诱导多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs)具有自我更新和多向分化潜能的特征,是一种全能干细胞。iPSCs是LBH589使用方法生物医学和再生医学研究的理想细胞模型,在农业方面可以用于研发转基因动物或保护优秀的遗传资源。通过piggyBac+TET-on转座子系统,将LY2835219价格7个外源转录因子(bovine OCT4、SOX2、KLF4、c Myc,porcine NANOG、Lin-28,SV40 Large T)转入乌骨绵羊成纤维细胞进行重编程。旨在获得具有强发育潜能的乌骨绵羊iPSCs细胞系,为进一步研究绵羊全能胚胎干细胞的建系提供理论基础。试验结果如下:对雄性和雌性乌骨绵羊皮肤来源的成纤维细胞进行生物学特性分析,低代次的细胞贴壁率可达95%,细胞冻存前和复苏后的存活率可达36%以上,生长曲线符合正常细胞生长规律(S型),染色体数量及形态正常(雄性乌骨绵羊皮肤成纤维细胞率95%,雌性性乌骨绵羊皮肤成纤维细胞率93%)且无支原体感染,可作为诱导乌骨绵羊iPSCs的起始细胞系。利用piggyBac体系诱导的乌骨绵羊iPSCs,接种于STO饲养层细胞上,能够连续、稳定传代26代以上,AP染色部分呈阳性,核型正常(核型正常率90%),表达OCT4、SOX2、SALL4、NANOG、KLF4、KLF17多能基因,在体外培养可形成具有向内、中、外三个胚层分化能力的拟胚体。结论:通过piggyBac+TET-on转座子系统,将7个外源转录因子(bovine OCT4、SOX2、KLF4、c Myc,porcine NANOG、Lin-28,SV40 Large T)转入乌genetic profiling骨绵羊成纤维细胞,可以获得绵羊类iPSCs。