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目的:探讨MiR-155通过对HuR的调控参与结肠癌细胞转移的机制。方法:研究使用HCT-116结肠癌细胞系，分为miR-155模拟物和miR-155抑制剂、miRNA模拟物阴性对照和miRNA抑制物IACS-010759供应商阴性对照组。MTT、伤口愈合试验、菌落形成测定、细胞周期分析和流式细胞术测定检测细胞活力、周期、迁移和凋亡。qPCR和蛋白质印迹法测量细胞中细胞miR-155的表达水平，蛋白质印迹法测量细胞中细胞HuR的表达水平，Upper transversal hepatectomy荧光素酶报告基因测定相关靶点。结果:与对照组比较，用miR-155模拟物转染后，miR-155水平升高；转染miR-155模拟物72h后细胞活力增加，菌落数增加，miR-155模点击此处拟物增加了S期细胞的百分比，miR-155模拟物抑制结肠癌细胞的凋亡，转染miR-155模拟物的细胞的迁移率增加，明确miR-155模拟物促进了结肠癌细胞的迁移。用miR-155抑制剂转染后，结果相反。用miR-155抑制剂转染后HuR的mRNA水平降低，转染miR-155模拟物后，HuR的mRNA水平升高。荧光素酶报告基因测定miR-155与HuR的3′UTR结合，并且HuR是miR-155的直接靶标。结论:结果表明miR-155促进结肠癌细胞增殖，增强其集落形成能力，促进其细胞周期进程，抑制细胞凋亡，促进了结肠癌细胞的迁移。HuR被确定为miR-155的新靶点。

我国是世界上最大的猪肉生产国和消费国,生猪饲养量和猪肉消费量约占世界总量的50%。随着人们生活水平的提高,对肉品质的要求也逐渐提高。因此,提高猪肉的品质,明确影响肉质的分子机制引起了研究关注。肌纤维类型的组成决定了肌肉组织的整体生化和功能SCH772984核磁特性,进而决定了鲜肉的质量。本团队前期对猪快慢肌纤维进行高通量测序,筛选并初步验证了circMYLK4可作为猪骨骼肌快/慢肌纤维的新型调节因子。因此,明确circMYLK4的分子机制对提高猪肉的质量具有重要意义。本研究通过转录组、蛋白组、磷酸化蛋白组和能量代谢组联合分析明确了circMYLK4在肌肉发育中的功能,并在猪骨骼肌卫星细胞中利用分子生物学技术证明了circMYLK4对肌细胞代谢的影响。进一步通过多聚体分析、双荧光素酶报告实验、RNA pull-down及RIP等方法阐明了circMYLK4的作用机制。最后在小鼠骨骼肌中外源注射circMYLK4-AAV明确circMYLK4功能的保守性。获得了以下主要结果:1.ciResearch Animals & AccessoriesrcMYLK4抑制猪骨骼肌糖酵解过程,促进氧化磷酸化过程。利用转录组、蛋白组及磷酸化蛋白组联合分析发现,过表达circMYLK4后上调基因主要富集到脂肪酸代谢,下调基因主要富集到糖酵解等过程。进一步分析发现circMYLK4不影响葡萄糖代谢关键酶HK2的表达,而是抑制糖原分解关键酶PYGM及PGM1的表达,从而抑制糖酵解过程。同时,circMYLK4促进了脂肪酸氧化、TCA循环关键基因以及线粒体电子传递链相关基因的表达。与此一致,能量代谢组发现,糖酵解中间代谢产物显著降低,TCA循环中间代谢产物显著升高。此外,对肌肉收缩相关基因分析发现,慢肌纤维标志基因MYH7、TNNI1、TNNT1及TNNC1的表达升高,快肌纤维标志基因MYH4及TNNT3的表达降低。2.circMYLK4抑制猪肌卫星细胞糖酵解过程,增强线粒体代谢。猪骨骼肌卫星细胞过表达circMYLK4显著抑制糖酵解关键基因的m RNA及蛋白水平(P<0.05),显著降低细胞中的乳酸含量(P<0.05)。进一步发现circMYLK4显著促进了脂肪酸氧化、TCA循环关键基因的m RNA及蛋白水平(P<0.05),显著增加细胞中的琥珀酸含量(P<0.05)。此外,线粒体氧化磷酸化关键基因的m RNA及蛋白水平显著增加(P<0.05),细胞中ATP含量显著上升(P<0.05),线粒体活性增强。3.circMYLK4既不编码多肽也不吸附miRNAs,而是与蛋白CACNA2D2结合。生物信息学发现circMYLK4包含三个ORF,通过多聚体分析发现circMYLK4主要在单组分中富集,表明其不具有编码能力。接下来通过RNA pull-down富集circMYLK4结合的miRNA,通过累积分布曲线及双荧光素酶实验发现富集前四的miRNA均不能与circMYLK4结合,进一步通过AGO2免疫沉淀发现circMYLK4不能与miRNA结合。通过RNA pull-down富集与circMYLK4结合的蛋白质,通过WB及RIP证明了钙离子通道DHPR的辅助亚基CACNA2D2可以与circMYLK4结合。4.CACNA2D2参与circMYLK4调控的钙稳态。猪骨骼肌卫星细胞过表达CACNA2D2显著促进糖酵解及线粒体氧化磷酸化过程。MitoTracker染色、线粒体拷贝数及细胞内ATP水平的增加表明CACNA2D2增强了线粒体代谢。深入分析蛋白组中钙信号相关基因发现,circMYLK4抑制了钙释放通道RYR1的蛋白水平,显著降低钙离子结合蛋白PVALB的蛋白水平(P<0.05),显著增加线粒体MCU的蛋白水平(P<0.05)。通过钙离子荧光探针发现circMYLK4降低了细胞质中的钙离子浓度,CACNA2D2可恢复circMYLK4抑制的钙离子浓度(P<0.05)。此外,CACNA2D2可抵消circMYLK4对糖原分解关键酶PHKB及PHKG1的抑制作用(P<0.05)。5.circMYLK4促进小鼠快肌纤维向慢肌纤维转化。通过对circ Atlas 3.0数据库中猪、小鼠和人类MYLK4产生的环状RNA分析发现,该数据库未发现猪MYLK4基因产生的circRNA,进一步发现小鼠mmu-Mylk4＿0004和人类hsa-MYLK4＿0016与circMYLK4序列高度相似,表明circMYLK4是一个新型保守的circRNA。外源circMYLK4-AAV注射小鼠腓肠肌发现,circMYLK4显著增加慢肌标志基因MYH7的蛋白和m RNA水平(P<0.05),显著抑制快肌标志基因MYH4的蛋白和m RNA水平(P<0.05)。H&E及免疫荧光染色表明circMYLK4减小了肌纤维横截面积,增加了慢肌纤维比例。综上所述,selleck抑制剂本研究发现circMYLK4通过与CACNA2D2结合,降低了细胞质中钙离子浓度,从而抑制了糖原分解的关键酶PHK及PYGM的活性,进而使糖酵解过程受到抑制。另一方面,circMYLK4通过促进脂肪酸氧化,增强了三羧酸循环及线粒体氧化磷酸化。此外,本研究还发现circMYLK4高度保守,可促进小鼠快肌纤维向慢肌纤维转化。因此,circMYLK4作为猪骨骼肌快/慢肌纤维的新型调节因子对提高猪肉的质量具有重要意义。

目的 探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞HK-2氧化应激、炎症、凋亡及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的影响。方法 将ACE2慢病毒转染HK-2细胞，按照实验需要分为常氧组(Control组)、缺氧复氧模型组(H/R组)、缺氧复氧转染阴性对照慢病毒组(H/R-NC组)和缺氧复氧转染ACE2慢病毒组(H/R-ACE2组)。细胞经H/R处理后，通过CCK-8法检测细胞活力；RT-PCR及ELISA法检测炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平；比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)表达水平；Western blotting法检测胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、Nrf2、HO-1的蛋白水平。采用Nrf2抑制剂ML385以及HO-1抑制剂SnPPIX抑制Nrf2/HO-1通路，Western blotting法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax、Nrf2、HO-1的蛋白表达水平变化，比色法检测SOD和MDA表达变化。结果 与Control组相比，H/R组细胞活力降低(t=7.58,P<0.001),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均增加(t_(MDA)=11.08,P_(MDA)<0.001;t_(PCR-IL-6)=5.82,P_(PCR-IL6)<0.001;t_(PCR-TNF-α)=7.69,P_(PCR-TNF-α)<0.001;t_(PCR-IL-1β)=4.80,P_(PCR-IL-1β)=0.001;t_(ELISA-IL-6)=3更多4.11,P_(ELISA-IL-6)<0.001;t_(ELISA-TNF-α)=14.12,P_(ELISA-TNF-α)<0.001;t_(ELISA-IL-1β)=9.63,P_(ELISA-IL-1β)<0.001;t_(Caspase-3)=2.73,P_(Caspase-3)=0.026;t_(Bax)=27.75,P_(Bax)<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平下降(t_(SOD)=7.74,P_(SOD)<0.001;t_(Bcl-2)=75.49,P_(Bcl-2)<0.001;t_(ACE2)=11.41,P_(ACE2)<0.001)。与H/R组相比，H/R-ACE2组细胞活力增加(t=3.61,P=0.002),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均下降(t_(MDA)=6.15,P_(MDA)<0.001;t_(PCR-IL-6)=3.34,P_(PCR-IL-6)=0.006;t_(PCR-TNF-α)=3.65,P_(PCR-TNF-α)=0.007;t_(PCR-IL-1β)=4.06,P_(PCR-IL-1β)=0.004;t_(ELISA-IL-6)=14.62,P_(ELISA-IL-6)<0.001;t_(ELISA-TNF-α)=10.42,P_(ELISA-TNF-α)<0.001;t_(ELISA-IL-1β)=8.65,P_(ELISA-IL-1β)<0.001;t_MLN8237分子量(Caspase-3)=3.74,P_(Caspase-3)=0.006;t_(Bax)=30.52,P_(Bax)<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平增加(t_(SOD)=3.58,P_(SOD)=0.007;t_(Bcl-2)=63.86,P_(Bcl-2)<0.001;t_(ACE2)=58.72,P_(ACE2)<0.001),Nrf2/HO-1信号通路被激活蛋白水平增加(t_(Nrf2)=44.55,P_(Nrf2)<0.001;t_(HO-1)=14.19,P_(HO-1)<0.001)。然而ML385和SnPPIX处理会抑制ACE2基因过表达在H/R中HK-2细胞的保护作用(F_(Bax)=11.02,P_(Bax)=0.003;F_(Bcl-2)=21.48,P_(Bcl-2)<0.001;F_(Caspase-3)=20.80,P_(Caspase-3)<0.001;F_(SOD)=133.49,P_(SOD)<0.001;F_(MDA)=14.06,P_(MDA)implant-related infections=0.001)。结论 ACE2在HK-2细胞缺氧复氧损伤中具有抑制氧化应激、调节炎症、改善凋亡的作用，Nrf2/HO-1信号通路发挥重要作用。

目的 探讨淋巴瘤患者在行化FUT-175学治疗(简称“化疗”)期间采用前瞻性Mediation analysis护理结合心理护理对其心理状态及营养状况的影响。方法 以2021年1月至2022年12月厦门大学附属第一医院收治的92例处于化疗期间的淋巴瘤患者作为研究对象，按照不同的护理干预方法将其分为对照C59分子式组和观察组。46例对照组患者采用常规护理，46例观察组患者接受前瞻性护理结合心理护理。比较2组在干预前和干预3周后的心理状态、自我效能感、希望水平、营养状况及不良反应发生率。结果 干预3周后，2组间焦虑自评量表评分和抑郁自评量表评分均低于同组干预前(P均<0.05),且观察组均低于对照组(P均<0.05);2组间一般自我效能感量表评分和成人特质希望量表评分均高于同组干预前(P均<0.05),且观察组均高于对照组(P均<0.05);2组间转铁蛋白、前白蛋白和视黄醇结合蛋白水平均高于同组干预前(P均<0.05),且观察组均高于对照组(P均<0.05)。观察组的不良反应总发生率较对照组更低(P<0.05)。结论 前瞻性护理结合心理护理可改善淋巴瘤患者于化疗期间的负性心理状态及营养状况，提高其自我效能感和希望水平，降低不良反应发生率。

研究背景:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)导致缺血性心脏病、卒中和外周动脉疾病。在过去的20年里,与AS相关的疾病发病率和病死率在中国大幅上升。AS发生机制目前研究得仍不是特别清楚,涉及血脂异常、炎症、氧化应激、免疫紊乱等。辛伐他汀是防治AS常用的调节血脂药物Medial medullary infarction (MMI),但是其半衰期较短、生物利用度低,且具有肌肉症状、肝脏毒性等不良反应。氧化应激是AS的主IACS-10759要发病机制之一,然而小分子抗氧化剂并没有表现出体内防治AS的积极作用。表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechingallate,EGCG)是绿茶中的天然多酚化合物,具有抗氧化、抗炎症、抗血栓、抗血管增生、抗动脉硬化等多种心血管保护作用,但是生物利用度低、稳定性差,限制了它的应用。为了解决辛伐他汀和EGCG生物利用度低、稳定性差的缺点,我们试图构建一种运载辛伐他汀和EGCG和靶向巨噬细胞的脂质体纳米颗粒(SE-LNPs),提高这两种药物的生物利用度及稳定性。本研究旨在探究此脂质体纳米颗粒对AS的作用以及具体作用机制,并为从靶向巨噬细胞的角度治疗AS的临床转化提供实验室依据。目的:开发一种稳定的、可静脉注射的运载辛伐他汀和EGCG的脂质体纳米颗粒,发挥降脂、抗氧化、抗凋亡、抗炎和M2极化的多功能作用,达到靶向巨噬细胞治疗AS的目的。方法:本研究以辛伐他汀(SIM)为模型药,EGCG为抗氧化剂,以二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)为主要载体制备脂质体纳米颗粒(SE-LNPs),并鉴定其表征。体外测试了纳米颗粒的细胞毒性、吞噬作用、抗氧化、抗炎、M2极化和抗凋亡性能。ApoE-/-AS小鼠作为动物模型,纳米颗粒处理后,观察血脂、主动脉根部油红染色和HE、Masson切片的变化。结果:1.我们制备的SE-LNPs在镜下呈球形。LNPs和SE-LNPs的粒径分别为(185.47±0.61)nm和(208.90±3.99)nm。Zeta电位接近-20 mV。所有纳米颗粒的多分散性指数均小于0.2。SE-LNPs中SIM的载药率(LC)和包封率(EE)分别为(43.39±7.6)%和(93.57±1.28)selleckchem Alpelisib%。体外释放实验显示SE-LNPs具有缓释行为。2.体外细胞实验证明SE-LNPs组未表现出细胞毒性。与内皮细胞相比,巨噬细胞吞噬更多的Rho-LNPs。SE-LNPs能有效清除应激状态下巨噬细胞内的ROS,但没有将ROS降至生理浓度之下。SE-LNPs有效的抑制氧化应激导致的巨噬细胞凋亡,促进巨噬细胞向M2极化,并降低IL-1β、TNF-α、IL-6水平,发挥抑制炎症反应的作用。3.SE-LNPs降低高脂诱导的ApoE-/-小鼠血液中TG、TC和LDL-C的水平,对HDL-C无明显作用。SE-LNPs减少了 ApoE-/-小鼠整条主动脉AS斑块和主动脉根部的坏死核心面积,并提高了主动脉根部斑块内的胶原蛋白含量,增加了斑块的稳定性。结论:SE-LNPs具有抗氧化、抗凋亡、抗炎、促进M2极化、降低血脂的作用,减少了 AS斑块和脂质坏死核心的形成,是一种可靠的靶向巨噬细胞治疗AS方法。

研究目的:心肌梗死(MI)是世界范围内对人类健康产生威胁的主要疾病之一。MI后引发特定部位心肌缺血缺氧,心肌细胞会面临大量死亡,同时心肌细胞氧化应激水平异常升高。由于心肌胶原生成和降解失衡,因此会出现替代性纤维化,导致心肌功能严重受损。ELA是近年来受关注较多的肾源性细胞因子。运动训练在促进心梗心脏恢复的过程中发挥重要作用。另有研究发现,为期4周的有氧运动能够有效降低心梗所致心肌纤维化且有氧运动能显著增加心肌组织和循环血液中的ELA水平,心肌ELA表达上调对受损心脏的康复起到一定的促进作用。有氧运动改善心梗所致心肌纤维化是否通过ELA介导,以及ELA发挥作用的具体分子机制,尚未完全阐明。探索减轻心梗心肌纤维化,逆转心梗导致心功能降低的手段和方法及其作用靶标,具有重要理论和现实意义。因此本文主要探究有氧运动通过激活肾源性ELA,靶向受损心肌组织,减轻心肌纤维化的分子机制,从心肾轴层面为改善心梗纤维化提供新的治疗靶点。研究方法:动物实验:雄性8周龄C57BL/6J野生型小鼠,随机分为假手术组(Sham,S)、假手术+运动组(SE)、心梗组(MI)、心梗+运动组(ME)、心梗+肾特异性ela高表达组(MIA)、心梗+肾特异性ela高表达+运动组(MIAE),心梗+肾特异性ela低表达组(MIS)、心梗+肾特异性ela低表达+运动组(MISE)每组8只。小鼠心梗手术采用左冠状动脉结扎法制备心梗模型,Sham组只穿线不结扎。采用ela高表达和低表达AAV病毒肾脏注射进行ELA表达干预,采用小动物跑台进行有氧运动干预,检测ELA介导有氧运动对心梗心肌纤维化的影响。运动方案:小鼠手术后恢复一周开始有氧运动训练,第一周进行适应性训练,5m/min,20min,在一周内训练时间和训练速度逐渐提升,达到12m/min,60min/d;随后进行正式训练,12m/min,60min/d,5d/wk,持续4周。训练结束后次日,采用心动超声检测小鼠心脏功能,心动超声检测结束后即刻,立即开胸摘取心脏、肾脏(剥去肾膜),转移至4%中性多聚甲醛中保存。用于后续生化与分子生物学指标检测的组织在吸干水分后用锡纸包裹后置于液氮中以保持其生物活性。采用冰冻切片Masson染色观察心肌纤维化;采用RT-qPCR检测肾脏ela、心肌apj和col1a1/col3a1 mRNA;采用Elisa试剂盒检测血清BNP和c TNT水平;采用Western Blotting检测ELA、APJ、TGFβ1、Smad2/3、p-SMangrove biosphere reservemad2/3、MMP2、MMP9、Collagen 1、Collagen 3、Bcl-2、BAX和C-caspase3表达。细胞实验:采用人胚肾小管上GSK2118436细胞培养皮细胞(HKC)和乳鼠原代心肌成纤维细胞(Cardiac fibroblasts,CFs),使用AMPK激动剂(AICAR)干预HKC模拟运动效应,采用AICAR浓度梯度分组检测HKC细胞ELA表达和分泌情况(Control对照组0μM、100μM、300μM、500μM、700μM、900μM不同浓度AICAR梯度干预组,共6组)。使用H2O2处理(100μM,1 h) CFs模拟缺血缺氧环境,ELA重组蛋白(ELA-14,为1μg/ml,12h)和TGFβ-Smad2/3通路抑制剂(LY364947,3μM,30min)干预CFs,探讨ELA抑制心肌纤维化的分子机制,CFs细胞实验分为为正常对照组、H2O2干预组、H2O2+ELA-14干预组、H2O2+LY364947干预组、H2O2+LY364947+ELA-14干预组,共5组。采用Western Blotting检测细胞水平ELA、APJ、TGFβ1、Smad2/3、p-Smad2/3、MMP2、MMP9、Collagen1、Collagen3、Bcl-2、BAX和C-caspase3等指标;采用TUNEL荧光染色检测凋亡细胞数量。研究结果:(1)有氧运动和肾脏ela内源性干预显著影响心梗心肌ELA表达水平。(2)肾源性ELA在有氧运动改善心梗心功能中发挥重要作用。(3)肾源性ELA介导有氧运动改善心梗小鼠心肌纤维化。有氧运动刺激肾脏分泌ELA表达上调,抑制MMP2、MMP9、Collagen1和Collagen 3等一系列纤维化相关细胞因子的表达,减轻MI导致的心肌纤维化,进而改善MI心功能。(4)肾源性ELA介导有氧运动改善心梗心肌细胞凋亡。肾脏可应答有氧运动刺激,分泌ELA经血液循环到达心脏,抑制BAX/Bcl-2和C-caspase3等一系列凋更多亡相关细胞因子的表达。(5)肾源性ELA介导有氧运动调控TGF-β1-Smad2/3信号通路。(6)AICAR模拟运动干预刺激HKC产生和分泌ELA,是ELA经循环到达心脏发挥保护效应的前提。AMPK激动剂AICAR干预显著增加HKC细胞ELA表达和分泌,且与AICAR干预浓度呈剂量依赖关系。(8)TGFβ1-Smad2/3通路是ELA抑制心肌纤维化的重要信号通路。研究结论:有氧运动显著上调心梗心肌ELA表达,抑制心肌细胞凋亡,减轻心肌纤维化,改善小鼠心功能。肾脏ela低或高表达可显著削弱或改善心梗心肌损伤,且肾脏ela高表达可促进有氧运动对心梗心脏的保护作用。表明ELA在有氧运动抑制心梗心肌细胞凋亡并减轻心肌纤维化中发挥重要介导作用。有氧运动抑制心梗心肌TGF-β1和p-Smad2/3。肾脏ELA低或高表达可分别上调或下调心梗心肌TGF-β1及p-Smad2/3表达。原代CFs通过ELA-14干预显著抑制TGFβ1-Smad2/3通路,促进CFs凋亡,降低其纤维化。表明ELA通过抑制TGFβ1-Smad2/3通路,介导有氧运动减轻纤维化的作用。综上所述,肾源性ELA可应答有氧运动刺激,并促进ELA分泌经循环达心脏,抑制TGFβ1-Smad2/3通路,减轻心梗心肌细胞凋亡和心肌纤维化,是有氧运动改善心梗心功能的重要机制之一。本实验发现以有氧运动方式促进肾源性ELA表达,调节心梗后心肌组织中ELA水平,通过抑制TGFβ1-Smad2/3通路,改善心梗所致心肌纤维化,另外,通过对ela高表达或低表达AAV病毒肾脏注射,内源性干预肾脏ELA的生成和分泌,结合有氧运动干预,进一步验证ELA改善心梗心肌纤维化的机制。

目的 在应用射频消融术治疗阵发性房颤（PAF）的患者中实施基础护理及综合护理干预措施，比较两种护理模式的干预效果，为临床治疗提供参考。方法 选取出天津市胸科医院2018年6月—2019年6月的108例实施射频消融术治疗的PAF患者作为研究对象，采用信封抽签的方式分为干预组和对照组selleck合成，每组各54例。干预组给予综合护理干预措施，对照组给予基础护理，比较两组患者心理状态及生活质量。结果 护理前，两组患者焦虑敏感指数（ASI）评分及贝克抑郁量表（BDI）评分比较差异无统计学意义（P>0.05）；护理后，干预组ASI-3及BDI评分低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。护理前，两组患者身体机能、社会功能、躯体角色、总体健康生活质量评分比较差异无统计学意义（P>0.05）；护理后，干预组各项生活质量评分高financing of medical infrastructure于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 射频消融术治疗会影响PAF患Adezmapimod者的心理状态及生活质量，而综合护理干预措施有针对性的对患者心理和生活等层面进行护理服务，减轻患者负面情绪，提高生活质量，值得临床推广应用。

背景：既往研究显示，沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(silent mating-type information regulator 2 homolog 1,SIRT1)-雷帕霉素机械靶蛋白(mechanistic target of rapamycin,mTOR)信号在骨关节炎进展中起重获悉更多要作用，大黄素对骨关节炎软骨细胞有一定的保护作用。目的：基于SIRT1-mTOR探究大黄素对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响。方法：体外分离培养大鼠软骨细胞，采用10 ng/mL的白细胞介素1β诱导构建体外骨关节炎细胞模型，以CCK-8法测定经0,20,40,80,120,160μmol/L的大黄素处理后的大鼠软骨细胞活力，选出合适大黄素作用浓度。将软骨细胞随机分为对照组、模型组、大黄素低剂量组、大黄素高剂量组、SIRT1抑制剂EX527组、大黄素高剂量+EX527组，除对照组外其余各组以10 ng/mL的白细胞介素1β诱导构建体外骨关节炎模型，同时以大黄素和EX527分组处理细胞后，用CCK-8法、Edu染色法及流式细胞术分别检测各组细胞增殖与凋亡情况；用试剂盒检测各组细胞活性氧相对含量、丙二醛与抗氧化酶超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平；免疫印迹检测各组细胞基质降解、凋亡与SIRT1-mTOR通路相关蛋白表达。结果与结论：(1)与对照组相比，模型组大鼠软骨细胞活力、Edu阳性率、超氧化物歧化酶与过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平、Bcl-2与SIRT1蛋白表达降低，凋亡率、活性氧相对含量、丙二醛水平、Bax与基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9蛋白表达及p-mTOR/mTOR升高(P <algae microbiome0.05)。与模型组相比，大黄素低、高剂量组上述各项指标呈相反变化(P <0.05);EX527组各指标水平与大黄素各组呈相反趋势(P <0.05)。(2)与大黄素高剂量组相比，大黄素高剂量+EX527组细胞活力、Edu阳性率、超氧化物歧化酶与过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平、Bcl-2与SIRT1蛋白表达降低，凋亡率、活性氧相对含量、丙二醛水平、Bax与基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9蛋白表达及p-mTOR/mTOR升高(P <0.05)。(3)结论：大黄素可通过激活SIhttps://www.selleck.cn/products/AZD1152-HQPA.htmlRT1-mTOR信号而抑制骨关节炎软骨细胞氧化应激，从而促进软骨细胞增殖并减轻其凋亡。

目的 观察盆底康复治疗良性妇科疾病行全子宫切除术患者的临床效果，进一步提升患者术后的康复质量。方法 选取2020年1月至2021年12月于本院就诊的110例良性妇科疾病行全子宫切除术的患者作为此次研究对象，按治疗措施的不同分为对照组、观察组，每组55例。对照组采用常规治疗，观察组采用盆底康复治疗，对比两组的治疗成果。结果 观察组患者的盆底肌张力、盆底肌纤维的肌力指标优于对照组（P <0.05）。在1 h尿垫试验量、盆底肌持续收缩时间、残余尿量以及尿失禁频率对比中，观察组均优于对照组（P <0.05）。盆底肌疲劳度对比，术后1周两组对比差异无统计学意义，但是术后6个月复查中，观察组优于对照组（P <0.05）。观察组患者在盆底不适、盆底功能以及盆腔泌Alisertib分子式尿功能量表评分方面优于对照组New microbes and new infections（P <0.05）。结论 针对良性妇科疾病行全子宫切除术患者实施盆底康GNE-140供应商复治疗的效果良好，有助于改善患者的盆底肌张力以及盆底肌疲劳度，降低尿失禁发生率。

目的 ：研究整合素αvβ6缺失细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)结合位点对结肠癌SW480细胞基因表达调控的影selleck AZD1152-HQPA响。方法：构建稳定转染β6基因结构的结肠癌SW480细胞（SW480β6）和缺失ERK2结合位点的缺失突变型β6转染的SW480细胞（SW480β6Del.mutant），并通过WestImmune repertoireern blot实验检测整合素αvβ6、总ERK(t-ERK)及磷酸化ERK(p-ERK)表达水平，通过Transwell实验检测整合素αvβ6缺失ERK2结合位点对SW480细胞侵袭能力的影响。通过RNA测序研究整合素αvβ6缺失ERK2结合位点对SW480细胞基因表达谱的影响，并对差异表达基因（DEGs）进行GO和KEGG功能富集分析。结果：SW480β6和SW480β6 Del.mutant细胞均高表达αvβ6，两者之间的t-ERK表达水平差异无统计学意义（P>0.05）,SW480β6 Del.mutant细selleckchem PLX3397胞p-ERK2水平较SW480β6细胞明显降低，且侵袭能力也明显下降（P<0.05）。通过RNA测序，在SW480β6Del.mutant细胞中共筛选出2249个DEGs，包括上调基因936个，下调基因1313个，DEGs显著富集在癌症通路、PI3K-AKT通路、MAPK通路、细胞与细胞因子受体互作方面。结论：整合素αvβ6通过αvβ6-ERK2直接连接提高ERK2的磷酸化水平，激活MAPK信号通路，促进结肠癌细胞侵袭。缺失整合素αvβ6-ERK2直接连接后，DEGs除富集于MAPK通路外，还富集于多条在结肠癌中具有重要作用的通路，提示在结肠癌中各种信号通路具有互补作用，多靶点药物对结直肠癌是一种有前景的治疗方式。