目的：探究清热化痰安神方择时治疗失眠模型大鼠的作用机制。方法：将无特定病原体(specific pathogen free, SPF)级雄性大鼠随机分为正常组、模型组、清热化痰安神组、艾司唑仑组。腹腔注射对氯苯丙氨酸(para-chlorophenylalanine, PCPA)悬浊液300μg/g建立失眠大鼠模型，连NVP-TNKS656浓度续给药3 d后，采用戊巴比妥钠协同实验评价造模情况。于造模成功后次日7:00(相当于人体酉时)开始给药。清热化痰安神组和艾司唑仑组依次灌服清热化痰安神方溶液12.4μL/g、艾司唑仑悬浊液0.2μg/g, 1次/d;正常组和模型组大鼠早、晚灌服生理盐水10μL/g。给药在1 h内完成，连续给药7 d。通过光镜观察松果体组织变化，采用酶联免疫吸附法检测血清褪黑素(melatonin, MT)含量、下丘脑谷氨酸(glutamic acid, Glu)及γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, γ-GABA)的含量，采用实时荧光bacterial co-infections定量聚合酶链反应检测视交叉上核生物钟基因Clock、Bmal1、Per1、Per2信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid, mRNA)的表达。结果：与模型组对比，艾司唑仑组及清热化痰安神组松果体细胞数目稍恢复，空泡变性明显减少。与模型组对比，艾司唑仑组及清热化痰安神组睡眠持续期延长，血清中MT含量上升，下丘脑中Glu含量下降，γ-GABA含量上升，差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组对比，清热化痰安神组ClBYL719小鼠ock、Bmal1、Per1和Per2 mRNA表达量均升高(P<0.05)。结论：在择时理论指导下，清热化痰安神方可以通过调节氨基酸类神经递质、血清MT含量和生物钟基因的表达水平来改善失眠。