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目的 在应用射频消融术治疗阵发性房颤（PAF）的患者中实施基础护理及综合护理干预措施，比较两种护理模式的干预效果，为临床治疗提供参考。方法 选取出天津市胸科医院2018年6月—2019年6月的108例实施射频消融术治疗的PAF患者作为研究对象，采用信封抽签的方式分为干预组和对照组selleck合成，每组各54例。干预组给予综合护理干预措施，对照组给予基础护理，比较两组患者心理状态及生活质量。结果 护理前，两组患者焦虑敏感指数（ASI）评分及贝克抑郁量表（BDI）评分比较差异无统计学意义（P>0.05）；护理后，干预组ASI-3及BDI评分低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。护理前，两组患者身体机能、社会功能、躯体角色、总体健康生活质量评分比较差异无统计学意义（P>0.05）；护理后，干预组各项生活质量评分高financing of medical infrastructure于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 射频消融术治疗会影响PAF患Adezmapimod者的心理状态及生活质量，而综合护理干预措施有针对性的对患者心理和生活等层面进行护理服务，减轻患者负面情绪，提高生活质量，值得临床推广应用。

背景：既往研究显示，沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(silent mating-type information regulator 2 homolog 1,SIRT1)-雷帕霉素机械靶蛋白(mechanistic target of rapamycin,mTOR)信号在骨关节炎进展中起重获悉更多要作用，大黄素对骨关节炎软骨细胞有一定的保护作用。目的：基于SIRT1-mTOR探究大黄素对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响。方法：体外分离培养大鼠软骨细胞，采用10 ng/mL的白细胞介素1β诱导构建体外骨关节炎细胞模型，以CCK-8法测定经0,20,40,80,120,160μmol/L的大黄素处理后的大鼠软骨细胞活力，选出合适大黄素作用浓度。将软骨细胞随机分为对照组、模型组、大黄素低剂量组、大黄素高剂量组、SIRT1抑制剂EX527组、大黄素高剂量+EX527组，除对照组外其余各组以10 ng/mL的白细胞介素1β诱导构建体外骨关节炎模型，同时以大黄素和EX527分组处理细胞后，用CCK-8法、Edu染色法及流式细胞术分别检测各组细胞增殖与凋亡情况；用试剂盒检测各组细胞活性氧相对含量、丙二醛与抗氧化酶超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平；免疫印迹检测各组细胞基质降解、凋亡与SIRT1-mTOR通路相关蛋白表达。结果与结论：(1)与对照组相比，模型组大鼠软骨细胞活力、Edu阳性率、超氧化物歧化酶与过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平、Bcl-2与SIRT1蛋白表达降低，凋亡率、活性氧相对含量、丙二醛水平、Bax与基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9蛋白表达及p-mTOR/mTOR升高(P <algae microbiome0.05)。与模型组相比，大黄素低、高剂量组上述各项指标呈相反变化(P <0.05);EX527组各指标水平与大黄素各组呈相反趋势(P <0.05)。(2)与大黄素高剂量组相比，大黄素高剂量+EX527组细胞活力、Edu阳性率、超氧化物歧化酶与过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平、Bcl-2与SIRT1蛋白表达降低，凋亡率、活性氧相对含量、丙二醛水平、Bax与基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9蛋白表达及p-mTOR/mTOR升高(P <0.05)。(3)结论：大黄素可通过激活SIhttps://www.selleck.cn/products/AZD1152-HQPA.htmlRT1-mTOR信号而抑制骨关节炎软骨细胞氧化应激，从而促进软骨细胞增殖并减轻其凋亡。

目的 观察盆底康复治疗良性妇科疾病行全子宫切除术患者的临床效果，进一步提升患者术后的康复质量。方法 选取2020年1月至2021年12月于本院就诊的110例良性妇科疾病行全子宫切除术的患者作为此次研究对象，按治疗措施的不同分为对照组、观察组，每组55例。对照组采用常规治疗，观察组采用盆底康复治疗，对比两组的治疗成果。结果 观察组患者的盆底肌张力、盆底肌纤维的肌力指标优于对照组（P <0.05）。在1 h尿垫试验量、盆底肌持续收缩时间、残余尿量以及尿失禁频率对比中，观察组均优于对照组（P <0.05）。盆底肌疲劳度对比，术后1周两组对比差异无统计学意义，但是术后6个月复查中，观察组优于对照组（P <0.05）。观察组患者在盆底不适、盆底功能以及盆腔泌Alisertib分子式尿功能量表评分方面优于对照组New microbes and new infections（P <0.05）。结论 针对良性妇科疾病行全子宫切除术患者实施盆底康GNE-140供应商复治疗的效果良好，有助于改善患者的盆底肌张力以及盆底肌疲劳度，降低尿失禁发生率。

目的 ：研究整合素αvβ6缺失细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)结合位点对结肠癌SW480细胞基因表达调控的影selleck AZD1152-HQPA响。方法：构建稳定转染β6基因结构的结肠癌SW480细胞（SW480β6）和缺失ERK2结合位点的缺失突变型β6转染的SW480细胞（SW480β6Del.mutant），并通过WestImmune repertoireern blot实验检测整合素αvβ6、总ERK(t-ERK)及磷酸化ERK(p-ERK)表达水平，通过Transwell实验检测整合素αvβ6缺失ERK2结合位点对SW480细胞侵袭能力的影响。通过RNA测序研究整合素αvβ6缺失ERK2结合位点对SW480细胞基因表达谱的影响，并对差异表达基因（DEGs）进行GO和KEGG功能富集分析。结果：SW480β6和SW480β6 Del.mutant细胞均高表达αvβ6，两者之间的t-ERK表达水平差异无统计学意义（P>0.05）,SW480β6 Del.mutant细selleckchem PLX3397胞p-ERK2水平较SW480β6细胞明显降低，且侵袭能力也明显下降（P<0.05）。通过RNA测序，在SW480β6Del.mutant细胞中共筛选出2249个DEGs，包括上调基因936个，下调基因1313个，DEGs显著富集在癌症通路、PI3K-AKT通路、MAPK通路、细胞与细胞因子受体互作方面。结论：整合素αvβ6通过αvβ6-ERK2直接连接提高ERK2的磷酸化水平，激活MAPK信号通路，促进结肠癌细胞侵袭。缺失整合素αvβ6-ERK2直接连接后，DEGs除富集于MAPK通路外，还富集于多条在结肠癌中具有重要作用的通路，提示在结肠癌中各种信号通路具有互补作用，多靶点药物对结直肠癌是一种有前景的治疗方式。

目的:探讨在产后压力性尿失禁患者中采取生物反馈电刺激联合康复训练的效果。方法:运用随机数表法将2021年9月至2022年9月期间本院收治的60例产后压力性尿失禁患者进行分组。对照组30例实行常规康复训练，观察组30例在对照组基础上采取生物反馈电刺激干预，两组均持续干预1个月。比较两组漏尿情况、Disaster medical assistance team盆底肌力以及生AZD2281体内实验剂量活质量。结果:两组干预前漏尿情况、盆底肌力以及生活质量比较(P>0.05);观察组干预后国际尿失禁问卷调查表(ICIQ-SF)各项评分均低于对照组(P<0.05);观察组干预后Ⅰ类肌纤维疲劳度、Ⅱ类肌纤维疲劳度低于对照组，Ⅰ类肌纤维肌电值、Ⅱ类肌纤维肌电值高于对照组(P<0.05);护理后，观察组生存质量简表(QOL-BREVE-822体外F)各项评分均比对照组高(P<0.05)。结论:生物反馈电刺激联合康复训练可改善产后压力性尿失禁患者漏尿症状，显著增强患者盆底肌力，促进患者产后康复，有助于生活质量的改善和提升。

背景 多发性骨髓瘤发病率长期居高不下，但目前关于磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/丝氨酸/苏氨酸激酶（AKT）信号通路和M2巨噬细胞极化促进多发性骨髓瘤发生进展的研究较少。目的 探讨M2巨噬细胞在多发性骨髓瘤患者中的表达及PI3K/AKT信号通路促进M2巨噬细胞极化的机制研究。方法 选取2021年10月—2022年4月于桂林医学院附属医院血液内科确诊的多发性骨髓瘤患者48例为试验组，选取同期健康志愿者（血液内科骨髓移植健康供selleck HPLC者）30名为对照组。取2组研究对象外周血并分离单个核细胞，流式细胞术检测M2巨噬细胞比例。采用细胞传代培养RPMI8226细胞，通过佛波酯分化培养单核巨噬细胞THP-1为巨噬细胞。根据实验需要将瘤细胞培养并采用siRNA转染沉默磷酸酶基因（PTEN）分成3组：空白组、siRNA-PTEN实验组、siRNA对照组；收集以上3组细胞培养基上清液加入巨噬细胞共培selleckchem养体系后分为4组：M0巨噬细胞组、瘤细胞上清液组、siRNA-PTEN上清液组、siRNA上清液组。采用Western blot实验检测多发性骨髓瘤细胞培养的空白组、siRNA-PTEN实验组、siRNA对照组的AKT、p-AKT、PI3K-p85、p-PI3K-p85蛋白表达水平。采用荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测多发性骨髓瘤细胞培养的空白组、siRNA-PTEN实验组、siRNA对照组的基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP9的mRNA表达水平。采用流式细胞术检测多发性骨髓瘤上清液共培养的M0巨噬细胞组、瘤细胞上清液组、siRNA-PTEN上清液组、siRNA上清液组M2巨噬细胞中特异性抗体CD163、CD206、F4/80表达水平。采用荧光定量PCR检测多发性骨髓瘤上清液共培养的M0巨噬细胞组、瘤细胞上清液组、siRNA-PTEN上清液组、siRNA上清液组M2巨噬细胞特异标志物精氨酸酶1(ARG-1)、白介素10(IL-10)的mRNA表达水平。结果 试验组M2巨噬细胞表达水平高于对照组（t=0.855,P<0.hepatoma upregulated protein001）。siRNA-PTEN实验组中p-AKT/AKT、p-PI3K-p85/PI3K-p85蛋白表达水平均高于空白组和siRNA对照组（P<0.05）。siRNA-PTEN实验组中MMP2、MMP9的mRNA表达水平均高于空白组和siRNA对照组（P<0.05）。siRNA-PTEN上清液组M2巨噬细胞特异性抗体CD163+F4/80、CD206+F4/80表达水平高于瘤细胞上清液组和siRNA上清液组（P<0.05）。siRNA-PTEN上清液组M2巨噬细胞特异标志物ARG-1、IL-10的mRNA表达水平高于瘤细胞上清液组和siRNA上清液组（P<0.05）。结论 多发性骨髓瘤患者中M2巨噬细胞表达上调，多发性骨髓瘤细胞可通过激活PI3K/AKT信号通路促进M2巨噬细胞极化，调控骨髓瘤细胞微环境。

研究背景肾细胞癌(Renal cell carcinoma,RCC)是最常见的恶性肿瘤之一,也是迄今为止泌尿系肿瘤中最致命的。其发病原因包括肥胖、高血压、吸烟、遗传等。最常见的病理类型为肾透明细胞癌(clear cell Renal cell carcinoma,ccRCC)。由于影像学的进步,肿瘤的检测不断改善,越来越多的早期肾癌患者被发现并得到有效的治疗。但是,仍有20%-30%的患者在诊断时就发现了转移,即转移性肾细胞癌(metastatic renal cell carcinoma,mRCC)。此外,大约 20%-40%的患者在手术后出现复发及转移。由于RCC对放疗及化疗均不敏感,这无疑增加了治疗的难度,导致了晚期肾癌患者预后不佳。虽然目前已经开发了索拉非尼、舒尼替尼及抑制血管生成的酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitor,TKI)等靶向治疗药物,但是,它们对于患者生存期的改善仍十分有限。这需要我们不断探索、研究晚期肾癌临床治疗这一急需解决的重要难题。微量元素对人体健康至关重要,在机体构成、生理功能维持等方面起着重要的作用。正常情况下,人体的微量元素处于平衡状态。但是,当某种原因导致这种平衡被破坏时,此时多个器官未处在最佳状态,可导致多种疾病的发生。比如硒元素缺乏可导致克山病、甲状腺功能减退等疾病,锰元素含量过多可导致红细胞增多症、肝硬化等疾病。此外,流行病学显示微量元素紊乱与多种肿瘤相关,如乳腺癌、前列腺癌等。前期工作中我们课题组同学已对健康人及肾癌患者血清微量元素的含量进行了测试及分析,发现晚期肾癌患者血清硒的含量低于正常人及早期肾癌患者。因此,我们考虑硒元素可能影响肾细胞癌生物学行为,补充硒元素可能对晚期肾癌患者治疗具有一定帮助。本研究应用硒元素最常见形式亚硒酸盐GDC-0068生产商,验证亚硒酸钠对RCC细胞生物学行为的影响并初步研究了亚硒酸钠对RCC细胞的作用机制,最后验证了亚硒酸钠对裸鼠肾细胞癌移植瘤模型的生长是否具有抑制作用及对裸鼠有无明显毒副作用,希望对晚期肾癌患者的治疗提供一定的帮助。第一部分 亚硒酸钠对肾细胞癌细胞生物学行为的影响研究目的:通过体外实验验证亚硒酸钠对于RCC细胞增殖、凋亡、转移的影响,明确亚硒酸钠对于RCC细胞生物学行为的影响。研究方法:不同浓度的亚硒酸钠(0、2.5uM、5uM、10uM、20uM、40uM)处理RCC细胞系786-O细胞及ACHN细胞,通过光学显微镜观察作用不同时间后细胞形态及数量的变化。通过MTT实验、克隆形成实验验证亚硒酸钠对于RCC细胞增殖的影响。通过流Orthopedic biomaterials式细胞仪观察亚硒酸钠对RCC细胞凋亡的影响。通过细胞划痕实验、Transwell实验验证亚硒酸钠对于RCC细胞转移能力的影响。研究结果:通过光学显微镜观察,我们发现随着亚硒酸钠浓度的升高及作用时间的延长,细胞数量减少,细胞形态萎缩,细胞质颜色变深。通过MTT实验我们发现亚硒酸钠可有效抑制RCC细胞增殖活性,具有时间依赖性和浓度依赖性,克隆形成实验显示亚硒酸钠可抑制RCC细胞的克隆形成能力,流式细胞技术显示亚硒酸钠可引起RCC细胞凋亡,随着浓度的增高,其凋亡的比例增加。细胞划痕实验及Transwell实验显示亚硒酸钠抑制RCC细胞的迁移及侵袭。以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:亚硒酸钠对于RCC细胞的增殖具有抑制作用,并引起RCC细胞的凋亡。此外,亚硒酸钠对于RCC细胞的转移能力具有一定的抑制作用。第二部分 亚硒酸钠促进肾细胞癌细胞凋亡并抑制其转移分子机制研究研究目的:探讨亚硒酸钠促进RCC细胞凋亡并抑制其转移的分子机制。研究方法:为了检测亚硒酸钠是否通过内源性途径引起RCC细胞凋亡,我们应用荧光分光光度计检测了线粒体膜电位、活性氧含量的变化,进一步通过Real-time PCR检测凋亡相关mRNA表达水平的变化,Western Blot检测凋亡相关蛋白含量的变化。我们通过Real-time PCR及Western Blot检测肿瘤细胞转移相关MMP-9、E-cadherin、VEGF的mRNA表达水平及蛋白含量的变化。应用NAC调节ROS的含量验证亚硒酸钠是否通过ROS引起RCC细胞凋亡并抑制其转移。String数据库寻找ROS互作蛋白,并进一步通过Western Blot检测不同浓度亚硒酸钠作用于RCC细胞时NF-κB通路相关蛋白含量的变化。最后我们应用NAC调节ROS含量,通过Western Blot及细胞免疫荧光实验观察亚硒酸钠是否通过ROS影响RCC细胞NF-κB通路。研究结果:我们发现随着亚硒酸钠浓度的升高,线粒体膜电位(MMP)不断降低,细胞活性氧(ROS)水平不断升高。这提示亚硒酸钠通过内源性凋亡途径引起RCC细胞凋亡。内源性凋亡相关mRNA(Bcl-2、Bax、cIAP、xIAP)水平的变化及相关蛋白(Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase3)含量的变化更加充分说明亚硒酸钠通过内源性凋亡途径引起RCC细胞凋亡。我们发现随着亚硒酸钠浓度增加,E-Cadherin的mRNA表达水平及蛋白含量升高,而MMP-9的mRNA表达水平及蛋白含量降低。它们与上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关。此外,MMPs 与肿瘤微血管形成相关,微血管生成在肿瘤转移中起到重要作用,故同时检测了微血管形成相关VEGF的mRNA表达水平及蛋白含量变化,发现随着亚硒酸钠浓度的增加,VEGF的mRNA表达水平及蛋白含量下降。当我们向亚硒酸钠处理的RCC细胞加入活性氧清除剂NAC时,发现亚硒酸钠引起RCC细胞凋亡及对转移的抑制程度降低,说明亚硒酸钠通过ROS引起RCC细胞凋亡并抑制其转移。String数据库提示ROS与NF-κB通路相关蛋白可能存在相互作用。通过进一步实验,我们发现亚硒酸钠抑制NF-κB通路相关蛋白(P65及IκB-α)磷酸化,并抑制p-p65由细胞质进入细胞核,进而促进RCC细胞凋亡并抑制其转移,NAC的加入可以减轻亚硒酸钠对NF-κB通路的抑制。结论:亚硒酸钠通过内源性凋亡途径引起RCC细胞的凋亡,通过影响EMT及微血管形成相关蛋白、mRNA水平影响RCC细胞的转移能力。亚硒酸钠可通过ROS介导NF-κB通路的抑制进而促进RCC细胞的凋亡并抑制其转移。第三部分亚硒酸钠对肾癌移植瘤模型的影响研究目的:探讨亚硒酸钠对肾癌移植瘤模型的影响。研究方法:我们构建BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,分为亚硒酸钠组及对照组。待肿瘤生长至一定体积后,亚硒酸钠组应用亚硒酸钠按2mg/kg每两天腹腔注射一次,对照组应用相同剂量的生理盐水。注射药物后每3天用游标卡尺测量移植瘤的长径和短径,并对小鼠进行称重。2周后处死小鼠,测量肿瘤的重量,TUNEL染色检测肿瘤凋亡,肺组织行病理切片检查,Western Blot实验检测凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3、转移相关蛋白E-Cadherin、VEGF及NF-κB相关蛋白p-p65含量的变化。研究结果:亚硒酸钠组中肿瘤体积及重量低于对照组,两组小鼠体重无明显统计学差异。TUNEL实验发现亚硒酸钠可引起小鼠移植瘤凋亡。两组裸鼠肺组织病理切片无明显异常,未发现明显转移瘤,无明显间质性肺炎、肺纤维化等药物毒性改变。Western Blot实验检测显示亚硒酸钠可引起移植瘤细胞Cleaved-Caspase-3、E-Cadherin表达含量升高,VEGF表达含量降低,亚硒酸钠降低了移植瘤细胞NF-κB通路相关蛋白p-p6Belumosudil5的含量。结论:亚硒酸钠可抑制小鼠移植瘤的生长,并引起移植瘤的凋亡。亚硒酸钠可引起凋亡、转移、NF-κB通路相关蛋白含量的变化。两组裸鼠体重无明显统计学差异及肺组织切片无明显异常提示亚硒酸钠对小鼠无明显毒副作用。

研究背景我国恶性肿瘤发病率高、且呈现逐年上升的趋势。近年来研究发现,肿瘤的发生常伴随着免疫微环境的异常。肿瘤免疫微环境组成复杂,其中微环境内的代谢产物和细胞因子等能够重塑免疫细胞的表型与功能,抑制其抗肿瘤能力,甚至发挥促肿瘤作用,导致肿瘤免疫逃逸。因此,近些年来免疫治疗已逐渐成为临床肿瘤综合治疗的重要方案之一。肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是肝脏最常见的恶性肿瘤,在全球的恶性肿瘤发生率中占第六位,位居世界范围内癌症致死率第三位,严重危害人类健康,且对免疫治疗响应性差。肝脏富含巨噬细胞,肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)是肝癌免疫微环境的重要组成部分,具有高度的可塑性和异质性,在决定肝癌发生发展和临床免疫治疗响应性中发挥重要作用。因此,进一步揭示TAMs表型和功能的调控机制,将为阐明HCC发病机理、发现新的肿瘤干预靶点提供实验依据。巨噬细胞具有表型可塑性和功能多样性,分为M1型经典活化的巨噬细胞(classically activated macrophage)和 M2 型替代性活化的巨噬细胞(alternatively activated macrophage)以及两者之间的众多过渡类型。同样,TAMs也可以分为M1型和M2型。其中,M2型TAMs与肿瘤的发生发展和较差的患者预后密切相关。众多代谢途径参与调控巨噬细胞的表型分化和功能重塑,例如脂质代谢重编程在其中就发挥重要作用。已有研究表明M1型巨噬细胞主要依靠有氧糖酵解消耗葡萄糖以及消耗谷氨酰胺来产生ATP,而M2型巨噬细胞则主要依赖脂肪酸氧化(fatty acid oxidation,FAO)作为ATP来源。线粒体作为细胞有氧呼吸的主要场所,参与调节TAMs的脂质代谢水平并影响其功能的发挥,进而影响肿瘤的发生发展。然而,越来越多的证据表明,对于细胞内长链脂肪酸的氧化还需要另一种细胞器,即过氧化物酶体的作用。长链脂肪酸经过过氧化物酶体的初步氧化剪切后,再将获得的短链脂肪酸以酰基辅酶A的形式转输到线粒体中进行进一步的β循环氧化。然而,目前关于过氧化物酶体在巨噬细胞表型和功能调控中的作用尚不明确。本课题以巨噬细胞作为研究对象,发现IL-4诱导的M2型巨噬细胞中脂质富集水平发生上调,且这样的脂质异常富集与线粒体和过氧化物酶体的FAO密切相关。由于TAMs脂质代谢异常与患者更差的预后相关,所以我们进一步以TAMs为研究对象,通过体外实验以及肝癌患者的样本分析后验证了 M2型TAMs中亦存在脂质异常富集的现象,并且线粒体和过氧化物酶体FAO代谢与TAMs的M2表型的维持有关。综上,我们研究了线粒体和过氧化物酶体介导的脂肪酸氧化在调控M2型巨噬细胞与TAMs的脂质水平、表型和功能中的作用,为阐明巨噬细胞代谢重塑机制、寻找干预TAMs促肿瘤功能的潜在靶点提供了新的依据。研究方法与结果1.M2型巨噬细胞中脂质富集水平上调脂质代谢在巨Biofertilizer-like organism噬细胞表型和功能调控中发挥重要作用,我们首先以mIL-4(20ng/ml)刺激小鼠的巨噬细胞系RAW264.7,或以hIL-4和hIL-13(20ng/ml)刺激人的单核细胞系THP1后,RT-qPCR验证RAW264.7细胞中M2极化相关标志分子Arg1和Tgf-β和THP1细胞中的CD206、TGF-β和IL-10的表达上调,确定成功诱导M2样巨噬细胞表型。利用中性脂质染料BODIPY染色后,荧光显微镜观察和流式细胞术检测胞内脂质富集情况,结果显示与对照细胞相比,两种M2型巨噬细胞中脂质富集水平均显著上调。同时,以IL-4诱导小鼠原代巨噬细胞(小鼠骨髓来源的巨噬细胞BMDMs和腹腔巨噬细胞PEMs),RT-qPCR验证其M2表型,流式细胞术检测脂质富集水平,结果显示M2型BMDMs和PEMs中脂质富集水平显著高于未selleck激酶抑制剂刺激组细胞。上述结果提示,M2型巨噬细胞中脂质富集水平显著上调。2.M2型巨噬细胞中线粒体和过氧化物酶体FAO相关基因表达上调线粒体和过氧化物酶体是参与细胞FAO代谢的主要细胞器,因此我们进一步检测了 M2型巨噬细胞中线粒体和过氧化物酶体FAO通路相关基因的表达情况。RT-qPCR结果显示,经IL-4刺激的BMDMs和PEMs中线粒体FAO代谢相关酶Cpt1a、Crat和Acads和过氧化物酶体FAO代谢相关酶Acot4、Acot8、Ehhadh和Acox-1的表达均较未刺激组细胞上调。Western Blot实验在蛋白水平进一步证明了 IL-4刺激的PEMs中线粒体FAO限速酶CPT1A和过氧化物酶体FAO限速酶ACOX1均明显上调表达。这些结果提示M2型巨噬细胞中线粒体和过氧化物酶体的FAO通路可能被激活。3.阻断线粒体和过氧化物酶体FAO通路进一步上调M2型巨噬细胞中脂质富集水平为进一步验证线粒体和过氧化物酶体FAO代谢通路在M2型巨噬细胞脂质代谢调控中的作用,我们利用线粒体FAO限速酶CPT1A的抑制剂Etomoxir和过氧化物酶体FAO限速酶ACOX1的抑制剂TDYA,分别处理IL-4刺激的BMDMs和PEMs,BODIPY染色、流式细胞术检测细胞内脂质富集情况。结果显示,Etomoxir和TDYA处理均可显著上调BMDMs和PEMS中脂质富集水平,提示线粒体和过氧化物酶体可能参与了M2型巨噬细胞的脂质分解代谢。4.干扰线粒体和过氧化物酶体FAO通路能够抑制M2型巨噬细胞表型和功能脂质代谢在巨噬细胞表型调控中发挥重要作用,为进一步明确线粒体和过氧化物酶体的FAO通路是否参与调控M2型巨噬细胞的极化表型。我们检测了 Etomoxir和TDYA处理对巨噬细胞表型的影响,RT-qPCR结果显示Etomoxir和TDYA处理显著下调IL-4刺激的BMDMs和PEMs中M2型巨噬细胞标志分子Arg1和Ym1的表达水平。流式细胞术数据也证明了 Etomoxir和TDYA处理能够下调BMDMs和PEMs中M2样表型分子的表达。上述结果提示,线粒体和过氧化物酶体的FAO通路可能参与调控M2型巨噬细胞的表型。众多研究显示,M2型巨噬细胞在肿瘤进程中发挥促肿瘤的作用。因此,我们进一步探究Etomoxir和TDYA处理后的M2型巨噬细胞是否还具有促进肝癌细胞增殖的功能。分别收取Etomoxir和TDYA处理后的M2型巨噬细胞上清,刺激小鼠肝癌细胞系Hepa1-6。CCK8细胞增殖实验数据显示,与对照M2型巨噬细胞来源的上清相比,Etomoxir和TDYA处理在一定程度上抑制了 Hepa1-6细胞的增殖。上述结果初步提示,干扰M2型巨噬细胞线粒体和过氧化物酶体FAO通路能够抑制其促肿瘤表型。5.肝癌相关巨噬细胞中脂质明显富集肿瘤微环境能够重塑TAMs的表型和功能,介导肿瘤免疫逃逸,促进疾病进程。已知TAMs主要极化为促肿瘤的M2表型,因此课题进一步验证了 TAMs中脂质富集情况。首先建立了肿瘤细胞与巨噬细胞的体外共培养体系,BODIPY染色、荧光显微镜观察和流式细胞术结果显示分别与人的肝癌细胞系Huh7或小鼠的肝癌细胞系Hepa1-6细胞共培养的THP1和RAW264.7细胞中脂质的富集水平显著上调。RT-qPCR和流式细胞术验证与Hepa1-6共培养的小鼠原代巨噬细胞(小鼠骨髓来源的巨噬细胞BMDMs和腹腔巨噬细胞PEMs)M2表型相关标志物Arg1和Ym1表达上调,同时用流式细胞术检测脂质富集水平,结果显示与肝癌细胞共培养后的BMDMs和PEMs中脂质富集水平显著高于未刺激组细胞。同时,借助于拉曼光谱检测技术结合免疫荧光染色对肝癌患者癌与癌旁组织中TAMs的脂质水平进行了定量分析。结果发现,与癌旁组织巨噬细胞相比,肝癌组织TAMs的脂质富集水平显著增加。上述结果提示肿瘤微环境能够上调巨噬细胞中脂质富集水平。6.线粒体和过氧化物酶体参与调控肝癌相关巨噬细胞的FAO代谢途径BODIPY标记的中性脂质主要定位于脂滴中,而脂滴与其他细胞器互作参与细胞内脂质代谢调控,因此我们观察了 TAMs中脂质与线粒体、过氧化物酶体的定位情况。将THP1细胞与Huh7细胞共培养后,激光共聚焦显微镜观察显示,脂质的BODIPY荧光与MitoTracker Deep Red标记的线粒体、特征性膜蛋白PMP70标记的过氧化物酶体存在共定位,提示线粒体和过氧化物酶体可能参与了 TAMs的脂质代谢。为明确线粒体和过氧化物酶体FAO通路在TAMs中的变化,我们进一步检测了肝癌细胞共培养对BMDMs和PEMs中FAO相关基因表达的影响,RT-qPCR结果显示肝癌细胞共培养能够显著上调BMDMs和PEMs中线粒体FAO代谢相关酶Cpt1a、Crat和Acads以及过氧化物酶体FAO代谢相关酶Acot4、Acot8、Ehhadh和Acox1的表达。同时蛋白水平检测发现PEMs在与Hepa1-6共培养后线粒体FAO限速酶CPT1A和过氧化物酶体FAO限速酶ACOX1均表达上调。上述结果提示,TAMs中线粒体和过氧化物酶体的FAO通路被激活。7.阻断线粒体和过氧化物酶体FAO通路进一步促进肝癌相关巨噬细胞中的脂质富集为进一步验证线粒体和过氧化物酶体FAO通路在TAMs脂质代谢中的作用,Etomoxir和TDYA处理与肝癌细胞共培养的BMDMs和PEMs细胞,BODIPY染色、流式细胞术检测脂质富集情况。结果显示,Etomoxir和TDYA处理能够显著上调与肝癌细胞共培养的BMDMs和PEMs的脂质富集水平,提示线粒体与过氧化物酶体FAO通路均参与TAMs中脂质代谢过程。8.抑制线粒体和过氧化物酶体FAO通路调控TAMs表型为验证线粒体和过氧化物酶体FAO通路在TAMs的表型重塑中的作用,我们检测了 Etomoxir和TDYA处理对TAMs表型的影响。结果显示,经Etomoxir和TDYA处理后的BMDMs来源的TAMs中M2表型标志分子表达明显下调,提示线粒体和过氧化物酶体FAO通路均参与了 TAMs细胞M2样表型重塑过程。研究结论与意义脂质代谢在巨噬细胞表型和功能重塑中发挥重要的调控作用,而FAO通路为M2样巨噬细胞能量的主要来源之一。本课题以IL-4活化的M2型巨噬细胞和TAMs为研究对象,检测了上述巨噬细胞中脂质富集以及线粒体和过氧化物酶体FAO通路的变化,初步探索了线粒体和过氧化物酶体FAO通路在巨噬细胞表型和功能调控中的作用。Rapamycin分子量研究发现M2型巨噬细胞和TAMs中脂质富集增加伴随线粒体和过氧化物酶体FAO通路相关基因的表达上调,而阻断线粒体和过氧化物酶体FAO通路能够进一步上调巨噬细胞中脂质富集水平、同时抑制M2样巨噬细胞表型。我们的研究为阐明肿瘤微环境中巨噬细胞代谢重塑机制提供了新的实验依据,为寻找巨噬细胞免疫治疗相应靶点提供了新思路。

目的 探讨中青年原发性高血压患者肾素和醛固酮水平与短时血压变异性的相关性。方法 回顾性分析2020年7月～2022年12月间就诊于甘肃省人民医院的65岁以下原发性高血Ferrostatin-1使用方法压患者192例，检测肾功能symbiotic associations、尿酸、血脂、空腹血糖、糖化血红蛋白（HbA1c）、立位血浆肾素Y-27632浓度、醛固酮浓度水平，并行24 h动态血压监测。以醛固酮浓度/肾素浓度（ARR）的中位数（ARR=11.81）为分界线，分为高ARR组（>ARR中位数者）和低ARR组（

目的：分析洛铂与吡柔比星载药微球肝动脉栓塞化疗治疗不可切除的肝癌的临床疗效。方法：选择2018年3月～2019年5月不可手术切除的肝癌患者94例以随机数字表法分为对照组和观察组各47例。对照组采用吡柔比星载药微球肝动脉栓塞化疗治疗，观察组采用洛铂载药微球肝动脉栓塞化疗治疗，对比两组近期疗效，甲胎蛋白(AFP)水平、不良反应发生情况，生存情况等。结果：观察组客观缓解率为44.68%,疾病控制率为93.62%,高于对照组的31.91%、74.47%,AFP低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。观察组贫血发生率为4.26%、血小板降低2.13%、恶心8.51%、肝功Renewable lignin bio-oil能异常4.26%,低于对照组的23.40%、34.04%、23.4获悉更多0%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2年、3年观察组生存INCB28060率分别为65.96%、53.19%,高于对照组的51.06%、38.30%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：洛铂载药微球肝动脉栓塞化疗治疗不可切除的肝癌效果确切，近期疗效好，并发症少，可提高患者生存周期。