猪源GSDMA蛋白多克隆抗体的制备与初步应用

Gasdermin A(GSDMA)作为Gasdermin(GSDM)蛋白家族的一员，参与细胞的炎症反应，其经切割产生的片段可以诱导细胞焦亡。为制备猪GSDMA(pGSDMA)多克隆抗体，本研究构建了重组表达质粒pET-21apGSDMA，转化BL21(DE3)感受态细胞后经IPTG诱导，表达并纯化了重组pGSDColforsin小鼠MA蛋白。将纯化的该重组蛋白免疫小鼠制备pGSDMA多克隆抗体（pAb），并进行western blot和间接免疫荧光试验鉴定。结果显示，pGSDMA pAb能够特异性地识别外源表达的pGSDMA蛋白和猪肺泡巨噬细胞（PAMs）中内源表达的pGSSexually explicit mediaDMA蛋白。利用该pAb检测猪主要组织器官中pGSDMA蛋白的表达，结果显示其能识别猪不同组织器官中的pGSDMA蛋白，且pGSDMA在猪心脏中的表达量最低，在肝、脾、肺和肾中的表达量较高。利用该pAb检测不同剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）感染PAMs中p GSDMA的表达，结果显示pGSDMA蛋白的表达量随着病毒感染剂量的增加而降低，表明pGSDMA在HP-PRRSV感染过程中发挥相关生物学作用。本购买Tezacaftor研究首次制备了pGSDMA pAb，为深入探究pGSDMA生物学功能奠定了基础。