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胞苷作为一种嘧啶核苷,是生物体内RNA的结构成分,参与多种细胞代谢过程,可用作某些抗肿瘤和抗病毒药物的前体。本研究主要从全局角度着重解决胞苷生物合成中心碳代谢不平衡问题,基于发酵特性、基因表达以及细胞内代谢通量分布,研究了pgi和edd基因敲除对好氧条件下大肠杆菌胞苷合成的影响。主要研究内容和结果如下:(1)大肠杆菌pgi和edd基因缺失对胞苷发酵的影响。为增强磷酸戊糖(PP)途径的代谢通量,以大肠杆菌K12为出发菌株,应用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas9)基因编辑技术对大肠杆菌染色体上的磷酸葡萄糖异构酶编码基因pgi与6-磷酸葡萄糖酸脱水酶编码基因edd进行敲除,分别获得pgi缺失菌株E.coli NXBG-14和edd缺失菌株E.coli NXBG-15。对重组菌株胞苷生物合成途径关键酶基因和发酵产胞苷进行研究,结果表明,pgi基因敲除后PP途径deoC和deoB基因的表达量上调,有利于胞苷的合成。edd基因敲除后,ED途径的关键酶基因eda表达量下降,减少了PP途径的碳流分支。对重组菌株摇瓶发酵40 h后,E.coli NXBG-14耗糖量较出发菌提高了1.04倍,胞苷含量较出发菌提高了1.62倍(产胞苷2.82 g/L),E.coli NXBG-15耗糖量提高了1.09倍,胞苷含量提高了1.64倍(PD0325901抑制剂产胞苷2.85 g/L),说明pgi和edd基因敲除均能够将碳流引向有利于胞苷合成的途径。(2)重组菌株的转录组学分析。通过转录组分析出发菌株E.coli K12以及重组菌E.coli NXBG-14和E.coli NXBG-15的基因表达水平,并解析基因改造影响胞苷合成过程的机制。结果表明,对照组E.coli K12和重组菌E.coli NXBG-14共有1363个差异表达基因(DEGs),有697个基因上调,666个基因下调,重组菌E.coli NXBG-14和E.coli NXBG-15共有630个差异表达基因,有403个基因上调VX-445 NMR,227个基因下调。对这些差异表达基因进行GO/KEGG注释和富集分析我们发现pgi和edd基因缺失不仅可以提高细胞对葡萄糖的吸收还能够还有助于解除磷酸转移酶系统(PTS)中分解代谢阻遏,使葡萄糖代谢进入PP途径,促进胞苷前体物的合成。另外,相比于出发菌株E.coli K12,重组菌E.coli NXBG-14中糖酵解途径(EMP)中转录水平变化显著,大部分基因表达量均呈上调趋势,促进了能量物质的合成。(3)重组菌株的代谢流组学分析。利用~(13)C代谢流量分析(~(13)C-metabolic flux analysis,~(13)C-MFA)技术,通过标记葡萄糖同位素准确定量重组菌株胞内的碳代谢通量分布。本研究以出发菌株E.coli K12以及重组菌E.coli NXBG-14和E.coli NXBG-15为研究对象,采用~(13)C-MFA平台进行分析。结果表明,pgi和edd基因敲除会提高菌体的糖代谢能力。另外,通过分析代谢途径中关键代谢物的含量变化发现,重组菌和出发菌代谢差异较大,中心碳代谢产物变化明显。重组菌PP途径的6-磷酸葡萄糖酸浓度较高,EMP中果糖-6-磷酸和葡萄糖-6-磷酸浓度明显提升,三羧酸循环(TCA)中相关物质浓度相对较低,其它副产物浓度也较低。最后经转录组学与代谢流组学的联合分析发现,大多数中心碳代谢途径(CCM)代谢物与DEGs在对胞苷生物合成的能量代谢中可能发挥正向调节作用。综上,本研究采用转录组、~(13)C代谢流和定量代谢物组学技术,解析了大肠杆菌pgi和edd基因敲除前后细胞内基因表达及胞苷代谢通量的变化,证biologic agent明pgi和edd基因敲除有利于胞苷前体物合成途径中关键基因的表达,改变了碳流方向和减少碳流分支,增强了胞苷的合成。

目的:通过观察健骨通瘀汤治疗胫腓骨骨折术后患肢肿胀疼痛前后症状体征变化,判断其有效性及安全性,为其治疗胫腓骨骨折术后患肢肿胀疼痛的临床应用提供科学理论依据。方法:收集2021年11月-2023年1月期间在甘肃省中医院骨科住院的胫腓骨骨折术后患肢肿胀疼痛患者60例,完善个人基本信息及安全性检查并统计。采用随机数字表法将患者分为2组,对照组(29例)、治疗组(31例),对照组予以基础治疗及甘露醇、依托考昔片治疗,治疗组在对照组的基础上加服健骨通瘀汤,2周为1疗程。统计并对比分析两组患者在治疗前后的中医证候积分、患肢肿胀度、肿胀持续时间、VAS评分、下肢FMA评分及实验室检查等指标的变化及随访时的检查结果,并对两种治疗方案的不良事件进行安全性评价,以评估健骨通瘀汤治AZD1152-HQPA价格疗胫腓骨骨折术后患肢肿胀疼痛的疗效性和安全性。结果:1.本研究实际纳入59例患者,对照组(29例),治疗组(30例)。两组患者一般资料包括性别、年龄、患肢部位、备术时间等差异均无统计学意义(P>0.05)。2.患肢肿胀度,两组患者术后当天结果均无统计学意义(P>0.05)。患肢肿胀度于术后第1天明显升高;于术后第3天及第7天均较前次有所减低(P<0.05);且治疗组优于对照组(P<0.05)。肿胀消退时间,治疗组较对Legislation medical照组数值低(P<0.05)。3.VAS评分,两组患者VAS评分数值均于术后第1天明显升高;于术后第3天及第7天均较前次有所减低(P<0.05)。且治疗组优于对照组(P<0.05)。4.下肢FMA评分,两组患者下肢FMA评分数值于术后第1天开始升高;于术后第3天及第7天均较前次升高(P<0.05),且治疗组较对照组升高幅度大(P<0.05)。5.中医证候积分,两组患者中医证候积分数值均于术后第1天升高;于术后第3天及第7天均较前次有所减低(P<0.05),且治疗组均较对照组减低程度高(P<0.05)。6.检测指标:C-反应蛋白、D-二聚体、血沉,两组患者术后第1天各指标差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,于术后第7天两组患者各指标数值均减低,且治疗组减低程度更高(P<0.05)。7.随访结果示两组患者在术后1月时骨折愈合情况、下肢静脉血栓形成及中医证候积分差异无统计学意义(P>0.05),下肢FMA评分治疗组较对照组疗效更佳(P<0.05)。8.安全性评价:两组患者在研究过程中,均未发生骨筋膜室综合征、过敏等不良事件,且治疗后各项安全性指标均未出现明显异常。结论:健骨通瘀汤治疗胫腓骨骨折术后患肢肿胀疼痛疗效确切,配合功能锻炼及西药应用,可有效缓解患肢肿胀疼痛症状,并有效恢复其功能,试验中无严重事件发生,具有较高selleckchem的安全性,值得临床进一步探讨与应用。

目的:1.通过对延安大学附属医院新生儿科28周≤胎龄≤33~(+6)周早产儿临床数据的研究,以期更好地了解其可能出现的并发症。2.研究分析早产儿脑损伤高危因素,并在此基础上建立其发病风险的预测模型,为临床医生早期诊断提供理论依据。研究对象及方法:1.收集2018年1月1日至2022年12月31日在延安大学附属医院新生儿科住院治疗28周≤胎龄≤33~(+6)周的早产儿的基本资料、孕母围产期情况、早产儿并发症情况、实验室检查结果及出生后的治疗情况。2.按胎龄及体重为分组标准分析早产儿临床并发症的特点。3.将原始资料以7:3的比率随机分成训练数据集和验证数GSI-IX采购据集,将训练集按照是否发生脑损伤分为脑损伤组和非脑损伤组,分析早产儿脑损伤的相关因素,并运用单因素分析、lasso回归及多因素logistics回归进行变量的筛选。最后使用受试者工作特征曲线及校准曲线来评估早产儿脑损伤的早期预测效能,临床决策曲线评估临床实用性。结果:1.早产儿临床并发症分析1.1本次研究发现28周≤胎龄≤33~(+6)周早产儿常见的并发症为:新生儿肺炎、新生儿高胆红素血症、新生儿贫血。1.2呼吸暂停、新生儿窒息、NRDS、BPD、PDA、贫血、低血糖、NEC、BIPI等在不同胎龄及体重Medical incident reporting的比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.早产儿脑损伤预测模型的构建和验证2.1单因素分析结果显示:胎龄、出生体重、分娩方式、1、5 min Apgar评分、产前使用糖皮质激素、孕母绒毛膜羊膜炎、胎儿宫内窘迫、败血症、新生儿窒息、NRDS、BPD、PDA、NEC、新生儿贫血、低血糖、p H、Pa CO_2、BE与BIPI的发生有关。2.2.多因素logistic分析结果显示:胎龄、出生体重、分娩方式、5 min Apgar评分、低血糖、p H、孕母产前使用糖皮质激素、胎儿宫内窘迫是BIPI发生的独立影响因素。2.3.训练组、验证组ROC曲线下面积(AUC值)均大于0.8,区分度良好。2.4.模型校准曲线与标准曲线接近,说明校准度良好。结论:1.本次研究发现早产儿常见的临床并发症为:新生儿肺炎、新生儿高胆红素血症、新生儿贫血。2.与32≤胎龄≤33~(+6)周早产儿相比较,28周≤胎龄≤31~(+6)周早产儿更容易发生临床并发症。3.2IACS-010759体外8周≤胎龄≤31~(+6)周、出生体重<1 500g、经阴道分娩、有低血糖、p H<7.20、有胎儿宫内窘迫是BIPI发生的独立危险因素;产前足量使用糖皮质激素、5min高Apgar评分是BIPI的保护因素。4.建立的BIPI的预测模型有较好的区分度和校准度。

目的:1.通过对延安大学附属医院新生儿科28周≤胎龄≤33~(+6)周早产儿临床数据的研究,以期更好地了解其可能出现的并发症。2.研究分析早产儿脑损伤高危因素,并在此基础上建立其发病风险的预测模型,为临床医生早期诊断提供理论依据。研究对象及方法:1.收集2018年1月1日至2022年12月31日在延安大学附属医院新生儿科住院治疗28周≤胎龄≤33~(+6)周的早产儿的基本资料、孕母围产期情况、早产儿并发症情况、实验室检查结果及出生后的治疗情况。2.按胎龄及体重为分组标准分析早产儿临床并发症的特点。3.将原始资料以7:3的比率随机分成训练数据集和验证数GSI-IX采购据集,将训练集按照是否发生脑损伤分为脑损伤组和非脑损伤组,分析早产儿脑损伤的相关因素,并运用单因素分析、lasso回归及多因素logistics回归进行变量的筛选。最后使用受试者工作特征曲线及校准曲线来评估早产儿脑损伤的早期预测效能,临床决策曲线评估临床实用性。结果:1.早产儿临床并发症分析1.1本次研究发现28周≤胎龄≤33~(+6)周早产儿常见的并发症为:新生儿肺炎、新生儿高胆红素血症、新生儿贫血。1.2呼吸暂停、新生儿窒息、NRDS、BPD、PDA、贫血、低血糖、NEC、BIPI等在不同胎龄及体重Medical incident reporting的比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.早产儿脑损伤预测模型的构建和验证2.1单因素分析结果显示:胎龄、出生体重、分娩方式、1、5 min Apgar评分、产前使用糖皮质激素、孕母绒毛膜羊膜炎、胎儿宫内窘迫、败血症、新生儿窒息、NRDS、BPD、PDA、NEC、新生儿贫血、低血糖、p H、Pa CO_2、BE与BIPI的发生有关。2.2.多因素logistic分析结果显示:胎龄、出生体重、分娩方式、5 min Apgar评分、低血糖、p H、孕母产前使用糖皮质激素、胎儿宫内窘迫是BIPI发生的独立影响因素。2.3.训练组、验证组ROC曲线下面积(AUC值)均大于0.8,区分度良好。2.4.模型校准曲线与标准曲线接近,说明校准度良好。结论:1.本次研究发现早产儿常见的临床并发症为:新生儿肺炎、新生儿高胆红素血症、新生儿贫血。2.与32≤胎龄≤33~(+6)周早产儿相比较,28周≤胎龄≤31~(+6)周早产儿更容易发生临床并发症。3.2IACS-010759体外8周≤胎龄≤31~(+6)周、出生体重<1 500g、经阴道分娩、有低血糖、p H<7.20、有胎儿宫内窘迫是BIPI发生的独立危险因素;产前足量使用糖皮质激素、5min高Apgar评分是BIPI的保护因素。4.建立的BIPI的预测模型有较好的区分度和校准度。

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研究背景:糖化血红蛋白(HbA1c)是反映糖尿病患者过去3月血糖控制情况的金标准,然而,HbA1c不能反映瞬时高低血糖风险。糖尿病肾脏病(DKD)患者存在多种因素影响HbA1c的准确性。持续葡萄糖监测(CGM)提供大量血糖参数,其中,血糖管理指标(GMI)反映佩戴CGM期间的平均血糖(MBG)水平,是HbA1c的有效补充。量化HbA1c和GMI之间的差异可以计算得到HbA1c-GMI差值,联合理解HbA1c和GMI的差异可能有助于更全面了解患者的血糖内涵。本研究旨在观察不同肾功能水平DKD患者的血糖特征;比较HbA1c评估不同肾功能水平DKD患者血糖控制情况的准确性;探索HbA1c-GMI差值与DKD患者eGFR水平的关联;并利用临床指标,建立和验证GMI的估算方程,以评估DKD患者的血糖控制情况。研究方法:本研究纳入2018年10月至2022年10月我院内分泌与代谢病科住院的DKD患者共156名,回顾收集患者的一般临床资料、实验室生化检验、CGM数据进行统计分析,量化HbA1c与GMI之间的差异,计算得到HbA1c-GMI差值。根据估算的肾小球滤过率(eGFR)水平将DKD患者分为G1-2组(eGFR≥60ml/min/1.73m2,n=64)、G3 组(30≤eGFR<60ml/min/1.73m2,n=56)和G4-5组(eGFR<30 ml/min/1.73m2,n=36),比较三组的血糖特征;采用线性回归分析法,分析葡萄糖低于目标范围内时间(TBR)与eGFR水平的关联以及HbA1c的影响因素。采用Pearson相关分析法Berzosertib体内检验HbA1c和MBG的相关性。采用线性回归分析法,分析HbA1c-GMI差值与eGFR水平的关联。另外,将研究对象按6:4的比例划分为训练集和验证集,在训练集,将临床生化指标纳入单因素线性回归分析,选择具有临床意义和统计学意义(P<0.05)的指标进入多因素线性回归模型,建立GMI的估算方程;在验证集,通过配对t检验,检验GMI估算值和实测值的显著性差异。研究结果:1、比较不同eGFR水平DKD患者的一般临床资料和血糖特征,与G1-2期患者相比,G3、G4-5期患者的TBR更高(P<0.001)。三组患者空腹血糖(FBG)、CGM来源的平均血糖(MBG)无显著性差异(P>0.05),但与G1-2期患者相比,G3、G4-5期患者的HbA1c、血红蛋白(Hb)更低(P<0.05)。2、多因素线性回归分析提示TBR与eGFR存在显著负相关(P<0.05),但在校正贫血状态后,TBR与eGFR之间无显著性selleck合成关联(P=0.16)。3、比较不同eGFR水平的DKD患者HbA1c和MBG的相关性,相较G1-2期患者,G3期患者HbA1Stress biologyc和MBG相关性更弱(r=0.576,P<0.01;r=0.266,P=0.047),G4-5期患者HbA1c和MBG相关性无统计学意义(r=0.296;P=0.079);多因素线性回归分析发现Hb可能是影响DKD患者HbA1c的因素之一。4、三组患者GMI水平无显著性差异,而eGFR水平越低,HbA1c水平越低,HbA1c-GMI差值水平越低(P=0.009)。多因素线性回归分析提示HbA1c-GMI差值与eGFR存在显著正相关(β=0.014;P=0.015)。5、基于HbA1c、肾功能分期、贫血状态、血白蛋白(ALB)、FBG,建立了 DKD患者GMI的估算方程:GMI估算值=0.095 × HbA1c-0.031 ×ALB+6.740+贫血+肾功能分期+0.03×FBG(贫血:若不合并贫血,+0.445;若合并贫血,+0。肾功能分期:若为G1-2期,-0.285;若为G3期,+0.213;若为G4-5期,+0)。GMI估算值与实测值之间不存在显著性差异(6.92±0.46%vs 6.80±0.87%;P=0.250)。研究结论:1、eGFR水平较低的DKD患者低血糖风险更高,TBR有助于弥补糖化不能反映低血糖风险的局限性。2、HbA1c评估eGFR<60ml/min/1.73m2的DKD患者血糖控制情况准确性较弱。3、联合糖化血红蛋白和血糖管理指标有助于优化DKD患者的个体化血糖管理。4、基于简单易得的临床指标,构建了 GMI的估算方程,GMI估算值有助于合理评估DKD患者血糖控制情况。

目的 探讨系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus, SLE)初诊患者入院血压与系统性红斑狼疮活动指数(Systematic lupus erythematosus disease activity ievidence informed practicendex, SLEDAI)评分、血清补体C3、C4的相关性，并评估引发SLE患者高血压的危险因素。方法 2017年9月至2019年9月我院收治的95例SLE初诊患者，根据血压高低分为SLE血压升高组33例，SLE血压正常组62例，另选取同期100例健康体检者为对照组。采用医用臂式电子血压计测量3组入院血压；采用速率散射比浊法测定血清补体C3、C4；采用SLEDAI-2000评分评估SLE疾病活动程度；采用Pearson相关性分析法分析血压与实验指标的相关性，Logistic回归分析模型分析疾病危险因素。结果 selleck BucladesineSLE初诊患者入院血压高于健康体检者。SLE血压升高组SLEDAI-2000评分显著高于SLE血压正常组。SLE初诊患者收缩压、舒张压与SLEDAI-2000评分呈正向相关关系（r=0.490,P<0.05;r=0.408,P<0.05），舒张压与血ZD1839 MW清补体C3、C4呈正向相关关系（r=0.223,P<0.05;r=0.285,P<0.05）。Logistic回归分析显示SLEDAI-2000评分和血清补体C3是导致SLE患者高血压的危险因素（P<0.05）。结论 SLE初诊患者SLEDAI-2000评分与血压呈正向相关关系，舒张压与血清补体C3、C4呈正向相关关系。SLEDAI评分及血清补体C3是导致SLE患者高血压的危险因素。

目selleckchem的 分析激素、吗替麦考酚酯联合白芍总苷胶囊对系统性红斑狼疮的治疗作用及机制。方法 选取2017年5月至2019年6月于河南大学淮河医院收治的84例系统性红斑狼疮患者，以随机表法分为对照组和治疗组，各42例，对照组予以泼尼松联合吗替麦考酚酯治疗，治疗组在对照组的基础上增加白芍总苷胶囊，共治疗6个月。分析两组患者治疗后的总有效率、狼疮活动指数(SLEDA评分)、补体C3、C4、抗双链DNA、抗核抗体(ANAEntinostat采购)、抗SM、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等指标。结果 治疗前两组各指标均无差异(P>0.05);治疗后两组的总有效率为对照组低于治疗组(78.6%vs 95.2%)(P<0.05);治疗后两组SLEDA评分均下降，较治疗前均好转，治疗组下降程度优于对照组(P<0.05);治疗后两组C3、C4均较治疗前升高，治疗组上升程度优于对照组(P<0.05);抗双联DNA、ANA、抗SM阳性率治疗组均优于对照组(P<0.05);治疗后两组血清IL-6、IL-10、TNF-α浓度均较治疗前降低，治疗组降低数值优于对照组Taiwan Biobank(P<0.05)。结论 激素、吗替麦考酚酯联合白芍总苷胶囊对于治疗系统性红斑狼疮的疗效优于激素联合吗替麦考酚酯。此治疗方案能够有效改善免疫功能，应推广使用。

Taurine目的：采用临床实践的方式探讨结合慢性脑供血不足头晕患者的特点，实施有针对性的护理，观察护理效果，通过负性情绪、生活质量评估临床应用价值。方法：本次研究对象选择了2020年1月—2022年1月在我院治疗的64例慢性脑供血不足头晕患者，基于护理方法的Febrile urinary tract infection差异将患者平均分为对照组以及观察组。针对对照组，护理延续了常规式，针对观察组实施了针对性护理，对比两AMPK抑制剂组患者的负性情绪及生活质量的改善情况。结果：经过护理，观察组的有效率为93.25%，高对于对照组的75.00%(P <0.05)；护理后，两组患者临床症状都有所改善，表现为头晕发生频率与持续时间均得以减少、HAMA、HAMD评分均有所降低（P <0.05）、患者生活质量各项评分均得以改善，但是与对照组相比，观察组的改善幅度更为明显（P <0.05）。结论：针对性护理服务应用于慢性脑供血不足头晕患者具有明显的护理效果，可以缓解患者的负性情绪，提升生活质量，此方法可以在临床加以推广应用。

单碱基编辑技术是针对单个碱基进行替换的基因编辑策略,根据不同的单切口Cas9(Cas9n)脱氨酶分为两个工作系统。其中,嘌呤碱基编辑器(Adenine Base EditProbiotic bacteriaors,ABEs)是将编辑活性窗口内的腺嘌呤(A)替换为鸟嘌呤(G),从而将C·G至T·A遗传突变回复纠正。与传统的CRISPR/Cas9基因编辑策略相比,ABEs工作系统基因治疗的效果改善,精确性和安全性进一步提高,具备广泛的应用能力和较高的发展前景。作为一种强大的基因编辑工具,碱基编辑系统也存在着许多技术缺陷,例如靶向范围小、精准性差、编辑活性低、存在脱靶现象等。本研究利用宏基因组分析得到了一种新型腺苷脱氨酶,通过对新型碱基编辑器的突变和改造,进一步提高编辑活性、扩大活性窗口,是碱基编辑工具开发和优化工作的有益尝试。首先,将新型腺苷脱氨酶5V1替换TadA8e脱氨酶,构建5V1-ABE新型碱基编辑器并利用哺乳动物细胞系来检测编辑系统的工作特性。与ABE8e碱基编辑器相比,5V1-ABE编辑器的编辑活性更低,编辑窗口范围更小。因此,根据5V1与TadA8e蛋白同源建模结果,本研究选择Q150/Q151/P152三个靶点对5V1-ABE进行单点突变改造和组合突变改造,得到一种性能更优异的碱基编辑器5V1-GMR-ABE。5V1-GMR-ABE的S63845核磁编辑窗口与5V1-ABE相同为A3-A8,活性窗口内平均编辑效率提高了1.5～3.4倍,并且没有sgRNA依赖性DNA脱靶的产生。它比ABE8e的编辑范围更小,在A5、A6和A8位的编辑活性媲美ABE8e。其次,将新型脱氧腺苷脱氨酶和TadA8e脱氨酶插入到Cas9n蛋白内部的相关耐受位点,构建新型融合表达的碱基编辑器。在测试的11个耐受位点中,1249位点的结果最优。与腺苷脱氨酶位于N-末端的对照编辑器相比,位于1249位点Laduviglusib体内融合表达的碱基编辑器的编辑窗口发生改变,编辑活性提高。其中,ABE8e-1249变体编辑活性提升最为明显,而5V1-1249-ABE和5V1-GMR-1249-ABE突变体的改善效果减弱。此外,本课题研究了ABE8e在小鼠肝脏中进行体内编辑的有效性,搭建了使用脂质纳米颗粒(Lipid Nanoparticle,LNP)体内递送碱基编辑器及sgRNA的可行方法,可用于在体内验证更多新型碱基编辑器的工作特性。综上所述,本研究成功开发新型ABE工具,实现了在哺乳动物细胞的高效编辑,进一步丰富碱基编辑工具库。研究证实LNP介导的ABE8e在小鼠肝脏内高效编辑,为家族性高胆固醇血症提供一种有价值的治疗策略。