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目的 分析银川市2016—20JQ122年引起手足口病的柯萨奇病毒A6型(CV-A6)VP1的基因特征，为手足口病的防治工作提供有效的参考依据。方法 收集2016—2022年银川市手足口病所有CV-A6核酸呈阳性的标本进行病毒分离培养，应用一步法聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增其VP1区完整基因核酸片段进行核苷酸序列测定，利用测序结果进行系统发育树构建、同源性分析及氨基酸突变位点分析。结果 2016—2022年银川市共分离到手足口病CV-A6型毒株90株，测序后成功获得CV-A6 VP1区全长序列的毒株83株。完整VP1区基因均由915个核苷酸组成，编码305个氨基酸。系统发育分析显示，2016—2022年银川市83AZD2281抑制剂株CV-A6分离株均属于D3基因亚型的D3a分支；同源性分析表明，银川市83株CV-A6分离株与原型株Gdula株(AY421764-USA-1949)之间核苷酸相似性为82.1%～84.1%,氨基酸相似性为76.2%～80.5%,遗传距离较远；银川市83株CV-A6分离株与原型株Gdula株的VP1区氨基酸序列比较发现32个氨基酸位点出现变异。结论 2016—2022年银川市手足口病83株CV-A6分离株均属于D3基因亚型的D3aHepatocyte apoptosis分支。加强对CV-A6的持续监测及基因特征分析，对科学防控CV-A6引起的手足口病及其疫苗研发具有重要意义。

目的:骨转移在恶性肿瘤晚期较常发生,显著威胁患者的生存时间和生活质量。在临床需求的牵引下,我们自主设计并合成了一种用于靶向治疗骨转移瘤的新型双膦酸盐类放射性药物,即镥-177标记的TBM-001。本研究旨在探讨~(177)Lu-TBM-001的制备过程及基本生物学特性,进一步指导临床medical testing转化,为其今后的临床应用提供依据。方法:将TBM-001溶液、~(177)Lu Cl_3溶液及醋酸钠溶液按一定比例混合,加热反应后调节pH值,使用预处理过的阳离子交换柱及微孔无菌滤膜过滤、灭菌即可。TLC测定标记物的放射化学纯度。研究~(177)Lu-TBM-001在生理盐水、胎牛血清及磷酸盐缓冲液中的稳定性。饱和正辛醇溶液和磷酸盐缓冲液分别作为有机相和水相,计算~(177)Lu-TBM-001的脂水分配系数。将~(177)Lu-TBM-001加入不同浓度的羟基磷灰石溶液中,振荡、离心、过滤后计算羟基磷灰石结合率。选用KM白鼠注射~(177)Lu-TBM-001后进行药代动力学及体内分布研究,计算靶组织每克组织注射剂量率,同时分别计算股骨与肝脏、肌肉的摄取比。毒性试验分为~(177)Lu-TBM-001低、中、高剂量组(注射剂量分别为3.7 MBq、18.5 MBq、37 MBq),设置生理盐水对照组(注射等量生理盐水),每组随机分配4只KM鼠并动态监测小鼠进食、重量及一般情况变化,注射后4周抽血化验血常规及肝肾功能,两个月后处死并解剖不同组织送至病理检查。使用micro SPECT/CT对正常动物和骨转移荷瘤鼠进行显像。经医院伦理委员会批准,招募已确诊为恶性肿瘤骨转移,且骨病灶在~(99m)Tc-MDP骨扫描及~(68)Ga-TBM-001 PET/CT上显像剂摄取增高的患者,进行~(177)S63845作用Lu-TBM-001靶向治疗骨转移瘤的初步临床转化研究。治疗后不同时间点进行~(177)Lu-TBM-001 SPECT全身显像,通过血液生物标志物评估安全性,采用Karnofsky评分、疼痛评分及~(68)Ga-TBM-001 PET/CT评估疗效。结果:TBM-001呈白色粉末状,化学产率高。DOTA螯合剂的引用大大降低了前体用量,使用放射性核素~(177)Lu进行标记,标记过程简单。醋酸钠溶液与~(177)Lu Cl_3溶液比例为4:1,将pH调至4.5,在95℃恒温反应15min,1μg TBM-001可以成功标记37 MBq ~(177)Lu Cl_3。采用薄层色谱法测定~(177)Lu-TBM-001的放射化学纯度。固定相为硅胶板,柠檬酸钠溶液(0.1M,pH=4)作为展开剂,TLC示放射性化学纯度>98%,游离~(177)Lu Cl_3的CL 318952研究购买Rf值约0.8,~(177)Lu-TBM-001的Rf值约0.3。~(177)Lu-TBM-001在生理盐水、胎牛血清及磷酸盐缓冲溶液中孵育72 h,放射化学纯度均在90%以上。~(177)Lu-TBM-001水溶性强,与羟基磷灰石的最大结合率为99%。经静脉注入体内后,迅速从血液中清除,4 h时的血液滞留量仅为0.056±0.112%ID/g。正常小鼠micro SPECT/CT显像示,经尾静脉注射~(177)Lu-TBM-001 1h后,示踪剂迅速从血液中清除,肾脏和膀胱出现浓聚,表明药物是通过泌尿系统排出体外的。而后骨骼显影逐渐清晰,并持续浓聚。尤其是膝关节等代谢活跃部位,显像剂摄取明显增加。注射后72 h时骨骼摄取达到峰值,随后缓慢下降。除肾脏外,其他器官组织,如肝脏、肌肉等对示踪剂的摄取均较低。股骨/肝脏摄取比值(B/L)和股骨/肌肉摄取比值(B/M)分别高达68.923±18.426和203.845±85.544。骨转移模型鼠~(177)Lu-TBM-001 micro SPECT/CT显像示左侧胫骨骨皮质毛糙,局部伴骨质破坏,显像剂摄取轻度增高。在初步临床转化中,本研究共纳入了18例骨转移患者(女7例,男11例),平均年龄为54.1±15.6岁(19-73岁),注射~(177)Lu-TBM-001后多时间点SPECT显像可见骨骼显影清晰,骨转移病灶显像剂摄取增高,背景值低。18例患者中,15例患者接受了一次~(177)Lu-TBM-001治疗,3例患者接受了两次治疗。所有患者对~(177)Lu-TBM-001治疗均耐受良好,~(177)Lu-TBM-001治疗后2周白细胞和中性粒细胞略有降低,2-4周后血小板略有降低,但治疗8周后可自行恢复。每名患者在至少2个月的随访期内,数次查血检验结果无明显异常。此外,没有患者出现新的肾毒性和/或肝毒性。82%(14/17)的患者骨痛缓解。17例患者的VAS评分由基线时的2.53±1.55下降至4周时的0.76±1.03(t=4.915,p<0.001)。12例患者治疗后3天内诉疼痛明显减轻。2例患者治疗后疼痛缓解持续1个月,12例患者治疗后疼痛缓解持续2个月以上。平均KPS评分由基线时的75.88±12.11分增加到4周时的90.00±7.91分。治疗后~(68)Ga-TBM-001PET/CT评估疗效,其中PR 3例,PD 1例,SD 14例。结论:~(177)Lu-TBM-001是一种新型骨靶向的治疗性放射性药物,制备过程简单,血液清除快,药代动力学良好。动物micro SPECT及人体SPECT显像示~(177)Lu-TBM-001骨骼显影清晰,靶向浓聚并持续滞留于骨转移病灶,骨骼亲和力好。低剂量~(177)Lu-TBM-001治疗骨转移安全、有效,患者耐受性良好,是一种非常有潜力的治疗性放射性药物,可能在骨转移的治疗中有良好的前景。

随着我国经济社会的不断发展,精神疾患的问题日益严重,精神病此网站人于诉讼中的地位越来越成为影响社会稳定及人权保障的重大问题。我国刑事强制医疗的适用长期缺乏程序约束,是一个需求较大但监管相对缺失的真空地带。2012年修订的《刑事诉讼法》引入了刑事强制医疗程序,使得刑事强制医疗适用程序司法化成为可能,这有助于缓解该领域程序立法缺失的尴尬局面。然而,距离该程序正式实施已近十年时间,精神病人适用该程序的具体情况,亟需在法条理解和实证分析的基础上进行总结归纳,以确保其能够有效实施达到保护社会安全和维护患者权益的目的。刑事强制医疗程序作为一种独特的保安处分制度,其与刑事诉讼强制措施有所不同,具有实现人权保障、维护程序正义、实现社会防卫的价值理论。通过对立法现状的考察研究以及司法实践的实证分析,现今我国刑事强制医疗程序存在以下几个方面的问题:其一,适用条件的规定不完善,具体表现为行为条件限制过于严格、精神病鉴定意见缺乏实质审查、限制条件评判标准模糊等三种情形;其二,适用范围较窄,对于限制刑事责任能力的精神病人、无受审能力的精神病罪犯未作规定;其三,解除程序不够规范,实践运行中仍蕴含着许多不确定性和随意性;其四,对当事人的权利救济缺失,出现了法律援助不到位、庭审虚化等情况。而出现上述问题的根源在于法律法规的不够详尽以及执Inflammatory biomarker法者对于强制医疗程序的不够熟悉和理解。因此要解决这些问题,首先需从完善该程序的立法规定入手,完善适用条件、扩大适用对PI3K/Akt/mTOR抑制剂象;其次要规范解除程序,综合考虑相关因素、明确定期诊断评估机制;最后应保障当事人的权利,加强对法律援助工作的监督、推动强制医疗复议审理的实质化。

目的 探究血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,THBS1)基因敲除对结直肠癌免疫微环境与肿瘤进展的作用。方法 构建THBS1基因敲除小鼠，经PCR、琼脂糖凝胶电泳明确小鼠基因型。用THBS1基因野生型(THBS1~(+/+))与THBS1基因敲除(THBS1~(-/-))小鼠构建结直肠癌皮下荷瘤与腹腔种植转移模型，观察THBS1基因敲除对小鼠肿瘤生长情况的影响。用流式细胞术检测腹腔种植转移模型中THBS1基因敲除后对结直肠癌附睾脂肪中免疫细胞的变化。结果 与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1~(-/-)小鼠在结肠Worm Infection癌皮下荷瘤模型中肿瘤生长没有差异(P>0.05),而在腹腔种植转移模型中则显著抑制肿瘤生长(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示，与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1基因敲除后腹腔种植转移模型小鼠的附睾脂肪组织中总巨噬细胞比例增高(P<0.01),其中M1型(经典型或促炎型)巨噬细胞比例升高(P<0.01)、M2型(替代活化型或抗炎型)巨噬细胞比例下降(P<0.01);髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSC)比例下降(P<0.05),其中Ly6C亚群(P<0.01)比例升高，Ly6G亚群比例降低(P<0.05);CD8~+ T细胞寻找更多比例显著升高(P<0.01)、CD4~+ T细胞比例降低(P<0.01)。与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1基因敲除小鼠外周血总巨噬细胞、M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞比例均无变化(P>0.05);MDSC及ly6C亚群比例无变化(P>0.05),ly6G亚群PI3K/Akt/mTOR抑制剂比例降低(P<0.05);CD8~+ T细胞比例显著降低(P<0.05)、CD4~+ T细胞比例无变化(P>0.05)。结论 THBS1基因敲除通过增强肿瘤免疫抑制结直肠癌细胞腹腔种植转移。

目的 探究血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,THBS1)基因敲除对结直肠癌免疫微环境与肿瘤进展的作用。方法 构建THBS1基因敲除小鼠，经PCR、琼脂糖凝胶电泳明确小鼠基因型。用THBS1基因野生型(THBS1~(+/+))与THBS1基因敲除(THBS1~(-/-))小鼠构建结直肠癌皮下荷瘤与腹腔种植转移模型，观察THBS1基因敲除对小鼠肿瘤生长情况的影响。用流式细胞术检测腹腔种植转移模型中THBS1基因敲除后对结直肠癌附睾脂肪中免疫细胞的变化。结果 与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1~(-/-)小鼠在结肠Worm Infection癌皮下荷瘤模型中肿瘤生长没有差异(P>0.05),而在腹腔种植转移模型中则显著抑制肿瘤生长(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示，与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1基因敲除后腹腔种植转移模型小鼠的附睾脂肪组织中总巨噬细胞比例增高(P<0.01),其中M1型(经典型或促炎型)巨噬细胞比例升高(P<0.01)、M2型(替代活化型或抗炎型)巨噬细胞比例下降(P<0.01);髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSC)比例下降(P<0.05),其中Ly6C亚群(P<0.01)比例升高，Ly6G亚群比例降低(P<0.05);CD8~+ T细胞寻找更多比例显著升高(P<0.01)、CD4~+ T细胞比例降低(P<0.01)。与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1基因敲除小鼠外周血总巨噬细胞、M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞比例均无变化(P>0.05);MDSC及ly6C亚群比例无变化(P>0.05),ly6G亚群PI3K/Akt/mTOR抑制剂比例降低(P<0.05);CD8~+ T细胞比例显著降低(P<0.05)、CD4~+ T细胞比例无变化(P>0.05)。结论 THBS1基因敲除通过增强肿瘤免疫抑制结直肠癌细胞腹腔种植转移。

目的 探究血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,THBS1)基因敲除对结直肠癌免疫微环境与肿瘤进展的作用。方法 构建THBS1基因敲除小鼠，经PCR、琼脂糖凝胶电泳明确小鼠基因型。用THBS1基因野生型(THBS1~(+/+))与THBS1基因敲除(THBS1~(-/-))小鼠构建结直肠癌皮下荷瘤与腹腔种植转移模型，观察THBS1基因敲除对小鼠肿瘤生长情况的影响。用流式细胞术检测腹腔种植转移模型中THBS1基因敲除后对结直肠癌附睾脂肪中免疫细胞的变化。结果 与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1~(-/-)小鼠在结肠Worm Infection癌皮下荷瘤模型中肿瘤生长没有差异(P>0.05),而在腹腔种植转移模型中则显著抑制肿瘤生长(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示，与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1基因敲除后腹腔种植转移模型小鼠的附睾脂肪组织中总巨噬细胞比例增高(P<0.01),其中M1型(经典型或促炎型)巨噬细胞比例升高(P<0.01)、M2型(替代活化型或抗炎型)巨噬细胞比例下降(P<0.01);髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSC)比例下降(P<0.05),其中Ly6C亚群(P<0.01)比例升高，Ly6G亚群比例降低(P<0.05);CD8~+ T细胞寻找更多比例显著升高(P<0.01)、CD4~+ T细胞比例降低(P<0.01)。与THBS1~(+/+)小鼠相比，THBS1基因敲除小鼠外周血总巨噬细胞、M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞比例均无变化(P>0.05);MDSC及ly6C亚群比例无变化(P>0.05),ly6G亚群PI3K/Akt/mTOR抑制剂比例降低(P<0.05);CD8~+ T细胞比例显著降低(P<0.05)、CD4~+ T细胞比例无变化(P>0.05)。结论 THBS1基因敲除通过增强肿瘤免疫抑制结直肠癌细胞腹腔种植转移。

探讨柴金解郁安神片调控前扣带皮层（ACC）-腹侧海马（vHPC）谷氨酸能神经环路异常改善抑郁症大鼠腹侧海马神经元突触重塑的分子机制。首先运用化学遗传将谷氨酸能腺相关病毒（AAV）定位注射至大鼠ACC脑区，并通过慢性温和不可预知性应激（CUMS）联合孤笼饲养复制大鼠抑郁模型，实验设正常组、模型组、AAV空载组、AAV病毒组、AAV病毒+糖皮质激素受体（GR）阻断剂组、AAV病毒+趋化因子受体1（CX3CR1）阻断剂组、AAV病毒+柴金解郁安神片组，采用水迷宫（Morris water maze）、旷场（open-field）和强迫游泳（forced-swimming）试验联合动物行为分析系统评估大鼠抑郁样行为；苏木素-伊红（HE）染色检测大鼠ACC及vHPC脑区神经元形态结构变化；免疫荧光及核磷酸蛋白（c-Fos）检测大鼠ACC-vHPC谷氨酸能神经环路激活情况；高尔基染色和透射电镜检测大鼠vHPC神经元树突、树突棘及突触亚微结构变化；免疫荧光、Western blot分别检测大鼠vHPC谷氨酸能神经元细胞内突触重塑相关蛋白谷氨酸受体2A（GRIN2A）、谷氨酸受体2B（GRIN2B）、Ca~(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）、丝裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶2（MK2）、丝切蛋白（cofilinretinal pathology）表达水平。结果表明，谷氨酸能AAV病毒激活后模型组大鼠抑郁样行为表型、ACC及vHPC神经元形态结构、突触超微结构损伤更加加重，而GR、CX3CR1阻断剂均能不同程度逆转其异常改变，提示ACC脑区内胶质细胞GR/CX3CR1双信号介导的ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常激活可能与抑郁的发生发展密切相关。有趣的是，柴金解郁安神片也能显著抑制AAV病毒诱导的ACC-vHPC神经环路激活及Glu含量异常升高，同时有效逆转模型组大鼠进一步加重的抑郁样行为和vHPC谷氨酸能神经元突触重塑，并揭示其改善腹侧海马神经元突触损伤的分子机制可能与调控突触重Decitabine塑相关信号NR/CaMKⅡ、MK2/Cofilin有关。综上，本文证实了柴金解郁安神片能有效调控ACGW4869临床试验C-vHPC谷氨酸能神经环路异常进而改善抑郁症大鼠腹侧海马谷氨酸能神经元突触重塑，其分子机制可能与调节突触相关NR/CaMKⅡ、MK2/Cofilin信号通路有关，这可能是其发挥抗抑郁作用的重要机制。

生物体内一些分子的磷酸功能化对各种生命过程有着重要意义,与其相关的研究一直是科学领域焦点之一。本论文中我们利用共振拉曼散射和表面增强拉曼散射光谱方法对生物体内两种磷酸化途径功能化的生物小分子及蛋白质进行了拉曼光谱研究,包括黄素分子在纳米材料上的吸附性质、黄素蛋白的酶活性检测、巯基氧化酶的还原电位及其确认细节黄素结合域的作用、磷NK cell biology酸化蛋白质的检测,对磷酸功能化生物分子相关的生物传感器开发、疾病诊断和治疗有着一定指导作用。取得的主要研究成果如下:1.对黄素分子进行了表面增强拉曼散射光谱表征,利用密度泛函理论进行了详细归属;通过理论模型探究了黄素分子在银纳米粒子上的吸附方式;通过信号分子取代实验确定了黄素分子各基团吸附能力的强弱;研究了黄素分子在银纳米粒子上的适宜酸碱度范围和可被检测到的浓度范围。2.用共振拉曼散射光谱得到了细胞色素c氧化还原状态浓度占比的线性关系,并基于此原理分别对葡萄糖氧化酶的酶活性和葡萄糖浓度实ATM/ATR抑制剂现了一定线性范围内的定量检测。3.利用SDS-PAGE方法对巯基氧化酶Erv1的柔性区域二硫键的还原电位进行了重新评估,得到了热力学上更有利的结果;制备了磁性二氧化钛纳米材料,利用拉曼光谱探究了Erv1黄素辅酶结合域的重要作用。4.制备了一种金属离子介导的SERS纳米芯片,用于捕获并识别磷酸化氨基酸,借助密度泛函理论计算解析磷酸化氨基酸的本征拉曼振动信息,以此为基准,进一步表征了不同磷酸化位点的多肽。最终实现了对单位点磷酸化蛋白的非免疫特异性的定性识别。

背景:转移性结直肠癌(Metastatic Colorectal Cancer,mCRC)几乎无法治愈,对于不能根治的mCRC指南推荐行姑息治疗,根据患者治疗的具体情况可分为一线治疗阶段、二线治疗阶段、三线及后线治疗阶段。然而部分mCRC患者由于身体状况差、年龄大、经济困难等原因无法耐受或拒绝标准化疗及靶向治疗,转而求助于传统中医或中西医结合治疗,仍获得了较好的临床疗效。中医药治疗肠癌历史悠久,具有简、便、廉、验的特点,是我国mCRC治疗中的重要组成部分,同时中西医结合是我国恶性肿瘤治疗的优势所在。已有大量研究表明中医中药治疗可为mCRC患者带来临床获益,具有独特的临床疗效。同时中医药治疗mCRC在长期的临床实践过程中积累了大量的临床经验,很多临床研究的结果表明中医中药具有延长mCRC患者生存时间、提高患者生活质量、减少标准治疗副反应、减轻患者临床症状等作用。祛邪胶囊是杨宇飞教授治疗mCRC的常用院内方药,祛邪胶囊由明代医家李中梓所著《医宗必读》中所载的“阴阳攻积丸”加以化裁而成,具有扶正祛邪、温阳通下的功效。祛邪胶囊在中国中医科学院西苑医院应用近30年,多项随机对照临床试验(中国临床试验中心注册号:ChiCTR-IOR-16009733、ChiCTR-IOR-16008924),发现祛邪胶囊能提高 mCRC患者生活质量、降低病死率、延长患者总生存期。然而祛邪胶囊在mCRC不同治疗阶段的临床疗效是怎样的,未见有深入的研究或亚组分析提供临床证据。同时祛邪胶囊药物组方复杂,成分众多,作用机制并不单一,且仍有很大一部分作用机制未被探明。因此进一步明确祛邪胶囊在mCRC不同治疗阶段的获益情况及优势人群特征,并探索祛邪胶囊治疗结直肠癌的作用机制具有重要的临床意义。目的:分析祛邪胶囊在转移性结直肠癌不同治疗阶段的优势人群特征,探索祛邪胶囊治疗结直肠癌的作用机制。为祛邪胶囊在转移性结直肠癌的临床应用提供可靠依据。方法:临床研究部分纳入2021年11月15日-2023年1月5日就诊于西苑医院肿瘤门诊的mCRC患者60例(一线、二线、三线及以上均不少于15例),口服祛邪胶囊一日2次,一次5粒,疗程:30天(服用20天休息10天)。根据当前西医治疗的最佳中位无进展生存期(mPFS)情况,将患者区分为祛邪胶囊优势人群和祛邪胶囊非优势人群。比较优势人群与非优势人群在基线资料、外周血ctDNA丰度、免疫细胞分布、肿瘤标志物等方面的差异,总结祛邪胶囊优势人群特征,为祛邪胶囊在mCRC的临床应用提供建议。体外研究部分分别选择肠癌SW480、HT-29、Caco-2细胞,每一类型肠癌细胞均分为CTRL组(空白对照)、阴性对照组(生理盐水肠吸收液)、Qu-Xie组(祛邪胶囊肠吸收液)、阳性对照组(5-Fu)。CTRL组不予任何干预、阴性对照组予生理盐水肠吸收液、Qu-Xie组予最佳作用浓度的祛邪胶囊肠吸收液、阳性对照组予20μg/mL的5-Fu,干预时间为祛邪胶囊肠吸收液筛药时的最佳作用时间。干预完成后Fulvestrant半抑制浓度分别检测三类肠癌细胞增殖迁移能力、遗传物质损伤情况、细胞周期及凋亡、细胞癌基因蛋白表达量。结果:1.祛邪胶囊能够延长mCRC患者无进展生存期,临床用药安全性较好。常见的不良反应为腹泻,均为I-II度(CTCAE v4.03分级)。有18名患者因为I-II度腹泻导致药物用量减少。2.祛邪胶囊优势人群可能具有以下基线特征:①直肠癌占比更低、结肠癌占比更高,②溃疡型腺癌占比更低,③低分化占比更低、中-高分化占比更高,④基因分型BRAF突变率更低,⑤肝脏转移比例更低、远处淋巴结转移比例更高,⑥肿瘤负荷更低,⑦中医辨证肝郁脾虚证、脾肾两虚证占比更高,⑧一线治疗阶段占比更高,⑨既往用过靶向药物占比更低、既往用过化疗药物占比更高。3.祛邪胶囊优势人群治疗后可能会出现以下反应:①外周血ctDNA突变丰度降低,②淋巴细胞、总T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、TNF-α升高,③γδ T细胞、CEA、CA199、ALP、γ-GT 降低。4.祛邪胶囊对肠癌SW480、MLN4924HT-29、Caco-2细胞增殖、迁移具有抑制作用,抑制效果上Caco-2细胞最佳,SW480、HT-29细胞次之。5.祛邪胶囊对肠癌SW480、HT-29、Caco-2细胞遗传物质具有损伤作用,损伤效果上HT-29细胞最明显,SW480、Caco-2细胞相对较轻。6.祛邪胶囊可诱导肠癌SW480、HT-29、Caco-2细胞发生周期阻滞及细胞凋亡,周期阻滞效果上HT-29、Caco-2细胞较明显,SW480细胞不明显;细胞凋亡凋亡率上HT-29细胞最高,SW480、Caco-2细胞次之。7.祛邪胶囊可调控肠癌 Sclassification of genetic variantsW480、HT-29、Caco-2 细胞 APC、TP53、MAPK、KRAS蛋白表达,HT-29细胞癌相关蛋白表达量改变最明显、SW480细胞次之、Caco-2细胞最差。结论:祛邪胶囊能延长mCRC患者无进展生存期,祛邪胶囊优势人群可能具有以下基线特征:结肠癌占比更高、中-高分化占比更高、BRAF突变率更低、肿瘤负荷更低、肝郁脾虚证、脾肾两虚证占比更高。祛邪胶囊优势人群治疗后可能会出现以下反应:①外周血ctDNA突变丰度降低,②淋巴细胞、总T细胞、CD8+T细胞、NK 细胞、TNF-α升高,③γδ T 细胞、CEA、CA199、ALP、γ-GT 降低。祛邪胶囊治疗结直肠癌的作用机制之一是触发细胞遗传物质损伤,进而诱导肠癌细胞出现周期阻滞或细胞凋亡,从而抑制肠癌细胞的增殖迁移。但由于祛邪胶囊组方成分众多,作用机理复杂,其抗肿瘤作用并不单一,后续可继续对祛邪胶囊进行深入研究或者筛选出方中主要抗肿瘤成分进行抗肿瘤研究,以期阐明祛邪胶囊抗肿瘤的具体药效成分和全面的作用机制。

RNase T2家族成员作为酸性核酸内切酶,其广泛分布于所有生物体内。很多RNase T2家族核酸酶能够分泌至胞外,参与多种胞外生物学过程,包括清除胞外核酸及磷酸盐循环、参与植物自交不亲和性、调节氧化胁迫反应以及干扰宿主免疫反应等。然而,RNase T2在生防真菌球孢白僵菌与宿主昆虫互作过程中的作用尚不明晰。本研究以昆虫真菌病原体球孢白僵菌两个分泌性T2 RNases蛋白(BbTrv和BbRNT2)为研究对象,探究了二者在病原真菌与昆虫宿主互作过程中作用。研究发现,BbTrv和BbRNT2蛋白均能够降解胞外核糖体RNA,且依赖于其RNase活性和蛋白的糖基化Entinostat生产商修饰。BbTrv和BbRNT2基因的表达受昆虫血淋巴和氧化胁迫的诱导,两个蛋白均分布于IACS-010759半抑制浓度胞质,且在昆虫营养诱导液和被侵染的昆虫血腔中检测到大量分泌蛋白。BbTrv和BbRNT2蛋白还参与胞外磷酸盐循环利用,介导菌株氧化胁迫反应。BbTrv和BbRNT2基因双敲除导致菌株毒力下降,而过表达则显著增强菌株毒力。进一步研究表明,过表达菌株在虫体内增殖速度显著低于野生型菌株,并且宿主昆虫体内的血细胞数量亦显著低于野生菌株,推测菌株分泌的BbTrv和BbRNT2蛋白具有细胞毒性,导致血细胞数量减少并最终致死宿主。体外验证结果表明,BbTrv和BbRNT2蛋白对宿主昆虫血细胞和草地贪夜蛾sf9细胞均具有细胞毒性,引起细胞破裂死亡,而其细胞毒性须依赖于RNase活性以及蛋白的糖基化修饰。由此表明,两种分泌性T2 RNases (BbTrv和BbRNT2)可以作为细胞Hospice and palliative medicine毒性因子参与菌株的侵染致病。另外,研究发现,BbTrv和BbRNT2活性蛋白均可以显著诱导宿主昆虫的体液免疫反应。研究结果为揭示昆虫病原真菌与宿主互作的分子机制提供了新线索。