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针对传统蛋黄酱的高胆固醇、高脂、高热量的问题，以乳清蛋白（whey protein,WP）和魔芋葡甘聚糖（Konjac glucomannan,KGM）代替蛋黄、以亚麻籽油为油相，制备无胆固醇、高ω-3不饱和脂肪酸的类蛋黄酱，并探究亚麻籽油浓度对类蛋黄酱外观、微观粒径与结构、堆叠性、挤出成型等物理稳定性及流变特性的影响。结果表明：随着油相浓度的增加，液滴粒径从30.8μm降低至17.1μm，且液滴的均一性增加；体系中液滴具有良好的分散性，微观结构观察显示液滴间无絮凝现象；油相浓度从40%增加到80%时，类蛋黄酱样品的流变特性从流体性质（40%时，G′G″），粘度、弹性模量与粘性模量均随着油相浓度的增加而增加，抵抗一定外力作用下形变及变形后恢复原状能力逐渐增强，堆叠CSF-1R抑制剂性、挤出成型亦随油相浓度的增加而Bioconversion method增加。综上，可通过调控类蛋黄酱中亚麻籽油的浓度，制备较低粘度、流动AZD2281分子量性强的类蛋黄酱（油浓度40%～60%）应用于流动性和分散性要求高的酱汁类调味品中，或制备较高粘度、堆叠性强的的类蛋黄酱（油浓度70%～80）应用于有成型、涂沫要求的调味品中。

目的 探究团体心理护理在行放射治疗(简称“放疗”)的口腔颌面部恶性肿瘤术后患者中的应用效果。方法 选取2021年2月至2022年2月于华中科技大学SB431542浓度同济医学院附属同济医院行放疗的100例口腔颌面部恶性肿瘤术后患者为研究对象，按照入院编号的奇偶性分为对照组和观察组，各50例。对照组患者给予常规护理，观察组患者基于常规护理给予团体心理护理。评估2组患者的焦虑自评量表(SAS)评分、抑郁自评量表(SDS)评分、治PEG300半抑制浓度疗依从率、并发症发生率、血小板计数(PLT)、血管内皮生长因子(VEGF)水平、血清C-反应蛋白(CRP)及Stochastic epigenetic mutations白介素-6(IL-6)水平。结果 2组在护理4周后的SAS评分及SDS评分均较护理前降低(P均<0.05),且观察组均低于对照组(P均<0.05)。与对照组比较，观察组在护理4周后的治疗总依从率更高，并发症总发生率更低(P均<0.05)。与护理前比较，2组在护理4周后的PLT均下降，VEGF水平均上升(P均<0.05),且观察组均优于对照组(P均<0.05)。护理4周后，2组的CRP和IL-6水平均较护理前上升(P均<0.05),观察组的CRP和IL-6水平均低于对照组(P均<0.05)。结论 团体心理护理能够缓解行放疗的口腔颌面部恶性肿瘤术后患者的不良情绪，改善其治疗依从性及治疗指标，降低并发症发生率。

辣椒是在我国范围内普遍种植的重要蔬菜,它营养价值丰富,经济效益高,已经成为我国最主要的经济作物之一。果实品质是决定辣椒经济价值的关键,品质优良的辣椒更受消费市场喜爱。密旋链霉菌(Streptomyces pactum)Act12对辣椒、番茄等多种经济作物具有显著的促生增产效果,且可提高果实品质,但Act12对果实品质的改善机制尚不清楚。本研究选取Act12微生物菌剂,通过田间试验验证Act12对辣椒植株生长及果实品质的影响,进一步通过代谢组-转录组-宏基因组联合分析,明确Act12对辣椒果实代谢产物、代谢物相关基因表达和根际土壤微生物的影响,揭示Act12介导的代谢重编程提高辣椒果实品质的分子机制。主要研究结果如下:(1)与对照相比,Act12处理显著改善了辣椒根系生长状况,总根长增加154.1%,总投影面积增加157.2%,总表面积增加157.6%,根平均直径增加146.7%,根系总体积增加157.4%,根尖数增加74.5%;Act12处理显著提高辣椒植株的生物量,植株地上部鲜重、地上部干重、地下部鲜重、地下部干重分别提高13.97%,8.82%,11.56%,23.48%;Act12处理显著增加了辣椒产量,单株果实重量增加23.2%,亩产量增加26.7%。(2)Act12处理后,在辣椒果实中共鉴定出281种差异累积代谢物和3032个差异表达BI 10773试剂基因,KEGG富集结果表明在11个途径中显著富集的差异表达代谢物和差异表达基因具有一致的表达模式,包括“黄酮和黄酮醇生物合成”,“不饱和脂肪酸的生物合成”,“维生素B6代谢”,“抗坏血酸和醛酸代谢”,“氨基酸的生物合成”,“多种生物碱的生物合成”,“苯丙烷类生物合成”和“糖酵解”。代谢组和转录组联合分析结果显示,Act12通过显著上调黄酮类物质、脂类物质、有机酸类物质、生物碱类物质、糖类和醇类物质、氨基酸及其衍生物、维生素类物质和蒽醌、萜类等相关代谢物及相关基因表达,影响辣椒果实颜色、风味、营养及生物活性物质,对辣椒果实品质有显著的改善作用。(3)宏基因组分析结果表明,Act12处理重塑了根际土壤微生物群落结构,改变微生物群落功能。与对照相比,Act12显著增加根际土壤微生物群落丰度和多样性,其中变形菌门(67.1%)、放线菌门(31.0%)、厚壁菌门(7.5%)等相对丰度最高;LEf Se分析显示,Act12处理后苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)、辣椒溶杆菌(Lysobacter capsici)、琼胶分解菌KY YJ3(Cellvibrio sp.KY YJ3)、食酸菌JMULE5(Acidovorax sp.JMULE5)、鞘氨醇盒菌PAMC25046(Sphingopyxis sp.PAMC25046)Hydration biomarkers、抗生素溶杆菌(Lysobacter.antibioticus)、鞘氨醇盒菌QXT31(Sphingopyxis sp.QXT31)和墨西哥假黄色单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)的相对丰度有显著差异(P<0.05);根际微生物群落功能如不同环境下的微生物代谢、CAZymes(碳水化合物活性酶)、细菌分泌系统、防御机制、抗病原体和金属抗性等相关功能基因与对照相比显著上调(P<0.05)。(4)Mantel检验结果表明,根际微生物群落多样性、群落特征和微生物群落功能组成与果实品质相关代谢途径之间呈正相关(P<0.01),代谢-转录-微生物相关性网络分析揭示了辣椒根际土壤微生物群落的变化、辣椒果实基因功能与代谢之间有紧密联系,共同影响着辣椒果实品质。本研究通过代谢组、转录组和宏基因组进行多组学分析表明,S.pactum Act12显著改善辣椒的风味和色泽特征,增加了辣椒素、碳水化合物、有机Panobinostat半抑制浓度酸、黄酮、蒽醌、不饱和脂肪酸、维生素B和C、酚酸等营养物质和生物活性化合物的含量;此外,接种S.pactum Act12显著增加了辣椒根际微生物群落的多样性和潜在有益微生物类群的相对丰度。根际微生物的基因功能和辣椒代谢之间存在串扰,即Act12介导的微生物-植物-代谢重编程提高了辣椒果实品质。

与过硫酸盐相比，亚硫酸(氢)盐价格低廉，来源广泛，毒性更低。活化亚硫酸(氢)盐过程不但可产生强氧化性的SO_4~(·-)和SO_5~(·-),还可产生兼具氧化性pneumonia (infectious disease)和还原性的SO_3~(·IACS-010759化学结构-),因SB203580体内实验剂量此，活化亚硫酸(氢)盐在降解有机污染物的同时可实现自身的氧化，不会造成二次污染，具有广阔的发展前景。活化亚硫酸(氢)盐的方式主要包括光活化、过渡金属活化、炭质材料活化和电化学活化等。本文简述了活化亚硫酸(氢)盐的机制，综述了活化亚硫酸(氢)盐降解有机污染物的研究进展，解析了活化亚硫酸(氢)盐降解有机污染物的影响因素，分析了活化亚硫酸(氢)盐降解有机污染物存在的问题，展望了活化亚硫酸(氢)盐降解有机污染物的发展趋势，以期为相关学者的后续研究工作提供一定的参考。目前活化亚硫酸(氢)盐降解有机污染物技术还处于实验室研究阶段，未见相关工业应用的报道。假以时日，如若技术成熟，活化亚硫酸(氢)盐在有机污染物的降解领域必将占有一席之地。

目的：通过生物信息学技术分析影响肝癌患者生存预后的铁死亡调控基因(ferroptosiLaduviglusib体外s-related genes，Nirogacestat分子式 FRGs)，并在细胞和组织层面进行验证。方法：从TCGA数据库下载肝癌基因表达矩阵和临床数据集，并从ferrdb数据库获取与铁死亡相关的基因。使用LASSO回归分析，构建风险比例模型，并通过受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic， ROC)回顾患者1、2、3年生存率，使用单因素和多因素COX生存分析筛选肝癌的独立预后因素。并对得到的基因进行基因本体（Gene ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG)富集分析。最终进行免疫细胞和免疫功能相关评分。在人类蛋白质图谱数据库下载肝癌预后相关的FRGs的正常肝组织和肝癌组织的免疫组化的结果图。并在正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2，临床获取的六名肝癌患者手术切除的肝癌组织和癌旁组织，通过qPCR分析比较TOP20基因的表达量。结果：通过分析共得到了42个影响肝癌患者预后的相关差异表达FRGs。通过LASSO回归分析，最终筛选出11个FRGs(G6PD、HRAS、SLC1A5等)来构建肝癌患者的风险模型。生存分析发现高风险组患者的生存率显著较低风险组小，且高风险组的患者的免疫评分显著高于低风险gibberellin biosynthesis组。肿瘤的分期和我们发现的风险因素评分可以作为肝癌患者的独立预后因素。富集分析发现相关FRGs主要涉及细胞周期、脂质氧化等生物学功能。结论：FRGs能够影响肝癌患者的预后，可能是通过参与调节肿瘤细胞的氧化应激和免疫微环境实现的。

目的:本研究旨在从临床角度和基因层面探究影响上尿路尿路上皮癌(UTUC)患者预后的相关因素。通过构建临床预测模型,预测UTUC患者在1、3、5、10年内的预后情况,同时填补中国热带地区UTUC患者数据方面的空白。此外,通过筛选UTUC预后相关的铁死亡基因,建立UTUC铁死亡基因调控网络,以期为后续基因相关性功能研究提供方向和理论依据。方法:1、收集海南医学院附属海南医院泌尿外科近10年的UTUC患者临床数据,对149例患者的临床资料和生存资料进行回顾性分析。采用机器学习方法搭建随机生存森林,同时结合单因素和多因素COX分析结果,建立临床预测模型。本研究采用一致性参数C指数,综合判别改善指数IDI,净重新分类指数NRI对模型进行评价。最后以列线图形式展示模型结果。2、从GEO公共数据库中提取UTUC患者的基因表达谱(GEPs),并与铁死亡基因数据库中提取的铁死亡基因进行交集筛选,筛选出UTUC铁死亡基因。通过GO和KEGG通路分析,挖掘UTUC铁死亡基因的功能富集结果。使用String在线数据库绘制UTUC铁死亡基因的PPBelumosudil细胞培养I调控网络。最后结合预后相关基因,构建风险预测模型。结果:1、从海南医学院附属海南医院收集的病例共187例,去除失访信息后最终纳入研究共149例,病例资料完整共66例。其中男女比例约3:2,发病年龄在38-88岁(中位年龄67岁),生存时间约21-4010天(中位天数706天)。通过机器学习搭建随机生存森林,发现肿瘤分期在模型中的重要性评分最高,而T分期,是否手术,手术方式及肿瘤大小等变量评分逐渐降低Bioactive material。采用单因素COX分析结果显示发病年龄、是否手术、手术方式、肿瘤大小、病理诊断、肿瘤分期、T、N、肿瘤分级、NLR、PLR、LMR、SII、SIRI等均是影响UTUC预后的危险因素(P<0.05)。行多因素COX分析结果显示发病年龄、是否手术、肿瘤分期是影响UTUC患者预后的独立危险因素。将这些因素作为预测因子构建临床预测模型。绘制校准曲线发现实际值与预测值结果较为相似。计算评价新模型的C指数为0.845,IDI指数结果为0.284,NRI指数结果为0.800。与传统TNM分期模型(C=0.705)进行比较,可以认为新模型预测效果更好,预测结果更加准确。2、从GEO公共数据库中筛选的UTUC基因表达谱数据共33例。从Gene Cards,NCBI,Ferr Db三大基因数据库下载的铁死亡基因共764个。设置adj.p值<0.05和|log_2FC|>1.0作为筛选差异基因的临界值,共筛选出差异基因952个。最后获得的铁死亡差异基因共50个。通过GO富集分析发现,这些基因显著参与氨基酸跨质膜输入,DNA结合转录因子活性的调节,同时参与介导细胞骨架和细胞外基质的结构成分,与多种跨膜转运蛋白活性有关。KEGG通路分析结果表明这些基因主要富集在铁死亡,动脉粥样硬化,癌症途径,癌症中枢碳代谢,和海马信号等相关通路。然后采用单因素COX回归分析筛选UTUC预后基因,结合铁死亡差异基因,共筛选出5个UTUC铁死亡预后差异基因(RGS4,KR购买TamoxifenT16,SCARA5,LRFN5,SLC7A5)。根据这5个基因构建风险预测模型。结论:1、本研究通过对149例UTUC患者的临床信息进行统计学分析,采用机器学习和单因素及多因素COX回归分析的方法,构建预测UTUC患者1、3、5、10年生存率的临床预测模型。通过对模型进行评价,发现新模型的预测精度更高,可以为临床医师指导患者预后提供一定参考价值。2、本研究共筛选出5个具有差异的铁死亡预后基因,使用lasso回归去除过拟合基因后,构建风险预测模型。根据风险曲线和生存曲线可以发现,高低风险两组患者的预后存在明显差异。

背景慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)是一个重要的公共卫生问题,随着肾功能的进展,可进展至终末期肾脏病(end-stage renal disease,ESRD)即尿毒症阶段。血液透析(hemodialysis,HD)是常用的肾脏替代治疗方式之一,自体动静脉内瘘(arteriovenous fistula,AVF)是HD患者优选的透析通路。但AVF较高的早期成熟障碍及失功率限制了其临床应用。静脉流出道狭窄是AVF失功的常见原因,其病理基础是静脉内膜增生(neointimal hyperplasia,NIH)。NIH的发生发展与血管内病理机制有关,包括炎症、氧化应激等一系列级联反应和血管重塑,致血管狭窄、血栓形成,最终导致AVF的失功。C-kit是一种酪氨酸激酶受体,与配体干细胞生长因子(stem cell growth factor,SCF)结合后,可通过一系列信号通路参与细胞增殖分化的调控。C-kit已被证明在动脉损伤后再狭窄、动脉粥样硬化等方面发挥重要作用,但在AVF失功的关键机制NIH中的作用,尚未完全阐明。目的通过回顾性队列研究,探讨ESRD患者AVF建立后的通畅率及AVF失功的临床预测指标和相关生物学标志物;建立患者生物样本库,研究NIH导致AVF失功患者与首次行AVF患者,血管内膜中c-kit表达与血管形态学指标的变化及相关性,探讨下游磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt信号通路的表达变化;建立肾衰竭大鼠腹主动脉-下腔静脉内瘘(aortocaval fistulas,ACF)的双损伤模型,观察应用c-kit特异性抑制剂(伊马替尼)干预治疗后的不同时间点,ACF内膜中c-kit表达与血管形态学指标的变化及相关性,探讨抑制c-kit对ACF建立后NIH的影响。方法探讨290名ESRD患者初次行AVF手术后在12、24、36、48和60个月时AVF的通畅率;应用Cox比例风险回归分析,探讨AVF失功的独立危险因素;利用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked-immune-sorbent-assay,ELISA)测定血清 SCF 与内皮细胞激活指标E-选择素(E-selectin,ES)、磷脂酰基醇蛋白聚糖1(Glypican-1,GPC1)水平,并研究SCF与ES、GPC1之间的相关性。纳入首次行AVF和AVF因NIH而失功的ESRD患者进行研究(术前组,n=14;失功组,n=1 6)。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和弹力纤维(Verhoeff-Van Gieson,EVG)染色用于组织形态计量学分析;免疫组织化学方法检测c-kit在血管内膜中的表达,并与血管内膜面积及面积狭窄率进行相关分析;免疫荧光双标记法检测c-kit与α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscle actin,α-SMA)和CD31的共定位情况;蛋白免疫印迹法检测 c-kit 及相关的 PI3K/Akt 信号轴上 PI3K、P-PI3K、Akt、P-Akt473、P-Akt308和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的表达。先通过喂食含0.75%腺嘌呤饮食建立大鼠肾衰竭模型(肾衰竭组),对照组为正常饮食大鼠;再于肾衰竭大鼠基础上构建ACF模型,术后分别给予生理盐水灌胃(双损伤模型组)、伊马替尼灌胃(伊马替尼组)1周,ACF术后4周、6周和8周时取材;免疫组织化学方法检测血管内膜中c-kit的表达变化,EVG染色观察形态学指标变化;将c-kit在血管内膜中的表达量与血管内膜厚度及管腔面积进行相关性分析。结果Kaplan-Meier生存分析显示,ESRD患者前臂AVF的通畅率在12、24、36、48、60个月时分别为89.0%,84.1%,79.3%,77.6%和77.6%;在Cox比例风险回归粗分析中心血管疾病(cardiovascular disease,CVD),抗血小板药物,他汀类药物,D-二聚体(每增加1mg/L),血清白蛋白(每1g/L增加),和钙(每增加1g/L)与AVF失功独立相关,Laboratory biomarkersHR分别为 1.63(95%CI,1.00-2.65),1.92(95%CI,1.08-3.41),1.97(95%CI,1.05-3.69),1.08(95%CI,1.02-1.15),0.96(95%CI,0.92-0.99)和 0.37(95%CI,0.16-0.89)。Cox分析校正了混杂因素后,只有高血压与AVF失功相关(HR=8.47,95%CI=1.12-63.84);患者血清 SCF 与 ES、GPC1 均呈正相关(ES:R=0.42,P<0.001;GPC1:R=0.44,P<0.001)。ESRD患者AVF失功组的内弹力板面积、内膜面积、狭窄程度百分比和内膜中c-kit平均光密度值(average optical density,AOD)均显著高于术前组(P≤0.001);C-kit在血管内膜中的表达与内膜面积和管腔狭窄程度均呈正相关(内膜面积R=selleck合成0.744,P<0.001;狭窄程度R=0.923,P<0.001);免疫荧光染色提示,c-kit与α-SMA共定位,但未观察到与CD31共定位;蛋白免疫印迹法研究显示,失功组PI3K/Akt轴上c-kit、P-PI3K、P-Akt473和mTOR蛋白表达水平均显著高于术前组(P<0.05)。生化、病理染色及超声证实,可成功建立大鼠肾衰竭+ACF双损伤模型;肾衰竭组大鼠下腔静脉(infPidnarulex体外erior vena cava,IVC)内膜上有c-kit阳性表达,而对照组IVC内膜没有c-kit阳性表达,两组间静脉内膜厚度无统计学差异(P=0.06);伊马替尼组术后8周时可抑制ACF内膜中c-kit表达(P=0.04)。与双损伤模型组相比,伊马替尼组在术后6周、8周内膜厚度降低(术后6周P=0.03;术后8周P=0.001)、术后8周管腔面积显著增加(P=0.01);C-kit在ACF内膜中的表达量与内膜厚度呈正相关(R=0.664,P=0.003)与管腔面积呈负相关(R=-0.563,P=0.015)。结论1.本回顾性队列研究显示,ESRD患者前臂AVF建立后初级通畅率逐年降低,在60个月时初级通畅率降至77.6%。基线血浆D-二聚体水平未能预测AVF的失功。血清SCF与内皮细胞的激活有关,提示SCF及其特异性受体c-kit可能在AVF失功过程中发挥作用。2.在患者的血管组织中,c-kit的表达升高与NIH狭窄程度显著相关,且PI3K/Akt通路相关蛋白表达升高,提示c-kit及下游PI3K/Akt通路可能参与了 AVF中NIH的发生发展。3.腺嘌呤诱导的肾衰竭大鼠ACF双损伤模型成功建立后,应用c-kit特异性抑制剂伊马替尼进行干预治疗,可抑制ACF内膜中c-kit表达、减少内膜厚度、增加管腔面积,提示伊马替尼干预治疗具有延缓NIH的作用。

硒(Selenium,Se)是机体中必需的一种营养微量元素,对机体的健康至关重要。硒缺乏会引起鸡腹泻,甚至死亡,从而影响家禽养殖业的经济发展。腹泻与肠道健康相关,小肠是机体消化吸收的重要场所,也是吸收硒的重要部位,缺硒导致的肠道损伤会严重危害动物的健康和生产性能。研究发现缺硒会引发肠黏膜出血、肠道完整性破坏、氧化应激、炎性细胞浸润、上皮细胞坏死等。在机体内,硒以硒代半胱氨酸的形式发挥抗氧化功能,硒缺乏引起的氧化应激损伤与硒蛋白的失活有关,谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidases,GPXs)家族中的GPX3是具有抗氧化作用的硒蛋白之一,在肠道中起到减少氧化应激和炎症的关键作用。竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ce RNA)是近年来发现的一种新型调控网络,涉及到一种新的转录后分子调控方式,长链非编码RNA(long non coding RNA,Lnc RNA)能够作为ce RNA竞争性地与micro RNA(miRNA)结合,调控细胞程序性坏死。越来越多的研究发现,硒蛋白与ce RNA调控网络存在互作关系,但缺硒引起的GPX3表达变化与ce RNA调控网络的相关性以及非编码RNA/GPX3轴在肉鸡缺硒性肠炎中的作用机制尚不明确。课题组前期研究发Staurosporine现,Lnc RNAWSF27、miR1696和GPX3存在ce RNA调控关系,为进一步确定Lnc RNAWSF27/miR-1696/GPX3轴在鸡缺硒性肠炎发生中的作用及调控机制,本试验复制了鸡缺硒肠炎模型,应用透射电镜和H&E染色观察十二指肠和空肠组织形态学变化,采用免疫组化、免疫印迹(western blot)、实时荧光定量PCR(q RT-PCR)等技术,检测25种硒蛋白、氧化应激、细胞程序性坏死、炎症因子和紧密连接相关基因及蛋白的表达。通过体外培养缺硒鸡小肠上皮细胞,建立鸡小肠上皮细胞Lnc RNAWSF27敲低模型、miR-1696敲低/过表达模型以及GPX3敲低/过表达模型,应用WB、q RT-PCR、AO/EB染色、ROS染色、荧光葡聚糖标记法、HRP示踪剂标记法等技术,检测肠氧化应激水平、细胞程序性坏死的激活情况、炎症程度和紧密连接相关因子的表达及细胞旁路通透性情况,旨在确定缺硒引起的肠GPX3表达变化与Lnc RNANN2211作用WSF27和miR1696的调节关系以及揭示Lnc RNAWSF27/miR-1696/GPX3轴调控鸡缺硒性肠炎发生的作用机制。试验结果如下:(1)采用低硒日粮饲喂肉鸡后,成功复制了硒缺乏肉鸡小肠损伤模型。H&E染色观察结果显示,硒缺乏肉鸡十二指肠和空肠的肌层断裂,肠腺、绒毛发生严重变形,肌层和黏膜固有层出现炎性细胞浸润,黏膜固有层细胞出现核固缩。透射电镜观察结果显示,缺硒肉鸡十二指肠、空肠肠绒毛断裂、溶解,细胞结构变形,细胞膜发生断裂,核溶解、消失,内质网肿胀断裂,线粒体肿大和嵴消失,细胞间紧密连接结构破坏,呈现出明显的坏死特征,表明缺硒引起鸡小肠组织坏死病变。(2)缺硒会影响鸡小肠硒蛋白表达,25种硒蛋白的m RNA水平检测结果显示,在空肠中GPX1、GPX3、Dio1、Dio3的表达降低较为显著,十二指肠中GPX3、Dio1、Dio2、Sel I、Sel K、Sel M、Sel W的表达降低较为显著,其中GPX3降低的最显著。根据之前的研究,为进一步验证肠GPX3与Lnc RNAWSF27和miR-1696的调节关系,在缺硒鸡小肠中检测到Lnc RNAWSF27表达显著降低,miR-1696的表达显著升高。同时,缺硒会导致鸡小肠上皮细胞中Lnc RNAWSF27、GPX3表达降低,miR-1696的表达升高。在鸡小肠上皮细胞中,敲低Lnc RNAWSF27会升高miR-1696的表达,从而降低GPX3的m RNA和蛋白水平。过表达或敲低miR-1696会降低或升高Lnc RNAWSF27、GPX3的表达。这表明在鸡小肠中Lnc RNAWSF27能够作为miR-1696的分子海绵,竞争性地结合miR-1696,调节miR-1696以及GPX3的表达。(3)对于缺硒造成鸡小肠氧化损伤的进一步研究结果显示空肠、十二指肠中CAT活性显著降低,GSH-px、GSH、SOD含量显著降低,MDA含量显著升高。此外,CAT、GST、HO-1、SOD1、SOD2的m RNA水平均显著降低。在缺硒鸡小肠上皮细胞中60%的硒蛋白m RNA表达水平降低,其中GPX3降低最为显著。氧化应激相关指标表达水平的检测结果显示CAT、GST、HO-1、SOD1、SOD2的表达均显著下调,ROS水平显著升高,NAC的处理会减少ROS水平以及细胞死亡,表明缺硒导致了鸡小肠氧化应激的激活。在鸡小肠上皮细胞中,分别敲低Lnc RNAWSF27、敲低GPX3、过表达miR-1696后,ROS水平增加,氧化应激相关指标的表达水平显著下调,伴随着程序性坏死的加剧,最终导致炎症反应,表明Lnc RNAWSF27低表达、miR-1696过表达、GPX3低表达会激活鸡小肠上皮细胞氧化应激。同时敲低Lnc RNAWSF27和miR-1696后,低表达的miR-1696能够缓解敲低Lnc RNAWSF27造成的鸡小肠上皮细胞氧化应激的发生,抑制细胞程序性坏死通路,阻止炎症反应,表明在鸡小肠上皮细胞中Lnc RNAWSF27/miR-1696能减少GPX3的表达引起氧化应激反应,加剧细胞程序性坏死,最终导致细胞炎症反应。(4)根据形态学呈现出的坏死特征,空肠、十二指肠免疫组化结果显示缺硒导Immunochromatographic tests致组织中RIPK1含量升高。对空肠、十二指肠组织内程序性坏死相关基因进行检测,结果显示缺硒增加鸡肠组织和鸡小肠上皮细胞中TNF-α、RIPK1、RIPK3、MLKL表达水平,降低Caspase-8和FADD表达水平,表明缺硒导致鸡小肠发生程序性坏死。在鸡小肠上皮细胞中,分别敲低Lnc RNAWSF27、敲低GPX3、过表达miR-1696后,细胞程序性坏死水平增加,经Nec-1处理后有所缓解,表明Lnc RNAWSF27低表达、miR-1696过表达、GPX3低表达会造成鸡小肠上皮细胞程序性坏死。同时敲低Lnc RNAWSF27和miR-1696,发现低表达的miR-1696能够缓解敲低Lnc RNAWSF27造成的鸡小肠上皮细胞程序性坏死,表明Lnc RNAWSF27能够竞争性地结合miR-1696并降低GPX3的表达,参与缺硒造成的鸡小肠细胞程序性坏死。(5)病理组织学观察到肠肌层、黏膜固有层出现炎性细胞浸润后,进一步对组织中炎症因子进行检测,结果显示IL-1β、IL-2、IL-6、NF-κB、i NOS、COX-2、PTGE表达量显著上调,IL-10表达量显著下调。同时,缺硒导致鸡小肠上皮细胞中炎症反应增加,以上结果表明缺硒诱发鸡小肠炎症反应。在鸡小肠上皮细胞中,分别敲低Lnc RNAWSF27、敲低GPX3、过表达miR-1696后,炎症水平增加,经Nec-1处理后,促炎因子表达显著降低,表明Lnc RNAWSF27低表达、miR-1696过表达、GPX3低表达会加剧鸡小肠上皮细胞炎症反应。同时敲低Lnc RNAWSF27和miR-1696,发现低表达的miR-1696能够缓解敲低Lnc RNAWSF27造成的鸡小肠上皮细胞程序性坏死以及炎症反应,表明Lnc RNAWSF27/miR-1696能降低GPX3表达,加剧鸡小肠上皮细胞炎症反应。(6)缺硒会导致会激活空肠、十二指肠中ERK、JNK、p38的表达显著升高,同时,ZO-1、Occludin-1、RAPGEF2、Rap2c、Claudin-1的表达显著降低,而Rho A、Rock的表达显著升高。缺硒鸡小肠上皮细胞中MAPK通路基因水平升高,维持紧密连接完整性的相关基因表达降低,细胞旁路通透性增加,表明缺硒会导致鸡小肠紧密连接损伤。在鸡小肠上皮细胞中,分别敲低Lnc RNAWSF27、敲低GPX3、过表达miR-1696后,MAPK通路激活并加剧紧密连接损伤,经Nec-1处理后有所缓解,表明Lnc RNAWSF27低表达、miR-1696过表达、GPX3低表达会导致鸡小肠上皮细胞紧密连接损伤,增加细胞旁路通透性。同时敲低Lnc RNAWSF27和miR-1696,发现低表达的miR-1696能够缓解敲低Lnc RNAWSF27造成的鸡小肠上皮细胞紧密连接损伤,恢复细胞旁路通透性,表明Lnc RNAWSF27/miR-1696能降低GPX3表达,破坏鸡小肠上皮细胞紧密连接。综上所述,缺硒会通过抑制Lnc RNAWSF27的表达,导致miR-1696表达升高,从而降低GPX3的表达,低表达的GPX3会激活鸡小肠氧化应激,导致程序性坏死进而引发肠炎。我们的结果表明Lnc RNAWSF27、miR-1696、GPX3均参与调节缺硒诱导的鸡肠程序性坏死和炎症损伤,Lnc RNAWSF27和miR-1696之间的相互作用能够调控GPX3参与程序性坏死介导的鸡缺硒性肠炎,同时氧化应激的发生还会激活MAPK通路,诱导肠道紧密连接损伤。该结论丰富了对硒缺乏引起肠道损伤机制的理解,进一步充实了硒生物学功能,为比较医学提供借鉴。同时,该研究将有助于缺硒性肠炎的诊断及药物开发。

射线对细胞的损伤作用通常分为直接和间接两种,直接作用指射线直接引起的生物大分子电离等损伤,间接作用指放射后持续高水平的氧化应激。间接损伤作用的主要致伤因素是活性氧自由基(ROS),射线通过水的电离只能诱导短暂的ROS产生(10秒左右),但已明确放射后存在持续增加的氧化应激,表明放射后的ROS还有其他来源。已有研究表明,线粒体是细胞内ROS的主要来源,且ROS与放射诱导的氧化应激密切相关。通过用多种特异性的线粒体ROS指示剂检测,发现在放射后线粒体产生的ROS持续增加。持续增加的氧化应激可导获悉更多致细胞内抗氧化剂的过度消耗,并导致线粒体的进一步损伤和产生更多的ROS,从而形成恶性循环,增加细胞死亡的风险。过多的ROS可导致线粒体膜的损伤,引起线粒体膜通透性增加PF-07321332核磁。线粒体膜通透性增加会促使线粒体依赖的细胞促凋亡分子细胞色素C释放到胞质中,激活caspase 9依赖性的细胞凋亡通路,引起受损细胞的凋亡。而线粒体膜通透性持续增加又会导致mtDNlow-density bioinksA释放到细胞质中,释放的mtDNA可被细胞内环鸟苷酸腺苷酸合成酶识别,进而诱导环鸟苷酸腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)炎症通路的激活,炎症反应也是导致放射后细胞损伤的重要机制。除了典型的细胞凋亡外,线粒体还参与其他形式的细胞死亡,包括坏死、焦亡、铁死亡等。而一些抑制线粒体氧化应激的制剂能显著改善放射后的细胞死亡情况,进一步证明了线粒体在放射诱导的细胞死亡中发挥着关键作用。放射损伤后,持续的高ROS水平环境还会导致细胞的远期损伤效应。而细胞衰老是放射后极易被忽视的一种变化,放射可引起线粒体功能障碍和线粒体数量增加,这两种现象在衰老细胞中普遍存在。而持续的ROS产生能促进二次放射后的细胞衰老,加重二次放射损伤效应;放射诱导的ROS也可扩散到细胞核并导致持续的细胞核基因组不稳定,并可能会引起肿瘤的发生。

目的 回顾性分析Baf-A1分子量并比较Smoothened Agonist采购CalliSpheres药物洗脱微球和空白微球经支气管动脉化疗栓塞术治疗中晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法 收集50例经放、化疗、靶向及免疫治疗后无效或复发的中晚期非小细胞肺癌患者，进行超选择性支气管动脉化疗栓塞治疗。通过回顾性分析，比较CalliSpheres药物洗脱微球和空白微球两组间肿瘤治疗有效率和生存期的差异。结果 术后药物洗脱微球组PR、ORR、DCR均高于空白微球组，其中术后1个月两组间DCR差异有统计学意义（χ2=4.08,P=0.0Symbiotic drink4）。术后药物洗脱微球组PD低于空白微球组；术后药物洗脱微球组的CEA、CYF、SCC均低于空白微球组，两组术后CEA、CYF、SCC均低于术前，其中两组间术后1个月CEA、CYF差异有统计学意义（P <0.05）；药物洗脱微球组PFS、OS均高于空白微球组。结论 CalliSpheres药物洗脱微球相较于空白微球经动脉化疗栓塞术可更有效地提高肿瘤治疗有效率及延长生存时间，为其治疗中晚期非小细胞肺癌提供可靠的临床实践依据。