为探讨小尾寒羊甲状腺组织中与繁殖功能相关的miR-370-3p与COL4A3的靶向关系，本研究利用miRDB与Targetscan网站预测了miR-370-3p的靶基因，并取其交集进行功能富集分析，通过RNAhybrid与Targetscan网站预测绵羊miR-370-3p与候选靶基因的结合位点；随后检测了miR-370-3p与COL4A3基因在小尾寒羊甲状腺组织Elexacaftor说明书中的相对表达量。构建psiCHECK2-COL4A3-3′UTR-野生型/突变型双荧光素酶载体，并将其与miR-370-3p mimics/mimics NC共转染至HEK293T细胞并检测荧光活性。结果显示：1)miR-370-3p的靶基因可富集到孕酮介导的卵母细胞成熟、卵母细胞减数分裂、HIF-1信号通路、MAPK信号通路、mTOR信号通路、Ras信号通路和FoxO信号通路等与动物繁殖有关的信号通路中。2)miR-370-3p可与COL4A3基因3′UTR区域结合，且两者在小尾寒羊甲状腺组织中表达呈相反趋势。3)共转染psiCHECK2-COL4A3-3′UTR-野生型和miRaf抑制剂R-370-3p mimedical subspecialtiesmics组的荧光素酶活性显著低于共转染psiCHECK2-COL4A3-3′UTR-野生型和miR-370-3p mimics NC组、共转染psiCHECK2-COL4A3-3′UTR-突变型和miR-370-3p mimics组、共转染psiCHECK2-COL4A3-3′UTR-突变型和miR-370-3p mimics NC组(P<0.05),而这三组间无显著差异(P>0.05)。综上，miR-370-3p与COL4A3存在靶向关系，且可靶向结合COL4A3-3′UTR区域，为进一步探究miR-370-3p影响绵羊甲状腺功能与绵羊繁殖力的分子机制提供了依据。