分析结果,NF-κB信号通路在衰老MSCs中明显下调,并且NF-κB信号通路与干细胞衰老、成骨分化以及线粒体功能之间关系密切。我们推测,端粒相关基因TINF2可能通过介导线粒体功能影响NF-κB信号通路,进而参与调控MSCs衰老和成骨分化。目的:筛选出衰老MSCs中变化显著的端粒相关差异基因,明确差异表达基因的变化对MSCs衰老及成骨分化的影响,进一步探究其机制,既为延缓干细胞衰老、促进成骨分化提供新思路和新靶点,也为临床治疗骨质疏松症提供实验依据。方法:1.选用出生1～2月健康雄性Wistar大鼠,采用全骨髓贴壁法提取原代MSCs,然后通过连续体外传代培养得到早代次MSCs(early passage MSCs,EPMSCs)和晚代次MSCs(late passage VX-661纯度MSCs,LPMSCs)。通过细胞形态学观察,细胞表面积、细胞长宽比、SA-β-gal活性、衰老相关因子p16INK4amRNA表达等衰老相关指标的检测,构建MSCs体外复制性衰老模型。2.采用转录组测序检测年轻和衰老MSCs的基因表达谱,筛选出具有显著变化的端粒相关差异表达基因,其中TRF1和TRF2相互作用核蛋白2(TRF1 and TRF2interactingnuclearprotein2,TINF2)是变化最为显著的差异基因,进一步通过RT-qPCR和Western Blot检测衰老MSCs中TINF2的表达水平。3.通过慢病毒感染获得TINF2敲减(sh-TINF2)或过表达(LV-TINF2)的MSCs(在年轻MSCs中敲低TINF2表达,在衰老MSCs中过表达TINF2),进一步探究TINF2表达的变化对MSCs衰老和成骨分化的影响。分别测定衰老相关指标(细胞形态、SA-β-gal活性及p16INK4amRNA表达)和成骨分化能力(茜素红染色,Western Blot检测成骨分化标志物Runx2表达)。此外,在年轻MSCs中通过慢病毒感染过表达TINF2,检测其对细胞衰老和成骨分化的影响。4.通过慢病毒感染获得TINF2敲减或过表达的MSCs,探讨TINF2表达的变化对端粒和线粒体功能的影响。分别进行端粒功能(端粒长度和端粒损伤标志物γH2AX的表达)和线粒体功能(ATP含量和ROS水平)的检测。5.在TINF2敲减或过表达的MSCs中,通过Western Blot检测NF-κB信号通路表达水平的变化。然后在TINF2敲减的MSCs中激活NF-κB信号通路(加入NF-κB信号通路的激活剂PMA),探讨其对线粒体功能及细胞衰老的影响。结果:1.与EPMSCs相比,LPMSCs呈铺展、细胞边界模糊等形态学变化,细胞长宽比明显降低,表面积显著增加,SA-β-gal阳性率升高,衰老相关因子p16INK4a mRNA的表达上调。后续研究将以EPMSCs为年轻MSCs,LPMSCs为衰老MSCs。2.转录组学分析结果显示,与年轻MSCs相比,衰老MSCs中共有3188个(上调918个,下调2270个)差异表达基因,其中有11个Enzyme Inhibitors变化最显著的端粒相关差异基因。GO和KEGGPathway富集分析结果显示,端粒维持、双链断裂部位和端粒酶RNA结合等在衰老MSCs中下调;NF-κB信号通路、凋亡和非同源末端连接等在衰老MSCs中下调。在11个端粒相关差异基因中,Parp1和TINF2变化最为显著。由于TINF2是端粒复合物中的核心成分,对维持端粒功能起重要作用,故后续我们以TINF2为研究靶点。RT-qPCR和Western Blot也进一步证实TINF2在衰老MSCs中显著下调,与转录组测序结果一致。3.敲减TINF2使年轻MSCs呈衰老形态学特征,细胞表面积增大而长宽比减小,SA-β-gal阳性率及p16INK4amRNA表达增高,同时,骨基质钙盐沉积减少,成骨分化标志物Runx2蛋白表达下调。TINF2过表达使衰老MSCs细胞由铺展、不规则变为长梭形,边界变清晰,细胞表面积减小而长宽比值增大,SA-β-gal阳性率及p16INK4amRNA表达降低,骨基质钙盐沉积增多及Runx2蛋白表达上调。此外,在年轻MSCs中过表达TINF2对细胞衰老无明显影响,但使其成骨分化能力显著增强。4.敲减TINF2后,MSCs的端粒长度显著缩短,端粒损伤标志物yH2AX表达明显增强,同时线粒体ROS水平增加而ATP产生减少,即敲减TINF2使MSCs端粒功能降低,并且削弱了 MSCs线粒体功能。过表达TINF2后,MSCs的端粒长度明显延长,端粒损伤标志物yH2AX表达减弱,同时线粒体ROS水平减少而ATP产生增多,即过表达TINF2增强了 MSCs端粒功能,并且改善了 MSCs线粒体功能。PCI-32765说明书5.TINF2敲减后,p-NF-κB p65的蛋白表达水平显著下调,而NF-κB p65表达水平两组间无明显差异;TINF2过表达后,p-NF-κB p65蛋白表达水平显著上调,而NF-κB p65表达水平两组间也无统计学差异。提示敲减TINF2能够抑制NF-κB信号通路,而过表达TINF2则激活NF-κB信号通路。此外,在TINF2敲减的MSCs中加入NF-κB信号通路的激活剂PMA后,细胞内ROS含量明显降低,而ATP含量显著增高,衰老MSCs细胞由铺展、不规则变为长梭形,边界变清晰,细胞表面积减小而长宽比值增大,SA-β-gal阳性率及p16INK4amRNA表达降低,说明激活NF-κB信号通路能明显改善TINF2敲减所致的线粒体功能降低并延缓MSCs衰老。结论:1.在衰老MSCs中,端粒相关基因TINF2表达降低。2.敲减TINF2能够促进MSCs衰老、抑制其成骨分化,而过表达TINF2则能抑制MSCs衰老、促进其成骨分化。3.TINF2介导端粒和线粒体功能通过NF-κB信号通路调控MSCs衰老及成骨分化。

银屑病，中医称之为白疕，是一种慢性的炎症性的皮肤疾病，具有很强的遗传倾向和自身免疫致病特征，并且与许多其他疾病相关。该病病因及病机尚未彻底明确，且临床治疗较难，易反复，严重影响患者身心健康。近年来，中医在治疗银屑病方面疗效显著，可是关于该病的发生，以及迁延不愈Alpelisib采购的难题却始终困惑着病人和临床医师。笔者主要从《黄帝内经》的营卫学说角度，立足于阴阳理论，以卫失卫外，营失内Chiral drug intermediate守，内生痰浊瘀血为病机JQ1小鼠，以调和营卫、固护脾胃为治疗原则，深刻阐析了银屑病发生发展的中医理论根源，认为营卫失和是引起银屑病发生和缠绵难愈的核心原因，并指出银屑病共患病的产生也与营卫不和所引起的机体环境变化有关，因此该文用《内经》营卫理论可以为银屑病的预防治疗提出了新思路。

目的：构建列线图预测模型以预测重型β地中海贫血患者造血干细胞移植后出现巨细胞病毒（CMV）感染的风险，评估模型的预测价值。方法：收集2020年7月至2022年6月在广西医科大学第一附属医院血液内科接受造血干细胞移植的重型β地中海贫血患者的临床资料，以出现CMV感染为结局分为感染组和未感染组，通过独立样本t检验、非参数检验、卡方检验、LASSO回归方法确定纳入列线图模型的预测指标。通过受试者工作特征曲线（ROC）、校准曲线、C指数和决策曲线分析评估和验证模型的价值，并通过Bootstrap方法进行内部验证。结果：年龄、HLA配型、educational media环孢素A、血清铁蛋白、CD34、急性移植物抗宿AZD6738体内实验剂量主病（a GVHD）是构建重型β地中海贫血患者造血干细胞移植后出现CMV感染的列线图模型的预测指标。列线图的C指数为0.682(95%CI:0.610～0.754)，内部验证的C指数为0.644,ROC曲线下面积为0.682，决策曲线分析结果为0.09～0.83。结论：首次构建以年龄、HLA配型、环孢素A、血清铁蛋白、CD34、aGVHD为评分依据的列线图预测模型，该模型FUT-175作用预测重型β地中海贫血患者造血干细胞移植后出现CMV感染风险的效果良好，有利于优化患者的临床诊疗，更好地提高患者的生活质量。

白色念珠菌在临床中引起的真菌感染逐渐加重,在念珠菌感染中也是主要的感染源,对人体健康造成了一定的威胁。野生食药用菌是一个宝贵的天然活性物质资源库,具有丰富的营养成分外还有抗肿瘤、抗氧化、降血糖、抗病毒、抑菌等多种功能活性物质,但由于多数野生食药用菌难以实现人工栽培,子实体不易获得的原因,多数资源尚未被开发利用。本实验室在前期大规模野生食药用菌抑菌活性初筛的研究中发现褐扇小孔菌对白色念珠菌具有显著的抑菌效果,但未明确活性成分和作用机制。本研究首先,通过固体发酵和液体发酵两种不同发酵方式获得野生食药用菌褐扇小孔菌发酵产物,体外评价两种发酵提取物抑制白色念珠菌的活性。之后,采用化学-生物学相结合的技术,通过液液萃取、柱层析等方法对固体发酵提取物进行活性追踪分离,初步确定褐扇小孔菌固体发酵提取物的活性组分,采用UHPLC-HR-MS技术对活性组分的化学成分进行快速检识,明确抑制白色念珠菌主要活性物质,并结合生物学观察Mv5组分对白色念珠菌的生长、繁殖的影响;对早期生物膜的形成、成熟生物膜的清除,观察细胞膜的完整性,对芽管生成的作用以及转录组学技术探析活性组分抑制白色念珠菌的作用机制。结果:1.对褐扇小孔菌进行固体发酵和液体发酵后通过乙酸乙酯浸提。抑菌试验结果表明,1mg/m L浓度下固体发酵粗提物抑菌圈直径为19.34±0.37mm,最低抑菌浓度为62.5μg/m L,液LY-188011体发酵提取物无明显抑菌效果,确定固体发酵为其最优的发酵方式。2.筛选发现柱层析分离组分中Mv5具有显著抑制白色念珠菌的活性BMN 673作用,并通过UHPLC-HR-M S分析该组分有脂肪酸及其衍生物、生物碱类、酚类和其他类23个化合物,其中主要成分为脂肪酸类物质。3.作用机制研究表明Mv5组分对白色念珠菌的MIC为15.63μg/m L、MFC为31.25μg/m L;Mv5组分能够抑制早期生物膜的形成、破坏成熟生物膜的结构,对白色念珠菌细胞膜具有破坏作用;能够抑制白色念珠菌的芽管生长从而抑制了酵母形态向菌丝形态转变。4.对Mv5组分作用后的白色念珠菌进行转录组学分析,结果显示,MIC浓度作用组共检测到了193个差异表达基因,差异上调表达基因共156个,差异下调表达基因共37个;MFC浓度作用组共检测到了391个差异表达基因,差异上调表达基因334个,差异下调表达基因57个。这些差异表达基因中菌丝形成相关基因和生物膜形成相关基因显著下调。GO富集分析表明单有机体过程、代谢过程以及细胞过程是富集基因最多的生物学过程。KEGG富集分析表明,Mv5组分作用后的白色念珠菌差异基因主要富集在减数分裂-酵母、氨基酸代谢等代谢通路。q RT-PCR结果表明Mv5组分作用后的白色念珠菌与空白对照组相比TEC1、HWP1、ALS3和SRR1基因表达显著下调,CAALFM＿C206890CA、HSP30、LDG3和MRV8基因表达显著上调。本课题的研究揭示了褐扇小孔菌有抑制白色念珠菌的作用,固体发酵为获得活性物质最Cell Isolation优发酵方式,初步分析了其活性成分及作用的机制,并通过转录组学揭示了Mv5组分在多个靶点对白色念珠菌的抗菌机制,为进一步抑菌活性机制研究奠定基础。

目的 ：通过在镁锌钆合金（MZG）膜表面形成乙二醇化聚癸二酸甘油酯/β-磷酸三钙（PEGS/β-TCP）涂层，制备PEGS/β-TCP改性镁合金（PEGS/β-TCP/MZG）膜，使用材料浸提液对PEGS/β-TCP/MZG复合膜的成骨诱导活性和免疫调节性能进行评价。方法：采用溶胶凝胶法在MZG膜表面制备PEGS/β-TCP涂层，制备PEGS/β-TCP/Medically-assisted reproductionMZG复合膜，并与PEGS/β-TCP和MZG膜进行对比，检测其形貌、成分和亲水性。检测材料浸提3天后的镁离子释放量和pH值。体外细胞实验观察成骨细胞MC3T3-E1细胞在浸提液中的增殖活性、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）和矿化结节形成情况，以及RAW264.7巨噬细胞在浸提液中的增殖活性、极化和细胞内相关因子的表达。采用GraphPad Prism 9.0软件包对数据进行统计学分析。结果：制备出PEGS/β-TCP涂层与MZG膜紧密嵌合的PEGS/β-TCP/MZG复合膜，具有良好亲水性，可缓慢降解。细胞实验结果显示，PEGS/β-TCP/MZG复合膜浸提液对MC3T3-E1和巨噬细胞的增殖活性无明显影响。PEGS/β-TCP/MZG组显著增强MC3T3-E1的ALP表达和矿化结节形成，PEGBlebbistatinS/β-TCP组和PEGS/β-TCP/MZG组在巨噬细胞极化模式上虽无明显差异，但PEGS/β-TCP/MZG膜在PEGS/β-TCP涂层的免疫调节基础上，可进一步降低炎症相关肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-SCH727965供应商α)表达，提高成骨相关转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达。结论：PEGS/β-TCP复合膜改性的MZG可为骨组织工程的发展提供新的材料选择。