目的 研究补肾调泡周期疗法组方(逍遥散、三子汤)对大鼠原代卵巢颗粒细胞增殖、分泌功能及抗苗勒氏管激素(AMH)、抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHR2)、Smad同源物4(Smad4)表达的影响。方法 6~8周龄SD雌鼠20只随机分为空白组、阳性药物组(7.8 IU·kg~(-1)FSH)、逍遥散组(12 g·kg~(-1))、三子汤组(16 g·kg~(-1))各5只,连续给药4 d后采血,制备含药血清。选取21~25日龄SD雌鼠提取大鼠卵巢颗粒细胞,贴壁生长至70%,用免疫荧光法进行大鼠卵巢颗粒细胞纯度鉴定。培养成功的大鼠原代卵巢颗粒细胞分别用各组含药血清培养液培养,CCK-8法筛选各组含药血清最佳干预浓度;各组采用最佳干预浓度培养细胞,CCK-8法检测各组颗粒细胞24、48、72、96 h增殖情况;ELISA法检测各组颗粒细胞培养液上清AMH、雌二醇(E_2)及孕酮(P)浓度;Western Bolt法检测各组颗粒细胞AMH、AMHR2和Smad4蛋白表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组颗粒细胞中AMH、AMHR2和Smad4 mRNA表达水平。结果 与空白组比较,各组含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞增殖均有促进作用(P<0.05,P<0.01);与阳性药物组比较,三子汤组促进颗粒细胞增殖作用最佳(P<0.01),逍遥散次之(P<0.05);各组颗粒细胞增殖与含药血清干预时间呈正相关,干预48 h启动细胞增殖活性,96 h细胞增殖达到高峰。与空白组CP-456773体内比较各组颗粒细胞培养液上清AMH、E_2及P的浓度均明显升高(P<0.05,P<0.01);与阳性药物组比较,逍遥散组促P分泌效果更佳(P<0.05)。与空白组比较各组卵巢颗粒细胞AMH、AMHR2、Smad4蛋白表达水平明显升高(P<0确认细节.05,P<0.01),阳性药物组AMHR2蛋白表达较逍遥散、三子汤组升高明显(P<0.01)。与空白组比较各组卵巢颗粒细胞AMH、AMHR2、Smad4 mRNA表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),其中三子汤组AMH、AMHR2 mRNA表达明显优于阳性药物组与逍遥散组(P<0.01)。结论 补肾调泡周期疗法组方genetic absence epilepsy逍遥散、三子汤能促进大鼠原代卵巢颗粒细胞增殖并与干预时间呈正相关性,促进颗粒细胞分泌甾体激素和AMH,并可能通过上调AMH、AMHR2、Smad4蛋白及mRNA表达,促进卵泡发育和成熟,并以此改善卵巢生殖和内分泌功能。