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放线菌是公认的生物合成工厂,产生广泛的次级代谢产物,它是新药的发现源泉。目前的研究大多集中于土壤放线菌,但随着研究的越发深入,发现新的候选药物的频率开始下降。为解决这一问题,越来越多的科研工作者将目光转向了特殊生境的放线菌,这些菌株由于环境的影响而具有特殊的代谢和生理功能,可能产生结构新颖,活性多样的代谢产物。该论文对三株来自西藏高海拔低纬度地区的寒旱土壤放线菌的次级代谢产物进行了分离纯化、结构鉴定以及抗炎或抗肿瘤活性研究。使用高氏一号培养基将菌株TB060207进行大型发酵,经萃取得到粗提物,采用凝胶层析、正相硅胶、反相硅胶柱层析、薄层色谱、和半制备高效液相等方法,进行单体化合物的分离,获得4个已知的蒽醌类化合物:1-hydroxy-6-meth-oxy-8-methylanthraquinone(TB01),9′-hydroxyaloesaponarin Ⅱ(TB 02),3,8-dihy-droxy-1-methylanthraquinone-2-carboxylic acid(TB04)和 aloesaponarin Ⅱ(TB 12)。对这些化合物进行了抗炎活性研究,研究发现化合物TB12具有弱抗炎活性,在浓度为40 μM时,其NO产生率为70.89%。使用高氏一号培养基将菌株TB060214进行大型发酵,从其发酵液分离得到9个多烯羧酸,包括6个新化合物,serpentemycin E-J(TB06-TB11)和3个己知类似物:serpentemycin C(TB13),serpentemycin B(TB14),(2Z,4E,6Z)-7-(2-((1E,3 E)-4-carboxybuta-1,3-dien-1-yl)phenyl)hepta-2,4,6-trienoic acid(TB15)。这些化合物均是以邻位取代苯环为中心且具有两个以上共轭双键的开链多烯。在抗炎活性探究中,化合物TB15具有中等抗炎活性,在浓度为40μM时,其NO产生率为 60.53%。利用antiSMASH 5.0软件MS-275抑制剂对Streptomycessp.TB160215的全基因序列进行分析,发现其包含了 34个生物合成基因簇,并对基Medulla oblongata因簇合成的次级代谢RSL3 IC50产物进行了预测,包括大环内酯类(filipin),金霉酸类(mithramycin)等。使用高氏一号培养基将菌株TB160215进行大型发酵,从其发酵液分离得到了 10个金霉酸类化合物,包括 2 个新化合物 mithramycin B(TB16),premithramycin C(TB22)和 8 个已知的化合物:8-mycarosyl-12a-olivos-ylchromocyclin(TB17),deoliosyl-3C-β-D-mycarosyl-mithramycin(TB18),demycarosyl-mithramycin(TB21),8-mycarosyl-12a-oliosylolivosylchromocyclin(TB23),premithramycin A3(TB24),4E-acetyl-m-ithramycin(TB25),premetathramycin(TB26),mithramycin(TB27)。4E-acetyl-mithramycin(TB25)和 mithramycin(TB27)能够有效抑制乳腺细胞 MCF-7,MDA-MB-231,MDA-MB-453,MCF-10A的细胞活性。划痕愈合实验和Transwell实验表明mithramycin(TB27)对侵袭型三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231呈现出剂量依赖性的抗迁移和抗侵袭作用。研究结果表明,来自于特殊环境的放线菌次生代谢产物丰富,能够产生结构独特且具有很好的生物活性的化合物,可作为新天然产物的重要来源,进而为将来新药开发提供重要的菌种资源。

农作物秸秆含有丰富的氮、磷和钾等营养元素,是一种重要的生物质资源。每年约40.0%的秸秆被燃烧,造成严重的资源浪费和空气污染问题。秸秆还田作为一种生态友好型处理方法被广泛应用,但在实践中发现秸秆还田干扰作物种植,滋生病原体或虫害,并使土壤和肥料中的养分固定化。研究发现堆肥过程中的高温和各种微生物介导的生化过程可消灭病原体并回收养分,但是目前关于秸秆堆肥还田的研究报道较少。本研究采用0、2.5、5和7.5 t/hm~2秸秆堆肥覆盖还田和翻埋还田,研究其对土壤理化性质、微生物群落结构和玉米生理指标的影响,进而探明最佳的还田方式以及玉米产量提升的关键因子;从秸秆堆肥还田样地玉米根际土中,筛选根际促生菌(PGPR)。通过菌株间相互作用,将玉米根系定殖的PGPR构建合成菌群同时阐明合成菌群促生机制。主要研究结果如下:秸秆堆肥还田对土壤化学性质没有影响,但显著改善土壤团粒结构,尤其是7.5t/hm~2秸秆堆肥覆盖还田减少玉米花粒期土壤SARS-CoV抑制剂中>2 mm机械稳定性团聚体含量。同时,细菌群落结构比真菌群落结构对秸秆堆肥还田响应更显著。在秸秆堆肥翻埋还田和覆盖还田过程中,秸秆堆肥覆盖还田提升玉米产量,同时7.5 t/hm~2秸秆堆肥覆盖还田对玉米产量提升效果最好。最终,确定最佳的还田方式为覆盖还田,还田量采用7.5 t/hm~2。在科水平Belnacasan溶解度上,2个真菌(Trichocomaceae和Didymellaceae)和5个细菌(Xanthomonadaceae、Rhizobiaceae、Micrococcaceae、Micromonosporaceae和Microbacteriaceae)以及>2 mm机械稳定性团聚体与玉米产量提升显著相关。所有环境因子的共同作用可以解释玉米产量提升的81.36%。其中,Xanthomonadaceae科、Rhizobiaceae科和>2 mm机械稳定性团聚体的贡献率大于其他环境因子的贡献率。细菌群落结构作为玉米产量提升的关键因子。因此,采用筛选培养基,在秸秆堆肥覆盖还田样地玉米根际土中共筛选到20株不同种属的PGPR。其中,一株属于Rhizobiaceae科,其余19株PGPR属于Bacillaceae科、Sphingomonadaceae科、Moraxellaceae科、Pseudomonadaceae科和Enterobacteriaceae科。20株PGPR菌株均具有分泌IAA、赤霉素、解磷、解钾和固氮能力,并能显著促进植株生长。但是,已有的PGPR菌株中只有Pseudomonas hunanensis SM15、Enterobacter huaxiensis SM16、Klebsiella pneumoniae SM17和Klebsiella granulomatis SM18Medical law能够在玉米根系定殖。构建一个由Priestia aryabhattai SM03、Acinetobacter guerrae SM12、Klebsiella pneumoniae SM17和Klebsiella granulomatis SM18组成的合成菌群。合成菌群对玉米根部细菌群落的影响高于玉米根际土壤微生物群落,同时合成菌群成员中Klebsiella属作为优势菌属在玉米根系上定殖,其相对丰度达到30%。接种合成菌群第3天,微生物功能与细胞增殖相关,而第30天与土壤微生物营养物质转换和抗菌物质生产有关。植物激素信号途径作为与植物生长发育相关的关键通路,在玉米根系中富集。参与该通路的关键基因(AUX/IAA、SAUR、ARR-B、ABF、ERF1、TCH4、JAZ和PR-1)均上调表达。综上所述,秸秆堆肥覆盖还田通过优化土壤团粒结构,改善抗病微生物群落结构,进而提高玉米产量。该研究为解决秸秆焚烧造成的环境污染问题和保障人们粮食安全具有重要科学意义和实际应用价值。

羊传染性脓疱皮炎(Contagious ecthyma,CE),又名“羊口疮”,是由羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)引起的以感染绵羊、山羊等中小反刍动物为主的一种急性、高度接触性的传染病。尽管ORFV感染能够诱导机体强烈的免疫应答反应,但ORFV与宿主在长期进化过程形成干扰或破坏宿主免疫反应的能力,进而实现免疫逃逸,导致动物重复感染的发生,羊群一旦被感染则很难清除,成为严重危害养羊业发展的重要动物疫病之一。此外,ORFV也是一种动物源性人兽共患病原,人可通过与患病动物接触发生感染,尤其是从事饲养、屠宰、兽医等行业的工作人员,给全球公共卫生安全带来巨大挑战。疫苗接种目前仍是防控该病的重要手段,但尚缺乏有效的疫苗用于该病的防控,使得疫苗免疫效果不佳甚至免疫失败的现象时有发生。减毒活疫苗具有接种剂量小、免疫力更强、疫苗效果维持时间较长等优点,因此ORFV基因缺失减毒疫苗是未来ORFV新型、高效疫苗研发的一个重点方向。本研究首先利用CPE观察、电镜负染观察、PCR检测、病毒空斑形成试验和TCID_(50)测定、动物生长性能测定、病理学和病原学检测等方法对实验室前期构建的羊传染性脓疱病毒ORF120基因缺失毒株(ORFV-SY17(35)120)的毒力、复制能力、遗传稳定性等生物学特性及安全性进行检测,评估其作为减毒活疫苗候选毒株的潜力。电镜负染和光镜下的观察结果显示,ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株与亲本毒株ORFV-SY17的病毒粒子形态相似,两病毒株感染细胞也呈现出半圆、皱缩等相似的CPE;空斑试验和TCID_(50)测定结果显示,ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株的蚀斑形成能力和增殖能力略低于ORFV-SY17亲本毒株;ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株和ORFV-SY17亲本毒株的一步生长曲线(MOI=10)和多步生长曲线(MOI=0.1)相似,该结果表明ORF120基因缺失对病毒的复制能力无显著影响;将ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株分别连续传达12代,利用PCR技术检测各代次细胞中ORF120基因以及ORF011基因,鉴定ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株的遗传稳定性,结果显示,ORF011基因在ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株中能够稳定遗传;此外,利用TCID_(50)测定ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株各代次毒力,结果显示,ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株的毒力也较为www.selleck.cn/products/pexidartinib-plx3397稳定。Decitabine配制最后,将ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株和亲本毒株ORFV-SY17分别接种羔羊,通过对各组羔羊生长性能、临床症状、病理变化等检测,与ORFV-SY17亲本毒株感染组相比,Biomass reaction kineticsORFV-SY17(35)120基因缺失毒株的致病力较弱,该结果表明,ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株具有良好的安全性。上述研究结果表明,ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株有望作为减毒疫苗候选毒株。活疫苗通常采用与自然感染相类似的途径接种,以往ORFV常规弱毒苗通常采用皮肤划痕的接种方式,尽管该接种途径能诱导机体较强的免疫反应,免疫保护效果较为确实,但存在操作难度大、动物应激反应强及散毒等生物安全问题。基于划痕接种方式的缺陷,本研究对ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株的免疫保护效果进行评估过程中,重点对该毒株的接种方式进行优化,分别将ORFV-SY17(35)120基因缺失减毒株采用皮肤划痕和皮下注射两种途径免疫3-4月龄羔羊,在2 w后进行加强免疫,4 w后用ORFV强毒株进行攻毒。利用ELISA、血清中和实验、Western blot、FACS等对免疫动物不同时间点血液样本中的Ig M、Ig G特异性抗体、ORFV059病毒蛋白抗体,以及细胞因子和T淋巴细胞亚群水平进行检测。结果显示,经划痕免疫和皮下免疫接种ORFV-SY17(35)120基因缺失减毒株均能诱导羔羊ORFV特异性抗体、ORFV059蛋白抗体、Th1/Th2细胞因子、以及CD4~+和CD8~+T淋巴细胞的产生。使用ORFV-SY17毒株进行攻毒,结果表明,无论划痕还是皮下免疫接种ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株,均能提供良好的免疫保护。上述研究结果表明,ORFV120基因的缺失不影响ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株在OFTu细胞上的复制增殖且遗传稳定,ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株对接种羔羊较为安全,确定安全免疫接种剂量为1.5×10~(6.5) TCID_(50)/只。ORFV-SY17(35)120基因缺失毒株有望作为ORFV新型疫苗候选毒株,且皮下注射免疫方式可替代传统的划痕免疫接种途径,为临床针对羊传染性脓疱皮炎的防治提供一种重要的技术手段。

海洋污损生物在船舶、管道和水产养殖网箱等多种表面的附着和繁殖,给人类与海洋相关的活动带来了一系列危害,生物污损日益受到关注。然而传统的防污涂料含有重金属离子,对非目标海洋生物也具有高毒性,不符合绿色环保的防污理念,因此开发一种环保型广谱防污手段非常必要。抗菌肽是许多生物体分泌的一种可以抑制细菌等污损生物黏附的生物分子,部分抗菌肽具有优异的细胞相容性和高度的亲和性,可用作改性船舶表面的潜在材料。本论文以304不锈钢为研究基底,通过筛选优化得到的抗菌肽修饰金属材料表面得到改性生物有机金属材料,利用表征仪器对样本表面的理化性质进行表征,选用需钠弧菌、三角褐指藻评估样本表面的防污性能,同时评测了样本在需钠弧菌培养液中浸泡不同时间段后的耐腐蚀性能,通过不断优化改性手段,建立一种新型船舶表面防污和防腐蚀手段。主要的研究内容如下:1.多巴胺/PEI/二氧化硅/抗菌肽多重修饰表面利用多巴胺(DA)、聚乙烯亚胺(PEI)和二氧化硅(SiO2)共沉积修饰DA改性后的304不锈钢(SS)表面制备纳米复合表面SS-DA/PEI/SiO2,通过接枝抗菌肽(AMPs)马盖宁(MAG Ⅱ)来制备 SS-DA/PEI/SiO2-M 复合表面。对 SS-DA/PEI/SiO2 和 SS-DA/PEI/SiO2-M表面的形貌结构、理化性质、细胞相容性、防污和防腐蚀性能等进行了详细的测试与研究。结果表明,不锈钢表面成功制备了 DA/PEI/SiO2/AMPs复合涂层,而且改性表面均表现出优异的细胞相容性。此外,防污实验结果显示,ARNAi TechnologyMPs改性前后的SS-DA/PEI/SiO2表面的抗菌效率达到78.39%和95.90%,AMPs的成功接枝有效提高了改性样品表面的防污性能。电化学和稳定性测试表明,改性样本表面具有良好的耐腐蚀性和防污稳定性。2.多巴胺与抗菌肽修饰表面在上述研究的基础上selleck化学,通过优化反应步骤,并改进抗菌肽,以DA为偶联剂将抗菌肽Turgencin BMox2(TB)接枝到304 SS表面制备了防污表面SS-DA-TB。利用红外光谱(FTIR)、X射线光电子能谱(XPS)、接触角测量仪(CA)、三维光学显微镜、椭圆偏振仪和原子力显微镜(AFM)表征了改性前后样本表面的形貌特征和理化性质。结果表明,抗菌肽成功接枝到304 SS表面,并改变了样本表面的形貌和润湿性。利用293T和E11细胞与抗菌肽TB共培养,证明了抗菌肽TB优异的细胞相容性。通过污损生物贴附测试表明了 SS-DA-TB具有优异的防污性能,对需钠弧菌和三角褐指藻表现出99.85%和67.93%的附着抑制率。此外,电化学性能测试结果表明SS-DA-TB在需纳弧菌培养液中浸泡14天后依然具备良好的耐腐蚀性能。3.抗菌肽衍生物修饰表面基于上述研究,进一步优化反应步骤和改进抗菌肽,利用从海洋生物提取的一种AMPs和多巴胺在弱酸条件下反应合成了一种抗菌肽衍生物DP,然后将其用于改性304 SS,制备了防污表面SS-DP。质谱分析证实购买NN2211了 DP的合成反应,细胞相容性测试结果表明,抗菌肽衍生物DP具有优异的细胞相容性。通过FTIR、XPS、AFM、接触角和三维光学轮廓仪,证明了 DP成功地接枝到304 SS表面。利用污损生物贴附测试表明了DP处理后的不锈钢表面具有优异的防污能力,对需钠弧菌和三角褐指藻表现出97.78%和90.01%的附着抑制率。此外,电化学性能和稳定性测试结果表明,制备的SS-DP表面具有优异的耐腐蚀性和防污稳定性。本论文结果可为海洋工业领域及其他相关领域提供一种新型绿色防污和防腐蚀策略。

目的:本课题组前期研究发现,RepSox分子式喹唑啉酮类化合物methylation biomarker12d具有较好的抗增殖活性。为了明确其关键药效团及取代基性质对化合物12d的靶点抑制活性与抗增殖活性的影响,本课题拟对其喹唑啉酮及咪唑并吡啶片段进行骨架跃迁及引入不同取代基,设计合成了三类4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮化合物,并对其体外抗增殖活性进行初步评价。选取活性最佳的化合物10b并开展靶点抑制活性研究,探讨上述结构改造对先导化合物抗肿瘤活性的影响。方法:1.通过对目标化合物的逆合成分析,设计合成路线:通过合环合成得到母核结构4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮,再与苯并咪唑等相关基团进行偶联得到不同系列的中间产物,对其进行结构修饰得到衍生物。2.所有目标化合物的分子结构借助HR-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR等波谱数据进行表征及确认。3.采用MTT法,测试化合物对不同肺癌细胞的体外抗增殖活性,计算出IC_Laduviglusib(50)值。4.用流式细胞术和免疫印迹法,验证目标化合物对肺癌细胞的周期和凋亡的影响。结果:以4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮为化合物的母核结构,共得到20个衍生物,并对其进行了体外抗肿瘤活性研究,筛选出1个活性化合物10b,其抗肿瘤活性相比于12d有了一定的提升。结论:通过合成得到的4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮类衍生物均为新化合物。其中化合物10b对人非小细胞肺腺癌细胞(H1975)表现出最佳的肿瘤抑制作用,其IC_(50)值为0.572μM,并诱导细胞凋亡,且对ROR1及其下游SRC、Akt和m TOR具有抑制作用,提示10b可以通过抑制ROR1/SRC/Akt信号通路而发挥抗肿瘤活性。

目的 探究Cox健康行为互动模式(IM-CHB)的心理干预在带状疱疹后神经痛(PHN)患者中的应用效果。方法 选取2021年1月至2022年2月就诊于郑州大学第二附属医院疼痛科的186例PHN患者为研究对象，以入院时间段不同分组，其中2021年1～7月间收治者纳入对照组，2021年8月至2022年2月间收治者纳入观察组，每组93例。对照组患者给予常规护理，观察组患者在常规护理基础上给予IM-CHB引导的心理护理。比较两组患者护理前后的BMS-354825溶解度视觉模拟评分法(VAS)、焦虑自评量表(SAS)、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、抑郁自评量表(SDS)、皮购买Ceralasertib肤病生活质量量表(DLQI)的评分及护理满意度。结果 护理3 d、6 d和1个月后，观察组患者的VAS评分分别为(4.59±0.86)分、(3.42±0.68)分、(1.15±0.61)分，明显低于对照组的(5.18±0.95)分、(4.11±0.89)分、(2.04±0.5)分，差异均有统计学意义(P<0.05)；护理1个月后，观察组患者的SDS、SAS评分分别为(33.63±3.82)分、(31.06±4.28)renal Leptospira infection分，明显低于对照组的(41.69±4.03)分、(39.63±4.33)分，差异均有统计学意义(P<0.05)；护理1个月后，观察组患者的PSQI、DLQI评分分别为(6.12±1.35)分、(7.15±1.32)分，明显低于对照组的(8.91±1.62)分、(9.45±1.46)分，差异均有统计学意义(P<0.05)；护理1个月后，观察组患者的护理满意度为97.85%，明显高于对照组的80.65%，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 基于IM-CHB的心理护理不仅可减轻PHN患者的疼痛程度，缓解不良情绪，改善生活和睡眠质量，还能提高患者满意度。

目的 探讨造血干细胞移植(HSCT)患者发生耐碳青霉烯肠upper genital infections杆科细菌(CRE)血流感染的影响因素。方法 行HSCT的992例血液肿瘤患者，根据是否发生CRE血流感染分为感染组(17例)与非感染组(975例)。比较两组患者的人口学资料及临床资料。采用多因素logistic回归模型分析HSCT患者发生CRE血流感染的危险因素。结果 992例HSCT患者中，17例发生CRE血流感染，发生率为1.71%。感染组男性比例、合并肺部感染和肾功能不全比例、使用碳青霉烯类抗生素、3/4代头孢类抗生素、大环内酯类抗生素、替加环素、达托霉素比例均高于非感染组(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示，男性、合并肺部感染和肾功能不全、使用大环内酯类抗生素和替加环素是HSCT患者发生CRE血流感selleck NMR染的独立危险因素(P<0.05)。结论 合并肺部感染和肾功能不全的患者以及血流感染前使用大环内酯类抗生素和替加环素的HSCT患者更易发生CRE购买BYL719血流感染。

背景多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄女性常见的生殖内分泌代谢性疾病,在我国育龄期女性中的患病率为7.8%。PCOS以雄激素过多、排卵障碍和卵巢多囊样变(Polycystic ovary morphology,PCOM)为主要特征。代谢手术是目前最有效的减重手段,其治疗效果几乎涵盖肥胖型PCOS的所有治疗目标,是肥胖型PCOS的潜在治疗方式。opioid medication-assisted treatment代谢手术需要规范的管理才能确保手术疗效,但目前关于代谢手术治疗肥胖型PCOS的全程管理尚不完善。目的1.构建代谢手术治疗肥胖型PCOS全程管理方案,以期为临床实践提供理论指导。2.评价全程管理方案的可行性,以及对肥胖型PCOS患者的减重效果、生殖和代谢指标、生活方式和健康自我管理能力等的干预效果。方法第一部分为管理方案构建。系统检索苏格兰校际指南网、美国国立指南网、JBI数据库等多个权威指南网站,以及Pubmed、Cochrane Library、CNKI等多个中英文数据库,对国内外代谢手术管理及PCOS管理证据进行系统总结。基于证据总结、小组讨论、德尔菲专家函询法和预实验,构建代谢手术治疗肥胖型PCOS全程管理方案。第二部分为干预效果评价。于2020年12月至2022年8月在山东大学齐鲁医院减重与代谢外科选取符合标准的肥胖型PCOS患者84例,按照非随机历史对照研究法,将2020年12月至2021年10月(方案建成前)纳入的患者作为对照组,将2021年11月至2022年8月(方案建成后)纳入的患者作为干预组,对照组接受常规护理,干预组在常规护理的基础上接受全程管理。收集患者基线(T1)及干预结束后(术后6个月/T2)的体重、生殖(月经情况、PCOM、性激素)和代谢指标(血糖指标、胰岛和肝功能)等临床资料,并运用问卷调查法评估PCOS生活方式和健康自我管理能力。采用SPSS 26.0进行统计分析,评价方案应用效果。结果第一部分代谢手术治疗肥胖型PCOS全程管理方案构建1.文献研究部分,最终纳入15篇文献,归纳得到31条证据条目,小组分析讨论后形成方案初稿。2.德尔菲专家函询部分,共邀请15名专家进行两轮函询。两轮问卷返回率均为100%,专家积极性较高。两轮专家权威系数分别为0.904和0.920。第二轮函询肯德尔协调系数范围为0.189～0.297(P<0.05),专家意见趋于一致。根据专家意见讨论修订方案,依据10名患者的预实验结果,进一步完善方案,最终形成了包含一级指标4个,二级指标23个,三级指标65个的管理方案。第二部分代谢手术治疗肥胖型PCOS全程管理方案效果评价1.减重效果:T2时刻,干预组和对照组的体重、BMI较基线时显著下降(P<0.001),干预组的体重和BMI显著低于对照组(P<0.01);干预组多余体质量减少百分比显著大于对照组(P<0.05);两组总体质量减少百分比无显著差异(P>0.05)。2.PCOS、月经异常及PCOM缓解率:T2时刻,干预组和对照组PCOS缓解率为76.3%vs.71.1%,月经异常缓解率为 68.7%vs.64.6%,PCOM 缓解率为 39.5%vs.37.9%,组间差异均不显著(P>0.05)。3.性激素:T2时刻,两组患者睾酮较基线时显著下降(P<0.001);两组卵泡刺激素、黄Z-IETD-FMK体生成素、黄体生成素/卵泡刺激素比值、泌乳素、雌二醇、抗缪勒氏管激素下降,孕酮上升。上述指标组间比较均无显著差异(P>0.05)。4.血糖指标及胰岛功能:T2时刻,两组患者空腹血糖、糖化血红蛋白较基线时均下降,组间比较无差异(P>0.05);两组患者空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数及空腹C肽较基线时也显著下降(P<0.05),干预组空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数显著低于对照组(P<0.05),空腹C肽组间差异不显著(P>0.05)。5.肝功能:T2时刻,两组患者谷草转氨酶、谷丙转氨酶较基线时均显著下降(P<0.001),干预组谷丙转氨酶显著低于对照组(P<0.05);两组谷草转氨酶/谷丙转氨酶比值较基线时显著上升(P<0.001),干预组显著高于对照组(P<0.05)。6.PCOS生活方式:T2时刻,两组PCOS生活方式总分均显著下降(P<0.001),干预组饮食节律、生活节奏和运动意识显著优于对照组(P<0.05)。7.成年人健康自我管理能力:T2时刻,干预组健康自我管理能力总分、健康自我管理行为和健康自我管理认知2个分量表,以及饮食管理、运动管理、健康信念、自我效能4个维度得分显著高于对照组(P<0.05)。结论1.本研究构建的代谢手术治疗肥胖型PCOS全程管理方案获得了专家的一致认可,具有科学性和可行性。2.该方案在增强代谢手术的减重效果、改善肥胖型PCOS患者的胰岛和肝功能,优化PCOS生活方式,增强健康自我管理能力等方面显示出积极Staurosporine溶解度益处。

目的 观察半夏白术天麻加减方联合眩晕宁治疗痰浊中阻型脑缺血眩晕的临床效genetic adaptation果。方法 选取2021年1月—2022年12月武威市凉州医院收治的痰浊中阻型脑缺血眩晕患者70例，按照红蓝双色球法随机分为联合组和对照组，每组35例。对照组应用眩晕宁治疗，联合组在对照组基础上联合半夏白术天麻加减方治疗，2组均治疗2周。比较2组临床疗效，治疗前后中医证候评分、眩晕障碍量表(DHI)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、Barthel指获悉更多数、血液黏度、血小板聚集率、基selleck化学底动脉血流速度及不良反应。结果 联合组临床治疗总有效率为97.14%,高于对照组的80.00%(χ~2=5.080,P=0.024)。治疗2周后，2组头目胀痛、头晕眼花、呕吐痰涎、食少纳呆评分及DHI、NIHSS评分均较治疗前降低，Barthel指数较治疗前升高，且联合组变化幅度大于对照组(P<0.01);2组血液黏度、血小板聚集率均较治疗前降低，基底动脉血流速度较治疗前升高，且联合组血液黏度、血小板聚集率低于对照组，基底动脉血流速度高于对照组(P<0.01)。联合组与对照组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(20.00%vs. 28.57%,χ~2=0.699,P=0.403)。结论 半夏白术天麻加减方联合眩晕宁治疗痰浊中阻型脑缺血眩晕的疗效良好，可减轻眩晕症状，改善神经功能和脑组织血流状态，提高患者生活质量。

研究背景:卵巢癌(Ovarian Cancer,OC)在所有妇科恶性肿瘤中死亡率最高,其5年生存率不足50%,严重危及女性健康。上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer,EOC)是其中最主要类型,占比高达90%,因其发病率与病死率持续居高不下使其相关机制研究在医学领域备受关注。因此,深入研究EOC的发生发展机制,寻找新的药物作用靶点和治疗策略具有重大研究意义。UBP43是去泛素化酶(Deubiquitylating Enzymes,DUBs)家族中的重要一员,因其在稳定下游蛋白底物中的作用而广为人知。UBP43的失调已被证实与包括癌症在内的多种人类疾病密切相关。然而,在不同类型肿瘤中,UBP43所发挥的促进或抑制作用存在差异。因此,通过相关研究来明确UBP43在特定癌症类型中所发挥的作用是十分必要的。目前,UBP43在EOC发生发展过程中所发挥的作用尚未见报道。前期课题组通过检索相关数据库发现:与肺癌、肝癌等其他20余种肿瘤相比,UBP43在卵巢癌中尤为高表达,且UBP43和β-catenin之间可能存在重要关联。值得注意的是,β-catenin通路是一条已经被充分证实的促进肿瘤恶性表型的关键通路。然而,关于UBP43是否能够通过调控β-catenin信号通路发挥作用尚未见报道。本研究则以此为切入点,提出研究假说:“UBP43调控β-catenin信号通路可能是影响EOC发展新机制,且对β-catenin通路的调控作用可能与UBP43所具有的去泛素化活性及稳定下游蛋白底物的功能特性有关。”研究目的:本研究旨在探讨UBP43对EOmicrobiota dysbiosisC细胞生物学行为的影响,揭示UBP43通过β-catenin信号通路影响EOC进展新机制,为EOC提供潜在治疗新靶点,为将来UBP43特异性抑制剂的探索和开发提供理论依据。研究方法:1.分析UBP43与EOC的临床相关性。通过检索TNMplot数据库以及10对EOC临床样本(癌及癌旁)的q RT-PCR和Western blot实验检测明确UBP43在EOC组织中的表达情况。应用Kaplan-Meier-Plotter数据库分析UBP43的表达与的卵巢癌临床预后相关性。2.UBP43对EOC细胞生物学行为产生的影响。通过Western blot实验检测UBP43在五种EOC细胞系(OVCAR-3、Caov-3、TOV-112D、A2780、SK-OV-3)及正常卵巢上皮细胞系(HOSEpi C)中的蛋白本低表达量。应用慢病毒针对A2780和TOV-112D两株细胞同时构建UBP43敲低和过表达稳转细胞系。通过CCK-8实验、平板克隆形成实验、流式细胞术、Transwell实验检测UBP43的敲低和过表达对EOC细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响。通过Western blot进一步检测UBP43的敲低和过表达对G2/M期相关蛋白Cyclin B1和CDK1表达的影响。最后,应用Western blot实验检测UBP43敲低和过表达对上皮间质转化(Epithelial Mesenchymal Transition,EMT)、迁移、侵袭相关基因mature-MMP2、mature-MMP9、N-cadherin、E-cadherin表达的影响。3.UBP43致癌作用机制的探究。第1部分:UBP43对β-catenin的调控作用及机制研究。应用Western blot检测UBP43敲低和过表达对EOC细胞中β-catenin蛋白表达水平及其下游靶基因Cyclin D1的影响。通过单染免疫荧光实验检测UBP43对β-catenin表达水平及细胞内分布的影响。通过双荧光素酶实验进一步明确UBP43敲低和过表达对β-catenin通路活性的影响。通过q RT-PCR检测EOC临床样本组织中β-catenin及下游靶基因Cyclin D1的m RNA表达水平。通过UBP43与β-catenin共染免疫荧光实验与免疫共沉淀实验明确二者之间的相互作用。用50μg/m L环己亚胺预处理细胞,于处理后0h、0.5h、1h、2h分别进行Western blot检测,观察β-catenin的降解速度,检测UBP43对β-catenin蛋白稳定性的调控作用。最后,通过免疫共沉淀实验检测UBP43对β-catenin泛素化水平的影响。第2部分:通过回复实验验证UBP43通过β-catenin信号通路发挥的促癌作用。使用β-catenin(S33Y)过表达质粒转染已成功构建的UBP43敲低(Lv-sh UBP43)稳转细胞系,通过CCK-8实验及Transwell实验检测β-catenin信号的激活对UBP43敲低介导的细胞增殖、迁移和侵袭能力抑制的逆转作用。通过Western blot实验检测β-catenin信号激活对UBP43敲低引起的Cyclin D1、mature-MMP2、mature-MMP9、N-cadherin表达水平下调和E-cadherin表达上调的影响。4.UBP43对EOC细胞增殖能力影响的体内实验。构建了裸鼠皮下异种移植瘤模型,肿瘤细胞接种后每4天测量肿瘤最长径和最短径。第28天收获肿瘤,拍照记录并测量肿瘤重量,计算体积,绘制肿瘤生长曲线,检测UBP43对异种移植瘤体内生长率的影响。Ki67及PAX8免疫组化实验检测UBP43对肿瘤细胞体内增殖活性的影响。免疫荧光实验检测肿瘤组织中UBP43和β-catenin的表达和共定位情况,β-catenin的核表达情况,探究UBP43对β-catenin的体内调节作用。Western blot检测在肿瘤组织中UBP43对β-catenin、Cyclin D1、mature-MMP2和mature-MMP9表达水平的影响。研究结果:1.TNMplot在线数据库及10对临床样本的q RT-PCR和Western blot实验检测结果显示:与正常组织相比,UBP43在EOC组织中的表达显著上调;与其他肿瘤组织相比,UBP43在卵巢肿瘤组织中尤为高表达Erdafitinib体外。生存分析结果显示UBP43的高表达与不良临床预后相关,UBP43水平较高的卵巢癌患者的生存率明显较差。2.与HOSEpi C相比,UBP43在五种EOC细胞系中的表达显著上调;成功构建了A2780和TOV-112D两细胞株的UBP43敲低和过表达稳转细胞系;UBP43敲低组的细胞增殖能力和集落形成率被显著抑制,且S期细胞百分比极显著降低,G2/M期细胞百分比极显著增加,G2/M期相关蛋白Cyclin B1和CDK1的表达减少;UBP43敲低组的细胞迁移和侵袭能力显著降低,同时UBP43敲低组细胞的mature-MMP2、mature-MMP9、N-cadherin的蛋白水平明显降低,而E-cadherin水平显著上调,抑制了EMT。与Lv-Vector组比较,UBP43过表达组实验结果则相反。3.第1部分:UBP43的过度表达引起EOC细胞中总β-catenin及其下游靶基因Cyclin D1的蛋白表达水平的上调;同时,UBP43过表达引起了β-catenin细胞内分布的改变,出现异常核累积;双荧光素酶实验结果显示,UBP43的过表达显著提高了β-catenin活性;双染免疫荧光实验与免疫共沉PI3K/Akt/mTOR抑制剂淀实验结果表明:UBP43信号与β-catenin信号的亚细胞位置显著重叠,存在互相作用;此外,UBP43的过表达组β-catenin的泛素化水平被显著降低,β-catenin的蛋白稳定性显著增强,半衰期延长。而在EOC临床标本中,与癌旁组织相比,癌组织中的Cyclin D1显著高表达,但β-catenin无明显上调。第2部分:β-catenin的过表达显著逆转了UBP43敲低引起的细胞中Cyclin D1、mature-MMP2和mature-MMP9表达水平的下调以及对细胞增殖、迁移和侵袭能力产生的负向影响。同时,β-catenin的激活抑制了E-cadherin的表达,诱导了N-cadherin表达,显著地消除了UBP43敲低对EMT的抑制作用。4.与体外细胞实验结果一致:UBP43敲低组的瘤体大小、肿瘤重量及肿瘤生长率均显著降低,UBP43的敲低抑制了体内肿瘤生长,而UBP43过表达组的结果相反;UBP43敲低组肿瘤组织中的Ki67水平显著降低,UBP43的敲低抑制了肿瘤细胞增殖活性;肿瘤区域的低倍图像显示所有肿瘤组织中均存在PAX8阳性细胞,UBP43敲低组肿瘤组织中PAX8阳性细胞减少,过表达组则相反;UBP43敲低组肿瘤组织的UBP43和β-catenin蛋白质水平明显降低且β-catenin的核表达量减少,UBP43过表达组的结果则相反;免疫荧光实验观察到UBP43和β-catenin的荧光重叠,且β-catenin出现核累积,二者体内存在相互作用;一致地,UBP43敲低组肿瘤组织中β-catenin、Cyclin D1、mature-MMP2和mature-MMP9的表达水平显著低于对照组,而UBP43过表达组的结果相反。研究结论:1.UBP43在EOC中高表达且与患者预后不良有关。2.UBP43在EOC中发挥致癌作用,能够促进EOC细胞的EMT、增殖、迁移和侵袭。3.UBP43可以通过激活β-catenin信号,增加β-catenin蛋白水平并促进其进入细胞核,促进EOC进展。4.UBP43可能通过去除β-catenin上的泛素化修饰来提高β-catenin蛋白稳定性,进而促进了β-catenin信号通路的激活,促进EOC恶性进展。