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目的:探究Mn~(2+)在宿主细胞抵御结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)的过程中发挥的关键作用和内在机制,进一步深入了解M.tb与宿主的相互作用,并为Mn~(2+)作为药物辅助因子治疗结核病(Tuberculosis,TB)和开发新一代疫苗佐剂提供了理论支持。方法:稀释涂布法检测M.tb H37Ra在巨噬细胞内和胞外的生存情况。核骨架染色检测巨噬细胞的细胞膜的完整性;免疫荧光检测巨噬细胞内坏死性凋亡执行蛋白MLKL的磷酸化水平。建立感染M.tb的小鼠感染模型,通过HE染色观察小鼠肺部和脾脏组织中炎性细胞的浸润情况;免疫荧光检测p65在巨噬细胞核内外的转移情况,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immoral biopsyunosorbent assay,ELISA)检测巨噬细胞TNF-α的分泌水平,qPCR检测巨噬细胞TNF-α的基因表达情况。Western Blot检测巨噬细胞STING通路关键蛋白STING和p65的磷酸化水平,qPCR检测巨噬细胞STING通路STING和c GAS表达;用STING蛋白的激活剂c GAMP模拟Mn~(2+)在巨噬细胞中的效果。对Mn~(2+)处理/未处理感染M.tb H37Ra的巨噬细胞进行转录组分析,通过Western Blot检测转录组分析得到的TNF通路相关蛋白ERK、p38和JNK的磷酸化水平,qPCR检测TNF通路相关基因CXCL10、CCL20、CSF1、CSF2和JAG1的表达情况;STING蛋白的抑制剂H-151以及用si RNA干扰STING蛋白后检测TNF信号通路相关蛋白和基因的表达情况。结果:本研究发现,在巨噬细胞中,Mn~(2+)显著地抑制了胞内MAPK抑制剂细菌的生存能力,但是对胞外M.tb的生存能力没有明显的影响,并且Mn~(2+)提高了巨噬细胞MLKL的磷酸化水平,诱导了巨噬细胞发生了坏死性凋亡。在感染M.tb H37Ra的小鼠肺部和脾脏组织HE染色的切片中发现,Mn~(2+)增强了小鼠肺部和脾脏周围的炎性细胞浸润;细胞感染模型中,Mn~(2+)显著地提高了感染M.tb的巨噬细胞TNF-α的分泌水平,p65磷酸化水平升高并呈现细胞核外向核内转移的趋势。与感染M.tb的巨噬细胞相比,Mn~(2+)显著地提高了STING和p65的磷酸化水平,从而激活STING通路。RNA-Seq的结果显示TNF信号通路显著富集,CX点击此处CL10、CCL20、CSF1、CSF2和JAG1基因显著上调,TNF通路相关蛋白JNK、ERK和p38发生了磷酸化;STING蛋白的抑制剂H-151和小干扰RNA干扰STING使得TNF通路相关的基因表达和蛋白磷酸化水平又相应发生了下调。结论:1.Mn~(2+)通过STING-TNF通路调节感染M.tb的巨噬细胞产生TNF-α,诱导了巨噬细胞发生坏死性凋亡;2.Mn~(2+)抑制了感染M.tb的巨噬细胞内细菌的生长,在治疗TB的过程中有很大的应用前景。

目的:探讨缺铁性贫血对双胎妊娠母儿结局的影响,为孕期母胎监测及临床医师指导该人群妊娠提供临床依据,以降低不良妊娠结局的发生。方法:回顾性分析2020年1月至2022年6月于吉林大学第一医院收治的双胎妊娠合并缺铁性贫血产妇128例(实验组),双胎妊娠不合并缺铁性贫血产妇216例(对照组1)、单胎妊娠合并缺铁性贫血产妇314例(对照组2)及双胎新生儿的临床资料,采集孕产妇的一般资料:年龄、孕产次、孕周、受孕Liraglutide溶解度方式;妊娠并发症:早产、妊娠期高血压疾病、子宫收缩乏力、胎膜早破、妊娠期糖尿病、妊娠期甲状腺功能减退症;妊娠结局:产后出血量、分娩孕周、剖宫产率;孕产妇的补铁情况及不同剂量对并发症的影响;双胎的新生儿出生体重、双胎的新生儿结局:新生儿血气血红蛋白、Apgar评分等临床资料,比较相关指标的差异。双胎胎儿部分根据早期彩超及病例记载双胎妊娠的绒毛膜性,共得到有绒毛膜性的双胎产妇共287例,单绒单羊者5例,单绒双羊者66例,双绒双羊者216例。双胎分娩后死胎43例,共得活产儿658例胎儿体重。血气分析、Apgar结果,排除不完整的结果,共得到444名胎儿血气血红蛋白结果以及629名胎儿Apgar评分结果。胎儿部分比较母体贫血对双胎组绒毛膜性、双胎胎儿体重、双胎新生儿血气血红蛋白、双胎Apgar评分的影响差异。结果:1、三组孕产妇孕次、产次之间,无统计学差异(P>0.05)。与单胎贫血组比较,双胎贫血组的辅助生殖差异有统计学意义(P<0.0167),年龄、孕次、产次,差异无统计学意义(P>0.0167)。与单胎贫血组比较,双胎非贫血组间Docetaxel使用方法辅助生殖及年龄有统计学差异(P<0.0167),孕次、产次无统计学差异(P>0.0167)。双胎贫血组与双胎非贫血组比较,年龄、孕次、产次、辅助生殖,差异无统计学意义(P>0.0167)。2、三组间孕产妇并发症中:早产、妊娠期高血压疾病、子宫收缩乏力、胎膜早破、妊娠期糖尿病发生率差异有统计学意义(P<0.05)。与单胎贫血组比较,双胎贫血组发生早产、妊娠期高血压疾病、子宫收缩乏力及妊娠期糖尿病,差异有统计学意义(P<0.0167)。与单胎贫血组比较,双胎非贫血组早产、妊娠期高血压疾病、子宫收缩乏力、胎膜早破、妊娠期糖尿病发生率比较,差异均有统计学差异(P<0.0167)。双胎贫血组与双胎非贫血组,妊娠期高血压疾病比较,差异有统计学差异(P<0.0167)。3、将双胎贫血组与单胎贫血组比较,剖宫产率、分娩孕周以及分娩时出血量,差异有统计学意义(P<0.0167)。双胎非贫血组与单胎贫血组比较,剖宫产率、分娩孕周、分娩时出血量,差异有统计学意义(P<0.0167)。双胎贫血组与双胎非贫血组比较,剖宫产率、分娩孕周、分娩时出血量,差异无统计学意义(P>0.0167)。4、相比较双胎非贫血组,双胎贫血组与单胎贫nanomedicinal product血组铁剂及其他非铁剂补血药物服用率显著升高,差异有统计学意义(P<0.0167)。与单胎贫血组相比,双胎贫血组其他非铁剂补血药物服用率升高,约是单胎贫血组的两倍之多,差异有统计学意义(P<0.0167),两组铁剂服用率情况,差异无统计学意义(P>0.0167)。5、双胎妊娠MCMA组孕妇5例,贫血组1例,非贫血组4例。MCDA组孕妇66例,贫血者28例,非贫血者38例。DCDA组孕妇216例,贫血者84例,非贫血者132例。三组孕妇在在是否贫血上不具有统计学差异(P>0.05)。6.双胎妊娠活产儿658例中,非贫血组胎儿共416名,平均体重为2.43(2.02-2.76)千克,贫血组胎儿共242名,平均体重2.37(1.92-2.74)千克。两组年龄不满足正态分布。二组新生儿体重之间没有统计学差异(P>0.05)。但我们发现MCDA组胎儿平均体重2.26(1.87-2.65)千克,DCDA组新生儿平均体重2.44(2.03-2.79)千克,两组有统计学差异(P<0.05)。7、双胎妊娠共得到444名胎儿血气血红蛋白结果。结果显示母体贫血组胎儿贫血42例,占23.1%;母体非贫血组胎儿贫血37例,占14.0%。母体贫血与胎儿贫血有统计学差异(P<0.05)。8、贫血组Apgar评分低于7分者24例,占10.5%,非贫血组Apgar评分低于7分者31例,占7.8%,两组之间没有统计学差异(P>0.05)。其中每一项心率、肌张力、皮肤颜色、反射活动贫血组与非贫血组均无差异。但小儿呼吸项贫血组152例,占66.7%;非贫血组230例,占57.5%,两组具有统计学差异(P<0.05)。结论:1、双胎因素显著影响早产、妊娠期高血压疾病、胎膜早破、子宫收缩乏力及妊娠期糖尿病的发生。2、轻度及中度缺铁性贫血不是影响双胎妊娠分娩孕周、分娩方式、产后出血的主要因素,但会提高妊娠期高血压疾病的发生。3、母体贫血会影响新生儿出生后血红蛋白水平,会影响新生儿出生后呼吸水平,要第一时间处理,以免造成不良妊娠结局。4、双胎的绒毛膜性与孕妇的贫血无相关性,但会影响新生儿体重,MCDA组的新生儿体重相对低于DCDA组。5、双胎妊娠补铁剂量在100-200mg/天时,可显著降低早产、HDP、子宫收缩乏力的发生,补铁剂量大于200mg/天时未降低妊娠期并发症的发生,且会提高GDM发生的风险。

目的：探HDAC抑制剂讨非瓣膜性房颤病人的血清C反应蛋白(CRP)、红chemogenetic silencing细胞分布宽度水平(RDW)及中性粒/淋巴细胞百分比(NLR)的变化及其临床意义。方法：选择非瓣膜性房颤病人150例，并随机抽取同期于住院的非心房颤动病人100例作selleckchem PLX5622为对照组，记录2组病人姓名、年龄、合并疾病、实验室指标等，并比较2组各项指标的差异，同时将房颤组按房颤的分类标准分为阵发性房颤组50例和非阵发性房颤组(包括持续性房颤、长程持续性房颤、永久性房颤)100例。比较房颤亚组间各指标差异。结果：房颤组与对照组NLR及RDW、CRP差异具有统计学意义(P<0.01)。而房颤亚组间RDW、CRP及NLR差异具有统计学意义(P<0.05～P<0.01)。应用多变量回归分析显示，RDW、NLR可能是心房颤动发生的独立预测因素(P<0.01)。结论：CRP、RDW及NLR与非瓣膜性房颤发生密切相关，RDW、NLR可能是心房颤动发生的独立预测因素。CRP、RDW及NLR与非瓣膜性房颤的持续时间密切相关，非阵发性房颤组CRP、RDW及NLR高于阵发性房颤组。

目的 了解慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)门诊管理对糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)患者疾病进展及透析启动的影响，为持续改进CKD多学科门诊管理及DKDBiot number管理提供依据。方法 纳入2015年6月～2021年6月在江苏大学附属医院CKD管理门诊随诊并进入透析的92例DKD患者(管理组)，及同时期从肾脏内科专科门诊进入透析的94例DKD患者(非管理组)。比较2组患者首次透析时生化指标，血管通路，住院等情况以及肾功能进展情况，并分析各种因素对DKD病程进展的影MCC950试剂响。结果 进入透析时，管理组患者的收缩压、估算肾小球滤过率(eGFR)、全段甲状旁腺激素水平都低于非管理组(t值分别为-3.352、-1.196、-1.995;P值分别为0.001、0.047、0.047)，血红蛋白、血清白蛋白高于非管理组(t值分别为2.320、2.102;P值分别为0.021、0.037)。首次血液透析时2组在血管通路、紧急透析及首次诱导透析占比间差异有统计学差异(χ~2值分别为19.573、16.396、16.969，均P<0.001)。Kaplan-Meier生存分析显示管理组进入透析的中位病程长于非管理组(t=2.239,P=0.021)。多因素分析的结果显示年龄、糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)、尿微量白蛋白/肌酐是DKD进展的危险因素(HR分别为1.020、0.554、1.000,95%CI 1.003～1.038、0.405～0.757、1.000～1.000,P分别为0.019、<0.001、<0.001),CKD管理及使用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)治疗可减缓DKD进展。结论 慢性肾脏病管理能明显延缓DKD进展，在门诊管理中，注重DVP-16采购R的早期筛查和尿蛋白的管理，早期使用ACEI/ARB类药物，对延缓DKD进展有帮助。

目的:本研究以高脂饮食饲养小鼠为研究对象,通过腹腔注射20%L-精氨酸制备重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型,以16s r DNA高通量测序和GC-MS代谢组学为技术手段,探讨高脂饮食、肠道菌群、代谢产物和SAP四者之间关系。在此基础上,以中药大黄附子汤作为干预措施,从肠道菌群和代谢产物的角度探讨大黄附子汤治疗高脂血症性重症急性胰腺炎(hyperlipidaemic severe acute pancreatitis,HLSAP)的作用机制,寻找大黄附子汤作用的关键靶点。材料与方法:1.1动物分组96只C57BL/6小鼠随机分为2大组,高脂饮食组(HFD组)和正常组饮食组(ND组),每组各48只小鼠。高脂饮食组又分为对照组(HFD)、大黄附子汤对照组(HFDD)、模型组(HFD-M)和治疗组(HFD-M-D)四组。正常饮食组又分为对照组(ND)、大黄附子汤对照组(ND-D)、模型组(ND-M)和治疗组(ND-M-D)四组。分别给予高脂饮食或正常饮食饲养8周,并观察小鼠饮食饮水及活动状态、毛发,大小便情况。1.2动物模型的制备与取材模型组和治疗组给予腹腔注射20%L-精氨酸以制备SAP模型;大黄附子汤对照组和治疗组在SAP制备成功后每隔12h给予大黄附子汤灌胃。实验持续48h,实验结束后,取血标本进行ELISA测定血清淀粉酶(AMS)、内毒素(LPS)、血脂(TG,TC,LDL,HDL),炎症因子(TNF-α,IL-6,IL-1β)水平。取胰腺、肺、回肠和结肠行常规病理切片。用棉签拭子蘸取回肠和结肠内容物,进行GC-MS代谢组学分析;用棉签拭子刮取肠黏膜表层,进行l6s r DNA高通量测序,测定小鼠回肠和结肠黏膜相关肠道菌群变化。结果:论文一C57BL/6小鼠HLSAP模型的建立及大黄附子汤的干预作用medial geniculate实验周期为8周,ND组小鼠各方面均正常。HFD组小鼠前期正常,后期逐渐出现精神困倦,懒散少动,毛发油量,摄水量时有增加,小便正常,大便偶有便溏。HFD组在4,6,8周体重明显超过正常饮食喂养ND组(P<0.001)。HFD组小鼠的血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL)均显著高于ND组(P<0.01)。高密度脂蛋白(HDL)低于正常饮食组(P<0.05)。ND-M组血清AMS,胰腺、肺、回肠和结肠病理评分,LPS,TNF-α,IL-1β和IL-6显著高于ND组和ND-D组(P<0.01)。HFD-M组各项指标也同样高于HFD组与HFD-D组(P<0.01)。经过大黄附子汤治疗后,ND-M-D组和HFD-M-D组各项指标均显著降低(P<0.001)。此外,HFDM组血清LPS、TNF-α,IL-1β和IL-6均显著高于ND-M组(P<0.05)。论文二HLSAP小鼠回肠和结肠黏膜相关菌群的变化及大黄附子汤的干预作用经过16s高通量测序数据优化处理,96个样本共获得5717346条优化有效序列。稀释性曲线显示此次测序深度足够,覆盖度良好。首先,高脂饮食造成了菌群的显著变化。在门水平上,与ND组比较,HFD组回肠段和结肠段均存在Bacteroidetes的降低,Firmicutes的升高,以及Firmicutes/Bacteroidetes(F/B)比值比的显著升高。在属水平上,回肠段Faecalibaculum显著升高,结肠段norank_f_Bacteroidales_S24-7_group显著降低。HLSAP组小鼠回肠和结肠均发生明显的菌群失调。回肠段主要变现为Bacteroidetes的显著降低及F/B比值比的增加,以及Escherichia-Shigella的显著增加。结肠段主要表现为Proteobacteria的显著升高。大黄附子汤的治疗后,回肠Proteobacteria的EscherichiaShigella显著降低,unclassified_f_Lachnospiraceae和Akkermansia显著升高。结肠段Proteobacteria显著降低,同时增加了Blautia的丰度。正常饮食干预下SAP菌群在门和属水平的变化基本与HLSAP一致。HLSAP与SAP比较,HLSAP回肠和结肠段Proteobacteria以及EscherichPF-02341066体内ia-Shigella显著高于SAP,同时HLSAP还具有更高丰度的粪杆菌属(回肠)和脱硫弧菌属(结肠)。Spearman相关性分析显示,在门水平,Bacteroidetes与LPS成负相关,Proteobacteria与LPS成正相关。在属水平上,norank_f_Bacteroidales_S24-7_group,unclassified_f_Lachnospiraceae与LPS成负相关,Escherichia-Shigella,Enterococcus,Faecalibaculum与LPS成正相关关系。论文三HLSAP小鼠回肠和结肠段代谢产物的变化及大黄附子汤的干预作用GC-MS代谢组学测定,最终得到224种代谢物,经KEGG化合物分类共注释到91个化合物,共涉及39条代谢通路。经样本比较分析,KEGG化合物和功能通路分析,差异代谢物筛选,KEGG富集通路分析,高脂饮食干预下,回肠段,IHFD-M组与IHFD组比较,富集通路一共涉及到3种差异代谢物,分别是硬脂酸,亚油酸,甘油。其中模型组上调了硬脂酸,亚油酸,下调了甘油。IHFD-M-D与IHFD-M组比较,涉及的差异代谢物为肉豆蔻酸。治疗组下调了肉豆蔻酸。结肠段,CHFD-M组与CHFD组比较,富集通路一共涉及到6种差异代谢物,其中尿嘧啶,胆固醇,6-phosphogluconic acid表达上调,硬脂酸,麦芽糖,亚油酸表达下调。CHFD-M-D组与CHFD-M组比较,富集通路一共涉及到2种差异代谢物,分别是富马酸和6-phosphogluconic acid。正常饮食干预下,回肠段,IND-M组与IND组比较,富集代谢通路匹配到8种差异代谢物,其中甘油,半乳醇,果糖上调,黄嘌呤,Myo-inositol,L-MalRepSox半抑制浓度ic acid,L-谷氨酸,花生四烯酸表达下调。IND-M-D组与IND-M组比较,匹配到8种差异代谢物,分别是棕榈酸,尿嘧啶,硬脂酸,亚油酸,L-谷氨酸,乙醇胺,肌酸,花生四烯酸,其中棕榈酸,其余均为下调。结肠段,CND-M组与CND组比较,匹配到13种差异代谢物。其中蔗糖,琥珀酸,Myo-inositol,L-Malic acid,半乳醇上调,硬脂酸,角鲨烯,棕榈酸,肉豆蔻酸,亚油酸,氢化肉桂酸,甘油,乙醇胺下调。CND-M-D组与CND-M组比较,匹配到5种差异代谢物,其中棕榈烯酸,肉豆蔻酸,乙醇胺,3-hydroxybutyric acid上调蔗糖下调。两种饮食比较,回肠段,高脂饮食上调了肉豆蔻酸,二十四烷酸,甘油,山核桃酸,花生酸,下调硬脂酸,L-Malic acid,亚油酸。结肠段,高脂饮食上调了棕榈烯酸,肉豆蔻酸,Myo-inositol,二十四烷酸,山核桃酸,花生酸。下调了牛磺酸,琥珀酸,草酸,α-生育酚。两种饮食干预下SAP模型比较,回肠段,IHFD-M组与IND-M组比较,最终匹配到4种差异代谢物,其中上调棕榈烯酸,棕榈酸,肉豆蔻酸,下调半乳醇。CHFD-M组与CND-M组比较,匹配到13种差异代谢物,其中上调6种,分别为角鲨烯,棕榈烯酸,肉豆蔻酸,二十四烷酸,山核桃酸,花生酸,下调7种,分别为蔗糖,琥珀酸,硬脂酸,L-Malic acid,亚油酸,半乳醇,24,25-dihydrolanosterol。结论:1大黄附子汤能够显著降低HLSAP小鼠的血清AMS,改善胰腺、肺、回肠和结肠病理组织评分,降低LPS和炎症标志物水平,降低死亡率,疗效显著。2高脂饮食在SAP发生前即对肠道菌群和肠道代谢产物形成影响,其变化在特定菌群和代谢产物上与SAP发生后菌群和代谢的变化具有共同趋势。其中菌群方面,HLSAP回肠和结肠段Proteobacteria以及Escherichia-Shigella显著高于SAP,同时HLSAP还具有更高丰度的粪杆菌属(回肠)和脱硫弧菌属(结肠)。在代谢产物方面,两者都存在肉豆蔻酸的显著增高。这可能是导致HLSAP较其他类型SAP严重的潜在标志物。3大黄附子汤可能通过改变菌群结构,降低有害兼性厌氧菌Proteobacteria及Escherichia-Shigella(属于Proteobacteria),Desulfovibrio(属于Proteobacteria)的丰度,提高回肠段益生菌norank_f_Bacteroidales_S24-7_group,unclassified_f_Lachnospiraceae,Akkermansia的丰度,结肠段Blautia丰度发挥治疗HLSAP的作用。4在代谢产物方面,大黄附子汤可能通过调节内源性大麻素信号,调节肉豆蔻酸和富马酸的而发挥治疗作用。

目的:探讨50岁以下多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)患者的临床表现及预后。方法:回顾性分析2011年11月—2022年11月本院收治的39例50岁以下初治MM患者的临床资料及实验室指标，探索影响生存和预后的因素，并与既往已发表的国外研究数据进行比较。结果:50岁以下MM患者占同时期初治MM患者的21.5%(39/181),该部分患者国际分期系统(ISS)Ⅲ期比例为46.2%(18/39)、轻链型占30.8%(12/39)、贫血占56.4%(22/39)、肾功能不全占30.8%(12/39)。中位随访36(3～160)个月，中位无进展生存期为35个月，总生存期未达到。单因素分析显示，血钙、乳酸脱氢酶、自体造血干细胞移植和最佳缓解深度均是无进展生存期和总生存期的影响因素(P<0.05)。多因素分析显示，乳酸脱氢酶升高(HR=7.356,95%CI 1.288～41.998,P=0.025)是总生存期selleck Bemcentinib预后不良的独立影响因素。结论:与国外数据相比，本中心年轻初治MM患者的比例更高，且ISSⅢ期、轻链型、Plants medicinal贫血及肾功能不全的比例亦更高。患者预后大多较好，乳酸脱MG132配制氢酶是总生存期预后不良的独立危险因素。

白血病是一种以某种未完全分化的幼稚造血细胞大量增生为特征的血液系统恶性疾病,占肿瘤总发病率的3%左右,是儿童和青年中最常见的一种恶性肿瘤。目前最常见的白血病类型包括急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)、急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia,ALL)、慢性淋巴细胞白血病(Chronic lymphocytic leukemia,CLL)和慢性髓系白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)。不同类型的白血病中基因的突变类型、蛋白表达及分子机制是不同的,所以在治疗时要根据具体的疾病类型进行不同的治疗。目前,白血病经过常规治疗后的完全缓解率很高,总体缓解率介于30%-70%之间,儿童急性淋巴细胞白血病的完全缓解率高达95%左右,成人急性淋巴细胞白血病的完全缓解率在75%左右,除急性早幼粒细胞白血病外,急性白血病的完全缓解率在70%以上,但是由于耐药性等原因,白血病预后较差且存在较高的复发率。因此,寻找新的白血病治疗靶点,研究新的、更加有效的治疗方式对于白血病的治疗非常重要。c-Myc作为一种转录因子,在细胞的生长发育、生理代谢和衰老等许多生物活动中起着至关重要的作用。在大多数的人类肿瘤类型中,c-Myc蛋白selleck与不良预后相关。血液疾病中,c-Myc也是参与细胞转化和癌症发展的关键基因。有研究表明,c-Myc是胚胎造血发育及成人造血所必需的,并且c-Myc在调节造血干细胞的自我更新和诱导分化过程中发挥重要作用。弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B cell lymphomas,DLBCL)是一组在病理组织学形态、基因表型和临床表现上为异质性的大B细胞增生性病变。Meta分析又称荟萃分析,是将多个研究目的相同的结果进行合并分析的统计学方法,在更大的样本量下以更高的检验效能回答相关的医学问题。Meta分析一般遵循以下几个步骤:选题、文献检索、提取数据、文献质量评估、数据分析、报告结果等基本过程。本研究中,我们对c-Myc蛋白过表达在DLBCL中的不良预后进行了Meta分析。我们整理了最新发表的关于DLBCL的临床文献,最终筛选出36篇文献纳入本次研究。分析结果表明,c-Myc蛋白过表达使DLBCL患者的总生存期(Overall survival,OS)和无进展生存期(Progression-free survival,PFS)显著降低。另外检测了BCL2蛋白和BCL6蛋白过表达及BCL2/BCL6蛋白与c-Myc蛋白同时表达对DLBCL患者预后的影响,统计分析显示,BCL2蛋白是导致DLBCL患者的出现不良预后的危险因素,存在BCL2蛋白过表达或BCL2与c-Myc双表达都会使DLBCL患者的OS和PFS降低。研究发现BCL6蛋白是DLBCL的良性预后因素,但是关于BCL6与c-Myc双表达的文献数量较少,无法做统计分析。因为c-Myc在血液肿瘤中的作用,研究直接靶向c-Myc的小分子化合物是治疗血液疾病的潜在方法。10074-G5抑制c-Myc与Max的结合,从而抑制基因的转录。在其他癌症类型中如乳腺癌、神经母细胞瘤等,发现10074-G5可以抑制癌细胞的增殖,但是在白血病之间的研究和应用较少。EN4在2020年合成使用,目前只在乳腺癌细胞中进行了研究。我们选择了以上两种c-Myc抑制剂探究其对白血病细胞的作用,本次选取了两种鼠源的急性髓系白血病细胞MLL-AF9和MLL-ENL,四种不同类型的人源白血病细胞包括人急性髓系白血病细胞Molm13、人急性T淋巴白血病细胞Jurkat、人单核细胞白血病细胞TMedicago lupulinaHP-1和人组织细胞淋巴瘤细胞U937。首先,我们采用MTT比色法检测了两种抑制剂在不同白血病细胞中的半数抑制浓度,即IC_(50)值。通过MTT细胞增殖实验发现,使用10074-G5和EN4处理的白血病细胞与未用抑制剂处理的相比,白血病细胞的增殖速率受到了显著的抑制。这一结果在细胞体外克隆实验中也得到了证实。使用这两种抑制剂处理的白血病细胞与未处理的细胞相比,克隆的数量显著减少,克隆形态明显较小。接下来我们探究了10074-G5和EN4对白血病细胞的细胞凋亡、细胞周期和细胞分化的影响。结果显示,10074-G5和EN4显著促进了各类白血病细胞的凋亡,并且呈现剂量依赖型的方式,而这两种抑制剂对于细胞周期的影响并没有一致的趋势。在两种鼠源的急性髓系白血病细胞中,10074-G5使MLL-AF9的G1期细胞减少,促进细胞进入S期,而对MLL-ENL的细胞周期无显著影响。EN4对MLL-AF9细胞的周期无影响,但是促进了MLL-ENL的G1期阻滞。对于其他四种人源白血病细胞,除THP-1外,10074-G5使G1期细胞增多,进入S期的细胞减少,而使THP-1的G1期细胞减少,S期细胞增多。EN4使Molm13和Jurkat细胞G1期减少,G2/S期的细胞增加。使用两种单核细胞的标记物CD11b和CD14检测这两种抑制剂对四种人源白血病细胞分化的影响。结果显示,10074-G5和EN4显著增加了四种细胞CD11b和CD14的阳性率,即促进了人白血病细胞向单核和粒细胞方向分化。我们还将c-Myc抑制剂与传统的化疗药物阿糖胞苷(Ara-C)联合使用,探究c-Myc抑制剂是否能够增强Ara-C的效果。实验结果发现,c-Myc抑制剂与Ara-C联合使用与单独使用Ara-C相比,白血病细胞的增殖都受到了抑制。在联合用药后,白血病的凋亡出现了不同的结果。在MLL-ENL、U937、Jurkat细胞中,联合使用Ara-C和10074-G5与单独使用Ara-C相比,会促进细胞的凋亡。而在MLL-ENL、THP-1细胞中,联合用药后细胞的凋亡数量小于单独使用Ara-C的细胞凋亡数量,Molm13的凋亡数量无显著差异。联合使用Ara-C和EN4与单独使用Ara-C相比,在两种鼠源的白血病细胞MLL-AF9和MLL-ENL,两种人源白血病细胞U937和THP-1中,细胞的凋亡数量无显著性差异,在Molm13和Jurkat细胞中凋亡数量是增加的。通过检测细胞周期发现,Ara-C联合使用10074-G5和EN4与只使用Ara-C相比,两种小鼠白血病细胞G1期细胞减少,进入S期的细胞增多,对Molm13的细胞周期无显著影响。总之,Ara-C与两种c-Myc抑制剂联用后对细胞增殖的抑制作用增强。最后,我们设计并成功构建了四种c-Myc突变体c-Myc~(ΔN2)、c-Myc~(Δ36-70)、c-Myc~(V264G)和c-Myc~(L420P),分别影响c-Myc-CDK8信号通路、c-Myc-p TEFB信号通路、c-Myc-WDR5信号通路和c-Myc-Max信号通路,来探Pevonedistat配制讨c-Myc的各种功能单位和亚型在AML发生发展中的作用。总体而言,本论文首先进行了c-Myc蛋白过表达对DLBCL患者预后影响的Meta分析。整理并分析了c-Myc蛋白、BCL2与BCL6蛋白过表达对DLBCL患者OS和PFS的影响。结果显示,c-Myc和BCL2蛋白过表达是DLBCL的不良预后因素,BCL6蛋白过表达是良性预后因素。Meta分析是一项需要不断纳入最近临床数据,更新分析结果的研究。本Meta分析通过纳入最新的相关临床数据,为DLBCL的临床治疗提供一定的理论数据。接下来选择了两种c-Myc抑制剂10074-G5和EN4,探究c-Myc抑制剂对白血病细胞的作用。结果发现两种抑制剂均可以显著抑制白血病细胞的增殖。后续实验证明,10074-G5和EN4抑制白血病细胞增殖的原因是促进了细胞凋亡的发生,并促进白血病细胞向单核细胞方向分化。同时发现,与单独使用Ara-C相比,将两种c-Myc抑制剂与Ara-C联用对白血病细胞的抑制效果更好。本研究的创新性在于选择的两种抑制剂中10074-G5在血液肿瘤中应用较少,EN4为最新合成的小分子抑制剂,未在血液肿瘤中有过研究,探究它们在白血病细胞中的作用机制,可以为开发治疗白血病的小分子药物提供一定的实验数据。

癌症目前已经成为一项全球性高发的公共疾病,严重威胁人类生命健康。免疫治疗是利用患者自身免疫系统杀伤癌细胞的一种新兴癌症治疗方式,不仅具有良好的治疗效果,而且副作用小,已经成为癌症治疗的研究热点。但由于受肿瘤免疫原性差和免疫逃逸的严重限制,使免疫治疗在临床上的治疗效果有限。在本论文中,我们设计了一系列功能纳米葡萄糖氧化酶,通过“开源节流”的方式共同增强免疫效果。一方面“开源”,利用小尺寸金纳米颗粒(AuNP)代替天然葡萄糖氧化酶(GOx),克服了GOx半衰期短,在生物条件下不稳定、易失活的弊端。同时,通过近红外光(NIR)诱导金纳米棒(AuNR)的光热效应,既能增强AuNP催化效率,加速葡萄糖消耗,实现肿瘤饥饿治疗,Trichostatin A纯度又能抑制热休克蛋白(HSP)的表达,放大肿瘤细胞内过高热,诱导肿瘤细胞死亡,增强免疫原性。另一方面“节流”,通过小分子药物抑制免疫逃逸,或者利用二价金属离子调节免疫,激活T细胞来放大免疫治疗效果。这两种方式协同,显著抑制了肿瘤的生长,为增强抗肿瘤免疫治疗提供了新策略。本文研究主要分为以下两部分:(一)我们设计了一种具有类过氧化氢酶(CAT)活性和GOx模拟活性的纳米酶,可实现双向增强免疫治疗。该纳米酶是由在AuNR外涂层CeO_2外壳,并在其表面沉积小尺寸AuNP,同时负载小分子抑制剂JQ1,最后用癌细胞膜包覆形成的(AuNR@CeO_2/AuNP-JQ1@M)。当其通过癌细胞膜的同源粘附功能到达肿瘤部位后,AuNR在NIR驱动下诱导温度升高,增强了AuNP的类GOx活性。葡萄糖消耗产生的过氧化氢(H_2O_2)与CeO_2反应原位产生氧气(O_2),实现自加速葡萄糖消耗,同时抑制HSP表达,放大细胞内过高热效果,引起氧化应激,激活细胞焦亡相关蛋白,诱导肿瘤细胞焦亡,提高了免疫原性。另外,负载的JQ1通过下调肿瘤细胞上PD-L1的Oil remediation表达,阻断PD-L1与GSKJ4体内实验剂量PD-1结合,抑制免疫逃逸,放大免疫治疗效果。(二)为了使AuNP更好地分散,提高催化活性,并实现二价金属离子激活免疫,我们设计了一个沸石咪唑酯骨架材料(ZIF-8)中包裹AuNR的结构,并在其表面均匀地沉积AuNP,得到功能纳米葡萄糖氧化酶AuNR@ZIF/AuNP。当纳米酶到达肿瘤细胞后,AuNR在NIR照射下诱导温度升高,进一步增强AuNP的催化活性,引起肿瘤“饥饿”并造成高温诱导肿瘤细胞死亡,增强免疫原性。同时ZIF在肿瘤酸性溶酶体中实现自动瓦解,释放过量Zn~(2+),打破肿瘤细胞中的锌稳态。Zn~(2+)超载降低了质膜的完整性,通过诱导活性氧(ROS)产生以及激活肿瘤细胞cGas-STING信号通路来促进抗肿瘤免疫反应,并能诱导趋化因子CXCL9/10/11的表达和细胞质蛋白酪氨酸激酶(ZAP-70)磷酸化,以激活T细胞并增强它的募集。

目的 探讨山萘酚调控长链非编码RNAVPS9D1反义RNA 1(VPS9D1-AS1)/miR-377-3p对人宫颈癌细胞系增殖和凋亡的影响Femoral intima-media thickness。方法 将人宫颈癌细胞系SiHa分为对照组、山萘酚低、中和高剂量组(5、10和20μmol/L山萘酚)、si-NC组(转染si-NC)、si-VPS9D1-AS1组(转染si-VPS9D1-AS1)、山萘酚+pcDNA-VPS9D1-AS1组(20 mg/L山萘酚+转染pcDNA-VPS9D1-AS1)、山萘酚+anti-miR-377-3p组(20 mg/L山萘酚+转染anti-miR-377-3p)。RT-qPCR、MTT法和集落形成实验分别测定VPS9D1-AS1、miR-377-3p表达、细胞活性和集落形成；流式细胞测量术、划痕试验、TranswellDNA Methyltransferas抑制剂小室法和Western blot分别测定细胞凋亡、迁移、侵袭和Bax及Bcl-2表达；荧光素酶活性检测分析VPS9D1-AS1对miR-377-3p的靶向作用。结果 与对照相比，低、中和高剂量山萘酚降低SiHa细胞中VPS9D1-AS1表达水平，集落形成数、细胞活性、Bcl-2蛋白表达水平、迁移Cobimetinib化学结构距离和侵袭细胞数，且提高了miR-377-3p表达水平、凋亡率和Bax蛋白表达水平；作用均呈浓度依赖性(P<0.05)。SiHa细胞中沉默VPS9D1-AS1后，miR-377-3p表达水平、凋亡率和Bax蛋白表达水平高于si-NC组，且集落形成数、Bcl-2蛋白表达水平、细胞活性、迁移距离和侵袭细胞数低于si-NC组(P<0.05)。VPS9D1-AS1能靶向miR-377-3p。山萘酚处理的SiHa增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响能被过表达VPS9D1-AS1或抑制miR-377-3p所逆转。结论 山萘酚通过靶向miR-377-3p下调VPS9D1-AS1,减轻宫颈癌细胞系增殖、迁移和侵袭，以及加速凋亡。

【目的】评估急性缺血性脑卒中患者治疗前CT灌注成像(computed tomography pe rfusion imaging,CTP)参数、基于多时相CT血管成像(multiphase computed t omography angiography,m CTA)的区域软脑膜侧支多模式评分及临床相关参数与治疗后出血转化(Hemorrhagic Transformation,HT)的相关性,找出有意义的参数或影像学定量预测指标,并探讨CTP定量参数、m CTA区域软脑膜侧支多模式评分及临床参数联合能否提高出血转化的预测效能,并评估其预测价值。【方法】收集2microRNA biogenesis019年1月-2022年11月昆明医科大学第一附属医院神经内科经临床和多模态CT确诊为单侧大脑中动脉M1段中、重度狭窄或闭塞的急性缺血性脑卒中患者,共186例,其中溶栓治疗66例、介入取栓60例及常规抗凝治疗60例,根据治疗后24h内复查CT或MRI是否出血分为HT组和非HT组。所有患者治疗前均进行多模态CT扫描(CT平扫+全脑CTP+三期CTA),利用GE AW 4.7工作站的CT Perfusion 4D软件包对患者CTP图像进行分析处理,得到脑血流量(cerebral blood flow,CBF)、脑血容量(cerebral blood volume,CBV)、平均通过时间(mean transit time,MTT)及达峰时间(time to maximum,Tmax)、表面渗透性(permeability surface,PS)等多个灌注参数以及各参数的相对值即相对脑血流量(relative cerebral blood flow,r CBF)、相对脑血容量(relative cerebral blood volume,r CBV)、相对平均通过时间(relative mean transit time,r MTT)及相对达峰时间(relative time to maximum,r Tmax)、相对表面渗透性(relative permeability surface,r PS)。用Faststroke对多时相CTA图像分析处理,根据Alberta卒中项目早期CT评分(Alberta Stroke Program Early CT Score,ASPECTS)区域分区,将大脑中动脉供血范围的软脑膜侧支动脉划分为ASPECTS的M2～M6区5个区域,通过m CTA分别对5个区域软脑膜动脉的强化延迟、强化范围和对比剂廓清三种血流状态进行评分。首先,在不同治疗方法下,分别评估各影像学参数及临床因素与治疗后HT是否具有相关性。然后对单因素分析P<0.1与HT有相关性的参数进行Logistic分析,找出HT的独立影响因素,包括独立危险因素及保护性因素。最后,绘制受试者特征(Receiver Operating Characteristic,ROC)曲线,通过比较曲线下面积(AUC)分析各影像学参数对HT的预测价值,探讨CTP定量参数及临床参数联合能否提高HT的预测效能,并得到各参数的预测阈值。【结果】1.溶栓治疗组共66名患者,其中29例(43.94%)发生HT,单因素分析结果显示,治疗前NLR、ASPECT评分、入院NIHSS评分、溶栓后30min NIHSS评分、90d m RS评分、m CTA软脑膜侧支延迟、廓清及程度评分及r CBF、r CBV、r PS与溶栓后HT具有相关性(P<0.05)。纳入单因素分析P<0.1的多个因素进行Logistic回归分析显示,治疗前中性粒细胞与淋巴细胞比值(Neutrophilic to Lymphocyte Rati o,NLR)、m CTA软脑膜侧支延迟、r PS是溶栓后HT的独立危险因素,m CTA侧支廓清评分及程度评分、r CBF、r CBV是AIS患者溶栓后HT的保护性因素(P<0.05)。ROC曲线分析,纳入所有Logistic回归分析P<0.05的临床和影像变量,结果显示,临床指标、CTP参数及m CTA软脑膜侧支多模式评分三者联合的预测效能(AUC 0.966,敏感度92.90%特异度91.40%)高于三者单独使用对HT的预测效能;而m CTA软脑膜侧支多模式评分联合的预测效能(AUC 0.864)与CTP参数的预测效能相近(AUC 0.846),稍高于临床参数的预测效能(AUC 0.810)。2.介入取栓治疗组共60名患者,其中26名(43.33%)发生HT,单因素分析结果显示患者发病至入院时间、BMI、ASPECT评分、入院NIHSS评分、90d m RS评分、多模态侧支的廓清、延迟、程度评分、r CBV、r CBF、r PS评分及梗死核心体积与取栓后HT具有相关性(P<selleck NMR0.05)。多因素Logistic回归分析显示,治疗前NL R值、r PS是取栓后出血转化的独立危险因素,ASPECT评分、90d m RS评分、廓清评分是取栓后HT的保护性因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,临床指标及影像学参数联合参数对HT的预测效能最高(AUC 0.971,敏感度92.30%,特异度91.2%);m CTA软脑膜侧支廓清评分对取栓后HT的预测效能(AUC0.897,阈值为9.5)较各临床指标单独的预测效能高(治疗前NLR AUC 0.813;ASPECT评分AUC 0.729;90d m RS评分AUC 0.75),与灌注参数r PS的预测效能相近(AUC0.877)。3.常规抗凝治疗组共60名患者,其中13名(21.67%)发生HT,单因素分析结果显示,治疗前NLR值、入院NIHSS评分、入院m RS评分、m CTA软脑膜侧支延迟、廓清及程度评分及CTP参数中的r CBF、r CBV及r PS与抗凝后HT具有相关性(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示m CTA软脑膜侧支多模式评分中的廓清评分是常规抗凝治疗后HT的保护性因素,治疗前NLR、r PS是常规抗凝治疗后HT的独立危险因素(P<0.05)。各影响因素ROC曲线分析NLR、廓清评分及r P S三者联合的预测效能(AUC 0.938敏感度100%,特异度89.2%)高于以上三个参数单独使用的预测效能。软脑膜侧支廓清评分对抗凝后HT的预测效能(AUC 0.885)与灌注参数中r PS的预测效能相近(AUC 0.895)。4.溶栓、取栓及常规抗凝治疗中,HT的影响因素有治疗前NLR、m CTA侧支对比剂廓清评分、r PS,其中三种治疗方法下,治疗前NLR对HT预测的阈值分别为4.92、5.05、4.08;m CTA侧支廓清评分对HT预测的阈值分别为8、9、9;r PS对H T预测的阈值分别为2.505、6.07、8.698。【结论】1、急性缺血性脑卒中多个CTP定量参数、临床相关指标及区域软脑膜侧支多模式评分与治疗后(溶栓、取栓及常规抗凝治疗)出血转化有相关性,其中临床指标中治疗前中性更多粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、CTP灌注参数中相对表面通透性(r PS)是出血转化的独立危险因素;m CTA侧支多模式评分中的廓清评分是出血转化的保护性因素。2、急性缺血性脑卒中的CTP定量参数、区域软脑膜侧支多模式评分及临床指标单独应用对出血转化的预测有一定价值,三者联合提高了出血转化的预测效能,联合参数对治疗后出血转化的预测具有较好的应用价值。