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目的 研究信迪利珠单抗结合FOLFOX6化疗方案对进展期胃癌患者免疫、血管新生及预后的影响，为改善胃癌患者预后提供参考。方法 选取2018年6月～2021年6月我院收治的120例进展期胃癌患者作为研究对象，以随机数字表法分为对照组和观察组，每组各60例。对照组采用FOLFOX6化疗方案，观察组在对照组基础上静滴信迪利珠单抗，均治疗3个周期。比较两组临床疗效、治疗前后免疫功能指标(CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+)、血管新生指标[碱性成纤维细胞因子(bFGF)、促血管生成素-2(Ang-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ES)]、血清凋亡因子[B淋巴细胞瘤基因-2蛋白(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤基因-2相关X蛋白(Bax)]水平及1年生存率。结果 观察组客观有效率(ORR)、疾病控制率(DCR)分别为60.00%、88.33%,均高于对照组(41.67%、68.33%),差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗3个周期后，观察组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平降低幅度更多小于对照组；观察组血清Ang-2、VEGF、bFGF水平与对照组相比较低，ES水平较高；观察组血清Bcl-2水平NSC125066低于对照组，Bax水平高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组1年生存率90.91%高于对照组(75.44%),差异有统计学意义(P<oncology pharmacist0.05)。结论 信迪利珠单抗结合FOLFOX6化疗方案治疗进展期胃癌患者疗效肯定，可有效抑制肿瘤血管新生，改善免疫功能，提高患者1年生存率。

细胞色素P450 2J(CYP2J)主要表达在心脏组织中,不仅代谢外源性药物,还介导内源性物质的生物转化。CYPMalaria immunity2J介导花生四烯酸(Arachidonic acGSK2118436配制id,AA)代谢生成环氧二十碳三烯酸(Eepoxyeicosatrienoic acids,EETs)。EETs是保护心血管系统的重要物质。本论文基于Cyp2j3/10基因敲除(Knockout,KO)大鼠模型研究了CYP2J基因的敲除及其酶活抑制导致心脏损伤的作用机制。首先,本文比较了野生型(Wild type,WT)大鼠和Cyp2j3/10敲除大鼠血浆中EETs的变化,研究了CYP2J敲除对心脏生理功能和心肌损伤的影响。结果证明Cyp2j3/10的敲除减少了大鼠血浆中11,12-EET和14,15-EET的含量,损害了线粒体功能,进而导致心肌炎、心肌肥厚和纤维化。虽然机体通过上调心脏功能基因Myh7、Dsp、Tnni3、Tnni2和Scn5a启动了心脏自我保护机制,但这种保护作用随着年龄的增长而消失,导致老年KO大鼠心肌损伤加重。其次,本文探究了CYP2J酶活抑制导致的心脏损伤作用及其机制。结果证明CYP2J强抑制剂索拉非尼,可以显著降低WT大鼠体内EETs的水平,进而打破心脏组织中线粒更多体融合和裂变的平衡,同时下调了线粒体供能和结构因子Pgc-1β、Pgc-1α、Ampk、Sirt1和心脏功能基因Scn5a、Prkag2的表达,增加了心律失常和心力衰竭发生的风险。综上所述,本论文证明CYP2J基因的敲除及其酶活的抑制,均可导致EETs含量降低并且造成心脏损伤。本研究为进一步探究CYP2J的功能及其介导的药物心脏副作用提供了参考。

目的:为研究薰衣草纯露对断奶仔猪的生长性能、血清生化指标、抗氧化指标和免疫功能的影响,探讨其对病死试验猪分离菌株的抑制效果,以期为薰衣草纯露作为绿色饲料添加剂提供参考数据。方法:试验分别选择健康和具有明显腹泻症状的病弱断奶仔猪各60头,均分健康对照组(JD组)、按日粮量1%、2%添加薰衣草纯露的JT1组和JT2组,以及病弱对照组(BD组)、1%添加组(BT1组)和2%添加组(BT2组)。预试5d,正试30d。于试验的第1d和30d分别称重,记录每头仔猪体重,计算ADG;连续记录每天的投料量和剩余量,计算每头仔猪的ADFI和F/G;统计各组腹泻率和死亡率。正试第30d,采集各组血清样品,检测血清中TP、ALB、TG、TC等生化指标,MAD、T-AOC、SOD、GSH-Px等抗氧化指标,Ig A、Ig M、Ig G等免疫球蛋白,以及IL-6、IL-8、IFN-β、IFN-γ、TNF-α等细胞因子的浓度。分离鉴定病死仔猪淋巴结中的细菌,选用仔猪场常用的阿莫西林、盐酸林可霉素、青霉素钠和复方磺胺间甲氧嘧啶钠4种抗菌药物以及薰衣草纯露,微量肉汤法检测薰衣草纯露对分离菌株的抑制效果和分离菌株的耐药性。结果:1、薰衣草纯露对断奶猪生长性能、血清生化指标的影响JT1组和JT2组与JD组相比较,ADG分别提高14.55%和18.19%(P>0.05),ADFI提高16.88%和18.20%(P>0.05),F/G降低1.2%和0.56%(P>0.05);腹泻率和死亡率均为0;血清TP浓度分别提高5.71%和4.44%(P>0.05),ALB浓度提高19.11%和19.51%(P>0.05),TG浓度下降18.35%和13.76%(P>0.05),TC浓度下降8.66%和3.67%(P>0.05)。BT1组和BT2组与BD组相比较,ADG分别显著提高37.50%和34.38%(P<0.05),ADFI显著提高32.50%和22.50%(P<0.05),F/G显著降低20.00%和16.36%(P<0.05);腹泻率和死亡率均显著降低50%(P<0.05);血清TP浓度分别提高12.32%和6.04%(P>0.05),ALB浓度提高30.54%和16.84%(P>0.05),TG浓度下降38.1%和17.14%(P>0.05),TC浓度下降18.93%和13.87%(P>0.05)。结果提示添加日粮量1%和2%的薰衣草纯露,能提高断奶仔猪生长性能和饲料报酬,提高仔猪机体合成蛋白质和脂肪代谢的能力,且1%添加组和2%添加组之间差异不显著(P>0.05)。2、薰衣草纯露对断奶仔猪抗氧化指标和免疫指标的影响JT1组和JT2组与JD组相比较,血清中MAD浓度分别显著提高62.01%和52.28%(P<0.05),T-AOC浓度显著提高73.59%和58.23(P<0.05),SOD浓度显著提高22.02%和16.05%(P<0.05),GSH-Px浓度提高1.05%和0.62%(P>0.05);JT1血清Ig A和Ig M浓度分别极显著升高78.01%和68.65%(P<0.01),JT2组Ig A和Ig M浓度分别显著升高73.19%selleck激酶抑制剂和49.45%(P<0.05),Ig G浓度分别提高23.61%和12.13%(P>0.05);IL-6浓度分别显著降低17.55%和7.32%(P<0.05),IL-8浓度提高3.61%和2.55%(P>0.05),IFN-β浓度显著降低15.5%和14.96%(P<0.05),IFN-γ浓度提高1.59%和1.01%(P>0.05),TNF-α浓度提高2.04%和0.95%(P>0.05)。BT1和BT2组与BD组相比较,血清中MAD浓度分别降低8.26%和1.93%(P>0.05),T-AOC浓度显著升高37.04%和17.27%(P<0.05),SOD浓度显著升高17.89%和13.10%(P<0.05),GSH-Px浓度显著升高21.1%和14.70%(P<0.05);Ig A分别提高25.09%和26.14%(P>0.05),Ig M浓度提高8.81%和9.88%(P>0.05);Ig G显著提高34.1%和35.89%(P<0.05);IL-6分别显著提高16.18%和13.25%(P<0.05),IL-8浓度提高2.13%和1.52%(P>0.05),IFN-β浓度减少7.19%和1.67%(P>0.05),IFN-γ浓度提高1.88%和1.36%(P>0.05),TNF-α浓度显著提高56.27%和50.16%(P<0.05)。可见,在日粮中添加薰衣草纯露能提高断奶仔猪机体清除自由基的能力和免疫性能,从而提高仔猪的抗病能力,尤其能增强病弱仔猪的抗病能力,且添加1%组效果优于2%组。3、薰衣草纯露对病死仔猪淋巴结分离菌株的抑制效果分离培养、PCR鉴定以及生化鉴定,共分离出3株大肠杆菌、2株污蝇杆菌和1株肠球菌。薰衣草纯露抑制大肠杆菌的MIC为8倍浓缩液,大肠杆菌的耐药性为:128μg/m L的青霉素钠和林可霉素、256μg/m L的阿莫西林以及1280μg/m L磺胺间甲氧嘧啶钠,薰衣草纯露对大肠杆菌的MBC为16倍浓缩液,相当于:256μg/m L青霉素钠和林可霉素,25Anaerobic hybrid membrane bioreactor6μg/m L阿莫西林以及>1280μg/m L的磺胺间甲氧嘧啶钠;薰衣草纯露抑制污蝇杆菌的MIC为4倍浓缩液,污蝇杆菌的耐药性为:32μg/m L的青霉素钠、林可霉素、阿莫西林以及512μg/m L磺胺间甲氧嘧啶钠,薰衣草纯露对污蝇杆菌MBC为8倍浓缩液,相当于:64μg/m L的青霉素钠、林可霉素和阿莫西林以及1280μg/m L的磺胺间甲氧嘧啶钠;薰衣草纯露抑制肠球菌的MIC为8倍浓缩液,肠球菌的耐药性为:32μg/m L的青霉素钠、林可霉素、阿莫西林以及256μg/m L的磺胺间甲氧嘧啶钠,薰衣草纯露对肠球菌的MBC为16倍浓缩液,相当于:64μg/m L青霉素钠、林可霉素和阿莫西林以及512μg/m L的磺胺间甲氧嘧啶钠。结果表明分GSKJ4核磁离的6株细菌对仔猪场常用4种抗菌药已产生耐药性,尤其对磺胺间甲氧嘧啶钠已产生严重的耐药性;浓缩薰衣草纯露对6株分离菌均有一定的抑制效果。结论:日粮中添加日粮量1%的薰衣草纯露降低了断奶仔猪腹泻率和死亡率,提高了断奶仔猪的生长性能和饲料利用效率,增强断奶仔猪合成蛋白质、脂肪代谢、清除自由基和抗病的能力,研究结果为实现薰衣草纯露作为绿色饲料添加剂提供了科学依据。

目的 分析颅脑弥散受限类疾病的MRI表现，提高弥散受限疾病定性诊断的准确性。方法 回顾性分析滨州医学院附属医院收治的颅脑常见弥散受限类疾病MRI特点，扫描序列为T1WI、T2WI、T2 Flair、DWI等检查；观察病变发生部位、形态、范围、边界、信号特征等。结果 颅脑弥散受限疾病有一定的特征，低血糖Erastin脑病(4例)，好发于双侧顶枕叶；NKH-CB(4例)，受累区域主要是基底神经节，壳核最多见，其次为尾状核；线粒体脑肌病(4例)，无明显的对称性分布的特点；CO中毒迟发性脑病(11例)，双侧苍白球、脑室周围白质；疱疹病毒性脑炎(23例)，好发于颞叶及边缘系统；酒精中毒性脑病(2例)，导水管周围灰质、乳头体及内侧丘脑对称性分布；肝性脑immature immune system病(1例),Taurine MW双侧基底节区弥散受限。结论 根据颅脑弥散受限疾病的MRI特点，结合患者的临床症状和实验室检查，大大提高颅脑弥散受限疾病的诊断准确性。

草地生态系统是陆地生态系统中最重要的组成部分,在保障食物安全、生态安全、社会稳定等方面发挥着重要作用。过去几十年来,随着全球性PD0325901细胞培养气候变化,干旱、低温、盐、碱等灾害发生频率显著上升,严重影响草地生态平衡。仅仅开展植物单一胁迫抗性的研究对于应对当前及未来复杂的气候变化有一定局限性。因此,研究揭示草原植物对多种逆境的多抗性,并利用多抗性应对气候变化,是未来适应气候变化的重要策略。羊草是一个在欧亚草原广幅分布的优势植物,具有抗旱性、耐寒性、耐盐碱性等多种抗性,是研究多抗性的优选材料。抗体组技术是一种高通量筛选抗体靶标蛋白的新兴技术,是进行植物多抗性研究的有效手段。在前期的工作基础上,以抗逆性较强的草原优势物种羊草为研究材料,选取抗性水平(抗旱7种、抗寒5种、耐盐碱7种)不同的羊草,进行相应胁迫处理,进行了羊草抗体库的构建。通过构建羊草20000个单克隆抗体的单抗文库,搭建第一个可以高通量,高重复性,高灵敏度检测羊草内源蛋白表达模式的通用性蛋白组学研究技点击此处术平台,探索羊草相较于近缘种粗山羊草的强抗逆(抗旱、抗寒、抗盐、抗碱)适应性调控分子机理,筛选出5个羊草多抗性基因,并且进行功能验证。本研究证明抗体库技术是筛选差异基因的有效途径之一,筛选出来的5个基因经过验证都是多抗性相关基因。本研究为更好地开发利用羊草的多抗性特性和机制,适应气候变化的不medical model确定性,提供科学依据和支撑。

目的 通过与耳蜗结构正常的人工耳蜗植入（cochlear implant,CI）儿童进行对比研究，探讨不同内耳畸形儿童CI术后的听觉言语发育情况C59溶解度。方法 本研究共纳入116例语前聋CI儿童。耳蜗结构正常组50例；内耳畸形组66例，其中前庭导水管扩大（large vesLung bioaccessibilitytibular aqueduct syndrome,LVAS）组24例，Mondini畸形组14例，共同腔畸形（common cavity deformity,CCD）组12例，内听道狭窄组16例（10例伴蜗神经发育不良）。使用婴幼儿有意义听觉整合量表（infants meaningful auditory integration scale,IT-MAIS）、有意义使用言语量表（mean此网站ingful use of speech scale,MUSS）、听觉行为分级问卷（categories of auditory performance,CAP）和言语可懂度分级问卷（speech intelligibility rating,SIR）评估比较各畸形组与耳蜗结构正常组术后0、6、12、24个月听觉言语康复效果。结果 经过统计分析得出，听觉感知能力方面，LVAS组及Mondini组与耳蜗结构正常组IT-MAIS和CAP得分在各评估阶段均无显著差异（P>0.05）,CCD组及内听道狭窄组与耳蜗结构正常组在开机后的6、12、24个月均有显著差异（P<0.05）；言语能力方面，LVAS组与耳蜗结构正常组MUSS和SIR得分在各评估阶段均无统计学差异（P>0.05）,Mondini组与耳蜗结构正常组MUSS得分在术后12、24个月有统计学差异（P<0.05）,SIR得分在术后各评估阶段均无显著差异，CCD组、内听道狭窄组与耳蜗结构正常组MUSS得分在术后0、6、12、24个月均有差异（P<0.05）,SIR得分在术后12、24个月差异有统计学意义（P<0.05）。结论 不同内耳畸形患儿CI术后听觉言语发育轨迹与耳蜗结构正常患儿相似，畸形类型不同术后效果差异较大，术前应根据畸形类型选择个性化耳蜗植入方案。

目的 探讨斯金纳强化理论对维持性血液透析患者容量管理的影响。方法 选取该中心维持性血液透析患者123例，采用随机数Antineoplastic and I抑制剂字表法将其分为LGK-974研究组(62例)与对照组(61例)。对照组患者采用传统的容量管理模式，即一对一责任制管理，由责任护士对患者进行饮食、饮水等容量相关知识的宣教、指导和管理；研究组采用基于斯金纳强化理论的容量管理模式，开展斯金纳强化理论教育路径，按照学习-强化-实践对患者进行容量管理。评估并记录2组患者入组时和入组后3、6个月液体摄入依从性、体重增长控制率、水肿程度、Infectious keratitis高血压控制达标率和透析中低血压发生率。结果 入组后6个月，研究组患者液体摄入依从性、体重增长控制率和高血压控制达标率均高于对照组，水肿程度、透析中低血压发生率均低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 采用斯金纳强化理论增强了维持性血液透析患者自我容量管理意识，从而提高患者的自我容量管理能力，减少透析并发症的发生，提高患者的生活质量。

研究目的:自2004年咖啡因被从兴奋剂禁用清单中移除后,其在竞技体育运动领域中的应用日益普及,并涌现了大量相关研究,碳水化合物是网球运动员在GSK1349572研究购买比赛中最常用的补剂之一。因此,本研究拟在膳食支持的基础上探索运动营养补剂对高水平网球运动员提升运动表现、延缓疲劳的使用方法Bioactivity of flavonoids,探究咖啡因单独或与碳水化合物联合使用对于优秀男子网球运动员专项身体素质以及模拟比赛期间运动表现的影响。研究方法:采用安慰剂对照、双盲、随机交叉设计,对12名青年男子国家网球二级运动员进行专项素质测试和网球运动表现测试。专项素质测试包括握力、T测试、重复冲刺能力(Repetitive-sprint ability,RSA)测试和网球递增变向击球测试(hit and turn tennis test,H&TTT);网球运动表现测试包括击球准确性测试、发球速度测试、Stroop测试以及模拟比赛。受试者在安慰剂(PLA)、碳水化合物(CHO)、咖啡因(CAF)或咖啡因+碳水化合物(CAF+CHO)的条件下进行4次测试,每次测试间隔1周洗脱期。服用CAF前后的安静HR、BP和Stroop测试结果采用配对样本t检验;专项素质能力测试中握力、T测试、RSA、H&TTT的测试成绩以及运动期间HR采用单因素方差分析,RSA测试中10次冲刺时间的数据采用双因素重复测量方差分析;运动表现测试中击球准确性得分、发球速度、模拟比赛期间的数据(发球成功率、发球得分率、接发球成功率、接发球得分率、非受迫性失误)、Stroop测试的正确率和反应时间和运动期间HR、Bla、Glu、RPE的数据采用双因素重复测量方差分析。研究结果:(1)CAF和CAF+CHO组的惯用手和非惯用手握力显著提高、T测试时间显著缩短(P<0.05);CAF组和CAF+CHO组的RSA测试冲刺时间均显寻找更多著缩短(P<0.05),CHO组的RSA测试冲刺平均时间显著缩短(P<0.05);CAF+CHO组H&TTT的冲刺完成的级数显著升高(P<0.05),CAF组和CAF+CHO组的总挥拍次数明显增加(P<0.05)。(2)CAF可以明显提高模拟比赛前击球准确性和发球速度(P<0.05);模拟比赛后,CAF和CAF+CHO组的击球准确性测试得分、第一次和第二次最大发球速度均明显提高(P<0.05);模拟比赛中CAF+CHO组的第一次和第二次发球成功率和得分率、接发球成功率和得分率均明显提高(P<0.05),以及非受迫性失误降低(P<0.05)。(3)服用咖啡因后,收缩压升高、Stroop测试中的反应时间降低和正确率增加(P<0.05);在专项素质测试中,CAF+CHO组的HR_(max)、HR_(mean)、Glu和Bla均显著提高(P<0.05);模拟比赛后的Stroop测试中,CAF、CAF+CHO组的一致性和不一致性条件下反应时间和正确率明显改善(P<0.05);模拟比赛期间,CAF+CHO组可以明显改善HR_(mean)、HR_(max)、Glu和Bla水平(P<0.05),CAF可以明显改善HR_(max)和Bla水平(P<0.05),CHO组可以明显改善Glu和Bla水平(P<0.05);CAF和CAF+CHO组的RPE明显降低(P<0.05)。研究结论:咖啡因和碳水化合物联合使用可以提高网球运动员的上肢握力、灵敏素质、有氧耐力,以及保持间歇冲刺的时间等身体素质能力,并在提高网球运动员的有氧能力以及提高RSA冲刺时间和缩短衰减率中具有更优异的表现。在比赛前1h摄入咖啡因可以提高击球准确性、发球速度和认知能力。并在比赛期间摄入碳水化合物后,相比单独摄入咖啡因会延长其优异的运动表现,同时会增加发球成功率、发球得分率和减少非受迫性失误。咖啡因联合碳水化合物使用可以显著的提高网球运动员的身体素质能力,并在模拟比赛中有利于更稳定的技战术发挥和减少击球失误。

炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)包括克罗恩病(Crohn’s disease,CD)与溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC),是一种较为常见的慢性消化道疾病,由免疫紊乱、遗传易感性和肠道菌群等因素间的复杂互作而引起的。过去十年中,IBD已成为全球公共卫生挑战,给人类的身体健康和生活质量带来了极大负担。传统免疫疗法不能长期维持IBD的缓解,且具有诸多副作用,因此靶向微生物组的调控方法(如双歧杆菌等益生菌制剂)有望成为新的治疗手段。双歧杆菌在缓解IBD方面似乎具有菌株特异性。多项研究表明,菌株的功能基因、微生物学特性、代谢活性可能是其发挥功效的重要影响因素。目前缺少针对治疗IBD进行有效菌株筛选的方法。另外,双歧杆菌发挥作用的方式以及潜在的分子机制仍然未知。基于此,本研究以数株两歧双歧杆菌(双歧杆菌属的模式种)为研究对象,通过2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitro-benzene sulfonic acid,TNBS)诱导的小鼠结肠炎建立IBD模型,探究双歧杆菌在缓解IBD相关症状的潜在功效和作用方式,并对具有不同肠炎缓解能力的两歧双歧杆菌的微生物学特性、功能基因、免疫刺激能力进行了分析,进而评估了两歧双歧杆菌菌体不同成分的免疫活性,最终确定了两歧双歧杆菌缓解TNBS诱导型结肠炎的物质基础,并进行了体内验证。本论文主要结果如下:首先,建立TNBS诱导的肠道急性损伤、急性结肠炎、慢性结肠炎等三种小鼠模型,使用biotic and abiotic stresses9株两歧双歧杆菌进行干预,通过死亡率、疾病活动指数、结肠病理、肠纤维化、炎症因子水平、肠道屏障、粪便代谢物水平以及免疫等相关指标对其肠炎缓解效果进行评价。结果表明,两歧双歧杆菌对TNBS诱导型结肠炎的缓解作用具有菌株差异性,其中3株菌(JSNJJNM2、CJ238、FJSWX19M5)能显著缓解结肠炎小鼠体重降低、DAI指数、结肠损伤以及炎症因子水平增高等症状,其抗肠炎效果较好;而菌株M203F02M632、FXJWS17M4、FBJ1M4对上述指标没有显著缓解作用。通过抗生素诱导的肠道菌群敲减小鼠模型,探究了特定两歧双歧杆菌的肠炎缓解作用与肠道菌群的关系。评估了两歧双歧杆菌对TNBS诱导型肠炎小鼠肠道菌群的影响,然后进一步研究了菌株的活性、剂量以及防治方式对两歧双歧杆菌的肠炎缓解效果的影响。结果发现,两歧双歧杆菌干预对急性肠炎小鼠的菌群结构没有显著改变;当肠道菌群敲减后,特定两歧双歧杆菌对急selleckchem CP-456773性肠炎小鼠依旧具有缓解效果;高剂量(10~9 CFU/d)的死菌CJ238对TNBS诱导型肠炎小鼠具有保护作用,并且两歧双歧杆菌对急性肠炎的预防作用优于治疗。利用比较基因组以及肠系膜淋巴结(Mesenteric lymph node,MLN)细胞共培养等技术分析具有不同肠炎缓解能力的两歧双歧杆菌的功能基因、微生物学基本特性和免疫刺激能力,并对两歧双歧杆菌的生理特性、功能基因与其肠炎缓解指标(结肠长度和脾脏指数)进行相关性分析。结果表明,两歧双歧杆菌对TNBS诱导型肠炎的缓解效果与其体外增殖能力无关,而与其黏附以及免疫刺激能力(诱导MLN产生IL-10、IL-17以及IL-12)相关;与无效菌株(M203F02M632、FXJWS17M4和FBJ1M4)相比,具有显著肠炎缓解能力的菌株(CJ238、FJSWX19M5)含有13个能编码包括Sortase、LPXTG cell wall anchor motif等的基因簇。最后,对两歧双歧杆菌的不同菌体成分进行分离,并利用体外MLN和骨髓来源的树突Belnacasan状细胞(Bone marrow dendritic cells,BMDC)等模型对其免疫活性进行评估,以确定与两歧双歧杆菌肠炎缓解效果相关的活性组分。进一步选取免疫活性最强的组分,利用正常和无菌小鼠结肠炎模型,对其体内肠炎缓解效果进行验证。结果表明,与肽聚糖、荚膜多糖、膜蛋白相比,脂磷壁酸(Lipoteichoic acid,LTA)对诱导MLN细胞分泌IL-10的免疫刺激能力最强,这种免疫刺激能力在一定浓度范围内具有剂量依赖性,同时依赖于Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)-2而不是TLR4受体信号的传导;不同菌株LTA的免疫刺激能力与其抗肠炎能力相关;源自FJSWX19M5的LTA对普通和无菌的TNBS诱导的急性结肠炎小鼠均具有显著的保护作用,并且能显著促进稳态小鼠的脾脏淋巴细胞增殖和迟发型变态反应(Delayed type hypersensitivity,DTH),具有免疫增强活性。

冠心病,是一种缺血性疾病,在我国的发病率长年居于较高水平。中国心血管健康疾病报告显示,目前全国心血管疾病的患病人数高达3.3亿,其中冠心病1139万,占全国前列。心肌梗死是最严重的冠心病类型,由于供应血液的冠状动脉完全堵塞,而易发生心肌坏死。尽管通过血管重铸、溶栓、经皮动脉介入等方法,可以恢复心肌的血液供应,减少心肌梗死的发生,但这些办法无法从根本上修复已经发生梗死的心肌细胞。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),是一种存在于骨髓中,能够进行自我复制和更新的非造血干细胞,其具有多向分化的能力。大量实验表明,在一定条件作用下骨髓间充质干细胞可以向心肌样细胞分化,用于移植到心肌梗死的区域。而诱导剂的使用使骨髓间充质干细胞的分化效率得到进一步提高,成为干细胞诱导分化选择的重点。近年来中药因其较小的药物毒性,较高的诱导分化效率,成为研究BMSCs诱导分化新的关注点。川芎嗪是从中药川芎中分离提取的一种生物碱单体,Baricitinib纯度具有诱导BMSCs定向分化的能力,同时川芎嗪也是一种钙离子拮抗剂,具有钙离子拮抗的作用。钙离子作为细胞内第二信使,在细胞代谢、细胞增殖等细胞功能的调节中发挥着不可或缺的作用。它能够参与多种细胞不同生长时期的调节,如细胞分裂、生长、分化和凋亡等。细胞内Ca~(2+)浓度的改变是介导Ca~(2+)传递的重要因素,当细胞受到物理化学等因素刺激时,细胞内Ca~(2+)浓度发生改变,从而影响细胞的生物学功能和生长分化。鉴于川芎嗪诱导分化和钙离子拮抗的作用,本实验主要目的在于研究Ca~(2+)信号在川芎嗪诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化过程中的作用。本实验采用全骨髓贴壁法分离提取BMSCs,并应用流式细胞术对培养至第3代的BMSCs进行表面抗原鉴定。运用MTT增殖实验检测不同浓度的川芎嗪对BMSCs增殖的影响,筛选川芎嗪作用于BMSCs的最适浓度,并对培养至第3代的BMSCs进行分组诱导。实验设置空白对照组,230μmol·L~(-1)川芎嗪组,230μmol·L~(-1)川芎嗪+10μmol·L~(-1)硝苯地平组,230μmol·L~(-1)川芎嗪+0.5 mmol·L~(-1) EGTA组。加药诱导4周后,分别进行形态学PUN30119研究购买和分子生物学方面的观察检测:应用Western blot检测心肌肌钙蛋白T(Cardiac troponin T,c Tn T),心肌肌钙蛋白I(Cardiac troponin I,c Tn I),结蛋白Desmin的表达;运用免疫荧光细胞染色检测心肌特异性蛋白c Tn T,c Tn I的表达;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测不同加药诱导组1周、2周和4周心肌特异性基因GATA-4的表达情况。在倒置显微镜下观察细胞的生长状况,细胞培养72h,短梭形细胞增多,细胞向外伸展;培养至7天,细胞贴壁生长,体积变大,呈梭形;加药诱导28d,细胞紧密排列,形状趋向一致,呈现方向性平行排列。流式细胞术结果表明,CD29的阳性表达率91.0%,CD45的阳性表达率2.4%,CD90的阳性表达率高达95.1%,为纯化的BMSCs,可以用于后续实验。MTT增殖实验结果显示,230μmol·L~(-1)为川芎嗪作用于BMSCs的最适浓度,差异具有统计学意义(P<0.05)。故选取230μmol·L~(-1)的川芎嗪用于后续实验。免疫荧光细胞染色结果显示,空白对照组呈阴性或弱阳性表达,其它加药诱intermedia performance导组均呈阳性表达。川芎嗪组、川芎嗪+硝苯地平组、川芎嗪+EGTA组的c Tn T,c Tn I阳性表达水平显著高于空白对照组;川芎嗪+硝苯地平组、川芎嗪+EGTA组的c Tn T,c Tn I阳性表达水平高于川芎嗪组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,川芎嗪组、川芎嗪+硝苯地平组、川芎嗪+EGTA组的c Tn T,c Tn I,Desmin表达水平明显高于空白对照组;川芎嗪+硝苯地平组、川芎嗪+EGTA组的c Tn T,c Tn I,Desmin表达水平高于川芎嗪组,差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-q PCR结果显示,G A T A-4基因在各诱导组1 w开始表达,4 W的川芎嗪+硝苯地平组的GATA-4基因表达水平明显高于1W。与空白对照组相比,川芎嗪组、川芎嗪+硝苯地平组、川芎嗪+EGTA组GATA-4基因的表达显著上调;川芎嗪+硝苯地平组,川芎嗪+EGTA组的G A T A-4基因表达水平明显高于川芎嗪组,差异具有统计学意义(P<0.05)。综上实验结果表明,川芎嗪能够在体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化,Ca~(2+)信号在川芎嗪诱导BMSCs向心肌样细胞分化的过程中起负调控作用。