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目的:急性胰腺炎(AP)是常见的临床急腹症,发病原因与饮食以及胆源性等因素相关,其中的一部分病例会进展为重症急性胰腺炎(SAP)并诱发一系列并发症,严重者可危及生命。SAP常伴有肠粘膜屏障功能损伤,造成包括脓毒血症在内的一系列严重后果,但其具体机制尚不清楚。血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)是肾素-血管紧张素系统的重要受体,研究发现其不仅参与了机体血压的调节selleck产品,并且广泛参与了如炎症、氧化应激等在内的众多生理病理过程。我们的研究旨在证实AT1在重症急性胰腺炎肠粘膜细胞中表达,并且其介导的氧化应激反应参与了SAP肠粘膜屏障损伤。方法:将24只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为3组,重症胰腺炎组(SAP组)、假手术组(SO组)、阿奇沙坦干预组(SAP+AZL组),采用5%牛黄胆酸钠逆行胰胆管注射法诱导建立大鼠SAP模型,假手术组注射等量生理盐水,阿奇沙坦干预组大鼠在建模前7天开始,给予1mg/kg/d阿奇沙坦悬浊液灌胃,共治疗7次。建模24h后分别取下腔静脉血、末端回肠组织及胰腺组织,用于后续检测。所有大鼠均在取样后处死。采用全自动生化检测仪测定淀粉酶、脂肪酶等指标;试剂盒检测血清白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α);采用EKT-5M试剂盒检测血清内毒素浓度;试剂盒检测回肠中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;试剂盒检测此网站回肠活性氧(ROS)水平;HE染色评估回肠、胰腺病理损伤程度;Western-blot法检测肠道紧密连接(TJ)蛋白、AT1、NOX2表达水平;免疫荧光验证TJ蛋白、AT1及NOX2的表达及分布。结果:(1)淀粉酶与血清炎症指标检测结果:SAP组淀粉酶、脂肪酶、IL-6、IL-10、TNF-α、内毒素水平较SO组显著升高(P<0.05),SAP+AZL组上述指标较SAP组下降(P<0.05)。(2)回肠氧化应激水平:与SO组相比,SAP组GSH、SOD指标显著降低,ROS、MDA指标显著升高(P<0.05),同时SAP+AZL组与SAP组相比,GSH、SOD指标回升,ROS、MDA指标下降(P<0.05)。(3)HE染色及病理评分:与SO组相比,SAP组肠道及胰腺出现了如水肿、出血、炎细胞浸润等典型损伤表现,同时病理评分显著升高(P<0.05);SAP+AZL组上述损伤表现减轻,同时病理评分显著降低(P<0.05)。(4)Western-blot检测结果提示:与SO组相比,SAP组大鼠TJ蛋白表达下降、AT1、NOX2蛋白表达上升(P<0.05),SAP+AZL组TJ蛋白表达提升,同时AT1、NOX2蛋白表达下降(P<0.05)。(5)免疫荧光检测回肠粘膜组织中蛋白表达:与SO组相比,SAP组大鼠TJ蛋白表达及分布水平均下降,同时AT1、NOX2表达及分布水平上升。SAP+AZL组TJ蛋白水平上升,AT1及NOX2水平下降。这些变化与病理损伤、Western-blot、肠道氧化应激水平及血清炎症指标的趋势一致。结论:综上所述,我们的实验结果证实了AT1及其下游蛋白NOX2在肠黏膜上皮中高表达,同时肠道氧化应激水平与其表达呈正相关。因此我们推测AT1介导的氧化应激参与了SAP肠黏膜屏障的损伤,同时我们的实验证实应用AT1特异性抑制剂阿奇沙坦抑制ANeuromedin NT1可减轻肠粘膜损伤,降低肠粘膜氧化应激水平,上调TJ蛋白表达从而保护肠黏膜屏障。

目的:探究参芪健胃颗粒对胃癌细胞能量代谢的影响及其可能的分子机制。方法:裸鼠皮下注射胃癌细胞MGC803制备裸鼠胃癌细胞皮下移植瘤模型，随机分为模型对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)50 mg/kg组、参芪健胃颗粒960 mg/kg组，各组灌胃或腹腔注射给予相应药BMS-907351研究购买物或生理盐水，每3 d相同时间测量肿瘤大小及裸鼠体质量，给药21 d后处理动物，剥离肿瘤并称Enasidenib质量；HE染色法检测参芪健胃颗粒对裸鼠胃癌细胞皮下移植瘤组织病理改变的影响；TUNEL法检测参芪健胃颗粒对裸鼠胃癌细胞皮下移植瘤组织细胞凋亡的影响；Western blot法检测参芪健胃颗粒对裸鼠胃癌细Adenovirus infection胞皮下移植瘤组织凋亡、能量代谢相关蛋白表达的影响。结果:与模型对照组相比，参芪健胃颗粒960 mg/kg组显著抑制裸鼠胃癌细胞皮下移植瘤的生长，显著改善移植瘤组织的病理，促进移植瘤组织细胞的凋亡(P<0.01),明显下调移植瘤组织糖酵解相关蛋白磷酸化丙酮酸脱氢酶α1(p-PDHA1)、丙酮酸脱氢酶激酶1(PDHK1)和乳酸脱氢酶(LDHA)的蛋白表达(P<0.05或P<0.01),显著降低移植瘤组织B细胞淋巴瘤-2(BCL-2)/Bcl-2相关X蛋白(BAX)的蛋白表达比例(P<0.01),上调切割型半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)和Cleaved caspase-9的蛋白表达，显著抑制移植瘤组织c-Myc和低氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白表达(P<0.01)。结论:参芪健胃颗粒可能通过抑制HIF-1α和c-Myc表达，调控能量代谢重编程相关蛋白和促凋亡相关蛋白的表达，从而促进细胞凋亡，最终抑制胃癌的生长。

近年来研究显示,树突状细胞肿瘤疫苗(Dendritic cell tumor vaccine,DC-vac)在非小细胞肺癌(non-small cell lungs cancer,NSCLC)等恶性肿瘤临床干预中取得积极进展。然而,其干预效应有待提高,副作用仍待改善。蒲公英甾醇(taraxasterol,Tara)是从蒲公英植株中提取的一种五环三萜类天然植物甾醇,具有抗炎、抗癌和抗氧化等多种药理活性。然而Tara是否能提高DC-vac治疗NSCLC疗效及改善其副作用尚未有研究探讨。本研究主要内容简述如下:目的:观察Tara联合DCs-vac治疗鼠源Lewis肺腺癌(Lewis lungs carcinoma,LLC)移植瘤的效果;整合网络药理学、RNA-seq及流式细胞术等技术,探讨联合治疗的分子机制,以期为后续开发DCs-vac联合中药天然成分干预NSCLC的临床新策略提供前期研究基础。方法:1.常规制备DCs-vac:提取6-10周龄的CD45.1~(+/+)C57BL/6小鼠骨髓原代细胞(Bone marrow-derived cells,BMCs),加入GM-CSF(40ng/ml)和IL-4(20ng/ml)诱导成骨髓来源树突状细胞(Bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs);同时镜下观察细胞生长形态并拍照;通过流式细胞技术(Flow cytometry,FCM)检测DC细胞诱导纯度,及DCs成熟情况;利用冻融法提取鼠源NSCLC细胞株LLC细胞(Lewis lungs carcinoma cells,LLCs)全抗原,荷载给DCs制备成抗LLCs的DCs-vac。2.观察Tara联合DCs-vac体内治疗小鼠NSCLC疗效:将LLCs(8×10~5/只)皮下注射C57BL/6野生型(wild type,WT)小鼠,建立小鼠NSCLC移植瘤模型;成瘤小鼠随机分为4组(n=5):PBS对照组,taraxasterol(Tara)组,DC瘤苗(DCs)组,Tara联合DC瘤苗(DT)组,分别以如下方法进行干预:PBS对照组:腹腔注射PBS(0.2ml/只),每3天一次,共注射6次;Tara组:腹腔注射Tara(10mg/kg),每3天注射一次,共干预6次;DCs组:尾静脉注射DCs-vac(1×10~6个/只),每7天注射1次,共干预3次;DT组:首次腹腔注射Tara(10mg/kg)12 h后尾静脉注射DCs-vac(1×10~6个/只),然后Tara每3天注射一次,共计干预6次,DCs-vac每7天注射1次,共计干预3次;监测并记录各组模型小鼠肿瘤生长情况,绘制生长曲线;在PBS组,Tara组,DT组小鼠末次干预后第3天,DCs组小鼠末次干预后第4天,麻醉处死各组小鼠,收集血清、肿瘤和主要脏器;H&E染色观察各组小鼠肿瘤与肺脏组织病理学变化。3.观察模型小鼠外周免疫器官CD4、CD8 T细胞的比例和功能变化:FCM法检测脾脏中CD4~+T、CD8~+T细胞比例及活化分子(CD62L、CD69)和细胞因子(IL-4、IFN-γ)的表达变化;并利用FCM检测模型小鼠肿瘤同侧的引流淋巴结(draining lymph nodes,DLN)中CD4~+T、CD8~+T细胞增殖抗原Ki-67和活化分子CD69的表达变化。4.观察模型小鼠肿瘤局部CD4、CD8 T细胞浸润和功能变化:利用免疫荧光技术(Immunofluorescence,IF)观察各组小鼠肿瘤局部免疫细胞CD4~+T,CD8~+T细胞的浸润情况,及CD8~+T细胞表达IFN-γ情况。5.观察Tara对DCs-vac成熟及肿瘤局部浸润的影响:在体外通过CCK-8实验检测Tara对DCs-vac细胞活性影响;利用FCM检测Tara对DCs-vac细胞膜分子MHCII,CD80,CD86表达的影响;IF观察各组小鼠肿瘤局部DCs浸润的情况。6.观察Tara对肿瘤细胞凋亡的影响:TUNEL法检测肿瘤组织中的细胞凋亡情况;AV-PI双染法分析LLCs体外凋亡情况。7.观察细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocytes,CTLs)对肿瘤细胞的杀伤作用:将瘤细胞全抗原(200μg/只)皮下注射6周龄C57BL/6 WT小鼠,每7天免疫1次,共3次;末次免疫后第7天麻醉处死小鼠,解剖脾脏并制成单细胞悬液,利用免疫磁珠分选技术(Magnet-Activated Cell Sorting,MACS)分选脾CD8~+T淋巴细胞;按不同效应细胞:靶细胞比例共培养CD8~+T细胞和LLCs,然后利用FCM检测LLCs凋亡率;并利用IF观察各模型肿瘤组织中CD8~+T细胞和凋亡细胞的共定位情况。选取各组小鼠肿瘤组织,进行转录组测序(RNA Sequencing,RNA-seq),分析各组肿瘤组织RNA-seq结果中各凋亡途径相关分子的表达情况。8.分析Tara联合DCs-vac体内治疗小鼠NSCLC的相关信号通路:对各组模型RNA-seq结果进行整体分析,鉴定并筛选出差异表达基因(differentially expressed gene,DEG),通过KEGG富集分析和Venn分析,初步筛选出变化最为明显的通路后,进一步分析该通路相关基因在各组间差异表达情况;再利用Real-time RT-PCR,Western Blot,IF等技术,在体内、外验证候选生物学途径靶基因及其产物表达水平。9.观察Tara对鼠源NSCLC细胞生长和转移的影响:通过CCK-8实验、划痕实验、克隆形成实验等和鬼笔环肽染色检测Tara在体外对LLCs的增殖生长、迁移、克隆形成能力及细胞骨架变化的影响;FCM分析细胞周期变化;IF检测体外LLCs中和肿瘤组织局部增殖核抗原Ki67的表达;Real-time RT-PCR检测LLCs中细胞生长周期相关蛋白依赖性激酶CDK1、CDK2、CDK3、CDK4和CDK6,以及上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程与转移相关基因MMP2、MMP3、MMP9的表达变化;Western Blot检测与生长相关的分子CDK2、CDK4、CDK6、Cyclin B1、Cyclin D1、p21和p53,以及EMT与肿瘤细胞转移相关分子MMP2、MMP3、N-Cadherin、Vimentin的蛋白水平变化。10.结合网络药理学和分子对接技术筛选Tara的潜在作用靶点:利用Pub Chem化合物数据库(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)检索Tara的结构式;通过STITCH(http://stitch.embl.de/),Pharm Mapper(http:/www.lilab-ecust.cn/pharm),Swiss Target Prediction(http:/www.swisstargetprediction.ch/)等数据库来预测Tara潜在结合的靶点;通过Mouse Genome Informatics(http://www.informatics.jax.org/)数据库筛选小鼠肺腺癌(lungs adenocarcinoma,LUAD)的相关基因;Venn分析确定Tara预测靶点和小鼠LUAD相关基因的交集;利用String和David数据库分析各交集靶点之间的蛋白质互作网络关系(Protein-Protein Interaction Networks,PPI),并分析它们协同干预的细胞功能(GO分析)和代谢通路(KEGG分析)等;利用Cytoscape软件中Cyto NCA插件对交集靶点进行中心度值(degree)分析,取degree排名前30个Tara干预鼠源LUAD的核心靶点,进行(Autodocktools、vina等软件)Tara-核心靶蛋白对接模拟验证,分析各潜在结合靶蛋白与Tara的结合能及结合状态(根据形成的相互作用力,以及复合物的结合能判断)。接着利用Pymol软件,将构建的与Tara成功对接的靶分子,配-受复合物的3D结构结合示意图可视化。最后,根据RNA-seq结果KEGG富集分析出的通路及关键基因,结合现有文献报道,筛选出对接的30个Tara干预鼠源LUAD的核心靶点中影响该KEGG通路基因表达的潜在靶点;通过Western Blot、FCM检测Tara体外对LLCs中靶蛋白及其磷酸化形式的表达水平影响;IF检测体内各模型组肿瘤组织中磷酸化靶蛋白表达情况。11.观察各模型组脏器病理学及血清炎性因子变化:H&E染色观察各组小鼠心,肝,脑,肾脏等重要脏器组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中细胞因子IFN-γ,IL-10和TNF-α水平。结果:1.FCM结果显示:经IL-4和GM-CSF诱导刺激的BMDCs其CD11c阳性率达到95%以上(P<0.01);显微镜下观察可见:BMCs体积小,呈圆形,漂浮生长;而BMDCs细胞呈不规则形,体积逐渐增大,贴壁分裂成团生长,随着枝状突起伸出增加渐成半贴壁生长;DCs-vac表面毛刺状伪足明显增加,粗而密,细胞多呈悬浮生长,提示培养诱导BMDCs成功。FCM检测各组DCs的成熟情况,结果显示:培养5天未成熟的DCs(immature dendritic cells,i DCs)低表达MHCII,CD80和CD86分别为40%,36%及21%左右,而DCs-vac大量表达MHCII,CD80和CD86,分别约90%,75%和70%。2.观察肿瘤生长情况:与PBS组相比,Tara和DCs单一治疗组均能一定程度抑制肿瘤生长(P<0.01)。但与其他三组相比,DT组小鼠的肿瘤生长最为缓慢(P<0.01),治疗效果最优。H&E染色结果显示:与PBS组相比,各治疗组肿瘤细胞核质较为疏松,可见碎裂,肿瘤局部有不同程度的出血坏死和纤维化;但DT组瘤细胞核碎裂最为明显,坏死区域面积最大;且DT组肿瘤肺转移灶最少(P<0.01)。3.各模型组小鼠脾脏分析结Immune-inflammatory parameters果显示:相较于PBS组,Tara组小鼠脾脏减小(P<0.05),脾细胞数减少(P<0.01);DCs组小鼠脾脏增大(P<0.01),脾细胞数最多(P<0.01);DT组小鼠脾脏增大(P<0.01),脾细胞数升高(P<0.01),但DT组相较DCs组小鼠脾脏体积、重量及细胞数有所减小。脾细胞FCM检测结果显示:与PBS组相比,DCs组CD8~+T细胞比例显著上调(P<0.01),Tara组CD4~+T细胞比例显著上调(P<0.01),DT组CD4~+T、CD8~+T细胞比例皆上调(P<0.05);DCs组活化的CD69~+CD4~+T细胞、CD69~+CD8~+T细胞比例以及CD8~+T细胞中IFN-γ表达水平上调最显著(P<0.01),DT组次之(P<0.01),Tara组相对较少(P<0.05);Tara组CD62L~+CD4~+T细胞比例及CD4~+T细胞的IL-4表达水平上调最显著(P<0.01),DT组次之(P<0.05),DCs组CD4~+T细胞表达IL-4变化不明显(P>0.05)。这些结果提示:Tara显著诱导NSCLC模型小鼠体内Th 2型免疫应答,联合治疗时削弱了DT组中DCs-vac诱发的Th 1型免疫应答。进一步检测DLN中CD4~+T、CD8~+T细胞增殖活化情况,结果显示:各组模型DLN中的CD4~+、CD8~+T细胞与脾脏中的变化相似。与PBS组相比,DCs组DLN中CD8~+T细胞、活化的CD69~+CD8~+T细胞比例以及CD8~+T细胞增殖抗原Ki-67的表达上调最显著(P<0.01),DT组次之(P<0.05),Tara组CD8~+T细胞增殖活化不明显(P>0.05);而Tara组CD4~+T细胞比例及CD4~+T细胞Ki-67表达水平上调最显著(P<0.01),而活化的CD69~+CD4~+T细胞比例减少(P<0.01)。以上数据再次提示:在DC瘤苗干预的情况下,Tara会一定程度的下调NSCLC小鼠CD8~+T细胞的增殖活化。4.肿瘤局部T淋巴细胞检测结果显示:各治疗组肿瘤中CD4~+T细胞浸润显著上调(P<0.01),其中Tara组CD4~+T细胞浸润数最多(P<0.01),DT组次之(P<0.01),DCs组最少(P<0.01);DCs及DT组肿瘤局部均明显增加了CD8~+T细胞的浸润(P<0.01),且CD8~+T细胞显著表达IFN-γ(P<0.01);但相较于DCs组时,DT组肿瘤局部CD8~+T细胞浸润数及IFN-γ的表达被削弱(P<0.05)。综上外周免疫器官FCM和肿瘤组织IF结果提示:DT组联合治疗诱发的免疫应答反应,可能并不是抑制肿瘤生长的关键因素。5.CCK-8实验结果显示:DCs-vac细胞在20μg/ml浓度的Tara中培养时即出现生长抑制(P<0.05),且随着Tara浓度的增加,DCs-vac的CD80、CD86表达呈下降趋势(P<0.05),但是Tara对MHCII的表达变化无明显影响(P>0.05)。肿瘤局部DCs浸润情况IF结果显示:PBS组与Tara组肿瘤浸润的DCs没有显著差别(P>0.05);同时,在DCs组和DT组中,CD45.1~+DCs在肿瘤局部存在浸润,但无显著差别(P>0.05)。提示:Tara在体外不能进步促进DCs-vac增殖活化,在体内也不能促进DCs生长及浸润至肿瘤局部。6.模型肿瘤局部细胞凋亡结果显示:相较于PBS组,Tara组和DCs组中凋亡细胞比例皆增加(P<0.05),但与其他三组相比,DT组肿瘤组织坏死凋亡面积最大,凋亡细胞最多(P<0.01)。FCM检测LLCs凋亡显示:Tara处理LLCs 48h后早凋细胞约占4%,晚凋细胞约占5%,提示其仅有轻微的促凋效应(P<0.05),这似乎并不足以解释体内DT组肿瘤局部显著的凋亡现象。7.体外CTLs杀伤实验结果显示:MACS分选CD8~+T细胞阳性率达到92%;PI染色和镜检分析LLCs凋亡情况:随着CTLs:LLCs比率的增加,LLCs更明显地被CTLs杀伤,细胞皱缩破碎,凋亡漂浮细胞团显著增多;重要的是,相较于对照组,经Tara预处理组的LLCs凋亡率显著增加(P<0.05),提示Tara可显著增强LLCs的杀伤敏感性。IF共定位结果提示:各组肿瘤组织凋亡细胞可能与CD8~+T细胞杀伤作用相关(P<0.05)。并且结合分析各组RNA-seq数据发现,DT组肿瘤的凋亡现象和肿瘤细胞焦亡、自噬和铜死亡途径并不显著相关。8.各组肿瘤样本RNA-seq结果:提取padj<0.05及log2 Fold Change>2的基因得到:与PBS组相比,Tara组有612个上调基因,866个下调基因;DCs组有967个上调基因,595个下调基因;DT组有679个上调基因,922个下调基因。KEGG富集分析后发现以ECM(extracellular matrix)-受体相互作用途径变化最为显著。Venn分析各治疗组相比PBS组时,ECM-受体相互作用途径中差异表达基因结果显示:与I型胶原蛋白(type I collagen,Col I)和肌腱蛋白相关的4个共同下调基因:即Col1a1(I型胶原蛋白α1,collagen,type I,alpha 1),Col1a2(I型胶原蛋白α2,collagen,type I,alpha 2),Tnn(肌腱蛋白N,tenascin N)和Tnc(肌腱蛋白C,tenascin C)。进一步分析RNA-seq结果中ECM-受体相互作用途径相关基因表达倍数变化结果显示:CD36,CD44,Col1a1,Col1a2,Lamc2(层粘连蛋白γ2,laminin,gamma 2),Spp1(骨桥蛋白,secreted phosphoprotein 1),Thbs1(血小板反应蛋白1,thrombospondin 1)和Tnn,Tnc等多个ECM重要基因的表达在Tara组肿瘤中均有下降趋势。Real-time RT-PCR验证结果显示:Tara体外处理LLCs中CD44,Col1a1,Col1a2,Itga7,Spp1,Thbs1,Tnc的m RNA水平明显下调(P<0.05)。体内肿瘤组织中,与PBS组相比,Tara组和DT组肿瘤组织中CD44,Col1a1,Itga7(整合素α7,integrin alpha 7),Spp1,Sdc4(多配体蛋白聚糖4,syndecan 4)的m RNA水平明显下调(P<0.05),DCs组肿瘤中CD44,Col1a2,Itga7,Lamc2,Sdc4,Spp1,Thbs1的表达显著上调(P<0.01),仅Tnc表达降低(P<0.01)。WB结果进一步显示:与对照组相比,体外经Tara处理的LLCs中的Col1a1和Col1a2蛋白水平显著下调(P<0.05)。IF结果显示:体外经Tara处理后LINCB018424细胞培养LCs细胞中Col I的表达量显著减少(P<0.01);体内肿瘤中也得到一致结果,即相较于PBS组,Tara组和DT组肿瘤组织中Col I的表达量显著下调(P<0.01)。9.CCK-8实验、划痕实验、克隆形成实验结果分别显示:与对照组相比,Tara处理LLCs的增殖、迁移能力和克隆形成能力均显著降低(P<0.05);鬼笔环肽染色结果显示:对照组LLCs呈明显的EMT,细胞簇集落生长迁移,具有明显的细胞-细胞间粘附;而Tara处理后的LLCs生长稀疏,细胞形态较圆;周期分析结果显示:与对照组相比,Tara组LLCs细胞G0/G1期比例明显上调(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例显著下调(P<0.01)。IF结果显示:Tara体外处理LLCs中Ki-67表达明显下调;类似地,各治疗组中肿瘤细胞的Ki-67表达显著下调(P<0.05),且DT组下调最为显著。Real-time RT-PCR结果显示:较对照组,Tara处理LLCs中CDK4、CDK6、MMP2、MMP3、MMP9的m RNA水平显著下调(P<0.01)。WB结果进一步显示:CDK4、CDK6、cyclin B1、p53、MMP2、MMP3、N-cadherin、Vimentin表达水平明显减低(P<0.05),这与Real-time RT-PCR结果相一致。此外,肿瘤组织Real-time RT-PCR检测结果显示:较PBS组,各治疗组肿瘤组织中CDK3、CDK4、CDK6、MMP3、MMP9的m RNA水平显著下调(P<0.01),且DCs组和DT组肿瘤中CDK1、MMP2也被下调(P<0.05)。Tara可以在体内外下调肿瘤细胞生长、转移相关基因表达。10.靶点预测结果显示:Tara的潜在靶点共得到625个靶分子,筛选去重后得到465个鼠源基因,然后与筛选到的15542个小鼠源肺腺癌相关基因venn分析得到420个交集。通过DAVID数据库对Tara和小鼠NSCLC的420共同靶点进行功能注释,在条形图显示了FDR≤0.001的BP、CC和MF前15条通路主要包括:BP:脂质代谢过程,药物反应,蛋白质磷酸化,缺氧反应等;MF:转移酶活性,类固醇结合,蛋白激酶活性,跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性等。KEGG富集气泡图中富集了Tara潜在影响小鼠NSCLC的前45条通路主要与:代谢途径,癌症途径,癌症蛋白聚糖通路,血管内皮生长因子信号通路等相关。degree排名前30个Tara和鼠源LUAD相关的共同靶点分子对接结果显示结合能皆小于-7 kcal/mol,提示该30个靶分子都能与Tara自由结合。接着我们查阅文献,选取了影响ECM途径的主要5个候选分子:GSK3β(糖原合成酶激酶3β,Glycogen synthase kinase 3 beta),SRC(肉瘤癌基因,Rous sarcoma oncogene),AKT2(胸腺瘤病毒原癌基因2,Thymoma viral proto-oncogene 2),JAK2(Janus激酶2,Janus kinase 2),PIK3R1(磷酸肌醇-3-激酶调节亚基1,Phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit 1)。这5个Tara候选靶分子主要富集途径包括:Focal adhesion,PI3K/AKT,JAK/STAT,m TOR等信号通路。FCM和WB结果显示:经过Tara处理后LLC中pan-AKT、p-AKT、p-PIK3R1、JAK2、p-JAK2表达水平显著下调(P<0.05),p-GSK3β表达增加(P<0.05),但是GSK3β、PIK3R1的表达没有显著变化(P>0.05)。提示Tara可能通过结合PIK3R1和AKT2,并抑制其磷酸化,来影响ECM通路。WB进一步检测此5个靶分子所在信号通路上下游分子变化,结果显示:Tara处理后LLCs中α-SMA,STAT3,p-STAT3,FAK,m TOR,p-m TOR的表达显著下调(P<0.05)。各组肿瘤组织IF结果进一步显示:Tara组和DT联合组的肿瘤中p-AKT,p-PIK3R1的表达显著下调(P<0.01)。Tara和PIK3R1和AKT2对接可视化结果显示:Tara可以通过与PIK3R1的346号位懒氨酸形成氢键;也可以与AKT2的178号位的酪氨酸形成作用力而结合。提示Tara可能通过diABZI STING agonist半抑制浓度下调PI3K/AKT/m TOR通路来影响ECM途径,并抑制LLCs生长转移。11.H&E染色结果显示:PBS组,Tara组模型脏器没有明显病理学改变;DCs组中DCs-vac所导致的炎症风暴明显引起模型小鼠心、肝、肾等组织结构改变,但在DT组中Tara似乎能减少炎性反应带来的脏器炎性损伤,明显改善DT组模型中由DCs-vac引起的脏器病变;这与外周血中IFN-γ和TNF-α水平检测结果相一致,相较于PBS组,DCs组小鼠血清IFN-γ和TNF-α含量明显升高(P<0.01),但相较于DCs组,DT组的IFN-γ和TNF-α显著下调(P<0.05);此外,各治疗组血清IL-10含量明显低于PBS组3倍的以上(P<0.01)。结论:1.Tara能提高DCs-vac抗小鼠NSCLC的治疗效果,并改善DCs-vac诱发的炎症反应。2.Tara提高DCs-vas抗瘤效应机制,与其靶向PIK3R1和AKT2分子,影响PI3K/AKT/m TOR/ECM通路,从而减少I型胶原蛋白的生成,导致肿瘤细胞对CTLs的杀伤敏感性增加有关。

目的 探讨C-myc蛋白表达与获得性免疫缺陷综合征(AIDS)相关弥BI 10773核磁漫大B细胞淋巴瘤预后的相关性。方法 选取2018年2月—2020年4月收治的100例AIDS相关弥漫大B细胞淋巴瘤作为研究对象。纳入对象采用免疫组织化学检查检测肿瘤组织石蜡切片中C-myc蛋白表达水平，并分为阴性表达组(C-myc<40%)、阳性表达组(C-myc≥40%),随后分析C-myc蛋白表达与AIDS相关弥漫大B细胞淋巴瘤患者临床病理特征、预后的关系。结果 AIDS相关弥漫大B细胞淋巴瘤患者C-myc蛋白表达与临床分期、国际预后指数(IPI)评分存在显著相关性，Ⅲ～Ⅳ期、IPI评分≥3分患者C-myc蛋白阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ期、IPI评分<3分ICI 46474 MW患者(P<0.01)。C-myc蛋白阳性表达组、阴性表达组3年生存率分别为36.84%(14/38)、83.87%(52/62),2组3年生存率比较差异有统计学意义(P<0.01)。多因素Cox回归分析显示，临床分期Ⅲ～Ⅳ期、IPI评分≥3分、C-myc蛋白阳性表达均是medication abortionAIDS相关弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后的独立危险因素(P<0.01)。结论 随着AIDS相关弥漫大B细胞淋巴瘤病情进展，C-myc蛋白表达水平逐渐升高，其表达水平与患者生存期有一定相关性，有望成为评估患者预后的生物标志物。

光遗传学技术是将光控技术与遗传学技术相结合，通过将光敏感蛋白靶向表达在可兴奋细胞的细胞膜上，利用特定波长的光照实现对细胞、组织以BI 10773体外及器官的精细调控。在心脏电生理领域中，终止心房颤动（简称房颤）发作是光遗传学的一个潜在应用，相较于传统的电复律治疗，光遗传学技术能够更为精确地对心肌异常放电区域进行干扰，在一定程度上降低了复律过程中心脏组织的损伤。转子是目前学术界广泛认可的房颤驱动灶，它是心肌组织中围绕着一个不可激发的核心而产生的一种杂乱无章的电活动。而光遗传学技术可以改变心肌细胞的兴奋性，进parenteral antibiotics而使心肌细胞中的转子发生移位，当转子移位至不可兴奋的边界或者两个转子相互碰撞时可以终止房颤发作。在基础研究中，已经证实光遗传学技术可以有效终止离体和在体水平的房颤发作，而且在Galunisertib研究购买人体计算机模拟实验中也验证了光遗传学技术终止房颤发作的可行性，但目前光遗传学技术在人体试验中的研究比较少。相比于传统的治疗方法，光遗传学技术可以更加精准、持续地对心肌细胞的电活动进行调控，为房颤的复律治疗提供了一种新的选择。

目的 了解艾滋病合并胃肠道淋巴瘤的临床特征，并复习相关文献，以提高对此类疾病的认识。方法 回顾性分析2019年1月至2021年12月重庆市公共卫生医疗救治中心收治的10例艾滋病合并胃肠道淋巴瘤患者，结合临床症状、实验室检查及胃肠镜检查、病理结果、治疗及预后等资料进行分析。结果 10例艾滋病合并胃肠道淋巴瘤均为男IACS-10759研究购买性，平均年龄（46.8±16.3）岁。8例患者CD4~+T淋巴细胞计数<200个/μL。病变范围累及胃(7例)、结肠(2例)及直肠（1例），多部位活检病理证实10例患者均为非霍奇金淋biogenic amine巴瘤（包括弥漫大B细胞淋巴瘤8例、伯基特淋巴瘤1例及浆母细胞淋巴瘤1例）。临床症状无特异性，常见为纳差、腹胀、体重下降。胃淋巴瘤可同时累及多部位，最常见发病部位为胃体、胃窦，胃镜下表现为多个结节样隆起伴溃疡，胃内黏膜多处充血肿胀、糜烂。肠道淋巴瘤2例，发生在升结肠，受累管壁弥漫性充血、肿胀，局灶不规则溃疡。直肠1例，为巨大新生物，向肛门突出，表面糜烂，触之易出血，肠腔变窄。10例淋巴瘤患者根据Ann Arbor改良分期，确诊时Ⅱ期获悉更多1例，Ⅲ期4例，Ⅳ期5例。接受化疗的7例因各种原因均未完成治疗，其中1例（病例9）虽只化疗了4个周期，但截至随访时患者疾病稳定，未进展；3例未接受化疗，其中1例失访，另外2例在确诊淋巴瘤后1个月内死亡。结论 艾滋病合并胃肠道淋巴瘤好发于男性，且CD4~+T淋巴细胞计数常小于200个/μL，以胃内高发，弥漫大B细胞淋巴瘤最为常见，临床分期为较晚期。胃肠镜对艾滋病合并胃肠道淋巴瘤诊断及鉴别诊断具有重要价值。规范化疗联合抗反转录病毒治疗可提高艾滋病合并胃肠道淋巴瘤患者的生存率。

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是消化道系统最常见的恶性肿瘤之一,全球第四大癌症死因。CRC发生及其转移、耐药等发展机制极为复杂。研究显示,癌细胞高速率的新陈代谢导致活性氧(RSARS-CoV2 virus infectioneactive Oxygen Species,ROS)的积累,并刺激癌细胞发生氧化应激进而影响其增殖和转移等生物学功能。虾青素是一种天然的强抗氧化物质,主要通过清除细胞内外过氧化物的方式发挥抗炎抗衰老等作用。研究显示,多种抗氧化剂通过促进肿瘤细胞铁死亡的方式发挥抑制肿瘤发展。铁死亡作为一种新发现的细胞程序性死亡方式,其发生与细胞中的氧化应激密切相关。近来研究证明,细胞铁死亡参与调节CRC的发展。然而,重编程能力、异质性强的肿瘤细胞对抗氧化剂的敏感性及其发生铁死亡方式的多样性机制并未揭示。为了探究虾青素是否调节细胞铁死亡而影响CRC的发展,以及其具体作用机制,本研究首先通过用不selleck化学同浓度的虾青素处理转移灶细胞系SW620和原发灶细胞系HCT116,并进行细胞功能实验确定虾青素对CRC细胞的具体作用。通selleck产品过CCK8法、细胞周期、划痕和克隆形成等实验进行评价50μM和100μM浓度的虾青素处理48h后的两种细胞。结果显示,虾青素显著抑制CRC细胞增殖、细胞周期S、G2\M期阻滞、促进细胞凋亡、抑制迁移。为了揭示分子机制我们进行转录组测序,结果发现差异表达基因显著富集在细胞生物学功能改变相关信号通路,并意外的发现细胞铁死亡相关基因显著表达变化。为了进一步确定虾青素参与调控CRC细胞铁死亡机理,我们进行检测线粒体膜电位、ROS含量、GSH含量,以及铁死亡相关基因的表达变化。结果发现,虾青素显著降低CRC细胞的ROS含量,线粒体膜电位升高,GSH含量增多,并上调铁死亡抑制基因的表达。同时虾青素能够增强奥沙利铂的促进CRC细胞凋亡和抑制细胞迁移的作用。为了阐明虾青素调节细胞铁死亡进而影响CRC细胞生物学功能的机制,我们通过转录组测序中显著差异表达基因与铁死亡基因集、EMT基因集进行交集分析预测到锌指蛋白基因ZFP3,并通过基因相关性分析发现其与PTGS2、MMP2、MMP9显著正相关。我们的研究证明了虾青素抑制CRC细胞增殖,阻滞其细胞周期进程,促进凋亡,抑制迁移,并抑制铁死亡发生。同时,虾青素通过调控CRC细胞锌指蛋白ZFP36的表达抑制铁死亡的发生的潜在的机制。

目的:从中医药理论分析,猕猴桃根配伍石韦(Actinidia chinensis Planch Root and Pyrrosia lingua(Thunb.)Farwell,AP)具有利水通淋、活血解毒等功效,民间验方中常将它们配伍使用来治疗前列腺癌症(Prostate Cancer,PProtein BiochemistryCa)。本课题利用前列腺癌细胞PC-3体外检测AP提取物对细胞增殖、迁移、凋亡等方面的协同作用,并对其成分进行分析,以期为AP治疗PCa的进一步研究开发提供参考。方法:1.AP提取物制备:采用水提、先水提后醇提、醇提提取方法,对不同配比(1:0、3:1、1:1、1:3、0:1)的猕猴桃根石韦混合物进行提取。2.药物成分分析:采用液相及液质联用方法对猕猴桃根、石韦及二者混合提取物中的有效单体成分进行定性分析。3.网络药理学分析:采用网络药理学技术研究AP治疗PCa的物质基础和作用机制。4.体外抗氧化实验:通过研究AP提取物对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH·)、2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS·+)的清除能力,对15种提取物的抗氧化效果进行初步筛选。5.AP提取物对前列腺癌细胞PC-3增殖抑制效果评估:采用溴化噻唑蓝四氮唑染色法(MTT)对15种提取物及阳性药比卡鲁胺(CDX)对PC-3细胞的增殖抑制率进行检测,做剂量依赖和时间依赖实验,初步确定最佳配比。将其与CDX进行联合,检测药物联合后对PC-3细胞抗增殖协同作用,确定最佳联合组合。6.细胞迁移检测:通过细胞划痕实验,评估AP提取物组、CDX组及联合给药组对PC-3细胞迁移抑制效果,同时使用倒置相差显微镜观察PC-3细胞形态。7.细胞周期检测:采用流式细胞检测仪检测不同药物对PC-3细胞周期的影响,同时初步观察其对细胞凋亡的影响。8.细胞凋亡检测:采用TUNEL法,利用荧光素FITC进行标记,激光共聚焦显微镜观察结果,PC-3凋亡细胞为FITC阳性。9.PI3K/AKT信号通路蛋白及Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白检测:采用免疫荧光技术,利用荧光素FITC进行标记,对不同给药组细胞内PI3K/AKT信号通路蛋白及Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白水平进行评估,明确蛋白表达位置。结果:1.药物成分分析:采用UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS技术对三种提取物(WEAP-1-0、WEAP-3-1、WEAP-0-1)的成分进行鉴别。从三种样品中共鉴定出酚酸类、萜类、氨基酸、香豆素和黄酮等44种成分,研究报道其中咖啡酸、土荆皮乙酸等成分具有良好的抗肿瘤效果,为AP抗PCa提供参考。2.网络药理学分析:网络药理学结果显示AP主要通过减轻氧化应激、活性氧等,调节前列腺癌、细胞周期、癌症中的蛋白聚糖等通路,抑制细胞侵袭迁移和促进细胞凋亡,来发挥治疗PCa的作用。3.体外抗氧化实验:中药不同配伍均显示良好的DPPH·与ABTS·+清除能力,效果呈浓度依赖性增强,二者具有良好的量-效关系。不同配伍比例对DPPH·、ABTS·+清除效果影响由强到弱顺序为:AP-1-0>AP-3-1>AP-1-1>AP-1-3>AP-0-1;不同提取溶剂对其清除能力由强到弱顺序为:水提≈先水后醇提>醇提。4.AP提取物对前列腺癌细胞PC-3增殖抑制效果评估:15种提取物对PC-3细胞均有不同程度的增殖抑制作用,且这种作用呈现浓度依赖性。利用MTT方法筛选出的最佳药物提取组合WEAP-3-1,与CDX联合用药后能够减少药物浓度,增强对肿瘤细胞的杀伤效果,起到增效的作用。5.细胞迁移检测:CDX、WEAP-3-1及联合给药能够抑制PC-3细胞侵袭,对比单一药物两组,联合给药组划痕距离增加明显,提示联合给药组能够进一步抑制PC-3细胞的侵袭和迁移能力。6.细胞周期检测:单独给药及联合给药对PC-3细胞周期变化表现为S/G2期所占比例的减小及G1期的阻滞,经联合给药处理后,对G1期阻滞更严重,同时,单独给药及联合给药组细胞的sub G1期比例显著升高,通过将PC-3细胞阻滞在G1期,诱导其发生凋亡。7MRTX849 IC50.细胞凋亡检测:TUNEL实验结果显示实验组显绿色荧光的细胞数目显著增加,其中联合给药组荧光细胞数量增加最为显著,明显优于单独给药组,CDX与WEAP-3-1联合给药可协同促进PC-3细胞凋亡,诱导其死亡。8.PI3K/AKT信号通路蛋白及Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白检测:免疫荧光实验结果显示,CDX与WEAP-3-1联合给药后可下调PI3K/AKT信号通路蛋白表达,可能通过激活PI3K/AKT信号通路而抑制前列腺癌细胞PC-3增殖,同时上调Bax蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平,表现出促凋亡效购买Ipatasertib果,且优于单药组,二者联合起到协同增效的效果,这可能与Bcl-2/Bax信号通路激活有关。结论:猕猴桃根及石韦经UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS技术鉴定出44种成分,结合网络药理学研究提示AP可通过减轻氧化应激,调节前列腺癌、细胞周期等通路,抑制细胞侵袭迁移和促进细胞凋亡。体外抗氧化实验结果表明猕猴桃根、石韦对DPPH·及ABTS·+表现出良好的清除效果,具有良好的抗氧化效果。筛选出的最佳组合WEAP-3-1与CDX联合给药后协同抑制PC-3细胞增殖及迁移,且效果优于单药组,联合给药处理后细胞内PI3K/AKT信号通路蛋白表达降低,凋亡相关蛋白Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低,说明其可能通过激活PI3K/AKT及Bcl-2/Bax信号通路发挥其作用。

背景:高血压病是心脑血管疾病最常见的危险因素之一,常与其他危险因素共存,血压控制不佳可造成心、脑、肾等靶器官损害,最终导致脏器功能衰竭,危害巨大。研究表明,血压每升高20/10mmHg,缺血性心脏病和脑卒中的风险就升高1倍。我国高血压患者高达2.7亿。高血压相关疾病在我国城乡居民死亡原因中居首位。因此,控制血压是预防心脑血管疾病和降低我国医疗成本的关键因素之一。然而,目前高血压的防治效果仍不理想,探索新的管理模式,提高血压控制率,是减轻我国医疗卫生系统经济负担的关键环节之一。目的:本课题组针对目前我国高血压患者患病率高、致死率高、致残selleck合成率高,知晓率、控制率、达标率低等特点,公共卫生及经济负担重等现状,开发远程实时高血压管理系统,旨在评估通过远程实时高血压管理系统提供实时提醒、血压测量、上传血压数据、服药提醒、记录服药信息、提供健康宣教,在线实时与医生沟通,及时调整用药,实现互动式交流干预以提Bucladesine纯度高高血压患者用药依从性,从而提高患者血压控制率、达标率,减少并发症的发生。方法:根据目前国内外指南以及我院高血压管理经验,课题组与iHealth公司联合开发互联网+高血压管理系统,并与九安公司智能血压计对接,从而保证患者血压实时上传到医生WEB端,继而进行高血压远程管理。连续入选高血压患者581例,随机分为对照组(n=291)和试验组(n=290),两组患者均接受本课题组开发的远程实时高血压管理系统测量和记录血压。对照组根据个人习惯测量血压,但不通过该系统与医生远程互动交流,定期到门诊复诊,调整降压药物。试验组患者应用该系统测量和记录血压,同时可以通过该系统与医生远程实时沟通、互动交流,随时调整降压药物;医护也可主动通过该系统主动远程监控患者血压,主动在线干预,内容包括饮食指导、活动锻炼、测量提醒,用药指导等。结果:两组高血压患者在性别构成、年龄、体重指数、既往史、个人史、血压分级、靶器官损害、是否合并糖尿病、降压药物种类等基线资料方面,差异无统计学意义(P>0.05)。在随访3、6、9、12个月时,远程互动式干预组患者血压达标率明显升高,而收缩压、舒张压、脉压差控制较好,试验组用药依从性较好,用药种类明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:本课题组主导开发的该套高血压远程管理系统能够顺畅使用,医护人员利用该套高血压远程管理系统联合智能可穿戴设备,可明显改善高血压患者用immunosensing methods药依从性,提高高血压患者3月、6月、9月、12月血压水平,提高血压达标率,为高血压防治提供数字医疗新思路。

金花葵是药食两用植物,具有极高的营养价值和丰富的生理活性。目前对金花葵的研究多集中在功能成分分析阶段,有关发酵金花葵及其生物活性等问题的研究非常少见。金花葵作为一种营养丰富的植物基质具有较好抗氧化和防治慢性疾病的作用,通过发酵将益生菌与金花葵有机结合,最大程度发挥其生物活性功能。基于此,本文通过体外抗氧化活性试验筛选出抗氧化功能强且益生作用显著的益生菌发酵金花葵,分析比较了单菌与混菌发酵对金花葵发酵特性的影响,并对混菌发酵金花葵进行工艺优化,再通过非靶向代谢组学分析得到差异代谢物,借助网络药理学筛选出与部分慢性疾病对应靶点,对发酵金花葵进行功能预测,旨在为开发新型金花葵功能食品提供技术支撑。主要研究结果如下:(1)通过测定22株益生菌发酵金花葵后的活菌数和抗氧化能力来筛选适合金花葵发酵的菌株。结果为:干酪乳杆菌HG、植物乳杆菌QC-1、鼠李糖乳杆菌LR、副干酪乳杆菌KB3发酵金花葵的活菌数均超过8.20 lg(CFU/m L);副干酪乳杆菌KB3、植物乳杆菌Y1、鼠李糖乳杆菌LR、干酪乳杆菌HG的自由基清除率均超过90.00%;干酪乳杆菌HG、植物乳杆菌QG-1、鼠李糖乳杆菌LR、副干酪乳杆菌KB3的铁离子还原力(FRAP值)均超过400μmol/L。因此,选择副干酪乳杆菌KB3、鼠李糖乳杆菌LR和干酪乳杆菌HG作为金花葵发酵适宜菌株。(2)通过酸性环境、胆盐环境、模拟人体胃肠道环境的耐受能力、自聚集共聚集能力及疏水能力来评估KB3、LR和HG的益生特性。结果为:KB3、LR和HG其在p H值为3的酸性环境条件下存活率分别为54.43%、77.11%和62.15%;在胆盐1 mg/m L条件下的存活率分别为75.74%、82.28%和72.74%;在模拟人体胃液环境(p H值为3.5)条件下的存活率分别为46.79%、74.69%和61.53%;在模拟人体肠液环境条件下的存活率分别为50.00%、94.87%和88.89%;自聚集能力超过60%,对部分致病菌的共聚集能力超过65%且具有良好的疏水性。因此副干酪乳杆菌KB3、鼠李糖乳杆菌LR和干酪乳杆菌HG具有良好的益生特性可用于后续试验的研究。(3)通过抗氧化活性、活性成分含量等指标对比分析单菌和混菌发酵金花葵的发酵特性,并优化其发酵工艺。结果显示,不同的菌株/组合发酵金花葵均在发酵24 h时DPPH自由基清除率到达最高点,其中,混菌发酵组的抗氧化活性最高,较其他单菌发酵组提高0.40%-1.84%;与单菌发酵组相比,混菌组还原糖含量下降趋势更明显,发酵终点时比其他组低9.45%-12.57%;混菌发酵组与单菌发酵组的多酚和黄酮含量的差异随着时间的延长而逐渐显著。以抗氧化能力和活菌数为评价指标,利用单因素和响应面试验确定了混菌发酵金花葵最适混菌比例为1.9:1:1.9、最适接种量为8%、葡萄糖和蛋白胨最适比例为1.9:1以及最适发酵时间为18 h。(4)通过黄酮生物利用度、胰脂肪酶抑制率和牛磺胆酸钠结合率、α-淀粉酶抑制Infection types率和α-葡萄糖苷酶抑制率以及血管紧张素转换酶Ⅰ抑制率试验评价发酵金花葵的体外生物活性。结果表明,与未发酵金花葵相比,发酵金花葵的黄酮生物利用度可提高15.30%-51.39%;混菌发酵组的胰脂肪酶抑制率增长了271.27%,牛磺胆酸钠结合率增长了13.05%;发酵金花葵的α-淀粉酶抑制率增长82.05%-134.17%,α-葡萄糖苷酶抑制率增幅为58.07%-192.28%;混菌发酵组的血管紧张素转换酶Ⅰ抑制率增长了7.16倍。从总体上看,发酵后金花葵的生物活性均有提高,且混菌发酵的效果最好。(5)利用代谢组学分析对发酵金花葵的有效物质成分进行解析,并通过网络药理学进行功能预测。通过代谢组学分析共鉴定出21种差异代谢产物,包括5种有机酸及其衍生物和5种苯环型化合物等。差异代谢物富集最多的前三条代谢途径为氨基酸的生物合成、ABC转运蛋白以及烟酸和烟酰胺代谢。随后利用网络药理学预测发酵金花葵防治相关慢性疾病的作用,发现共13个差异代谢物拥有包括高血脂症和高血压症等27个慢性疾病及其并发症相关靶点,对应有包括PPAR信号通Lorlatinib浓度路和AMPK信号通路等28条对应通路。结果提示,发酵金花葵的功能预测与本研究中涉及的体外活性数据结果基本一致,推测其在相关慢性疾病的防治上具有很好地应用潜Alpelisib力。