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目的 探讨M1巨噬细胞对乳腺癌细胞上皮细胞-间充质转换(EMT)的影响及钙蛋白酶(Calpain)在其中的介SAG价格导作用。方法 以人乳腺癌细胞系雌激素受体阳性(ER+)细胞MCF-7、T47D及雌激素受体阴性(ER-)细胞MDA-MB-231为模型细胞，实验分为MCF-7细胞及PS-341核磁T47D细胞的RPMI-1640组(RPMI-1640纯培养基培养)、M1巨噬细胞条件培养液培养组(M1-CM组)、M1-CM+Calp组[M1-CM联合Calpain抑制剂Calpeptin(50μmoL/L)处理]、M1-CM+CI-Ⅲ组[M1-CM联合Calpain抑制剂Calpain inhibitorⅢ(50μmoL/L)处理],MDA-MB-231细胞的RPMI-1640组、M1-CM组；采用划痕实验和侵concomitant pathology袭实验检测各组中MCF-7细胞、T47D细胞、MDA-MB-231细胞的迁移能力及MCF-7细胞的侵袭能力，采用qRT-PCR检测M0巨噬细胞、M1巨噬细胞趋化因子受体7CCR7、趋化因子配体10(CXCL10)及白细胞介素-12(IL-12) mRNA表达水平，采用Western blot实验检测MCF-7细胞、T47D细胞及MDA-MB-231细胞中上皮-钙黏素(E-cad)、纤连蛋白(FN)、波形蛋白(Vim)蛋白水平表达。结果 与RPMI-1640组相比，M1-CM组ER+细胞MCF-7及T47D迁移能力增强(P<0.05),MCF-7细胞侵袭能力增强(P<0.05);ER+细胞MCF-7及T47D E-cad蛋白表达水平下调，而FN、Vim表达上调(P<0.05),而ER-细胞MDA-MB-231中只有E-cad表达上调(P<0.05);与M1-CM组相比，ER+细胞MCF-7及T47D的M1-CM+Calp组、M1-CM+CI-Ⅲ组中M1-CM诱导的ER+乳腺癌细胞EMT效应被逆转(P<0.05)。结论 M1巨噬细胞条件培养液可以促进ER+细胞人乳腺细胞的EMT,但对ER-细胞EMT无明显影响，其促进ER+乳腺癌细胞EMT信号机制可能与Calpain通路有关。

目的 分析多层螺旋CT测量左心耳形态结构对心房颤动(AF)射频消融术患者左心耳血栓的诊断价值。方法 选定2020年8月至2022年8月接诊的100例拟行射频消融术治疗的AF患者，分别给予多层螺旋CT、经胸超声(TTE)检查，将实时三维经食管超声心动图(RT-3D-TEE)作为本次研究金标准，比较多层螺旋CT、TTE诊断左心耳血栓准确率、灵敏度、Lapatinib体内实验剂量特异度，Kappa检验多层螺旋CT、TTE与RT-3DGenetics research-TEE的一致性。另选取同期门诊体检中心体检的90例健康体检者做对比，比较左VE-822心耳血栓与健康人左心耳以及左心房参数CT测量值。结果 多层螺旋CT诊断准确率(98.00%)、灵敏度(98.90%)、特异度(88.89%)均高于TTE(80.00%、86.81%、11.11%),Kappa检验多层螺旋CT与RT-3D-TEE一致性较好(Kappa值=0.573),TTE与RT-3D-TEE一致性一般(Kappa值=0.735)(P<0.05)。左心耳血栓者LAEF、LAEV均低于健康者，左心耳血栓者LAVmax、LAVmin、左心耳长径、短径均高于健康者(P<0.05)。左心耳血栓者LAAEV、LAAEF均低于健康者，左心耳血栓者LAAVmin、LAAVmax均高于健康者(P<0.05)。结论 多层螺旋CT在拟行射频消融术AF患者左心耳血栓诊断中准确率、灵敏度以及特异度较高，同时可通过测量左心耳CT参数，对左心耳功能做出评价，具有一定的临床价值。

目的:本研究通过细胞和动物实验探讨低剂量放疗是否可以通过调控肿瘤相关巨噬细胞抑制BDNF、Trkb,进而抑制肺癌进展。方法:将购买的Lewis肺癌细胞系(LLC)复苏、传代培养,第3代及饱和度大于80%用于后续实验研究。选6周龄C57BL/6雌性小鼠,平均体重20±2g,皮下注射Lewis肺癌细胞(LLC)1×10~6个/只,制作成Lewis肺癌荷瘤鼠模型,待摸到腋下瘤体每7天测量瘤体大小(体积=长×宽×0.5),绘制不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤生长变化曲线。待瘤体大小约0.8×0.8cm根据治疗方案随机分配为4组,每组10只,分别为:LLC组:0Gy;LLC+2Gy组:2Gy×18F;LLC+8Gy组:8Gy×3F;LLC+16.4Gy组:16.4Gy×1F,进行放射治疗。放射治疗后Canagliflozin分子量每组选取6只小鼠处死,留取不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织及血清于﹣80℃冰箱保存,肿瘤组织标本切片分别做HE染色、Tunel染色,比较各组肿瘤组织病理变化及细胞凋亡情况;Western blot方法检测Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织中BDNF、TRKB和BCL-2、BAX、Caspase-9、cytochrome c凋亡相关蛋白的表达情况;LLC组及LLC+2Gy组肿瘤组织标本切片行免疫荧光染色,明确LLC组及LLC+2Gy组M1及M2型巨噬细胞浸润水平;ELISA检测LLC组及LLC+2Gy组Lewis肺癌荷瘤鼠血清中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α、INOS及抗炎细胞因子IL-10的表达水平。将培养的LLC细胞分为4组,分别为:LLC组;LLC+2Gy组;LLC+8Gy组;LLC+16.4Gy组。分别用不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠血清培养相应处理组LLC细胞。分别做EDU染色、流式细胞术(FCM)评估细胞增殖、凋亡及活性氧水平;Western blot方法检测LLC细胞中BDNF、TRKB和BCL-2、BAX、Caspase-9、cytochrome c凋亡相关蛋白的表达水平。结果:1.不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠瘤体变化:LLC组瘤体增长速率明显比放疗组快,LLC+8Gy组和LLC+1IACS-0107596.4Gy组瘤体控制效果优于LLC+2Gy组;2.不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织切片HE染色:LLC组组织中癌细胞最多,组织癌化最严重,LLC+2Gy组、LLC+8Gy组、LLC+16.4Gy组组织癌化程度依次减轻;3.不同处理组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织切片Tunel染色:与LLC组相比,放疗组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织细胞凋亡增多,LLC+2Gy组、LLC+8Gy组、LLC+16.4Gy组肿瘤组织细胞凋亡依次增多;4.WesUrinary microbiometern blot方法检测Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织中BDNF、TrkB和BCL-2、BAX、Caspase-9、cytochrome c凋亡相关蛋白的表达水平:与LLC组比较,放疗组抗凋亡蛋白Bcl-2低表达(P<0.01),促凋亡蛋白BAX、凋亡相关因子cytochrome C、Caspase-9高表达(P<0.01),放疗组各组间差异无统计学意义;与LLC组比较,放疗组BDNF-TrkB低表达(P<0.01),LLC+2Gy组最低(P<0.01),LLC+8Gy和LLC+16.4Gy组差异无统计学意义;5.LLC组及LLC+2Gy组Lewis肺癌荷瘤鼠肿瘤组织切片CD68、CD80、CD163免疫荧光染色:与LLC组相比,CD80标记的M1型巨噬细胞在LLC+2Gy组显示高表达(P<0.01),CD163标记的M2型巨噬细胞在LLC+2Gy组显示低表达(P<0.01);6.ELISA检测LLC组及LLC+2Gy组Lewis肺癌荷瘤鼠血清中IL-6、IL-1β、TNF-α、INOS、IL-10的表达水平:与LLC组相比,LLC+2Gy组肺癌荷瘤鼠血清中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α、INOS高表达(P<0.01),抗炎细胞因子IL-10低表达(P<0.01);7.不同处理组LLC细胞EDU染色:与LLC组相比放疗组LLC增殖减少,LLC+2Gy、LLC+8Gy、LLC+16.4Gy组细胞增殖依次减少;8.FCM检测不同处理组LLC凋亡:与LCC组相比放疗组凋亡率升高(P<0.05),LLC+2Gy、LLC+8Gy、LLC+16.4Gy组凋亡率依次升高(P<0.05),LLC+16.4Gy组的细胞凋亡率最高(P<0.01);9.FCM检测不同处理组LLC活性氧水平:与LCC组相比LLC+2Gy、LLC+8Gy、LLC+16.4Gy组活性氧水平均升高,其中LLC+16.4组升高最明显;10.Western blot方法检测不同处理组LLC细胞中BDNF、TrkB和BCL-2、BAX、Caspase-9、cytochrome c凋亡相关蛋白的表达水平:与LLC组比较,放疗组抗凋亡蛋白Bcl-2低表达(P<0.01),促凋亡蛋白BAX、凋亡相关因子cytochrome C、Caspase-9高表达(P<0.01),放疗组各组间差异无统计学意义;与LLC组比较,放疗组BDNF、TrkB低表达(P<0.01),LLC+2Gy组最低(P<0.01),LLC+8Gy和LLC+16.4Gy组差异无统计学意义。结论:低剂量放疗促进M1型巨噬细胞极化,抗炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α、INOS分泌增多,进而抑制BDNF、Trkb,从而抑制肿瘤增殖及促进肿瘤凋亡,抑制肺癌进展。

目的 采用“分子对接-分子动力学-体外药理学”研究方法筛选并优化阻断程序性细selleck合成胞死亡蛋白1/程序性细胞死亡配体1(programmed cell death protein 1/programmed death-ligand 1, PD-1/PD-L1)结合，获得具有较高抗肿瘤活性的多肽小分子化合物。方法 利用本团队构建的5肽化合物数据库，以及从蛋白质数据库（protein data bank, PDB）中下载的PD-L1蛋白质三维结构数据，采用Molecular Operating Environment软件进行柔性分子对接得到多肽化合物；对其中GWVI/WSA(generalized Born volume integral/weighted surface area)自由能变化值（ΔG）排名最高的化合物分子进行分子动力学计算分析，包括配体重原子位置变动的均方根偏差（root mean square error, RMSD）以及相互作用能[为兰纳-琼斯势能（Lennard-Jones potential）与库伦势能（Coulombic energy）之和]。通过均相时间分辨荧光（homogeneous time-resolved fluorescence, HTRF）技术分析配体化合物对PD-1/PD-L1相互结合的阻断作用，建立Jurkat T淋巴细胞与黑色素瘤B16-F10细胞的共培养体系，探索化合物配体对T细胞杀伤肿瘤作用的影响以及对共培养上清液中IL-2分泌水平的影响。结果 在筛选的多肽化合物中，RGGHA与RGGHH与PD-L1的结合更为稳定，其中RGGHA与PD-L1存在多种相互作用力，与PD-1竞争性结合PD-L1的Asp122、Try123、Lys124等位点阻断PD-1/PD-L1信号转导。HTRF实验表明，RGGHA对PD-1和Pinfant infectionD-L1结合抑制率为58.38%,RGGHH为42.73%。此外，在共培养体系中，RGGHA与RGGHH能够显著增加IL-2的分泌水平，提高T细胞对于肿瘤细胞的杀伤能力，激活肿瘤免疫微环境。AG-221价格结论 研究发现多肽化合物RGGHA与RGGHH可以有效阻断PD-1/PD-L1相互作用，重新激活有利于抗癌的免疫反应，可以将其作为先导化合物用于新药研发。

目的:探讨稀土氯化镧对卵巢癌细胞(人COC1细胞系、人Liproxstatin-1 IC50卵巢癌SKOV3细胞系)及卵巢癌顺铂耐药细胞(COC1/DDP细胞系、SKOV3/DDP细胞系)的作用以及蛋白表达的机制。方法:1、选择人卵巢癌(COC1)细胞株、人卵巢癌耐顺铂细胞株(COC1/DDP)、人卵巢癌(SKOV3)细胞株作为实验细胞株,并通过将SKOV3培养于含有DDP的培养液中并逐步增加DDP的浓度使其产生耐药性,获得SKOV3/DDP耐药细胞株。2、采用0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0μmol/L浓度的氯化镧分别进行COC1细胞系及COC1/DDP细胞系的常规培养及添加半数已知浓度顺铂的联合培养,于48h后,利用MTT法进行各组细胞增殖抑制率的检测。3、按照加入氯化镧浓度不同将COC1和COC1/DDP细胞分别分为对照组(细胞悬液+培养基)、低剂量组(0.5μmol/L氯化镧)、中剂量组(2μmol/L氯化镧)和高剂量组(5μmol/L氯化镧),加入氯化镧培养48h后,在透射电子显微镜下观察不同浓度氯化镧处理后COC1和COC1/DDP细胞形态变化。4、依据细胞处理方法,将COC1和COC1/DDP细胞分别分为对照组(COC1或COC1/DDP)、顺铂组(COC1或COC1/DDP+DDP)、氯化镧组(COC1或COC1/DDP+氯化镧)和顺铂+氯化镧组(COC1或COC1/DDP+DDP+氯化镧),利用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,以Western blot检测不同处理方式下COC1/DDP细胞中ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白的相对表达量。5、采用DDP浓度逐渐增加的方法诱导卵巢癌DDP耐药细胞株(SKOV3/DDP),并在显微镜下观察其形态变化。6、向SKOV3和SKOV3/DDP细胞加入浓度分别为1、2、4、6、8、10、20、30μg/m L的DDP,培养24小时后,采用CCK8分析DDP对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的生长抑制率(Cell growth inhibition rate,GIR)和耐药指数(RI)。7、向SKOV3/DDP细胞中分别加入浓度为5、10、20、40、60、80、160、320μg/m L的氯化镧,培养36、48小时后采用CCK方法分析不同浓度不同时间药物对细胞生长抑制率。8、依据细胞处理方式不同将SKOV3和SKOV3/DDP细胞分为对照组(SKOV3或SKOV3/DDP)、氯化镧组(SKOV3或SKOV3/DDP+10μg/m L氯化镧)、DDP组(SKOV3或SKOV3/DDP+5μg/m L DDP)和氯化镧+DDP组(SKOV3或SKOV3/DDP+5μg/m L DDP+10μg/m L氯化镧)。将细胞处理后置于培养箱中培养7d计算不同实验组细胞克隆数。利用流式细胞术检测各组SKOV3和SKOV3/DDP细胞的凋亡率,以Western blot检测不同处理方式下SKOV3/DDP细胞中ERCC1、Ki67、CDK6、c-Cbl和Caspase-3蛋白的相对表达量。结果:1、顺铂处理后COC1及COC1/DDP细胞的增殖率明显降低,且呈现出浓度依赖性。COC1细胞株的IC50为2.11μg/m L,COC1/DDP细胞株的IC50为22.86μg/m L,耐药指数为10.53倍。2、MTT检测细胞增殖率的结果显示:氯化镧对COC1细胞及COC1/DDP细胞的生长具有显著的抑制作用,并呈现出浓度依赖特征。氯化镧以1.5μmol/L为节点,低于该浓度则细胞增殖的抑制效果降低;超过该浓度则细胞增殖的抑制效果增强,并呈现浓度依赖特征。取1.5μmol/L浓度的氯化镧进行卵巢癌细胞的处理,可获得最优的细胞增敏效果。3、对照组和低剂量组的COC1和COC1/DDP细胞形态正常,核膜完整,细胞器和细胞核结构清晰,胞内无空泡,两组间细胞形态的差异不显著(P>0.05)。中剂量组的COC1和COC1/DDP细胞株均出现微量皱缩,胞质内有少量空泡。高剂量组的COC1和COC1/DDP细胞株染色质固缩后凝结成团块,分布无规律,边界不清,形成新月状或环状小体在核膜周边聚集,而后细胞浆浓缩,内质网变疏松并与胞膜融合,形成空泡;细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体,细胞凋亡较多。4、对照组、顺铂组、氯化镧组、顺铂+氯化镧组的COC1细胞及COC1/DDP细胞的凋亡率分别为5.52±0.92%及4.60±1.11%、25.40±4.38%及18.24±2.81%、7.22±2.55%及5.59±1.73%、27.54±4.03%及29.12±5.38%.与对照组相比,顺铂组、顺铂+氯化镧组COC1/DDP细胞中ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与顺铂组相比,顺铂+氯化镧组COC1/DDP细胞中ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。5、SKOV3细胞株呈鹅卵石样,形态规则,DDP诱导后的SKOV3/DDP细胞株呈长形梭形,相对扁平。6、采用相同浓度DDP处理SKOV3和SKOV3/DDP细胞株,DDP对SKOV3细胞抑制率明显高于SKOV3/DD(P<0.05)。DDP对SKOV3细胞的半数抑制浓度IC50为4.54μg/m L,对SKOV3/DDP细胞的IC50为11.12μg/m L,SKOV3/DDP对DDP的耐药指数(RI)为2.45。7、当氯化镧浓度低于40μg/m L时,氯化镧对SKOV3/DDP细胞株作用36h和48h时的细胞生长抑制率相比无统计学差异(P>0.05),当氯化镧浓度≥40μg/m L时,相同浓度氯化镧对SKOV3/DDP细胞株作用48h时的细胞生长抑制率明显高于36h(P<0.05)。8、与对照组相比,氯化镧组、DDP组和氯化镧+DDP组的细胞克隆形成率均明显下降。氯化镧组的细胞克隆形成率与对照组相比具有统计学差异(P<0.05);DDP组的细胞克隆形成率与对照组相比具有显著性差异(P<Short-term bioassays0.01);氯化镧+DDP组的细胞克隆形成率与对照组相比具有极显著性差异(P<0.001)。氯化镧+DDP组的细胞克隆形成率明显低于DDP组(P<0.01)。9、与对照组相比,氯化镧组、DDP组和氯化镧+DDP组的SKOV3/DDP细胞凋亡率明显上升。氯化镧组的SKOV3/DDP细胞凋亡率与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。DDP组和DDP+氯化镧组的SKOV3/DDP细胞凋亡率均较对照组升高(P<0.05),而且DDP+氯化镧组的SKOV3/DDP细胞凋亡率高于DDP组(P<0.05)。与对照组相比,DDP组和氯化镧+DDP组中的ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白表达量明显下降(P<0.05);DDP组和氯化镧+DDP组中的ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白表达量明显低于氯化镧组(P<0.05);氯化镧+DDP组中的ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白BYL719核磁表达量低于DDP组(P<0.05)。与对照组相比,氯化镧组、DDP组和氯化镧+DDP组中的Caspase-3蛋白表达量明显上升(P<0.05);DDP组和氯化镧+DDP组中的Caspase-3蛋白表达量明显高于氯化镧组(P<0.05);氯化镧+DDP组中的Caspase-3蛋白表达量高于DDP组(P<0.05)。结论:1、低浓度氯化镧对卵巢癌COC1、COC1/DDP、SKOV3和SKOV3/DDP细胞生长均无显著抑制作用;2、氯化镧与顺铂共培养时可显著增强顺铂对卵巢癌细胞的抑制增殖作用,并促进卵巢癌细胞凋亡作用;3、氯化镧可显著下调SKOV3/DDP细胞中ERCC1蛋白表达,使得ERCC1基因的DNA修复功能受到阻碍,从而导致SKOV3/DDP细胞Caspase-3蛋白表达活化增加,加快细胞凋亡。4、氯化镧提高卵巢癌细胞对顺铂敏感性的潜在机制可能与ERCC1、Ki67、CDK6及c-Cbl蛋白表达下调以及Caspase-3上调有关。综上所述,本研究为氯化镧作为抗癌药物的临床应用提供实验依据。但仍需要进一步的研究来揭示参与氯化镧和顺铂协同作用的机制。

目的:1.探究Yes相关蛋白1(Yes-associaBMS-907351体外ted protein 1,YAP1)抑制剂Verteporfin(VP)和顺铂(cis-Diamminedichloroplatinum,CDDP)对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞存活率的影响,并探究VP与CDDP联合应用是否对ESCC细胞存在协同作用;2.探究VP与CDDP单独及联合应用对ESCC细胞恶性表型的影响;3.探究VP与CDDP在ESCC中联合作用的分子机制。方法:1.采用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测不同浓度的VP和CDDP在作用24 h、48 h、72 h后对细胞生存率的影响,并使用Graph Pad Prism 9计算IC_(50);2.根据两种药物的IC_(50),每种药物选三个浓度对细胞进行联合处理,使用MTT法测定细胞存活率。根据联合用药后的细胞存活率,使用在线数据分析工具Synergy Finder 2.0与Compu Syn软件计算协同分数(synergy score)和联合指数(combination index,CI),确定VP和CDDP联合用药之间的相互作用,并确定后续实验的药物联合使用浓度;3.VP和CDDP单药或联合用药作用于KYSE150和KYSE30细胞,使用倒置显微镜观察细胞形态变化;采用碘化丙啶(propidium lodide,PI)染色检测细胞的死亡情况;通过二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)探针检测细胞的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色检测细胞的凋亡情况;丹酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色检测细胞的自噬情况;采用细胞聚集实验和细胞分离实验检测ESCC细胞同质黏附能力;采用划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;4.采用Western blot实验检测VP和CDDP单药或联合用药对凋亡相关蛋白PARP-1和Procaspase-3、转移相关分子MMP-2以及对AKT信号通路的影响。结果:1.不同浓度的VP或CDDP均导致KYSE150和KYSE30的细胞活力下降,且呈剂量和时间依赖性;2.与单独用药相比,VP与CDDP联合用药显著抑制了细胞的生存,经Synergy Finder 2.0和Compu Syn计算,VP与CDDP联合使用具有协同效应;3.与对照组相比,单独用药组细胞开始变圆,CDDP组细胞出现肥大,而与单独用药相比,联合用药对细胞形态的影响更大,细胞数量减少更多,细胞肥大明显,形态不佳。经PI染色后发现单独用药组较对照组细胞死亡增加,而与单独用药组相比,联合用药组细胞死亡数量更多;与对照组相比,单独用药组增加了ROS水平,而联合用药导致细胞内ROS水平较单独用药组的ROS水平更高;经DAPI染色后发现,对照组凋亡细胞极少,单独用药组凋亡率出现增高,细胞核出现凝集,而联合用药组比单独用药组的细胞凋亡率更高,细胞出现核凝集和核碎裂;通过MDC染色发现,VP组自噬降低,CD点击此处DP组自噬增强且出现自噬空泡,而联合用药组自噬降低;通过细胞聚集实验和细胞分离实验检测到单独用药组细胞的黏附能力较对照组增强,而联合用药组细胞同质黏附力又显著强于单独用药组;通过划痕愈合实验发现,划痕48 h后单独用药组划痕宽度较对照组稍宽,而联合用药组的划痕宽度又显著大于单独用药组;4.与单独用药相比,VP和CDDP联合应用导致凋亡蛋白PARP-1和Procaspase-3表达量均明显下调;转移相关分子MMP-2表达降低;与对照组及单独用药相比,联合用药组的细胞AKT信号通路中p-AKT的表达水平明显下调,而总蛋白AKT的表达没有明显变化。结论:1.VP与CDDP单独应用均能抑制ESCC细胞的生存;2.VP与CDDP联合应用对ESCC细胞有协同抑制作用;3.VP与CDDP联合用药比单独用药更能降低ESCC细胞的增殖能力;导致细胞死亡、ROS水平、凋亡增加,自噬受抑;并能增强细胞间黏附力、降低细胞迁移能力;4.VP与CDDP联合用药通过凋亡蛋白PARP-1、caspase-3的活化来促进ESCMedia degenerative changesC细胞的凋亡;通过降低细胞中MMP-2的表达来减弱ESCC细胞的迁移侵袭能力;VP与CDDP对ESCC细胞的协同作用可能通过AKT信号通路发挥作用。

肾缺血再灌注损伤(Ischemia-rInfluenza infectioneperfusion injury,IRI)多是由肾前性因素触发的肾脏内炎症级联反应,从而导致组织损伤。巨噬细胞在IRI诱发的炎症反应中起重要作用。炎症初期,M1型巨噬细胞占主导位置,释放促炎因子和趋化因子诱导炎症反应;炎症中后期,巨噬细胞向M2型转化,大量释放抑炎因子和多种生长因子抑制炎症,促进组织修复。脂肪间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cell,ADMSC)是一类多能性成体干细胞,具有修复组织损伤功能。研究发现ADMSC的促修复作用主要依靠产生及分泌生物活性因子,对损伤细胞的代谢进行干预,外泌体(Exosome,Exo)是其中最有治疗价值的因子之一。此外,有研究报道ADMSC-Exo可减轻大鼠和小鼠肾IRI引起的肾损伤。本实验拟探究ADMSC-Exo是否通过调节巨噬细胞极化来对犬肾IRI起到保护作用,为其应用于临床实验提供理论依据。手术建立犬单侧肾IRI模型,分为:空白组(空白手术)、模型组(肾IRI模型)和实验组(ADMSC-Exo干预),观察ADMSC-Exo对炎性细胞浸润、炎性因子含量和巨噬细胞表型的影响。体外实验运用ELISA和q PCR检测经LPS诱导的巨噬细胞在与ADMSC-Exo共培后的表型变化。对犬肾脏组织中mi RNA进行q PCR检测,筛选可能参与巨噬细胞极化调节的mi RNA,并对其进行体内外实验验证。体内实验结果表明,在肾脏发生IRI后立刻在肾皮质区域分点注射ADMSC-Exo,能够减少犬肾脏组织内的炎性细胞浸润,显著降低血清和肾脏组织中的促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达量(p<0.05),并提高抑炎因子IL-10和TGF-β的含量(p<0.1),减轻炎症反应。同时,M1型巨噬细胞标志物i NOS表达量显著CB-839小鼠降低(p<0.05),M2型巨噬细胞标志物Arg-1表达量升高(p<0.05)。体外实验中,观察到ADMSCExo可以促进LPS诱导的巨噬细胞由M1型向M2型转化,并影响巨噬细胞释放的炎性因子表达量。在对犬肾脏组织内的mi RNA进行检测后发现,mi R-146a的变化与M2型巨噬细胞相关。通过mi RNA功能学实验证实,mi R-146a能够促进LPS诱导的巨噬细胞由M1型向M2型转化,当抑制ADMSC-Exo中的mi R-146a后,发现ADMSPD-0332991CExo促进巨噬细胞极化的作用被削弱。结论:ADMSC-Exo能够通过转运mi R-146a调节巨噬细胞极化,减少肾脏组织内炎性细胞的浸润,减轻炎症反应,减轻犬肾IRI。

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)717对胃癌细胞增殖、转移等生物学行为的影响及其调控机制。方法收集2021年1至12月宁波大学附属第一医院手术切除或活检的31例胃癌组织及配对癌旁组织，以及胃癌细胞系AGS、HGC-27和人正常胃黏膜细胞系GES-1。PD0325901采用qRT-PCR法检测lncRNA717在胃癌组织及癌旁组织、各细胞系中的表达水selleck AZD6738平。采用细胞增殖和毒性检测（CCK-8）法、Transwell法和划痕试验分别评估lncRNA717对细胞增殖、侵袭和迁移中的影响。采用荧光素酶报告基因测定、qRT-PCR法和Western blot法检测各组标本和细胞中lncRNA717、miR-762和干扰素调节因子（IRF）7表达水平。结果 与癌旁组织相比，lncRNA717在胃癌组织中显著下调，与正常细胞相比，lncRNA717在胃癌细胞中显著下调。过表达lncRNA717抑制了胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。Biomimetic peptideslncRNA717可以吸附miR-762，上调miR-762能抑制IRF7的表达，促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭，而过表达lncRNA717后逆转了miR-762对细胞的增殖、迁移和侵袭的促进作用。结论 lncRNA717可抑制胃癌细胞的增殖和转移，这可能与调控miR-762/IRF7有关。提示lncRNA717可作为胃癌的潜在生物标志物和治疗靶点。

旨在探究湖羊与三元杂交绵羊夏杜湖、夏澳湖肉质特性。本研究选择健康且出生体重相近的公羔((3.61±0.65) kg)随母哺乳至45天后集中断奶。断奶后分成3个处理组(湖羊组、夏澳湖组和夏PCI-32765供应商杜湖组),每个处理15只公羔，3个处理的45只羔羊混合饲养至6月龄屠宰，并分析背最长肌组织形态及背最长肌的肉品质及营养成分。试验期饲喂全混合基础日粮。结果表明：1)相对于湖羊，三元杂交绵羊背最长肌亮度(L*)显著降低，熟anatomopathological findings肉率显著提高(PAZD6738<0.05),但其对背最长肌pH、剪切力、失水率、红度(a*)和黄度(b*)无显著影响(P>0.05)。2)相对于湖羊，三元杂交绵羊背最长肌纤维直径和平均面积显著提高，但肌纤维数量和密度显著降低(P<0.05)。3)相对于湖羊，三元杂交绵羊背最长肌中粗蛋白、必需和非必需氨基酸的含量显著提高(P<0.05),但对总饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸及微量元素(铜、铁、锌和锰)无显著影响(P>0.05)。4)夏杜湖和夏澳湖在背最长肌pH、剪切力、失水率、熟肉率、肉色、肌纤维数量、肌纤维面积、肌纤维密度、常规营养成分(水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分)、微量元素(铜、铁、锌和锰)、必需和非必需氨基酸的含量、总饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量均无显著差异(P>0.05)。综上所述，三元杂交绵羊能够显著改善肉品质，增加背最长肌中粗蛋白和氨基酸水平，具有培育生产优质羊肉的潜力，且同一终端父本杂交后代在肉质特性中无明显差异。

目的 探讨LncRNA CDKN2BAS对肺癌细胞NCI-H1299增殖、凋亡和放射敏感性的影响及其分子机制。方法 选取42例肺癌组织及相应癌旁组织；体外培养人正常肺支气管上皮细胞和肺癌细胞系；将NCI-H1299细胞分为NC组、si-NC组、si-LncRNA CDKN2BAS组、miR-NC组、miR-627-3p组、si-LncRNA CDKN2BAS+anti-miR-NC组、si-LncRNA CDKN2BAS+anti-miR-627-3p组；实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA CDKN2BAS、miR-627-3p mRNA相对表达水平；噻唑蓝(MTTNVP-TNKS656说明书)检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；克隆形成实验检测放射敏感性；Western印迹检测相关蛋白的表达；双荧光素酶报告实验检测LncRNA CDKN2BAS和miR-627-3p的靶向关系。结果 与癌旁组织比较，肺癌组织中LncRNA CDKN2BAS mRNA表达明显升高，miR-627-3p mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与BEAS-Biolistic transformation2B细胞比较，肺癌细胞NCI-H1299、NCI-H2170、PNCI-H1975中LncRNA CDKN2BAS表达明显升高，miR-627-3p表达明显降低(P<0.05);低表达LncRNA CDKN2BAS或高表达miR-627-3p明显抑制NCI-H1299细胞增殖能力，明显促进了细胞凋亡和放射敏感性(P<0.05)。LncRNA CDKN2BAS靶向调控miR-627-3p表达(P<0.05),且下调miR-627-3p表达明显逆转低表达LncRNA CDKN2BAS对NCNavitoclax溶解度I-H1299细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响。结论 LncRNA CDKN2BAS通过靶向miR-627-3p调控NCI-H1299细胞的增殖、凋亡和放射敏感性。