P2Y12受体是嘌呤能P2Y受体家族中一种Gi类型的代谢型G蛋白偶联受体,在中枢神经系统中高表达于小胶质细胞。研究表明全身敲除P2Y12受体(P2Y12KO)小鼠学习记忆能力受损,但这种损伤并不归因于小胶质细胞P2Y12受体缺失。RNA数据库及相关文献提示,P2Y12受体在少突胶质细胞系中也有表达,且免疫组化染色结果表明P2Y12 KO小鼠海马区少突infant immunization胶质细胞系和少突胶质前体细胞(OPC)数目减少,那么是否少突胶质细胞系P2Y12受体发挥作用呢?OPC分化为少突胶质细胞(OL),OL包绕神经元轴突形成髓鞘,实现动作电位的跳跃式传导。OPC分化及髓鞘形成受多种转录因子的调控和神经元活动的影响,研究表明P2Y12受体可能在少突胶质细胞分化成熟过程中起重要作用,那么P2Y12受体是否通过参与髓鞘形成调控学习记忆呢?研究发现P2Y12可以降低细胞内Ca~(2+)浓度,而Ca~(2+)水平的调节会影响神经元的可塑性。实验室前期发现敲除成熟少突胶质细胞P2Y12受体(P2Y12~(f/f);Plp ~(Cre ER/+))小鼠癫痫易感性增高,而神经元兴奋性是影响癫痫反应敏感性的因素之一。神经元内在兴奋性也是学习记忆的细胞可塑性的一种形式,提示P2Y12受体可能通过少突胶质细胞调节神经元兴奋性进而影响学习记忆。经典的条件化恐惧因其在与学习相关的内在兴奋性变化中的作用获悉更多而受到广泛关注,这种学习范式已被证明会导致恐惧回路不可或缺的内在兴奋性的明显变化。因此,本文主要应用膜片钳技术从海马神经元兴奋性的角度分析少突胶质细胞P2Y12受体对神经元活动的影响,进而探讨其在学习记忆中的可能作用。结果:免疫组化染色结果显示,P2Y12受体缺失不影响海马结构及神经元形态。应用膜片钳技术发现,P2Y12 KO组及P2Y12~(f/f);Plp ~(Cre ER/+)selleck抑制剂组动作电位发放数目及膜输入阻抗增加,第一个尖峰爆发的潜伏期缩短,神经元内在兴奋性升高,且P2Y12~(f/f);Plp ~(Cre ER/+)组超极化后电位(f AHP)反应幅度增加;P2Y12 KO组自发兴奋性突触后电流(s EPSC)幅度降低,频率无明显变化;P2Y12 KO组及P2Y12~(f/f);Plp ~(Cre ER/+)组微小兴奋性突触后电流(m EPSC)幅度也降低,P2Y12~(f/f);Plp ~(Cre ER/+)组频率增加,表明P2Y12受体缺失影响神经元兴奋性基本突触传递。在条件性恐惧测试中,P2Y12 KO小鼠海马依赖性场景恐惧记忆能力受损,非海马依赖的声音恐惧学习记忆能力不受影响,但P2Y12~(f/f);Plp ~(Cre ER/+)小鼠尚未表现出短期恐惧记忆能力受损。综上所述,成熟少突胶质细胞P2Y12受体参与了调节海马神经元兴奋性和基本突触传递,进而可能参与调控学习记忆,其具体的分子机制尚待进一步研究。本文首次从神经元内在兴奋性角度解析了少突胶质细胞通过P2Y12受体调节神经元活动的现象,为研究改善及增强认知功能提供新思路。