叶色突变体不仅是水稻功能基因组学研究的理想材料,同时对杂交水稻育种也具有重要意义,还可以作为观赏稻打造乡村休闲农业观光旅游点,促进乡村振兴。本研究基于课题组前期辐射诱变获得的一个水稻亮绿叶突变体bgl-2,比较了突变体bgl-2与野生型SIPI在叶片颜色上的差异,结果表明突变体bgl-2叶片呈现出不同于野生型SIPI的亮绿色。在分蘖期利用95%的乙醇提取测定叶片中的光合色素含量,结果发现突变PS-341体bgl-2的叶绿素含量与野生型SIPI相比无显著差异。观察突变体bgl-2其他的植株形态发现,其剑叶和倒二叶叶尖均表现不同于野生型SIPI的弯折形态,且剑叶显著短于野生型SIPI,同时其株高也显著矮于野生型SIPI。收种后拷种发现,突变体bgl-2的千粒重、粒长Ceralasertib IC50和粒宽均显著小于野生型SIPI,但其长宽比与野生型SIPI的相比无显著差异。通过透射电镜观察分蘖期野生型SIPI和突变体bgl-2剑叶叶细胞结构,表明突变体bgl-2的细胞壁显著增厚,但细胞膜外膜厚度显著减小,内膜几乎退化,且其叶绿体超微结构中的类囊体的片层结构比野生型SIPI的疏松。通过将突变体bgl-2作为母本,野生型SIPI作为父本,进行杂交获得F_1代植株,调查发现其叶片表现正常绿色,且剑叶和倒二叶形态正常,而自交后的F_2代群体分离出叶色差异明显的正常绿叶苗和亮绿叶苗。统计群体中植株表型的分离比,卡方测验表明MEM minimum essential medium其符合隐性单基因的3∶1遗传分离模式。上述结果明确了突变体bgl-2的表型和遗传特征,为突变体bgl-2的分子调控机制研究和促进其在水稻育种上的应用提供理论依据,后续将进行BGL-2基因的定位克隆和功能分析。
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褪黑素通过调控miRNA-29b-3p促进胃癌氧化性损伤的研究进展
目的:褪黑素(Melatonin,MT)具有抗肿瘤作用,但其具体抗肿瘤的潜在机制尚不清楚。在本文中,我们通过多种实验验证了MT在胃癌细胞中的重要作用,并进一步探究其潜在的分子机制,探究其作为抗癌药物的可能性。方法:1.构建不同浓度MT作用于SGC-7901胃癌细胞模型,观察MT对胃癌细胞生长的影响,并通过CCK8法筛选出MT作用于胃癌细胞的最适作用浓度和最适作用时间,用于后续的GSK J4胃癌细胞处理。2.通过高通量测序筛选出MT处理胃癌细胞后差异的m R寻找更多NA,再通过生信分析获得与氧化作用相关的生物学功能及相应的mi RNA并预测mi RNA和m RNA的靶向关系及结合区域。3.通过q RT-PCR实验确定关键mi RNA-29b-3p和目的基因PDGFRB关系对,并通过双荧光素酶实验、q RT-PCR及Western blot法检测再次验证MT处理过的胃癌细胞中mi RNA-29b-3p和目的基因PDGFRB表达水平。结果:1.褪黑素可以抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长和增殖,且与褪黑素的浓度和作用时间成正比(p<0.05)。2.高通量测序及生信分析显示在褪黑素处理的胃癌细胞系中mi RNA-29b-3p与目的基因PDGFRB参与了胃癌细胞的氧化性损伤。3.通过双素荧光酶实验验证了mi R-29b-3p可以和PDGFRB的3UTR结合,且对目的基因PDGFRB有下调作用。q RT-PCR及Western blot法检测验证了褪黑素通过增强mi R-29b-3p的表达从而降低目的基因PDGFRB的水平导致胃癌细胞增殖受抑制。结论:Immunomganetic reduction assay褪黑素通过增强胃癌细胞中mi RNA-29b-3p的表达导致目的基因PDGFRB的水平下调,从而促进胃癌细胞的氧化性损伤,最终抑制胃癌细胞的增殖。
大豆蛋白-葡聚糖共价物酶法凝胶的冻融稳定性研究
研究了冻融循环过程中,谷氨酰胺转氨酶交联的不同质量浓度(30,40,50,60 mg/mL)大豆分离蛋白-葡聚糖共价物(SPI-DPUN30119临床试验)凝胶的持水性、弹性、硬度、可溶性蛋白含量、微观形貌及结构的变化。SDS-PAGE试验证实大豆分离蛋白与葡聚糖发生美拉德反应,生成大豆分离蛋白-葡聚糖共价物。随着SPI质量浓度的升高,SPI-D的接枝度先增大后减小,50 mg/mL时达到最大值12.54%。表面疏水性和内源荧光光谱分析表明,随着美拉德反应的进行,蛋白柔性增大,无序性增加,朝有利于冻融稳定的方向转变。与对照相比,5次冻融循环后,SPI-D、SPI与D混合物(SPI+D)、SPI凝胶持水性分别降低了32.46%,42.81%,44.98%,硬度分别增加了124.66%,271.51%,343.38%,弹性分别升高了4.38%,9.58%,11.76%,可溶性蛋白含量分别降低了2.05%,3.61%,7.17%,SPI-D凝胶的各项指标变化幅度均最小,冻融稳定性最好。扫描电镜图表征了凝胶微观形貌,MS-275供应商相比SPI+D和SPI,SPI-D凝胶孔隙更小且组织状态更均匀,说明美拉德反应是提升酶法大豆分离蛋白凝胶冻infection marker融稳定性的有效方法。
慢性萎缩性胃炎内镜检查以及病理诊断的效果评价
目的:探讨慢性萎缩性胃炎内镜检查以及病理诊断的效果。方法:纳入2022年6月—2023年6月收治的内镜检查诊断为慢性萎缩性胃炎病人,共为62例,将其作为研究对象。所有病人均接受内镜检查、病理诊断。分析检查结果。对慢性萎缩性胃炎等诊断符合率进行评价,统计内镜影像学特征。结果:(1)62Plant-microorganism combined remediation例内镜检查确诊慢性萎缩性胃炎患者中,Ⅰ型、Ⅰ+Ⅱ型、Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ型各为8例、33例、21例。有60例为病理诊断显示为慢性萎缩性胃炎,包括33例肠上皮化生GW4869,14例异形增生为。(2)诊断符合情况显示,慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异形增生符合率各为96.77%、53.23%、22.58%,以慢性萎缩性胃炎诊断符合率最高,有统计学价值,P<0.05。(3)内镜影像学特征显示,黏膜变薄、褶皱变平、ZD1839配制血管暴露、黏膜表面有结节占比各为93.55%、80.65%、69.35%、67.74%。结论:慢性萎缩性胃炎诊断中,应用内镜检查,能够为疾病诊断提供有效的参考,对促进临床诊断准确性提高意义显著。在内镜检查基础上,结合病理诊断方式,便于患者及时确诊,从而实现疾病的早期治疗,最终达到改善其预后的目的。
甜橙黄酮减轻顺铂致肠上皮炎性损伤的机制研究
宠物肿瘤是兽医临床中最常见的疾病之一,影响宠物生活质量、严重威胁其生命健康。目SCH727965小鼠前,肿瘤性疾病已成为犬、猫等宠物死亡的主要原因。同人类肿瘤一样,临床通常采用手术、放射治疗或化疗等方法干预动物肿瘤,也可以采用手术结合化疗或放射治疗等方法联合治疗。而化疗作为肿瘤治疗的主要实施方法,同样面临着巨大挑战。随着天然提取物或化合物的功能不断被发掘,越来越多的研究表明它们对许多疾病有效。鉴于此,具有安全性及调理性等系列特点的天然化合物在临床上备受关注,天然化合物在未来宠物肿瘤防治中所发挥的作用正不断增大。甜橙黄酮是一种从柑橘类水果中提取的天然黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤特性。虽然已有研究表明黄酮类化合物与癌细胞凋亡、自噬和细胞周期阻滞的关系,但黄酮类化合物对化疗诱导作用的影响知之甚少。而在临床中,天然化合物已被应用于与化疗药物联合,以提高疗效或减少不良反应。甜橙黄酮是否在降低化疗诱导的细胞焦亡中发挥作用,值得探索。本研究首先通过建立小鼠急性肠损伤模型以评估甜橙黄酮及化疗药物顺铂药效。剖检结果显示,单独施用甜橙黄酮的小鼠肠组织未见明显异常,同时该组小鼠体重一直维持正常水平,表现出较高的生物安全性。顺铂组小鼠肠道出现显著的肠道出血、肠段变短、出血等病理组织学变化,上述变化在甜橙黄酮与顺铂联用组明显减弱。上述组织进行HE染色后的结果显示,甜橙黄酮可减少顺铂诱导的肠绒毛变短、数量减少及肠绒毛完整性丧失等变化。免疫组化结果显示,顺铂诱导的中性粒细胞浸润、杯状细胞减少等现象也在甜橙黄酮作用下得到部分逆转。最后建立小鼠黑色素瘤模型,剖检结果显示,甜橙黄酮与顺铂联合Cadmium phytoremediation用药组的平均肿瘤体积及重量明显小于其他三组,而甜橙黄酮单独施药组的平均肿瘤体积及重量也明显小于对照(PBS)组。以上结果证明了甜橙黄酮削弱由顺铂诱导的炎性肠损伤的同时,不影响顺铂在体内发挥抗肿瘤作用,甚至可协同顺铂增强抗肿瘤作用。为深入阐明上述作用的潜在机制,首先检测甜橙黄酮对化疗药物顺铂诱导的细胞毒性的影响以及焦亡相关分子标志物的变化。通过LDH乳酸脱氢酶释放实验及实时荧光定量PCR、小鼠体重、BCS评分等实验验证了甜橙黄酮的生物安全性及抗炎特性后,即可选定用于体内、外实验中甜橙黄酮的药物浓度更多。随后通过Western blotting方法检测顺铂诱导下细胞焦亡相关标志物的表达情况,结果显示,甜橙黄酮可削弱由顺铂诱导的细胞焦亡。施药后,细胞在显微镜下的形态变化也显示出相同的实验结果。同时,在与细胞焦亡相关的活性氧(ROS)与DNA损伤中,甜橙黄酮同样减弱了顺铂诱导的ROS激增及DNA损伤。以上问题的研究结果将有助于深入探索天然化合物在宠物肿瘤化疗过程中的作用。
大鼠富血小板血浆制备方法的改良及质量检测
目的:优化一次离心法制备大鼠富血小板血浆(plateldigital pathologyet-rich plasma, PRP)的实验方案。方法:用肝素钠抗凝管收集经颈动脉插管获取的大鼠动脉血后分装入无菌EP管中,使用生理盐水调整红细胞浓度后,于不同条件下(200、220、240×g离心8、10、12 min等)制备大鼠PRP,随后利用血细胞分析仪及流式细胞仪分别对抗凝全血及PRP进行细胞计数和质量评价,比较不同组间的差异。结果:大鼠全血抗凝后调整红细胞浓度至(5.5-6.5)×10~(12)/L时有利于PRP的提取。当以220×g离心10 min时,血小板回收率最高[(53.52±0.63)%]。且提取出的PRP凋亡情况和血小板活化水平与全血无明显差异(P>0.05)。提取的PNaporafenib分子式RP中生长因子释放水平较全血显著升高(P<0.05)。结论:降低红细胞混入量是提高PRP提取效率的关键,本研究成功改良了大鼠AdavosertibPRP的制备方法,血小板的回收率高且质量稳定。
交联改性瓜尔胶基复合膜的研制及其对双孢菇采后品质的控制研究
瓜尔胶是一种环保型天然聚合物材料,来源广泛、材料易获取且价格较为低廉,可作为新型可降解生物复合膜的基材。但少量的瓜尔胶即可形成高粘度凝胶态结构,影响其成膜性;同时瓜尔胶膜的机械强度、透光率、阻隔性等整体性能有待提高。本文以瓜尔胶作为膜基材,添加改性剂(3-氯丙基)三乙氧基硅烷对其进行改性,并通过调节膜液的p H改brain pathologies善其高粘特性,使其利于成膜,并制备出改性瓜尔胶膜。选择性能良好的改性瓜尔胶膜的膜液配比,辅以不同质量分数的乳清蛋白进行复合交联,进一步提高膜的整体性能,制备改性瓜尔胶/乳清蛋白复合膜。将抗氧化活性物质芦丁添加到复合膜中,应用于双孢菇的保鲜实验,分析其保鲜效果,得到的研究结果如下:(1)以瓜尔胶为基材,添加(3-氯丙基)三乙氧基硅烷对其进行改性,制备出改性瓜尔胶膜。利用傅里叶红外光谱(FTIR)、扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、差示扫描量热(DSC)以及流变学分析等手段对改性膜进行表征,并测定分析膜的力学性C59体内实验剂量能和阻隔性能。FTIR图像显示,与单一瓜尔胶膜相比,添加有改性剂的膜在羟基吸收带附近的强度略有偏移和降低,这表明瓜尔胶中的羟基已被改性剂中甲基所取代。改性膜的SEM和XRD图像表明,不同浓度的改性剂会影响其在膜基质内部的分布情况,并且在两者间产生氢键以及硅氧烷桥,加强链接;DSC结果显示,经过改性后膜热性能有所提高,说明改性剂的添加有效增强瓜尔胶分子间的键合性。在力学性能及阻隔性能方面,改性膜性能最优,对比单纯瓜尔胶的抗拉强度(16.58 MPa),当改性剂添加量为30%时,抗拉强度最佳(27.39 MPa)。通过流变学分析发现,调节改性瓜尔胶水溶液的p H有利于其成膜,随着p H值的递增,膜液粘度呈现下降趋势,当p H为8时,膜液即表现出利于成膜的流延特性,并将其作为最终选择。(2)通过制备不同配比的改性瓜尔胶/乳清蛋白复合膜发现,当瓜尔胶与乳清蛋白配比为1:0.6(G’/W-2)时,复合膜的力学性能最好,此时膜的拉伸强度(TS)为39.92 MPa,断裂伸长率(EAB)为31.13%,两者间的复合可有效弥补单体膜的缺陷。另外,通过SEM、XRD及FTIR图像发现两者间的相容性好,复合膜表面具有光滑、透明的特征。添加芦丁制备成活性复合膜(G’/W-R)后发现,该活性膜具有良好的紫外阻隔性能,将其应用于覆膜保鲜时,也可有效保护食品免受氧化及紫外光伤害。对双孢菇进行保鲜研究发现:G’/W-R组处理可有效延缓双孢菇的褐变情况,降低呼吸速率并维持高硬度,同时该处理也能有效防止失重率的下降。(3)同时研究了改性瓜尔胶/乳清蛋白/芦丁复合膜(G’/W-R)在双孢菇保鲜过程中的抗氧化功效,结果表明:与对照组跟G’/W-2组相比,G’/W-R组处理能有效抑制丙二醛(MDA)含量的降低,维持细胞膜的完整性和稳定性;有效清除活性氧(ROS),降低ROS积累量;终止自由基链反应并维持较高的总酚和类黄酮含量。同时在活性膜处理下,可激活双孢菇中抗坏血酸-谷胱甘肽(As Aselleck MRTX1133-GSH)循环系统,提高抗坏血酸(As A)和谷胱甘肽(GSH)含量,影响过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、单氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)以及脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性,可有效清除双孢菇保鲜过程中多余的ROS,延缓衰老进程。
RPS6亚基肽段抑制S180肿瘤细胞的分子机制
为探究核糖体蛋白RPS6亚基肽段对S180肿瘤细胞基因表达的影响及抑制肿瘤细胞的关键分子和信号通路,以S180Alisertib细胞培养荷瘤小鼠为模型,用RPS6亚基肽段处理S180荷瘤小鼠,对S180肿瘤细胞进行Illumina测序获得差异表达的基因,并对这些差异基因进行GBio-active PTHO和KEGG分析。基因表达结果显示,RPS6亚基肽段会导致mt-Cytb、mtNd1、Rpl13基因表达降低,阻碍S180肿瘤细胞的氧化磷酸化过程。GO分析结果显示,RPS6亚基肽段抑制肿瘤细胞关键门类集中于质膜和质膜外侧组成成分的变化及免疫反应调节和免疫细胞的激活。差异基因结果显示,RPS6亚基肽段通过增强PRL/PRLR信号,上调Uchl1基因表达,诱导肿瘤细胞周期停滞。KEGG通路富集分析结果显示,穿孔素(PRF1)和颗粒酶B(GZMB)表达诱导细胞凋亡,同时自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)介导的细胞毒性与NF-κB信号通路信号增强,IFN-γ和TNF-α表达上调共同参与RPS6亚基肽段作用下的S18Pevonedistat生产商0肿瘤细胞凋亡,抑制S180肿瘤细胞增殖。RPS6亚基肽段导致S180肿瘤细胞细胞周期停滞,并诱导自然杀伤细胞介导的细胞毒性及NF-κB信号通路的上调导致S180肿瘤细胞凋亡,为RPS6亚基肽段在抗肿瘤研究的应用提供一定的理论依据。
肌骨超声在关节增生检查中的应用研究
目的 探究关节增生应用肌骨超声的诊断价值及其超声表现特点。方法core microbiome 选取30例关节增生患者作为关节增生组(n=30),同时选取同期与关节增生组患者年龄、性别、居住区域匹配、表现相似的30例非关节增生患者作为非关节增生组(n=30),应用肌骨超声检查,观察腱鞘炎、软组织肿胀、滑囊骨化、滑膜增生、骨侵蚀等超声下表现,分析肌骨超声检查的诊断效能。结果 两组患者在骨侵蚀、韧带内强回声、强回声点、双边征、骨赘形成、腱鞘炎、骨赘形成Trichostatin A供应商/韧带内强回声/强回声点/双边征(存在至少1项)中对比具有统计学差异(P<0.05)。骨赘形成/韧带内强回selleck产品声/强回声点/双边征(存在至少1项)诊断关节增生疾病敏感性为64.54%,特异性为91.65%,阳性预测值为89.76%,阴性预测值为72.53%,明显高于其他超声表现诊断效能(P<0.05)。ROC曲线下面积为0.782,Kappa为0.713,呈中等。结论 骨赘形成/韧带内强回声/强回声点/双边征中单一超声表现诊断关节增生疾病敏感性较低,特异性较高,但是出现两种或者两种以上可提高诊断效能,一致性为中等。
化疗和化学动力疗法联合的诊疗一体化抗耐药性结肠癌纳米体系的构建
结直肠癌(Colocommunity and family medicinerectal cancer,CRC)是全球第三大常见恶性肿瘤,癌症死亡率排在第二位。对于CRC晚期患者来说,化疗仍是主要的治疗手段。CRC部位高丰度的具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)导致CRC对化疗药物奥沙利铂(Ox Pt)产生耐药性。此外,Fn容易Liraglutide作用生成生物被膜,不仅能够保护细菌促进黏附和生长,还能导致肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性降低,给化疗增加难度。另一方面,传统的对抗肿瘤的策略中,诊断和治疗是互相独立的,这导Taurine分子量致在肿瘤的治疗和监测过程中难以进行精准的控制。因此,需要在化疗过程中,消除Fn进而消除化疗药物的耐药性,同时做到诊断和治疗一体化实现更加精准和有效的抗肿瘤疗效。为此,我们将羧酸化的奥沙利铂(Ox Pt-COOH)和抗菌剂月桂酸(LA)引入到超支化缩水甘油醚(PG)中,并与油酸修饰的氧化铁纳米颗粒(O-SPIONs)通过自组装形成O-SPIONs@PG-Pt-LA纳米胶束,将化疗与化学动力疗法相结合,克服化疗耐药性并实现诊疗一体化。动态光散射(DLS)和扫描电镜(SEM)观察表明纳米胶束的粒径在200 nm左右,能够通过增强渗透和滞留(EPR)效应实现在肿瘤部位的富集。药物释放实验表明,该纳米胶束具有较高的载药量以及p H和谷胱甘肽(GSH)的还原刺激响应。3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)显色实验证实了该体系具有过氧化物酶活性。通过涂布平板法和结晶紫染色验证了纳米胶束对Fn具有良好的抑制能力,LA和O-SPIONs具有协同抗菌作用。体外细胞实验表明:O-SPIONs@PG-Pt-LA能够被细胞摄取,具有良好的生物相容性,并且该纳米胶束可以引发芬顿反应,使细胞内的活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量增加,诱导细胞铁死亡。动物体内实验表明O-SPIONs@PG-Pt-LA具有优越的成像和抗肿瘤效果,并且具有较高的生物安全性。这种化学动力学疗法,一方面与抗菌剂协同提高材料的抗菌性能,另一方面与化学疗法协同提高其抗肿瘤活性,从而在根本上解决Fn导致的Ox Pt的耐药性问题,并对治疗过程进行实时监测和评估,为高效抗肿瘤药物载体构建及临床转化提供新的思路。