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采用高效液相色谱法测定磺Belumosudil价格胺二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉共5种磺胺类药物在动物源性食品中的残留量。动物源性样品经甲酸乙腈提取，正己烷除脂、固相萃取柱净化；用高效液相色谱法同时测定磺胺类药物残留量，采用Agilent Pursuit 5 C18(150mm×4.6mm, 5.0μm),柱温为35℃,流动相A为0.1%甲酸水，B为乙腈，流MK-1775速1.0mL·min~(-1),紫外检测器，检测波长为270nm。结果表明：在最优试验条件下，该方法测定5种磺胺类药物残留的线性范围在0.02～1.0mg·L~(-1),线性相关系数R>0.9999,方法检出限为0.003mg·kg~(-1)、0.005mg·kg~(-1),回收率达到80.1%～108%,相对标准偏差介于2.48%～10.0%。样品前处理方法简单快捷，能够高效、灵敏地同时检测出动物源性食品中的磺胺二甲基嘧啶等5种磺plant virology胺类药物的残留量。

目的:高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)是国内外一个常见的公共卫生问题,可造成痛风、心血管疾病、慢性肾脏病等疾病。高尿酸血症病因复杂,大致可分为尿酸生成增多、排泄减少两大方面,与饮食、生活习惯、遗传等相关,但深入机制尚不明确。应激(stress)是当外界负面因素影响超越了个体的心理、生理承受能力并产生负面影响时,个体产生的一种特殊反应,可增加多种精神、躯体疾病的患病风险。多项研究已证明应激及应激激素与尿酸生成有密切联系。四逆散为中医抗抑郁名方,除了焦虑抑郁等疾病外,四逆散在高脂血症、糖尿病等多种代谢性疾病均有应用。研究应激对高尿酸血症的影响及四逆散在其中的作用,可探讨高尿酸血症的深入机制,并提供一个全新的治疗思路。方法:通过腹腔注射肌苷(inosine)成功构建急性高尿酸血症小鼠模型,并通过束缚水应激(waterrestrain,WR)造成应激状态,通过多种应激激素及相关受体阻滞剂探讨激素、受体在其中的影响。通过对小鼠进行14天应激操作的方式造成慢性应激模型,并给予普萘洛尔、四逆散等干预,进行行为学检测,收集粪便以进行微生物组学检测,最后对各组进行一次腹腔注射肌苷的干预,一定时间后取材,对血清进行代谢组学研究,检测相关脏器中黄嘌呤脱氢酶(尿酸生成的关键酶)的变化,以观察应激对尿酸生成的影响及四逆散的干预作用。结果:束缚水应激这一应激模型能使肌苷模型的尿酸明显升高。在肌苷模型的基础上,肾上腺素可使尿酸升高更加明显。普萘洛尔可明显拮抗应激、肾上腺素等在急性模型中的升尿酸作用,而酚妥拉明对此无明显影响。14天的应激操作可使小鼠尿酸明显升高,产生一定程度的抑郁样改变,而四逆散可抵抗应激引起的尿酸升高、抑郁样translation-targeting antibiotics改变等现象。此外,各组肝脏中黄嘌呤脱氢酶染色阳性区域无明显区别,但应激可使小肠中黄嘌呤脱氢酶染色阳性更加明显,且在绒毛、乳糜管等处发现染色阳性聚集的Pexidartinib细胞培养现象。小鼠粪便的微生物组学分析结果提示应激可明显改变小鼠肠道菌群的组成结构,并影响肠道菌群的嘌呤代谢、氨基酸代谢等功能。血清代谢组学结果提示应激可明显改变小鼠血清中嘌呤相关、氨基酸相关代谢物,这两种代谢物之间存在许多正相关关系,提示应激可能通过调节肠道菌群的氨基酸代谢,进而影响小鼠的嘌呤代谢,导致尿酸升高。四逆散可使血清中嘌呤、氨基酸相关代谢物恢复到对照组水平。此外,四逆散干预可明显提高小鼠血清中Proteases抑制剂胍基乙酸、鸟氨酸含量,降低血清中甘氨酸、精氨酸含量,减少嘌呤合成过程中的关键氨基酸供给。结论:应激及应激相关的肾上腺素具有明显的促进尿酸升高的作用。应激可使小肠黄嘌呤脱氢酶表达明显增加,改变肠道菌群的嘌呤代谢、氨基酸代谢等功能,进而改变血清中嘌呤、氨基酸相关代谢物水平。四逆散调节肠道菌群的嘌吟代谢、氨基酸代谢等功能,提高血清中胍基乙酸等肌酸代谢相关原料,影响嘌呤代谢过程中氨基酸原料的供给,进而起到抵抗应激导致的尿酸升高的作用。

目的:胶质瘤是中枢神经系统(CNS)中最常见的原发性恶性肿瘤类型,预后不佳,尤其是胶质母细胞瘤(WHO IV型胶质瘤,GBM),其中位生存时间不到2年。近一半的胶质瘤病例被诊断为胶质母细胞瘤,被认为是最具侵略性和致命性的脑肿瘤,病情发展迅速,不可避免地会复发,预后极差。虽然采用了手术切除后化疗和放疗的策略,但效果不佳。因此,迫切需要基于胶质瘤生物学属性的新型治疗方法。硫氧还蛋白相关跨膜蛋白1(TMX1)是编码内质网(ER)蛋白二硫异构酶(PDI)家族的成员,目前研究发现在黑色素瘤及乳腺癌中发挥作用。但TMX1在胶质瘤中的作用未见报道。本研究探索TMX1在胶质瘤细胞生物学行为中的作用及相关机制。方法:1本研究使用癌症基因组图谱(TCGA)和中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库,目的是为了明确在胶质瘤中TMX1的表达情况及其与预后的关系。2我们对数据库中TMX1的表达情况进行了验证,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫组织化学技术(Immunohistochemistry,IHC)和蛋白质印记法(WB)方法,检测了正常脑组织和胶质瘤样本中TMX1的mRNA以及蛋白的表达水平;并使用NHA、U87、LN229、T98细胞系进行细胞实验。3利用慢病毒在胶质瘤细胞系LN229中构建TMX1敲减细胞(Sh TMX1)以及对应的对照细胞。4我们采用EdU标记、集落形成、CCK8等实验评估细胞的增殖能力;5采用流式细胞凋亡检测、WB蛋白检测评估细胞凋亡;6进一步检测了ROS、JC-1和seahorse了解TMX1对线粒体的功能的影响;7体内实验中,我们用BALB/C裸鼠构建异种皮下成瘤模型评估TMX1对于胶质瘤体内成瘤能力的影响。8最后利用蛋白免疫印迹进行分子机制研究。结果:1我们发现在数据库TCGA中显示胶质瘤样本中TMX1 mRNA表达水平比正常脑组织上调,而在CGGA数据库中显示TMX1 mRNA的表达水平随着胶质瘤级别的升高而呈现递增,这两个数据库均显示胶质瘤患者的总生存率与TMX1的表达呈负相关。2通过RT-qPCR、IHC和WB的结果发现,TMX1的mRNA和蛋白的表达水平在胶质瘤标本中均比正常脑组织高。TMX1在胶质瘤细胞系(U87,LN229,T98)中的蛋白表达水平也比正常人星形胶质细胞(NHA)高。3经慢病毒转染后,行Western blotting检测,其结果显示TMX1蛋白表达水平在胶质瘤细胞系LN229中显著抑制。4在体外实验中,EdU染色实验结果显示TMX1敲减组的EdU染色细胞比例低于对照组细胞;phage biocontrolCCK-8实验显示TMX1敲减组细胞的增殖能力低于对照组;TMX1敲减组细胞的集落形成能力下降。以上结果表明TMX1敲减后抑制胶质瘤细胞的增殖能力。5流式细胞术分析显示,TMX1敲减组的胶质瘤细胞表现出更高水平的凋亡;在TMX1敲减后,促凋亡蛋白Bax、caspase 3和caspase 9的表达上调,抑更多制凋亡蛋白Bcl-2表达下调。以上结果表明TMX1敲减后促进了胶质瘤细胞的凋亡。6 DCFH-DA探针检测提示TMX1敲减组胶质瘤细胞内ROS产生减少;荧光探针JC-1检测TMX1敲减组中线粒体膜电位下降;Seahorse检测研究代谢表型的改变,发现TMX1敲减组中OCR无变化,而ECAR下降。以上结果表明TMX1敲减后影响了线粒体的功能。7在体内实验中,我们用BALB/C裸鼠构建异种皮下成瘤模型,发现TMX1敲减后抑制了体内肿瘤的生长。8为了探究TMX1是否通过PI3K/AKT通路调节胶质瘤增殖,我们进行了蛋白质印迹鉴定PI3K/AKT相关蛋白的表达,发现总PI3K和AKT表达没有改变,但在TMX1的敲低组,磷酸化PI3K和磷酸化AKT水平降低。结论:胶质瘤组织中TMX1的表达水平高于正常脑组织,且随着恶性程度的增加其表达量增高。TMX1促进胶质瘤的进展,缩短患者的生存期。TMX1敲减后抑制胶质瘤细胞的增殖,并促进凋确认细节亡。使ROS降低,线粒体膜电位下降,有氧糖酵解(ECAR)下降,影响了线粒体的功能。机制研究表明TMX1通过调控ROS/PI3K/AKT影响细胞增殖和凋亡并影响线粒体功能。

目的：探讨在顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)中8-氧PLX4032配制代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)的作用及机制。方法：48只8～10周龄C57BL/6雄性小鼠构建动物模型。24只分为4组，每组6只，分别经腹注射顺铂干预0 h、24 h、48 h和72 h。剩余小鼠也随机分为4组，即生理盐水对照组、顺铂组、OGGVE-8221抑制剂组(Th5487组)和顺铂+Th5487组。分别在腹腔注射生理盐水或顺铂和Th5487。留取血液测定肌酐、尿素氮，取肾组织进行病理分析，检测肾组织8-氧代鸟嘌呤含量和超氧化物歧化酶活力，RT-qPCR测定mRNA水平，Western Blot验证OGG1和炎症蛋白表达情况。利用顺铂诱导小鼠肾小管上皮细胞建立体外模型，检测线粒体膜电位改变、活性氧生成情况和蛋白表达变化。结果：在顺铂诱导的AKI模型中，OGG1表达上调，环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)信号轴及炎症反应激活；Th5487可抑制顺铂诱导的组织损伤、cGAS-STING信号轴的激活及炎性反personalized dental medicine应；在体外，Th5487可减少顺铂诱导的细胞中ROS含量升高及线粒体膜去极化。结论：在顺铂诱导的AKI过程中，OGG1可通过cGAS-STING信号促进肾脏损伤及炎症反应。

【背景】雌激素是雌性哺乳动物卵巢组织分泌的主要激素，其对肌肉的生长发育起着重要的调控作用，circRNA已被发现参与多种与肌肉生长发育相关的信号通路。【目的】根据团队前期卵巢摘除苏尼特羊与假手术苏尼特羊全转录组整合分析发现circZNF423可作为内源性竞争RNA(ceRNA)调控oar-miR-541-3p/CALM3的表达。为进一步探究雌激素在绵羊肌肉生长中分子机制，通过体外培养绵羊原代成肌细胞，检测成肌细胞中外源添加雌激素介导circZNF423调控oar-miR-541-3p/CALM3对成肌细胞增殖的影响，为进一步研究雌激素及circRNA在绵羊生长发育性状中的作用机制提供理论依据，为绵羊分子设计育种提供新的研究思路。【方法】采集绵羊背最长肌组织，对绵羊原代成肌细胞进行体外分离培养，通过免疫荧光染色、RNA原位杂交（FISH）和核质分离试验确定circZNF423在成肌细胞中的表达位置；RNAhybrid在线软件预测circZNF423、oar-miR-5确认细节41-3p和CALM3存在结合关系，通过双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验验证circZNF423和oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p和CALM3结合情况；体外构建合成circZNF423过表达或干扰载体、oar-miR-541-3p的模拟物（mimics）或抑制剂（inhibitor）、CALM3过表达或干扰载体，在绵羊原代成肌细胞中进行转染，利用RT-qPCR、Western blot、EdU和CCK-8检测绵羊成肌细胞增殖标志因子的表达和https://www.selleck.cn/products/cx-5461.html成肌细胞增殖情况；为进一步明确雌激素在绵羊肌肉生长发育中的作用，体外添加不同浓度的外源性雌二醇（E2），利用RT-qPCR、Western blot、CCK-8和EdU检测绵羊肌细胞增殖标志基因的表达变化。【结果】免疫荧光染色显示分离的原代细胞为绵羊成肌细胞，可用于后续功能验证；RNA原位杂交和核质分离试验表明，circZNF423主要在绵羊成肌细胞质中表达。RNAhybrid、双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验结果表明，circZNF423与oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p与CALM3 3’UTR之间均存在显著的结合关系；抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后，绵羊成肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7 mRNA与蛋白表达水平一致，均显著上调（P<0.05或P<0.01）;EdU和CCK8结果表明，抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后，绵羊成肌细胞增殖率显著上升（P<0.05）；过表达circZNF423/CALM3或抑制oar-miR-541-3p后则相反。添加不同浓度外源雌二醇（E2）后，在浓度为10 nmol·L-1时绵羊成肌细胞增殖标志因子表达最高，显著高于1和100 nmol·L-1的添加浓度（P<0.05或P<0.01）；绵羊肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7mRNA和蛋白表达水Microbial biodegradation平一致，均显著上调，circZNF423和CALM3的表达量显著降低，oar-miR-541-3p的表达量显著升高（P<0.05或P<0.01）;EdU和CCK8结果显示，体外添加雌二醇后绵羊成肌细胞增殖率显著升高（P<0.05）。【结论】绵羊成肌细胞中circZNF423作为ceRNA调控oar-miR-541-3p和CALM3的结合及表达，添加外源雌激素可通过抑制circZNF423/oar-miR-541-3p/CALM3通路促进绵羊肌肉细胞的增殖。这些结果为揭示雌激素及circZNF423在绵羊骨骼肌发育性状中的分子机制提供理论基础。

目的 研究由其他胰岛素治疗转换为每日2次德谷门冬双胰岛素（IDegAsp）或门冬胰岛素30(IAsp30)在2型糖尿病患者中Ceralasertib化学结构的安全性及血糖控制效果。方法 采用回顾性队列研究方法，选择本院2021年1月1日至6月30日期间由其他胰岛素转换为IDegAsp(IDegAsp组)或IAsp30(IAsp30组)治疗的2型糖尿病住院患者资料，胰岛素剂量调整使早餐前和晚餐前血糖达4.4～7.2 mmol·L~(-1)。收集胰岛素转换前（基线）和转换12周后（终点）胰岛素剂量、血糖及低血糖发生数据。采用倾向性评分匹配（PSM），根据2组患selleckchem PLX4032者的基线资料进行1 1匹配，并统计PSM后胰岛素剂量、血糖及低血糖Invasion biology发生情况。结果 PSM前IDegAsp组患者48例，IAsp30组103例，2组年龄、体重指数、胰岛素剂量比较有显著差异（P <0.05）。PSM后2组患者各43例，基线资料比较无显著差异（P> 0.05）。PSM后，观察终点IDegAsp组餐前胰岛素、总胰岛素剂量均显著低于IAsp30组（P <0.05）;2组均无严重低血糖事件发生，虽IDegAsp组非严重低血糖事件和夜间低血糖事件发生数、频次低于IAsp30组，但发生风险组间比较无显著差异（RR=0.55,95%CI:0.30～1.04, P> 0.05和RR=0.60,95%CI:0.14～2.51, P> 0.05）;IDegAsp组空腹血糖（FPG）、早餐前、早餐后2 h血糖、午餐后2 h血糖、晚餐前和凌晨3 00血糖均低于IAsp30组（P <0.05）;2组患者体重变化无显著差异（P> 0.05）。结论 与IAsp30相比，由其他胰岛素转换为IDegAsp，患者低血糖发生次数降低，但低血糖风险无显著差异，应用IDegAsp患者的胰岛素剂量更低，FPG改善更佳，血糖曲线更平稳。

目的 制备针对严重急性呼吸综targeted immunotherapy合征冠状病毒2(severe acute respiratselleckchem Belnacasanory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)IgA单克隆抗体,对其表达条件进行优化以提高表达量,并初步探讨IgA抗体在抗SARS-CoV-2中的效应。方法 将编码IgA1-F61抗体序列的质粒与聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)转染试剂混合后转染EXPi293F~(TM)细胞,瞬时表达抗体蛋白;通过优化重链(heavy chain,Hc)、轻链(light chain,Lc)、J链(joining chain,Jc)比例、质粒与PEI比例、转染后收获时间确定单体IgA1(monomeric IgA1,mIgA1)-F61及二聚体IgA1(dimeric IgA1,dIgA1)-F61在EXPi293F~(TM)MCC950浓度细胞中的最佳培养条件以及最佳表达量。将转染后上清经亲和层析纯化后,BCA法测定浓度,SDS-PAGE及体积排阻高效液相色谱(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)法分析抗体表达完整性及纯度,假病毒中和试验检测抗体中和活性。结果 当He与Lc比例为1:2、质粒与PEI比例为1:3、转染后5d收获上清时,mIgA1-F61最高表达量为123.45μg/mL,纯化后抗体纯度达95%以上;Hc:Lc:Jc为1:2:1时,可获得最大纯度的dIgA1-F61,达90%以上。针对OmicronBA.4/5的假病毒中和试验结果 显示,dIgA1-F61呈现优于IgG-F61的中和活性,其最大半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))降低了4倍左右。结论 成功表达了重组抗SARS-CoV-2单克隆抗体mIgA1-F61和dIgA1-F61,纯度较高,且dIgA1在体外展现出优于IgG的中和活性。

本研究旨在制备猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体(m Ab)，为PCV2免疫学诊断方法的建立和应用提供特异性抗体。首先通过原核大肠杆菌表达系统表达PCV2 Cap蛋白，Multiple markers of viral infections将纯化后的Cap蛋白在体外组装成病毒样颗粒(VLPs)，以VLPs作为免疫原免疫BALB/c小鼠，使用杂交瘤细胞技术筛选能稳定分泌抗PCV2 Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。进一步制备单抗腹水并纯化，通过Western-blot和IFA方法对单克隆抗体的特异性进行鉴定。采用逐步截取法合成45条覆盖PCV2 Cap蛋白全长的短肽，并通过间接ELISA鉴定单克隆抗体识别的表位区域。利用两株mAbs对人工感染PCV2的猪肺脏组织进行免疫组化(IHC)检测鉴定。结果表明，成功筛选两株识别PCV2 Cap蛋白单克隆杂交瘤细胞株，分别命名为1A6和1A8，其中1A6重链为Ig G2b亚型，1A8重链为Ig G1亚型，轻链均为κ链，纯化后的抗体效价均达1∶656 100。IFA结果显示，两株mAbs均能与PCV2感染的PK-15细胞发生特异性反应；Western-blot结果显示，两RP56976 IC50株mAbs均与PCV2 Cap蛋白发生特异性反应，且不与PCV3和PCV4 Cap蛋白发生交叉反应；所获抗体均识别PCV2 Cap蛋白C端selleck NMR211-225 aa肽段；IHC检测结果表明，两株mAbs均能与感染PCV2的临床样品发生特异性免疫反应。本研究成功获得了两株单克隆抗体1A6和1A8，均能识别PCV2 Cap蛋白，具有良好的特异性，为PCV2免疫学诊断方法的建立及Cap蛋白生物学功能研究提供了重要生物材料。

目的 分析免疫检查点抑制剂(ICIs)和肿瘤靶向药物相关的皮肤不良反应。方法 回顾性分析22例免疫检查点抑制剂或各种肿瘤靶向药物相关的以皮肤表现为主的不良反应的病例相关资料。结果 22例患者发生皮肤不良反应距首次使用靶向药或ICIs的时间为1 d～4年，平均发病时间为7个月。CTCAE 3级20例(90.91%),CTCAE 4级2例(9.09%)。CTCAE 3级中18例(90.00%)主要表现为红斑、丘疹，3例(15.00%)累及粘膜；CTCAE 4级的2例患者均诊断为大疱表皮松解症型药疹，同时患者还有炎症指标升高、肝功能异常等表现。其中8例患者完善皮损病理检查，出现的大疱性类天疱疮、银屑病、穿通性胶原病等病理表现与特发性疾病的病理表现相似。所有患者经过抗过敏、抗炎、更多丙种球蛋白冲击等治疗后均好转出院。结论 免疫检查点抑制剂及靶向药导致的皮肤不良反应表现多样，住院病人中以CTCAE 3～4级为主，经过激intrauterine infection素及常规治疗疗效较好。临床上需早发现早诊断早diABZI STING agonist干预。目前暂无较好方法可以预测该不良反应的发生。

目的 观察宣痹通络膏对急性痛风性关节炎(Acute Gouty Arthritis, AGA)大鼠的作用机制及NLRP3相关蛋白的表达影响。方法 将40只SPF级Wistar大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、中药组、西药组，每组各10只。中药组给予宣痹通络膏3.2 g/(kg·d)灌胃；西药组给予苯溴马隆7 mg/(kg·d)灌胃；正常组和模型组20 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。寻找更多观察大鼠踝关节肿胀程度、干预48 h后血清血尿酸水平、ELISA检测IL-1β、WB检测滑膜组织中NLRP3、Caspase-1相关蛋白含量。结果 模型组大鼠踝关节肿胀度造模4 h后开始升高，模型组与正常组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。造模12 h后，模型组高于正常组，差异有统计学意义(P<0.05)。造模24 h后中药组肿胀程度低于西药组、模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。造模48 h后，西药组、中药组肿胀程度均低于模型组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较，模型组血尿酸水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较，西药组、中药组给药后尿酸水平明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较，模型组血清IL-1β蛋白含量升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较，西药组、中Dorsomorphin纯度药组血清IL-1β蛋白含量均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与西药组比较，中药组抑制IL-1β的表达接近，差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较，模型组滑膜组织NLRP3、Caspase-1表达均升高，差异有统计学意义(P<0.type 2 immune diseases05);与模型组比较，西药组、中药组滑膜组织NLRP3、Caspase-1表达均降低，差异有统计学意义(P<0.05);中药组滑膜组织NLRP3、Caspase-1表达均优于西药组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宣痹通络膏可能通过抑制NLRP3炎症体信号通路减少NLRP3、Caspase-1蛋白表达，抑制IL-1β分化成熟，从而抑制组织炎症。