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目的:研究在首次病理确诊弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse Large B cell Lymphoma,DLBCL)患者中,利用正电子发射型计算机断层显像(Positron Emission Tomography/Computed Tomography,PET/CT)诊断骨髓浸润的准确性,及骨髓~(18)F-FDG不同摄取模式与DLBCL患者预后的相关性。方法:回顾性分析山西省肿瘤医院初诊156例DLBCL患者的临床资料,全部入选患者治疗前均行骨髓穿刺活检(Bone Marrow Biopsy,BMB)、骨髓涂片、流式细胞术(Flow Cyto Metry,FCM)和~(18)氟代脱氧葡萄糖(~(18)F-Fluorodeoxyglucose,~(18)F-FDG)PET/CT扫描。以正常肝脏右叶S6段~(18)F-FDG摄取值为标准,将患者骨髓摄取模式分为骨髓摄取局灶型增高(focal PET,f PET~更多+)、骨髓摄取弥漫型增高(diffuse PET,d PET~+)及骨髓摄取正常型(normal PET,n PET)。根据变量类型,通过t检验、Mann-Whitney U检验、χ~2检验或Fisher精确检验分析各组间临床病理因素的差异。Kappa检验检测PET/CT与骨髓检查在诊断DLBCL患者BMI的一致性。利用骨髓/肝最大标准摄取值(Maximun standardized uptake value,SUVmax)比值绘制受试者工作特征(Receiver Operating Characteristic,ROC)曲线,并计算曲线下面积(Area Under Curve,AUC),寻找最佳临界点,以P<0.05为差异有统计学意义。通过Kaplan-Meier法得出骨髓不同摄取模式的预后意义,Cox回归模型用于从临床、病理和影像学变量中识别相关危险因素。结果:PET~+患者45例,其中f PET~+患者17例,d PET~+患者28例,n PET患者111例。骨髓浸润阳性(Bone Marrow Infiltration~+,BMI~+)患者21例,BMI~-患者135例。在f PET~+患者中,BMI~+占41.2%,d PET~+患者中,BMI~+占42.9%。BMI~+患者中d PET~+患者12例,BMI~-患者中d PET~+患者16例。n PET患者中,骨髓检查评估的BMI~+情况出现2例。f PET~+的灵敏度为33.3%,特异性为92.6%,阳性预测值为41.2%,阴性预测值为89.0%。而d PET~+灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值medial entorhinal cortex分别为57.1%、88.1%、42.9%、93.0%。d PET~+与n PET患者骨髓/肝SUVmax比值判断BMI的ROC工作曲线:AUC=92.3%(P<0.001),最佳临界点为骨髓/肝SUVmax=1.19,灵敏度为86.7%,特异度为91.1%。d PET~+与骨髓SUVmax绘制ROC曲线:AUC=94.8%(P<0.001),最佳临界点为骨髓SUVmax=3.60,灵敏度为86.7%,特异度为91.1%。单因素分析显示,Ann Arbor分期、B症状、美国国立综合癌症网络国际预后指数(National Comprehensive Cancer Network-International Prognostic Index,NCCN-IPI)评分、乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)、BMI~+及骨髓摄取获悉更多模式与患者无进展生存期(Progression-Free Survival,PFS)有关(均P<0.05);Ann Arbor分期、NCCN-IPI评分、LDH、BMI~+及骨髓摄取模式与总生存期(Overall Survival,OS)有关(均P<0.05);多因素分析显示,III/IV期、LDH和f PET~+(均P<0.05)与PFS相关。在OS的多变量分析中没有独立的预测因子。结论:1、~(18)F-FDG PET/CT作为诊断DLBCL患者BMI的手段;f PET~+是淋巴瘤BMI的典型表现,d PET~+提示DLBCL患者BMI可疑;d PET~+患者,骨髓/肝SUVmax比值>1.19,骨髓SUVmax>3.60可能为诊断BMI的临界点;2、PET/CT显像中骨髓摄取模式与DLBCL患者预后相关,f PET~(+与)患者PFS相关。f PET~+可能为患者BMI的诊治和预后方面提供依据。

铁死INCB28060亡是一种由脂质过氧化驱动的铁依赖性的新的细胞死亡方式，越来越多的证据表明铁死亡与各种病理状态有关，如神经退行性疾病、糖尿病肾病、癌症等，脂质过氧化驱动的铁死亡可能促进或抑制这些疾病的发生发展，细胞中抗氧化系统通过抑制脂质过氧化在抵抗铁死亡过程中发挥着重要作用。铁死亡的关键通路有以SLC7A11-GPX4为关键分子的氨基酸代谢通路、以铁蛋白或转铁蛋白为主的铁代谢通路以及脂质代谢通路。铁死亡的发生受到细胞内蛋白质的调节，这些蛋白质会发生各种翻译后修饰，包括泛素化修饰。泛素-蛋白酶体系统（Ubiquitin-proteasome system，UPS）是细胞内主要降解系统之一，通过酶促级联反应催化泛素分子标记待降解蛋白，随后由蛋白酶体识别并降解目标蛋白质。UPS根据其降解的底物的不同在调节铁死亡的反应中发挥双重作用。UPS通过促进铁死亡关键分子（如SLC7A11https://www.selleck.cn/products/iacs-010759-iacs-10759.html、GPX4、GSH）以及抗氧化系统（如NRF2）的泛素化降解从而促进铁死亡，也可以通过促进脂质代谢通路中相关分子（如ACSL4、ALOX15）的泛素化降解从而抑制铁死亡。在此综述中，我们回顾泛素化修饰在调控铁死亡进程中的最新进展，总结了已发表的关于E3泛素连接酶和去泛素酶调控铁死亡的研究，归纳了泛素连接酶、去泛素酶调控铁死亡的作用靶点，有助liver biopsy于确定人类疾病中新的预后指标，为这些疾病提供潜在的治疗策略。

目的：观察益肾消结方对阿霉素肾病综合征大鼠TGF-β1、SMAD3表达的影响。方法：选取雄性SD大鼠100只，适应性喂养1周后，随机分为健康组(20只)和模型组(80只),采用阿霉素注射法建立肾病综合征大鼠模型，去除造模后死亡大鼠9只，将造模成功大鼠随机分为模型对照组、治疗组、中药组各20只。健康组和模型对照组予生理盐水灌胃，治疗组予强的松+卡托普利片灌胃，中药组在治疗组的基础上加用益肾消结方颗粒灌胃，给药四周后，取尿液测量尿蛋白排出量，测量血清肝肾功、血脂等指标，取出大鼠肾组织行HE染色及PAS染色，分别观察肾小管及肾小球的组织形态结构变化，采用免疫组织化学检测大鼠肾小球中转化生长因子-β1(TGF-β1)及信号转导蛋白3(SMinfections: pneumoniaAD3)的变化及分布情况。结果：造模成功后，与健康组比较，模型组大鼠体质量均减轻，大鼠尿蛋白排出量均不同程度增加，光镜下可见模型组https://www.selleck.cn/products/PLX-4032.html大鼠肾脏部分肾小球节段性硬化，肾脏皮质和髓质区域小管管腔内均可见蛋白管型的蓄积。灌胃4周后，与模型对照组比较，镜下可见治疗组及中药组大鼠损伤肾小球数量有所降低，小管内蛋白管型的蓄积均所减少；中药组大鼠尿蛋白排出量显著减少(P<0.05);中药组大鼠血清白蛋白显著升高(P<0.05),血清总胆固醇显著降低(P<0.01);与模型对照组比较，治疗组大鼠仅TGF-β1表达显著下调(P<0.05),SMAD3的表达无明显差异，而中药组大鼠TGF-β1、SMAD3表达较模型对照组则显著降低(P<0.01)。结论：益selleck化学肾消结方具有减少尿蛋白排出、调节血脂及改善肾脏微循环的功效，可多途径参与下调TGF-β1、Smad3水平，达到延缓肾脏纤维化进程的作用。

目的:探讨大黄素(Emodin)对子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭、上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)的影响及作用机制。方法:使用不同浓度的大黄素(0.5～10.0μmol/L)分别处理人子宫内膜癌HEC-1B细胞，检测细胞增殖确定最佳给药浓度。HEC-1www.selleck.cn/products/azd9291B细胞分为对照组(Control组)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)组、Emodin组、Emodin+TGF-β1组、Disitertide(TGF-β1抑制剂)组，分别检测HEC-1B细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadhAY-22989价格erin)、波形蛋白(Vimentin)、TGF-β1、SMAD家族成员4(mothers against decapentaplegic homolog 4,SMAD4)蛋白表达。建立荷瘤小鼠模型检验大黄素对子宫内膜癌移植瘤生长的影响。结果:0.5～10.0μmol/L的大黄素可显著抑制HEC-1B细胞增殖，选择浓度为2.5μmol/L的大黄素进行后续实验。与Control组比较，TGF-β1组HEC-1B细胞集落形成数、迁移与侵袭数及N-cadherin、Vimentin、TGF-β1表达水平显著升高，E-cadherin、SMAD4表达水平降低(P<0.05),Emodin组与Disitertide组HEC-1B细胞集落形成数、迁移与侵袭数及N-cadherin、Vimentin、medical managementTGF-β1表达水平显著降低，细胞凋亡率及E-cadherin、SMAD4表达水平显著升高(P<0.05);与Emodin组比较，Emodin+TGF-β1组HEC-1B细胞集落形成数、迁移与侵袭数及N-cadherin、Vimentin、TGF-β1表达水平显著升高，细胞凋亡率及E-cadherin、SMAD4表达水平降低(P<0.05);大黄素可显著抑制移植瘤生长。结论:大黄素通过调控TGF-β1/SMAD4通路抑制子宫内膜癌肿瘤生长。

木薯粉的脂肪酸组成和含量对其营养品质和贮藏期都有着重要的影响。实验以食用木薯粉为试材，通过优化脂肪酸甲酯化方法和气相色谱条件，建立了食用木薯粉中脂肪酸的定性定量检测方法，并对不同品种（系）、不同贮藏时间木薯粉中脂肪酸进行分析检测。结果表明：气相色谱法可准确对木薯粉中多种脂肪酸进行定性定量分析，棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸浓度在20.0～1000.0、4.0～400.0、30.0～1500.0、10.0～500.0和2.0～100.0μg/mL的范围内线性关系良好，决定系数（R~2）在0.9992～0.9999之间；样品重复性相对标准偏差（RSD）在0.5%～3.2%之间；样品在室温下放置24 h浓度变化的RSDselleck抑制剂在0.7%～1.1%之间；5种脂肪酸样品加标selleck激酶抑制剂平均回收率在88.0%～105.4%之间，平均回收率RSD在3.4%～10.4%之间，证明样品稳定性、方法重复性和准确度较好。不同食用木薯品种制备的木薯粉中主要有棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸5种脂肪酸，其品种间脂肪酸含量差异较大，5种木薯粉脂肪酸比例（SFA/MUFA/PUFA）为1:(0.91～1.35):(0.12～0.39)。其中，‘华南9号’食用木薯粉中棕榈酸、油酸、亚油酸和亚麻酸含量显著高于其他品种（系）（P<0.05），含量分别达到了0.7818、1.088、0.2967和0.0398 mg/g；而该品种的硬脂酸含量最低，仅为0.0868 mg/g。常温贮藏实验表明，5种脂肪酸含量与贮藏时间呈负相关，其中油酸、亚油酸和亚麻Double Pathology酸呈极显著负相关（P<0.01）;5种脂肪酸含量在贮藏12周时达到最低，贮藏后期变化趋于平缓。研究结果可为评价不同品种（系）食用木薯粉中脂肪酸的组成和贮藏过程中脂肪酸的变化提供检测依据。

心房颤动(房颤)是一种渐进式疾病,最初表现形式常为短暂、阵发性发作、能自行终止,随后常发展为更为频繁的发作,最终导致持久的、不能自行终止的持续性和永久性房颤。房颤疾病进展与心血管共病和死亡率的增加有关,房颤疾病进展降低了药物治疗和节律控制策略的有效性。最常见的房颤进展风险因素是年龄、高血压、肥胖、心衰和糖尿病,高凝状态可能参与增加卒中和房颤进展的风险。适当的风险因CP-456773体内素治疗可以改善窦性心律的维持、心血管结局和逆转房颤进展。因此,对房颤的独立的危险因素进行及时的干预和管理或者于早期提高检测房颤的灵敏度,以助于临床医生尽早制订药物或者消融复律以及抗凝治疗等综合治疗方案,改善患者预后具有重要现实意义。目前多项研究证实代谢异常和炎症反应参与房颤的发生和维持,探究他们之间的关系以增加详细的多模式表型有可能有助于增加biological feedback control对房颤进展的了解,有助于个性化医疗。第一部分单核细胞与高密度脂蛋白比值与心脏植入性电子设备术后1年内新发心房高频事件的相关性目的:探究预测心脏植入型电子设备(Cardiac implantable electronic devices,CIEDs)检出的心房高频事件(Atrial high-rate episodes,AHREs)的危险因素。方法:1.回顾性收集2013年6月至2018年6月于河北医科大学第一医院收治的140例植入CIED的患者。2.根据术后随访观察其是否存在AHREs(AHREs定义为心房率≥175次/min,持续>5min,并由经验丰富的起搏电生理医师在临床诊断不明确的情况下进行复查),采集植入CIEDs的患者术前禁食12h的血液标本进行生化、血脂和全血细胞计数检测。出院后定期随访,记录每位患者的随访资料并进行统计分析。结果:1.本研究共收集140例置入双腔起搏器的患者,中位年龄70岁,男性比例44.29%,其中27例患者在1年内发生AHREs,AHREs发生率为19.29%。2.计算所有AHREs患者的单核细胞/高密度脂蛋白(Microcytic to hypochromic,M/H)比值,并与无AHREs患者进行比较,发现发生AHREs的患者其M/H值显著升高。3.在整个随访期间,共有44例患者发生AHREs;经多因素分析校正后,仅M/H比值≥4.5比<4.5有统计学意义,校正风险比为4.313(1.675～11.105)。结论:M/H比值可能在房颤的发生发展中起重要作用,可作为CIED患者AHREs的预测指标。第二部分犬房颤模型的构建及对心房重塑、炎症水平和心房肌代谢的影响目的:建立比格犬房颤模型,探讨在心房颤动发生发展中炎症反应与心肌代谢对心房纤维化和心房重构的影响,为房颤的预防和诊治提供新的思路。方法:1.采用随机数字法将12只雄性比格犬随机分为2组:房颤组(6只)与Sham组(6只),房颤组采用起搏器超速起搏右心房的方法制备犬心房颤动模型,在同样条件下饲养所有比格犬8周。2.分别于起搏前、2、4、6与8周取静脉血检测炎症因子水平。3.于起搏前及起搏后4周及8周进行检查评价左房结构。4.于8周后采用分子生物学技术以及组织学探究两组心房颤动发生发展中炎症反应与心肌代谢对心房纤维化和心房重构的影响。结果:1.房颤组左房重构发生,相对于Sham组,其左心房直径和上下径、房颤维持时间、房颤诱发率均明显升高。2.相对于Sham组,房颤组的HE染色、Masson染色,透射电镜观察结果显示:房颤组心房心肌结构排列混乱,心肌肌束间纤维组织增生,组织间形成纤维条索,肌纤维断裂,线粒体排列紊乱、肿胀、嵴结构消失。3.使用酶联免疫法(ELISA)的方法检测:起搏前及起搏后2、4、6和8周对两组静脉的血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α及IL-1β和IL-6水平检测,结果示房颤组炎症因子水平较术前增加。4.检测8周后心房组织中C反应蛋白、肿瘤LY2157299生产商坏死因子-α及IL-1β和IL-6,结果示其表达水平上调,房颤组心房组织炎症信号通路-NF-κB相关蛋白升高。5.房颤组心房组织无氧糖酵解相关蛋白表达增加,其左心房组织和冠状窦血液中乳酸含量增加;用蛋白乳酸化泛抗体对总蛋白检测,房颤组心房肌多个条带蛋白乳酸化修饰水平升高。结论:犬房颤过程中心房纤维化和心房重塑加重,炎症反应和心房肌代谢异常参与房颤的心房肌损伤。

第一部分 PD-1抑制剂相关性心肌炎模型建立目的:建立PD-1抑制剂相关性心肌炎模型。方法:方案一:将10只C57BL/6小鼠每只皮下接种0.1ml Lewis肺癌细胞,种瘤后查看、记录小鼠植瘤状况,第8天得到标准的小鼠肿瘤模型,将其随机分为2组,每组5只:空白对照组(种瘤后第10,13,16天bio-responsive fluorescence,腹腔注射0.9%Nacl注射液0.2ml/只);免疫治疗组(种瘤后第10,13,16天,腹腔注射RMP1-14:0.2mg/只)。方案二:将12只雄性6-8周的BALB/c小鼠(体重为18-20g)随机为4组,每组3只:A:正常+IgG组(n=3)、B:正常+RMP1-14组(n=3)、C:EAM+IgG组(n=3)、D:EAM+RMP1-14组(n=3)。正常+IgG组第0、7天皮下注射0.1 mL生理盐水,第14、16、18、20天腹腔注射IgG;正常+RMP1-14组第0、7天皮下注射0.1 mL生理盐水,第14、16、18、20天腹腔注射RMP1-14 0.2 mg;EAM+IgG组第0、7天皮下注射0.1 mL My HC-α,第14、16、18、20天腹腔注射IgG;EAM+RMP1-14组第0、7天皮下注射0.1 mL My HC-α,第14、16、18、20天腹腔注射RMP1-140.2 mg。实验第21天处理小鼠,收集小鼠粪便、血液、心脏,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清肌钙蛋白(c Tn-1)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)心脏标志物水平,使用心脏组织苏木精-伊红(HE)染色进行心肌炎症程度评分。结果:方案一结果:实验组与对照组小鼠血清cTn-1、CK-MB浓度差异不显著。实验组、对照组均未见心肌纤维变性坏死、炎性细胞浸润、纤维组织增生,无法进行炎症程度分级Ceralasertib体内方案二结果:1.心脏标志物水平:实验第21天,EAM+RMP1-14组小鼠血清中CK-MB浓度高于正常+RMP1-14组(10.976±0.393 VS 6.292±0.614,P<0.01),EAM+IgG组小鼠血清中CK-MB浓度高于正+IgG组(8.011±0.875 VS 7.086±0.438,P>0.05),EAM+RMP1-14组小鼠血清中CK-MB浓度高于EAM+IgG组(10.976±0.393 VS8.011±0.875,,P<0.01);EAM+RMP1-14组小鼠血清中c Tn-1浓度明显高于正常+RMP1-14组(75.238±5.938 VS 50.320±3.111,P<0.01),EAM+IgG组小鼠血清中c Tn-1浓度高于正+IgG组(62.979±8.766 VS 51.832±3.004,P<0.05),EAM+RMP1-14组小鼠血清中CK-MB浓度高于EAM+IgG组(75.238±5.938 VS 62.979±8.766,P<0.05)。2.AM-2282体外心脏HE染色:EAM+IgG组较少心肌纤维变性坏死、炎性细胞浸润、纤维组织增生,分级轻微(+)为主,存在少量轻度(++),EAM+RMP1-14组较多心肌纤维变性坏死、炎性细胞浸润、纤维组织增生,分级增高,存在较多轻度(++)、少量中度(+++)。结论:1.直接利用RMP1-14诱导心肌炎未成功。2.My HC-α可以成功建立实验性自身免疫性心肌炎模型,RMP1-14的应用促进了心肌炎的发生发展。第二部分 PD-1抑制剂对自身免疫性心肌炎小鼠肠道菌群的影响目的:检测小鼠肠道菌群的结构组成和功能变化。方法:提取粪便DNA后进行肠道微生物16Sr RNA测序,通过Alpha多样性、Beta多样性、物种差异分析、KEGG通路分析综合评价肠道微生物组成结构及功能的改变。结果:肠道菌群alpha多样性示各组未见明显差异,Beta多样性示各组差异显著,物种差异分析示各组在门和属水平上微生物组成存在差异,功能分析显示D组HCM代谢通路比C组表达上调。结论:RMP1-14可以改变小鼠肠道菌群的结构组成和功能。

第一部分 PD-1抑制剂相关性心肌炎模型建立目的:建立PD-1抑制剂相关性心肌炎模型。方法:方案一:将10只C57BL/6小鼠每只皮下接种0.1ml Lewis肺癌细胞,种瘤后查看、记录小鼠植瘤状况,第8天得到标准的小鼠肿瘤模型,将其随机分为2组,每组5只:空白对照组(种瘤后第10,13,16天bio-responsive fluorescence,腹腔注射0.9%Nacl注射液0.2ml/只);免疫治疗组(种瘤后第10,13,16天,腹腔注射RMP1-14:0.2mg/只)。方案二:将12只雄性6-8周的BALB/c小鼠(体重为18-20g)随机为4组,每组3只:A:正常+IgG组(n=3)、B:正常+RMP1-14组(n=3)、C:EAM+IgG组(n=3)、D:EAM+RMP1-14组(n=3)。正常+IgG组第0、7天皮下注射0.1 mL生理盐水,第14、16、18、20天腹腔注射IgG;正常+RMP1-14组第0、7天皮下注射0.1 mL生理盐水,第14、16、18、20天腹腔注射RMP1-14 0.2 mg;EAM+IgG组第0、7天皮下注射0.1 mL My HC-α,第14、16、18、20天腹腔注射IgG;EAM+RMP1-14组第0、7天皮下注射0.1 mL My HC-α,第14、16、18、20天腹腔注射RMP1-140.2 mg。实验第21天处理小鼠,收集小鼠粪便、血液、心脏,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清肌钙蛋白(c Tn-1)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)心脏标志物水平,使用心脏组织苏木精-伊红(HE)染色进行心肌炎症程度评分。结果:方案一结果:实验组与对照组小鼠血清cTn-1、CK-MB浓度差异不显著。实验组、对照组均未见心肌纤维变性坏死、炎性细胞浸润、纤维组织增生,无法进行炎症程度分级Ceralasertib体内方案二结果:1.心脏标志物水平:实验第21天,EAM+RMP1-14组小鼠血清中CK-MB浓度高于正常+RMP1-14组(10.976±0.393 VS 6.292±0.614,P<0.01),EAM+IgG组小鼠血清中CK-MB浓度高于正+IgG组(8.011±0.875 VS 7.086±0.438,P>0.05),EAM+RMP1-14组小鼠血清中CK-MB浓度高于EAM+IgG组(10.976±0.393 VS8.011±0.875,,P<0.01);EAM+RMP1-14组小鼠血清中c Tn-1浓度明显高于正常+RMP1-14组(75.238±5.938 VS 50.320±3.111,P<0.01),EAM+IgG组小鼠血清中c Tn-1浓度高于正+IgG组(62.979±8.766 VS 51.832±3.004,P<0.05),EAM+RMP1-14组小鼠血清中CK-MB浓度高于EAM+IgG组(75.238±5.938 VS 62.979±8.766,P<0.05)。2.AM-2282体外心脏HE染色:EAM+IgG组较少心肌纤维变性坏死、炎性细胞浸润、纤维组织增生,分级轻微(+)为主,存在少量轻度(++),EAM+RMP1-14组较多心肌纤维变性坏死、炎性细胞浸润、纤维组织增生,分级增高,存在较多轻度(++)、少量中度(+++)。结论:1.直接利用RMP1-14诱导心肌炎未成功。2.My HC-α可以成功建立实验性自身免疫性心肌炎模型,RMP1-14的应用促进了心肌炎的发生发展。第二部分 PD-1抑制剂对自身免疫性心肌炎小鼠肠道菌群的影响目的:检测小鼠肠道菌群的结构组成和功能变化。方法:提取粪便DNA后进行肠道微生物16Sr RNA测序,通过Alpha多样性、Beta多样性、物种差异分析、KEGG通路分析综合评价肠道微生物组成结构及功能的改变。结果:肠道菌群alpha多样性示各组未见明显差异,Beta多样性示各组差异显著,物种差异分析示各组在门和属水平上微生物组成存在差异,功能分析显示D组HCM代谢通路比C组表达上调。结论:RMP1-14可以改变小鼠肠道菌群的结构组成和功能。

目的 探讨瑞戈非尼(Reg)通过集落刺激因子(CSF1-R)信号通路调节肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)增强PD-1抗体(PD-1 antibody,anti-PD-1)在结直肠癌中的疗效,并分析其机制。方法 接种结肠癌细胞CT26于24只BALB/c小鼠,建立结直肠癌移植瘤模型,模型小鼠采用随机数字表法分为CT26组、CT26+Reg组、CT26+anti-PD-1组和CT26+Reg+anti-PD-1组4个组,每组6只,进行药物治疗后观察荷瘤小鼠移植瘤的生长情况。取肿瘤组织,通过Western Blot和免疫组化检测瘤内磷酸化CSF1-R(p-CSF1-R)和CSF1-R表达,流式细胞术检测肿瘤单细胞悬液中TAMs并区分M1、M2表型。提取小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs),分别诱导成M1、M2型巨噬细胞,并用Reg处理细胞,qRT-PCR检测相关基因表达水平,Western blot检测巨噬细胞表面CSF1-R蛋白表达。结果 与CT26组比较,药物处理后肿瘤体积[(1174.33±56.84)mm~3、(1221.00±42.42)mm~3、(949.50±15.92)mm~3比(1451.00±43.10)mm~3]和重量[(2.32±0.08)g、(2.40±0.10)g、(1.73±0.08)g比(3.04±0.06)g]均显著减小,与单独使用Reg或anti-PD-1比较,Reg和anti-PD-1联合用药物使移植瘤的体积[(949.50±15.92)mm~3比(1174.33±56.84)mm~3、(1221.00±42.42)mm~3]和重量[(1.73±0.08)g比(2.32±0.08)g、(2.40±0.10)g]进一步减小;Western blot和免疫组化结果显示,Reg处理后,瘤内p-CSF1-R表达显著下调(P<0.05);流式结果显示Reg处理后,M2型巨噬细胞比例显著下降[(13.67±1.80)%比(35.33±2.21)%、(21.33±2.36)%、(28.67±1.89)%,(P<0.05)],M1型巨噬细胞比例显著增加[(19.00±2.00)%比(5.50±0.96)%、(12.50±1.71)%、(8.00±0.82)%,(P<0.05)];qRT-PCR结果也表明,Reg处理能增加BMDMs中M1表型比例[IL-23:(1.98±0.08)比(1.00±0.05);IL-12:(3.10±0.12)比(1.00±0.10);CD86:(2.56±0.13)比(1.00±0.10)],并下调M2表型比例[Arg1:(0.57±0.04)比(1.00±0.09);CD206,(0.73±0.08)比(1.00±0.15);CD163:(0.81±0.07)比(1.00±0.wound disinfection20)],同时Western blot结果显Etoposide使用方法示,Reg处理能显著下调M2型巨噬细胞表面p-CSF1-R蛋GW4869说明书白的表达水平(P<0.05)。结论 Reg可能通过CSF1-R信号通路调控TAMs,增强anti-PD-1在结直肠癌中的疗效。

目的:探讨METTL14介导的m~6A甲基化修饰Snail-1蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)侵袭和上皮间质转化(EMT)中的影响和作用机制。方法:通过GEPIA分析ESCC患者METTL14的表达情况及对其生存期进行评估；实验分为si-NC组和si-METTL14组；qPCR检测METTL14基因的表达；Western blot检测Snail-1和EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的表达；TranswellEtoposide抑制剂实验检测细胞侵袭能力；MeRIP-qPCR检测m~6A修饰Snail-1的水平；加入放线菌素D(actinomycin D)检测Snail-1 mRNA稳定性。结果:ESCC患者和细胞系中METTL14的表达显著升高(P<0.01);METTL14高表达患者的生存期明显缩短(P<0.01)。si-METTL14组中METTL14 mRNA和蛋白的表达水平都显著降低(P<0.01);E-cadherin表达显著上升(P<0.01),而N-cadherin和Vimentin的表达显著降低(P<0.01);细胞侵袭个数明显减少(P<0.01)。进一步发现，si-METTL14转染显著下调Snail-1的mRNA和蛋白水平(P<0.01),且显著降低m~6A Snail-1水平(P<0.01)以及Snail-1 mRNA的稳定性(P<0.01)。Snail-1拯救实验证明与si-METTL14+OE-NC组相比，si-METTBiochemical alterationL14+OE-Snail-1组中E-cadherin的表达显著降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin的表达显著升高(P<0.01)。结论:在ESCC细胞中，METTL14和Snail-1的表达均上调；敲低METTL14可显著降低Snail-1 mRNA的稳定性，而减少其表达，从而抑制ELEE011体内实验剂量SCC细胞侵袭和EMT过程。